一种痔瘘洗剂中冰片的鉴别方法与流程

本发明属于医药鉴别技术领域，尤其涉及一种痔瘘洗剂中冰片的鉴别方法。

背景技术：

痔瘘洗剂为安徽中医药大学第一附属医院院内制剂，其制剂批准文号为皖q/ws-zj(z-0023)，具有清热解毒、消肿止痛、除湿止痒的功效，用于痔瘘患者的常规用药。方中冰片为君药，具开窍醒神、清热止痛的功效；因此作为君药之一的冰片鉴别方法对于该制剂的质量控制具有重要意义。对于冰片的鉴别方法2015版《中国药典》一部中冰片项下收载了两种理化鉴别的方法：产气和显色反应；而天然冰片则是采用薄层鉴别的方法。

但对于中药复方制剂来说(特别是液体制剂)，理化鉴别的结果都不宜观察；因此在该制剂的冰片的鉴别选择参照天然冰片的薄层鉴别方法；但在实验中发现，不同的人操作，对于鉴别结果有很大影响(有时是阳性有时是阴性)，排除原因发现，通过与药典中天然冰片的薄层鉴别方法比较，一般蒸干的方法可能会使冰片成分流失，从而影响色谱检视结果；而且中药制剂处方中的冰片的处方量一般较小，为了保证鉴别结果的准确性，鉴别时一般做不到像药典中天然冰片直接溶解制备供试品溶液的方法，大部分还是得使用提取后水浴浓缩的方法。因此，需要一种省时快捷，结果准确，且观察现象明显的鉴别方法来解决上述冰片鉴别中遇到的问题。

技术实现要素：

为解决上述背景技术中提出的问题。本发明提供了一种痔瘘洗剂中冰片的鉴别方法，具有省时快捷，结果准确，且观察现象明显的特点。

本发明是这样实现的，一种痔瘘洗剂中冰片的鉴别方法，包括以下步骤：

步骤一，供试品溶液的配置：取痔瘘洗剂样品若干，在30℃-60℃的温度下，用2倍量的石油醚萃取3次，萃取完成后将萃取后的石油醚液水浴蒸干，将蒸干后的残渣立即加20倍的石油醚溶解定容，作为供试品溶液；

所述水浴蒸干的条件为：将萃取完成后的石油醚液在45-70℃的温度下，接触水面蒸干；

步骤二，对照品溶液的配置：取冰片对照品，在30℃-60℃的温度下，加入石油醚，制成每1ml溶液含1mg冰片对照品的对照品溶液；

步骤三，点样和层析：吸取上述步骤中所制得的供试品溶液、和对照药材溶液，按照药典规定的薄层色谱法，使用一个硅胶g薄层板，并以乙酸乙酯：环己烷＝3：17的比例制得展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

优选的，步骤一中所述的所述水浴蒸干的条件为：将萃取完成后的石油醚液在65℃的温度下，接触水面蒸干。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的一种痔瘘洗剂中冰片的鉴别方法，通过多组实验对比，在萃取完成后，在65℃下利用接触水面蒸干，蒸干后立即定容的方式，保证了萃取样液中冰片的含量，从而使得结果更加准确，观察现象更加明显，且该方法操作简单，省时省力。

应当理解的是，以上所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。

附图说明

图1为本发明接触水面水浴蒸干蒸干温度和蒸干时间关系图；

图2为本发明未接触水面水浴蒸干蒸干温度和蒸干时间关系图；

图3为本发明蒸干方式和温度与蒸干时间关系比较图；

图4为本发明接触水面不同蒸干温度薄层色谱图；

图5为本发明未接触水面不同蒸干温度薄层色谱图；

图6为本发明不同蒸干方式和温度薄层色谱图；

图7为本发明挥干后再加热条件下接触水面冰片薄层色谱图；

图8为本发明挥干后再加热条件下未接触水面冰片薄层色谱图；

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

在本发明的描述中，需要理解的是，术语“长度”、“宽度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。

实施例1

请参阅图1-6，本发明提供一种技术方案：一种痔瘘洗剂中冰片的鉴别方法，包括以下步骤：

步骤一，供试品溶液的配置：取痔瘘洗剂(批号：20180411)样品20ml，并以容量比痔瘘洗剂样品：石油醚(30℃-60℃)＝1:2的比例加入40ml的石油醚(30℃-60℃)，并萃取3次，每次均为40ml，萃取完成后将萃取后的石油醚液，在45-65℃，接触水面蒸干的水浴条件蒸干，且蒸干后立即定容，并按照容量比痔瘘洗剂样品：石油醚(30℃-60℃)＝20:1的比例向蒸干物中加入石油醚(30℃-60℃)，使之溶解，作为供试品溶液；

步骤二，对照药材溶液的配置：另取冰片对照药材(批号：110743-200303)，加石油醚(30～60℃)制成每1ml石油醚(30～60℃)含1mg冰片的溶液，作为对照品溶液；

步骤三，点样和层析：吸取上述步骤中所制得的供试品溶液、和对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，并以乙酸乙酯：环己烷＝3：17的比例制得展开剂，并将点样后的硅胶g薄层板放入相关容器中展开，一定时间后取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

在本实施方式中，可以理解的是，在上述方法中，为了有明显的对比效果，本实施例中采用两种不同的蒸干方式对萃取液进行蒸干，即取供试品溶液按分别按表1设定蒸干方式及温度，进行挥干，并记录挥干所需的时间，结果如图1、2、3所示。

表1蒸干方式和蒸干温度设定表

可以理解的是，如图1、2所示，无论是按照接触水面还是未接触水面的蒸干方式进行蒸干，随着加热温度的升高，蒸干所需时间均减少，而且在开始时下降比较明显，降至十几分钟后，逐渐趋于平缓；图3结果表明，在三个相同水浴温度的条件下，接触水面的蒸干方式加热所需时间，明显会少于未接触水面的蒸干方式；

而且通过对上述样本进行t检验，可得到一定的统计学结果，结果如表2所示：

表2spaa配对样本t检验结果

根据表2的t检验结果得到p〈0.05，因此，表明两种加热方式的所需蒸干时间，存在显著差异。

按照上述方法所示的步骤对痔瘘洗剂(批号：20180411)中的冰片进行薄层色谱鉴定后，得到的结果如图4-6所示，可以理解的是，图中数字所代表的的含义均指相应的点样操作后薄层板上的斑点，图4中：1为冰片对照药材，2为35℃水浴供试品溶液，3为45℃水浴供试品溶液，4为55℃水浴供试品溶液，5为65℃水浴供试品溶液；图5中：1为45℃水浴供试品溶液，2为55℃水浴供试品溶液，3为65℃水浴供试品溶液，4为75℃水浴供试品溶液，5为85℃水浴供试品溶液，6为95℃水浴供试品溶液，7为100℃水浴供试品溶液，8为冰片对照药材；图6中：1为冰片对照药材，2为45℃水浴未接触水面蒸干供试品溶液，3为45℃水浴接触水面蒸干供试品溶液，4为55℃水浴未接触水面蒸干供试品溶液，5为55℃水浴接触水面蒸干供试品溶液，6为65℃水浴接触水面蒸干供试品溶液；7为65℃水浴接触水面蒸干供试品溶液。

根据图4、5所示，水浴蒸干后立即定容，对于冰片的色谱检视结果不产生影响，即使当未接触水面蒸干时水温高达100℃结果也是阳性；而从图6中我们可以看出，同等条件下三个水浴温度的比较，接触水面供试品色谱中冰片的色谱斑点明显大于未接触水面的斑点；综上所述，接触水面蒸干所需时间明显少于未接触水面，且数据之间存在显著性差异；比较不同水浴温度和加热方式对于冰片薄层鉴别检视结果的影响，结果表明不同的温度和条件对于检视结果均不产生影响，但同等条件下，接触水面蒸干的供试品色谱斑点明显大于未接触水面的，本发明在65℃采用接触水面蒸干所得到的结果更加准确，且更加易于观察；因此，本发明中的蒸干方式优选为65℃采用接触水面蒸干。

实施例2

请参阅图7和图8，本发明提供一种技术方案：一种痔瘘洗剂中冰片的鉴别方法，包括以下步骤：

步骤一，供试品溶液的配置：取痔瘘洗剂(批号：20180411)样品20ml，并以容量比痔瘘洗剂样品：石油醚(30℃-60℃)＝1:2的比例加入40ml的石油醚(30℃-60℃)，并萃取3次，每次均为40ml，萃取完成后将萃取后的石油醚液，在65℃，接触水面和未接触水面的两种蒸干方式下进行水浴挥干，挥干后按表3设定时间的温度进行再加热，，然后按照容量比痔瘘洗剂样品：石油醚(30℃-60℃)＝20:1的比例向蒸干物中加入石油醚(30℃-60℃)，使之溶解，作为供试品溶液；

步骤二，对照药材溶液的配置：另取冰片对照药材(批号：110743-200303)，加石油醚(30～60℃)制成每1ml石油醚(30～60℃)含1mg冰片的溶液，作为对照品溶液；

步骤三，点样和层析：吸取上述步骤中所制得的供试品溶液、和对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，并以乙酸乙酯：环己烷＝3：17的比例制得展开剂，并将点样后的硅胶g薄层板放入相关容器中展开，一定时间后取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

表3蒸干后再加热时间

按照上述方法所示的步骤对痔瘘洗剂(批号：20180411)中的冰片进行薄层色谱鉴定后，得到的结果如图7和图8所示，可以理解的是，图中数字所代表的的含义均指相应的点样操作后薄层板上的斑点，图7中：1和9为冰片对照药材，2为加热0分钟供试品溶液，3为加热5分钟供试品溶液，4为加热10分钟供试品溶液，5为加热15分钟供试品溶液，6为加热20分钟供试品溶液，7为加热25分钟供试品溶液，8为加热30分钟供试品溶液；图8中：1和9为冰片对照药材，2为加热0分钟供试品溶液，3为加热5分钟供试品溶液，4为加热10分钟供试品溶液，5为加热15分钟供试品溶液，6为加热20分钟供试品溶液，7为加热25分钟供试品溶液，8为加热30分钟供试品溶液。

如图7、8所示，蒸干后再持续加热对于色谱检视结果有了明显的影响，除了未接触水面蒸干5分钟还有弱阳性以外，其它结果均是阴性；因此，蒸干后再加热时间对于冰片薄层鉴别检视结果会产生显著性影响，，除未接触水面蒸干5分钟时还有弱阳性外，其余均是阴性，这可能是由于冰片升华的化学性质导致的。

综上实施例1和实施例2所述，冰片在液态时的性质稳定，挥干后易升华，会影响检视结果，因此本发明优选为65℃接触水面蒸干，挥干后立即定容的方式，作为痔瘘洗剂中冰片的薄层鉴别的最佳水浴蒸干条件；因此本发明的一种痔瘘洗剂中冰片的鉴别方法具有省时快捷，结果准确，且观察现象明显的优点，可解决上述背景技术中提出的各项问题。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。