一种植物N-糖链的精准相对定量分析方法及应用

文档序号:37907598发布日期:2024-05-09 21:56阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种植物n-糖链的精准相对定量分析方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述n-糖链含量的相对定量分析的公式为:a1=na1/na1内标,a2=na2/na2内标,……an= nan/nan内标……;

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述双标签标记反应是指在所述n-糖链释放的同时先进行酶促同位素标记,在所述n-糖链释放完成后再进行氧化还原开环反应以获得5da质量位移差的植物双标签n-糖链内标。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述分离的方法为将待测的植物n-糖链粗样品采用配置的buffer y缓冲液提取植物总蛋白,使用甲醇、丙酮除去植物总蛋白中的色素杂质,获得植物蛋白。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述酶切的方法为采用胰蛋白酶、糜蛋白酶酶切植物蛋白得到植物多肽样品。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述n-糖链释放的方法为采用pngase a试剂对获得的植物多肽样品进行酶切释放植物n-糖链。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中, 所述植物n-糖链样品和所述植物双标签n-糖链内标的溶液按体积比1∶1混合。

8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述质谱图谱包括基质辅助激光解吸附电离质谱、电喷雾质谱、串级质谱、多级质谱中的任意一种或多种。

9.一种分离纯化植物n-糖链的精准相对定量分析方法及应用在植物n-糖组学中的应用,所述应用的方法为:

10.一种如权利要求1-8任一项所述的植物n-糖链的精准相对定量分析方法在果实成熟研究中的应用。


技术总结
本发明涉及生物检测分析技术领域,提供了一种植物N‑糖链的精准相对定量分析方法及应用,包括(1)构建植物N‑糖链相对定量分析的样品组,获得植物N‑糖链峰的质谱信号强度达到10<supgt;4</supgt;及以上的检测图谱;植物双标签N‑糖链内标与植物N‑糖链样品的质量位移差能达到5Da及以上;(2)构建植物N‑糖链样品和植物双标签N‑糖链内标相对定量分析组,基于图谱中样品与内标的每个N‑糖链峰面积,建立每个N‑糖链含量的相对定量分析公式,获得具有可对比性的N‑糖链含量,筛选关键N‑糖链,可对不同种类、不同组织部位和各生长发育阶段的不同类型、不同批次的植物样品进行所有N‑糖链含量变化的比较分析。

技术研发人员:赵晓勇,王嘉祺,吴迪,李鲜,张波,徐昌杰
受保护的技术使用者:浙江大学
技术研发日:
技术公布日:2024/5/8
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