一种QuEChERS前处理技术结合气相色谱测定茶叶中的农药残留方法与流程

本发明涉及农产品质量安全检测技术领域，尤其涉及一种quechers前处理技术结合气相色谱测定茶叶中的农药残留方法。

背景技术：

gb2763-2016标准中关于茶叶的农药残留检测，所推荐的国标或者行标基本都是用气质和液质来完成。而很多县级质检站或一般的检测公司所配备仪器都是普通气相和液相，无法开展茶叶农药残留检测。

quechers技术是用乙腈进行提取，硫酸镁和氯化钠进行除水和盐析分层，取乙腈提取液，用硫酸镁和n-丙基乙二胺(psa)净化，最后用gc/ms检测。该方法因其简单、高效、实惠而备受业内青睐，最初是用于蔬菜和水果的农药残留检测，如美国农药残留检测方法aoac2007.01和cen标准方法156627。通过改变前处理过程等方法来调整其提取和净化效果，以便quechers技术结合气相色谱能应用到平常的茶叶农残检测中，以适于实验室配置较低的县级质检站和检测公司使用，具有广阔的市场前景。

技术实现要素：

为了解决上述背景技术中所提到的问题，本发明提供了一种quechers前处理技术结合气相色谱测定茶叶中的农药残留方法，使低配实验室能应用简单快捷的检测方法对茶叶农残进行日常检测。

一种quechers前处理技术结合气相色谱测定茶叶中的农药残留方法，包括以下步骤：

(1)提取：取粉末茶叶样品，置于离心管中，加入乙腈水混合溶液，均质提取，再加入氯化钠，涡旋混匀，离心，取上清液备用；

(2)净化：将所得上清液于水浴锅中氮吹至近干，加入丙酮正己烷混合溶液定容，涡旋混匀，再加入净化剂，涡旋，过滤膜，上机测定。

进一步地，所述步骤(1)的提取具体为：称取4g粉末状茶叶样品于50ml离心管中，加入22ml乙腈水混合溶液，于转速为9000-10000r/min的均质仪中均质提取2-3min，加入1-2g氯化钠，涡旋混匀，在转速为5000-6000r/min的条件下离心4-5min，取10ml上清液备用。

进一步地，所述步骤(2)的净化具体为：将上清液于45-55℃的水浴锅中氮吹近干，加入丙酮正己烷混合溶液定容至5ml，涡旋混匀，加入310mg净化剂，涡旋2-4min，过滤膜，上机测定。

进一步地，所述净化剂是由石墨化碳黑、n-丙基乙二胺、失活弗罗里硅土混合而成。

进一步地，所述石墨化碳黑、n-丙基乙二胺、失活弗罗里硅土的重量比为6:15:10。

进一步地，所述失活弗罗里硅土是将弗罗里硅土于600-700℃的马弗炉中烘烤3-4小时，冷却后加入蒸馏水进行失活处理。

进一步地，所述步骤(1)中的乙腈水混合溶液是由体积比为10:1的乙腈和纯净水混合而成。

进一步地，所述步骤(2)中的丙酮正己烷混合溶液是由体积比为1:9的丙酮和正己烷混合而成。

本发明的有益效果是：

1，本发明采用体积比为10:1的乙腈水混合溶剂进行提取，在保证回收率的同时，尽可能少提取出杂质，给后面净化过程减轻压力。

2、本发明采用先浓缩后净化的方法，与先净化后浓缩的方法相比较，效果更好，将定容溶剂由正己烷改为体积比为1:9的丙酮正己烷混合溶剂进行定容时，大大提高了部分指标的回收率。

3、本发明加入由石墨化碳黑、n-丙基乙二胺、失活弗罗里硅土混合而成的净化剂，其作用是去除色素、有机酸等杂质，由该组合物作为净化剂，回收率高，净化效果好。

4、本发明的测定方法简单、方便、实惠，适于低配实验室对茶叶农残的日常检测。

附图说明

图1为gc-ecd测定基质标液有机氯类和菊酯类农药的色谱图。

图2为gc-fpd测定基质标液有机磷类农药的色谱图。

图3为gc-ecd测定绿茶样品中有机氯类和菊酯类农药的色谱图。

图4为gc-fpd测定绿茶样品中有机磷类农药的色谱图。

图5为gc-ecd测定红茶样品中有机氯类和菊酯类农药的色谱图。

图6为gc-fpd测定绿茶样品中有机磷类农药的色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细地说明。

单标溶液的配置：准确吸取1ml100ug/ml有机氯或菊酯类农药标准品于10ml容量瓶内，用正己烷定容至10ml，得10ug/ml有机氯或菊酯类农药的单标溶液；准确吸取1ml100ug/ml有机磷类农药标准品于10ml容量瓶内，用丙酮定容至10ml，得10ug/ml有机磷类农药的单标溶液。

混合标准品溶液配置：分别准确吸取1ml10ug/ml的有机氯、菊酯类及有机磷类农药的单标溶液于10ml容量瓶内，用正己烷定容至10ml，得到1ug/ml的混合标准品溶液。

基质标液的配置：取4g空白茶叶样品按照下述实施例1的步骤(1)、(2)、(3)、(4)同样的前处理方法进行处理。得到空白基质溶液，取1ml1ug/ml的混合标准品溶液于10ml容量瓶内，用空白基质溶液定容至10ml，得0.1ug/ml的基质标液。

实施例1

检测绿茶中的农药残留：

(1)净化剂的制备：将弗罗里硅土于650℃的马弗炉中烘烤4h，自然冷却至室温，加入5％蒸馏水进行失活处理，所得物料称取100mg，与60mg石墨化碳黑、150mgn-丙基乙二胺混合，得净化剂；

(2)乙腈水混合溶液、丙酮正己烷混合溶液的制备：将体积比为10:1的乙腈和纯净水混合，得乙腈水混合溶液；将体积比为1:9的丙酮和正己烷混合，得丙酮正己烷混合溶液；

(3)提取：称取4g空白粉末状绿茶样品于50ml离心管中，加入400ul1ug/ml的混合标准品溶液，涡旋混匀，放置24h，加入22ml乙腈水混合溶液，于转速为10000r/min的均质仪中均质提取2min，加入1g氯化钠，涡旋混匀，在转速为5000r/min的条件下离心5min，取10ml上清液备用；

(4)净化：将上清液于50℃的水浴锅中氮吹至近干，加入丙酮正己烷混合溶液定容至5ml，涡旋混匀，加入310mg净化剂，涡旋3min，过滤膜，得样品溶液；

(5)测定：采用气相色谱-电子捕获检测器(gc-ecd)测定基质标液和样品溶液的有机氯和菊酯类农药，采用气相色谱-火焰光度检测器(gc-fpd)测定基质标液和样品溶液的有机磷类农药，保留时间定性、采用外标法定量(提取溶剂用量折算为乙腈)；

其中，测定有机氯和菊酯类农药的色谱条件是：色谱柱为hp-5熔融石英毛细管柱(30m*0.25mm*0.25um)；进样口温度为200℃，电子捕获检测器温度为320℃；升温程序：初温90℃，以每分钟25℃的速度升温至190℃，保持1分钟，然后以每分钟30℃的速度升温至275℃，保持10分钟；柱流量1ml/min；尾吹60ml/min；

测定有机磷类农药的色谱条件为：色谱柱为db-17熔融石英毛细管柱(30m*0.25mm*0.25um)；进样口温度为220℃，火焰光度检测器温度为250℃；升温程序：初温90℃，以每分钟25℃的速度升温至190℃，保持1分钟，然后以每分钟30℃的速度升温至275℃，保持10分钟；柱流量4.5ml/min；尾吹60ml/min；空气流量100ml/min；氢气流量110ml/min。

方法检出限：在本实验条件下，以3倍信噪比(s/n＝3)所对应的标准品浓度为检出限，来计算该方法的检出限，检出限在0.002mg/kg-0.006mg/kg。

实施例2

检测红茶中的农药残留：取4g的空白粉末状红茶样品，按照与实例1相同的方法进行前处理和测定。

精密度及加标回收实验1

取4g空白粉末绿茶加入1ug/ml的混合标准品溶液，以与实施例1相同的方法进行前处理及测定，进行6次平行实验，计算精密度和回收率，结果如下：

精密度及加标回收实验2

取4g空白粉末红茶加入1ug/ml的混合标准品溶液，以与实施例1相同的方法进行前处理及测定，进行6次平行实验，计算精密度和回收率，结果如下：

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。