一种采用HPLC-MS/MS测定食用香精香料中主要甜味剂的方法与流程

文档序号:20003387发布日期:2020-02-22 03:23阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种采用hplc-ms/ms测定食用香精香料中主要甜味剂的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)基质溶剂制备:以不含有目标物的食用香精为样品,以水为溶剂,超声萃取样品,萃取液过水相滤膜,制备基质溶剂;

(2)系列标准工作溶液制备:分别称取9种甜味剂标准品,以基质溶剂为配标溶剂,经逐级稀释,配置系列标准工作溶液;

(3)样品溶液制备:准确称取预定量的试样于离心管中,再准确移入预定体积的乙醇水溶液,用漩涡混合器分散均匀,再超声萃取,萃取液过水相滤膜,得样品进样液;

(4)高效液相色谱-串联质谱分析;用hplc-ms/ms色谱仪,对系列标准工作溶液和样品进样液分别进行检测;

(5)标准工作曲线建立及样品结果计算;

其中,步骤(1)中,基质溶剂制备过程为:选取不含有木糖醇、安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、三氯蔗糖、阿斯巴甜、新橙皮苷、纽甜和甜菊糖这几种甜味剂的食用香精,准确称取0.5g样品,加10ml体积分数为10%的乙醇水溶液,涡旋混合使样品分散开,然后进行超声提取,于60%功率条件下超声萃取40min,结束后摇匀,静置片刻,经0.22µm水相滤膜过滤,得基质溶剂。

2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(2)中,分别准确称取10mg木糖醇、10mg安赛蜜、10mg糖精钠、5mg甜蜜素、10mg三氯蔗糖、5mg阿斯巴甜、10mg新橙皮苷、5mg纽甜和5mg甜菊糖,于同一个100ml容量瓶中,精确至0.1mg,用基质溶剂溶解并定容,配制混合标准储备溶液,分别准确移取混合标准储备溶液50µl、100µl、250µl、0.5ml和1ml,用基质溶剂定容至10ml容量瓶中,混匀,配制得到5级标准工作溶液,各级系列溶液浓度如下表:

系列标准工作溶液表

3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(3)中,称取0.5g香精试样,精确至0.1mg,置于50ml具塞离心管中,准确移取1ml乙醇和9ml超纯水,涡旋混合使样品基质分散开,于60%功率条件下超声萃取40min,结束后摇匀,静置片刻,经0.22µm水相滤膜过滤,得样品进样液。

4.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(4)中,hplc-ms/ms分析,其中采用的高效液相色谱条件为:色谱柱:zorbaxeclipsexdb-c18,规格为150mm×4.6mm,填料粒度3.5m;流动相a:甲醇,b:5mmol/l乙酸铵的水溶液,梯度洗脱见下表;柱温:40℃;进样量:5μl,

梯度洗脱程序表

5.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(4)中,hplc-ms/ms分析,其中采用的质谱条件为:离子源:电喷雾离子源(esi);离子源温度:100℃;干燥气温度:300℃;干燥气流量:9l/min;雾化气压力:40psi;毛细管电压:正离子为4000v,负离子为3500v;检测方式:多反应监测模式(mrm),参数如下,

目标物mrm参数条件表

6.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(5)中,以系列标准工作溶液中各目标物的浓度为横坐标,以色谱图中各目标物的峰面积为纵坐标,进行线性回归分析,得到各目标物的标准工作曲线,将相同条件下测得的样品进样液中各目标物的色谱峰面积,代入标准工作曲线,根据下列公式求得样品中各目标物的含量:

上式中:

x——试样中各目标物的含量,单位为毫克每千克(mg/kg);

c——由标准工作曲线上读取的样品进样液中各目标物的浓度,单位为毫克每升(µg/ml);

v——萃取体系的体积,单位为毫升(ml);

m——试样的质量,单位为克(g)。

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