检测试剂盒的制作方法

本发明涉及生化检测，更具体地，涉及一种检测试剂盒。

背景技术：

1、迄今为止，由于体外诊断行业的迅猛发展，医者与患者对于疾病诊疗的便捷性也有了越来越高的要求，体外诊断试剂应运而生并逐步成为体外诊断领域的中流砥柱。

2、市面上大多的体外诊断试剂都有着十分良好的性能，同时兼顾了便捷性，但大多数试剂在研发阶段都绕不开一个共同的难点：钩状效应，又称hook效应。当抗原抗体系统未能保持一个比例适宜的反应环境时，钩状效应就有可能发生，使原本的高值样本被检测得到一个低值结果。

3、在试剂盒的检测系统中，大多数待检样本为抗原，则试剂盒所含为抗体，抗体的量是固定的，而抗原的量是一个变数，当抗原占比极度过量时，便很可能发生hook效应。然而，由于高亲和力单抗的价格昂贵，囿于试剂成本，往往不能随心所欲添加过量抗体，而且，过量的抗体溶液对于包装和运输也同时增大了成本压力，但相对不足量的抗体又容易在检测高值样本时产生hook效应，使检测值失真，从而导致临床诊断失误，有可能造成严重后果。

4、现有的解决hook效应的方法是梯度稀释，具体操作为，当检测样本出现hook效应时，将该样本进行整倍稀释，直至检测值与理论稀释值相关联为止，再以稀释倍数推导出该样本的原浓度。此方法是可行的，但有两处弊病，一是难以评估检测浓度是因hook效应偏低还是它本身真实浓度就是如此，二是样本倍数稀释过程操作繁复，难以被检验者接受。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种检测试剂盒，通过延迟hook效应发生的方法，避免因hook效应造成的检测值不准确的问题。

2、为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

3、一种检测试剂盒，包括高亲和力抗体和低亲和力抗体，所述低亲和力抗体与待测抗原的亲和力小于所述高亲和力抗体与待测抗原的亲和力，所述低亲和力抗体不与所述高亲和力抗体结合；

4、当待测抗原浓度较小时，所述高亲和力抗体优先结合待测抗原；

5、当待测抗原浓度较大时，所述低亲和力抗体也能结合待测抗原。

6、实施本发明实施例，将具有如下有益效果：

7、本发明实施例通过添加显著差异的高、低亲和力抗体，当待测抗原浓度较小时，高亲和力抗体优先结合待测抗原，低亲和力抗体由于亲和力弱，处于游离状态，不影响低端的灵敏度和精度，当待测抗原浓度较大时，待测抗原过剩，此时，低亲和力抗体也有了结合待测抗原的机会，被低亲和力抗体结合的抗原便会整体降低抗原过剩的比例，可以延迟hook效应的发生，也即可以增加检测的线性范围上限。

8、采用本发明的方法，可以用低亲和力抗体代替部分高亲和力抗体，不仅可以延迟hook效应，而且不会影响检测的灵敏度、精密度等其它性能。另，低亲和力抗体较高亲和力抗体成本低，且无需包被胶乳，可以显著降低成本。

技术特征：

1.一种检测试剂盒，其特征在于，包括高亲和力抗体和低亲和力抗体，所述低亲和力抗体与待测抗原的亲和力小于所述高亲和力抗体与待测抗原的亲和力，所述低亲和力抗体不与所述高亲和力抗体结合；

2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述高亲和力抗体结合待测抗原的亲和系数等于所述低亲和力抗体结合待测抗原的亲和系数的10倍～30倍。

3.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述低亲和力抗体包括不敏感单抗和/或不敏感多抗；

4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述低亲和力抗体的质量占总抗体质量的百分比为10％～50％。

5.根据权利要求1～4中任意一项所述的检测试剂盒，其特征在于，所述待测抗原包括crp、hcg、afp、cea、myo和ferritin中的一种或两种以上。

6.根据权利要求5所述的检测试剂盒，其特征在于，所述待测抗原为crp时，所述检测试剂盒包括胶乳试剂；

7.根据权利要求6所述的检测试剂盒，其特征在于，所述胶乳试剂还包括以下浓度的各组分：

8.根据权利要求6所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括低亲和力抗体溶液；

9.根据权利要求8所述的检测试剂盒，其特征在于，所述低亲和力抗体溶液还包括以下浓度的各组分：

10.根据权利要求8所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括稀释液和保存液；

技术总结
本发明公开了一种检测试剂盒，包括高亲和力抗体和低亲和力抗体，所述低亲和力抗体与待测抗原的亲和力显著小于所述高亲和力抗体与待测抗原的亲和力，所述低亲和力抗体不与所述高亲和力抗体结合；当待测抗原浓度较小时，所述高亲和力抗体优先结合待测抗原；当待测抗原浓度较大时，所述低亲和力抗体也能结合待测抗原。本发明能够延迟HOOK效应，且不影响灵敏度、精密度等其它性能。

技术研发人员：李莉芽
受保护的技术使用者：深圳市科曼医疗设备有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17