一种测定装置的制作方法

专利名称：一种测定装置的制作方法
技术领域：
本发明属于配位体—受体测定领域，该测定包括免疫测定，用于确定一种生物流体中有无某种被分析物。更具体地说，本发明的装置和方法涉及建立证实检验对象的身份并用一单独检验装置确定取自该检验对象的某种生物流体中有无至少一种被分析物。
背景技术：
多年来，配位体—受体测定领域的普通技术人员一直在寻求一种有效、廉价且可靠的装置和方法，用来检测有和/或无抗原、抗体及类似物。该领域充满了这样的装置。
多年来，本领域的普通技术人员还一直寻找用于确保被检验的样品实际来自某一确定的个体的装置和方法。已确立了许多方案，某些是复杂的，某些是简单的，以便证实检验样品事实上由一特定的个体产生。类似地，有许多方案妨碍了使某一特定的检验结果与某一特定的人相一致。
例如，现在药物检验对于运动员、囚犯及在工作场所是一种常规程序。那些记录涉及检验单人的流体样品，例如尿或血，以便确定该流体样品中存在某些特定的抗体；阳性的结果可表明使用了药物。
先前，通过一系列试验来完成这样的检验，这一系列试验涉及把被检验的流体移到一些不同的容器中，并把该流体从被检验的人身上取到远处。时常放错和/或替换流体就提出了有关一系列监管被检验的流体的问题。这样，在这样的检验期间出现的一个问题是检验流体可能是从其他一些人那里获得的，而不是从要被检验的那个人获得，或者，在检验流体从试验室返回后，那些检验流体会混合、遗失或不能被具体鉴别出是哪个人的。还有，这些测定一般需太长时间，以致于不能及时得到结果。
目前用于确定生物流体中的被分析物的许多装置和方法还有一些其它缺点。常需要一定水平的技术人员使用或操纵这样的装置，以便得到满意的结果。此外，这些装置的绝大多数需要一种或多种另外的试剂，且常需要冲洗溶液，以便在检验过程期间施加到该装置上。对于许多这样的装置，至少部分是由于装置的有限的敏感度，需要比较大量的、时常是昂贵的试剂或比较大量的检验样品，以便给出精确的结果。
如上所述，构成这类型检验的基础的原理是个人的免疫系统，即一个哺乳动物响应外来的、一般是宏观分子的分子的固有能力。此后，任何能够引出这样一种响应的分子将称作抗原，即抗体产生源。在响应抗原时产生的蛋白质和蛋白质碎片将称作抗体或免疫球蛋白。
发明概述本发明通过采用专门设计的测定装置来克服已知的那些装置和系统中所固有的那些问题，优选地，所述专门设计的测定装置是使得能确定样品中有无某种被分析物的一种免疫测定装置，而且优选地，该免疫测定装置专门鉴别提供所述样品的人。
本发明是关于检验方法和装置，而更具体地说，是专门涉及用于检测某种被分析物存在的方法和装置，该被分析物最优选的是某种生物流体中的一些特定抗原或特定抗体。本发明还优选地用来可靠地鉴别被检验的个人。
本发明提供了一种易于操作的、一次性检验垫，以及一种一次性检验装置，该检验装置适于检测有无某种被分析物，而且优选地适于鉴别检验对象。例如，可用一带有标记的配位体涂覆检验对象的手指上，并使该手指压在一种具有一特定的、固定了的配位体层的膜基片上，以便从生物流体中捕获某种被分析物，而同时提供检验对象的无墨汁的(特定的结合)、可见的手印，从而达到无可辩驳地、可靠地鉴别所述流体的提供者。在膜上所得到的流体提供者的手印还可包括关于一些被分析物的信息，例如在进行检验时在他的体液中存在的药物。这种信息可记录或储存起来，当需要时，用于可靠地鉴别。
本发明的一个目的是测定一检验样品有无某种被分析物，而同时还鉴别被检验的对象。这样，可消除误鉴定、一系列图标及延迟问题。
本发明的一个目的是提供一种用于快速确定取自一检验对象的某种被分析物存在与否的装置。本发明还有一个目的是提供一种用于快速定量地确定取自一检验对象的样品中某种被分析物的量的装置。而本发明的又一个目的是提供一种确定在取自一检验对象的检验样品中有无某种药物或药物代谢物的装置和方法，并提供一种确定一检验对象是否滥用某种急性或慢性药的装置。
本发明的另一个实施例中用手印鉴别检验对象并不是关键的，该实施例涉及把体液样品或带标记的配位体用一作为检验装置的一部分的转移装置或涂布器的压力施加到膜上。与把液体检验样品和/或一些试剂一滴一滴地施加在一种反应介质的表面的、类似的、那些已知装置相比，在本发明中，液体检验样品和/或一些试剂在压力下被施加在反应介质表面上，并在该反应介质表面上保留一段短的时间，因而本发明比已知的那些装置需要更少量的检验样品和试剂并显示了更高的敏感度。
按照本发明采用这种原理的装置是一种封闭的测定检验装置。在一个优选的实施例中，该测定检验装置包括一个外壳、一种至少有一个位于该外壳中的反应区域的反应介质、一种含有位于该外壳中的一种产生信号的或示明被分析物的试剂以及一种用于容纳位于上述外壳中的一种检验样品的介质。含有产生信号的试剂的介质和用于容纳位于上述外壳中的一检验样品的介质两者都可在一个与上述反应介质彼此隔开的第一位置和一个与所述反应介质进行可转移物质接触的第二位置之间独立移动。优选地，这是一种自备的检验装置。
本发明的一个特定的实施例包括一个采用了一个两部件的外壳的测定检验装置。在该装置的一个实施例中，具有至少一个反应区域的一种反应介质装设在所述外壳的一第一部分中。位于上述两部件的外壳的第二部分中的是一种用于容纳一部分检验样品的介质。这样把所述用于容纳一部分某种检验样品的介质和反应介质布置在上述外壳的两部件之中，使得当把各外壳部件以封闭方式并合在一起时，所述用于容纳一部分某种检验样品的介质和反应介质之间存在有可转移物质的接触。除了至少一个反应区域外，上述反应介质优选地有一个核对区域，配置该核对区域以便通过手印或类似的手段来鉴别检验对象，如果是愿意这样的话。可以把这样的一种装置设计为一种自备的测定装置。在此处所用的那样，术语“自备的”是指可以使用该装置而无需附加另外的试剂或溶液，或者，只是需要一滴一滴地加水。
另一个实施例采用了有些类似的装置，但用含有产生信号的试剂的一种介质代替了用于容纳一部分某种检验样品的介质。
按照上述“压力”原理的一种优选的装置类似于前述那些装置，类似之处在于也采用了一个两部件的外壳，在该外壳中，具有至少一个反应区域的反应介质装设在该两部件的外壳中的一第一部分中。不过，像这些实施例之一那样，在所述两部件的外壳的第二部分中，设置有一种含有某种产生信号的试剂的介质，例如，示明某种被分析物存在的带有标记的材料。所述装置还包括一种用于容纳一部分某种检验样品的可去除的介质，该种检验样品位于上述外壳的第一和第二部件的中间，并且当所述外壳的第一和第二部件以封闭方式位于该外壳的一第一封闭位置时，与所述反应介质进行可转移物质的接触。这样定位并配置反应介质和含有某种示明被分析物的试剂(或产生信号的试剂)处在它们各自的外壳部件之中，使得当所述外壳的各部件以封闭方式处于一第二位置时，所述反应介质和用于转移示明被分析物的试剂的装置处于彼此可转移物质的接触中。
在使用这种装置时，从一检验对象抽取的检验样品放置在一种用于容纳并转移一部分检验样品的可去除的介质上，该检验样品放置在两部件的外壳之中。然后，把该外壳关闭到一第一位置，从而含有介质的可去除的检验样品与反应介质处于可转移物质的接触中并给该反应介质施加压力。然后，打开所述外壳，并从该外壳中去除用于容纳和转移某种检验样品的可去除的介质。使所述外壳第二次封闭到一第二封闭位置，从而用于转移某种示明被分析物的试剂的装置处于与上述反应介质可转移的接触中并给该反应介质施加压力。
在本发明的另一个实施例中，反应介质的各种被隔离的区域包括一种免疫对(MIP)的一个特定成份，该免疫对结合或捕获某种特定的被分析物，例如，某种药物或药物代谢物。不同的被隔离的区域可包含一些专门用于一些被指定的不同的被分析物的MIP，由此，使得能在一次单独的测定中对多于一种被分析物进行确定。
本发明的方法和装置特别有利之处在于与传统的通过一些盒或装置的流动相比仅需少量的产生信号的试剂；在保持直接接触的同时施加压力于检验装置的表面上保持了一些试剂的局部浓度，特别是产生信号的试剂，该试剂呈现增加反应速度和敏感度，例如，关于秒所得到的检验结果与关于分或更长时间所得到的检验结果比较；而且，在某些实施例中，标记次级抗体(与标记初级抗体或抗原相反)减少测定的反应时间，这是因为通过把抗原结合到一个标记上并不改变该抗原的形状。
定义1.配位体—受体测定涉及到形成在一种配位体和一种结合到该配位体上的物质之间的复合物的检测的任何技术。优选地，该复合物的一种成份是一种被分析物。优选的配位体—受体测定是一种免疫测定法。配位体—受体测定可用来确定在生物流体中配位体的有、无、数量及浓度。配位体—受体测定可以是竞争性的或非竞争性的技术、单一的或复杂的技术、直接的或间接的技术、或者是一种组合检测技术，例如，把一种抗体结合到一小半的化学物上，例如生物素或二硝基苯酚(DNP)。
优选是的在测定过程期间，基本上所有的至少一种预定的配位体或配位体受体保留在一个预定位置。用于固定一种配位体或配位体受体的任何技术都包括在本发明的范围内。在一个优选的实施例中，一种配位体或配位体受体结合或固定在一种固体相上或其中。典型的固定机构包括但并不限于共价结合、非共价结合、化学耦合、物理捕集和吸附。
2.配位体是指被分析物本身或可用于推断出在一检验样品中有某种被分析物存在的一种物质。一种配位体—受体是指一些物质，对这些物质有一特定的结合伙伴，例如，配位体。在此处所用的那样，配位体和配位体—受体可以是一免疫对(MIP)的成员。配位体和配位体受体可以包括半抗原、激素、抗原、抗体(包括抗—抗体和抗体碎片，例如，Fab或Fc)、DNA、RNA、低聚核苷酸、核酸及一些复合物或上述任何物质的代谢物。配位体或配位体—受体可以带标记或不带标记。
3.被分析物要被测定的物质，而且，取决于所用的特定的测定，可以是一种配位体或一种配位体—受体。一些典型的被分析物包括但并不限于药物、蛋白质、半抗原、激素、前述这些物质的代谢物，以及一些其它分子，单独的或与一种蛋白质结合在一起的组合物。一种半抗原是一种小分子量物质，例如某些药物或药物代谢物，半抗原一般首先附着到一种蛋白质上，为了成为抗原的或免疫性的。例如，在体内可发现某些自由和结合形式的药物，这一点转而使得能区分慢性药物滥用者和急性药物滥用者。对于前者的情况，在许多例子中，在体内形成抵抗结合形式的某种抗体，该抗体也可用本发明检测为一种被分析物。
4.生物流体可以被检验以便确定有无某种被分析物的任何体液，包括但并不限于血液、血液组份、唾液、尿。
5.产生信号的试剂用在一种配位体—受体测定中、可用来产生一个可检测的信号的任何试剂。一些优选的产生信号的试剂提供了一种易于目测的信号，而更优选的是一种颜色。
附图简述图1是本发明的一种测定装置的一个平面图；图2是本发明的一种测定装置的一个平面图，其示出了进行有无某种抗原检验的结果及适合于鉴别一个检验对象的图案的形成；图3是本发明的一种测定装置的一个放大了的示意性剖面图，其显示出在一种反应介质中的一个反应区域；图4是本发明的一种测定装置的一个放大了的示意性剖面图，其显示出在一种反应介质中的一个核对区域；图5是本发明的一种测定装置的一个放大了的示意性剖面图，其显示出一个阳性的检验结果；图6是本发明的一种测定装置的一个放大了的示意性剖面图；其显示出一个阴性的检验结果；图7是本发明的一种测定装置的一个概括性的视图，其显示出本发明的测定装置和方法的联系；图8是本发明的一种免疫测定装置的一个概括性的剖面图，其显示出在反应介质的一个核对区域中的一个手印的形成；图9是本发明的一种免疫测定装置的另一个实施例的一个概括性的剖面图，其显示出一种检验混合物从拭子到提供检验样品的人的一个手指上的转移；图10是图9的免疫测定装置的一个概括性的剖面图，其显示出通过上述提供检验样品的人的手指把所述检验混合物施加到所述反应介质上；图11是本发明的一种装置的一个实施例的一个打开的、展开透视图；图12是本发明的一种装置的另一个实施例的一个透视图；图13是本发明的又一个实施例的一个透视图。
本发明的详细说明本发明的配位体受体测定装置包括一种反应介质，该反应介质至少具有一个反应区域，而优选地，至少具有一个能证实一个检验对象身份的核对区域。在本发明的一个优选的实施例中，所述反应区域至少包括一种配位体、配位体—受体对(此处也叫作一种“配位体/受体对”)的一个成员，这个成员能证实在一个检验样品中有无某种物质。在本发明的另一个优选的实施例中，通过在至少一个核对区域中结合进一种配位体以便提供一个检验对象的鉴别图案来鉴别上述检验对象的身份。
本发明的方法包括在一部分某种反应介质上或其中，进行对于在一个检验样品中有无某种被分析物的免疫测定，并且独立地证实在一部分所述反应介质上提供有上述检验样品的检验对象的身份。
本发明的一个实施例是针对一种测定装置，优选地是针对一种包括一多孔支座和一复盖一部分该多孔支座的反应介质的免疫测定装置。该反应介质至少包括一个反应区域，而且优选地，至少包括一个核对区域，其中，该核对区域能提供适于鉴别一检验对象的图案。在一个更优选的实施例中，该核对区域能提供一种图案，该图案包括一个手印或一个可用于鉴别的检验对象的身体的另外部分的表面复制。上述反应区域包括一种用于进行配位体/抗配位体或配位体/配位体—受体测定的装置，优选地，是一种进行有无某种被分析物的测定的装置。在另一个优选的实施例中，用于进行测定的装置包括一种免疫对的一个成员。
本发明的另一个实施例是针对包括一种反应介质的一种测定装置，该反应介质至少有一个反应区域，而优选地，至少有一个包括一种免疫对的一个成员的核对区域，其中，该核对区域能证实一个检验对象的身份。优选地，所述核对区域能提供一种图案，该图案包括一个手印或可用于鉴别的上述检验对象的身体的另外部分的表面复制。
按照另一方面，本发明包括一个支座优选的是一个多孔支座；还包括一种装设在该支座上的反应介质，优选的是一种多孔介质，其中，所述反应介质至少有一个反应区域，而且优选地，至少有一个核对区域，且其中，至少一部分核对区域能证实检验对象的身份。一个优选的实施例包括位于上述反应介质中或其上的一种免疫对的一个成员。在另一个优选的实施例中，至少一部分核对区域包括一种免疫对的一个成员。在本发明的某些实施例中，所述反应介质可以是无支座的。
本发明还针对一种用于处理样品的方法，该方法包括使一测定装置的一个反应区域与一个检验样品接触；确定在所述检验样品中有无至少一种被分析物；并且在所述测定装置的一个核对区域中形成一个鉴别对象的检验图案。
本发明还针对一种用于确定在一样品中有无某种被分析物的方法，该方法包括在一免疫测定装置的一个反应区域中进行被分析物的免疫测定，由此，确定在一检验样品中有无某种被分析物；并且在位于所述免疫测定装置上的一个核对区域中证实提供上述检验样品的人的身份。
本发明的方法包括在一样品中确定有无某种被分析物，优选地是用任何基于配位体结合的测定，并且，证实提供该样品的人的身份，优选地是用任何基于免疫性的记录。参照图1，可通过把一种生物流体施加到至少一个反应区域20并使得预定的配位体/受体的结合反应能发生，来确定在一样品中有无某种被分析物。在本发明的一个优选的实施例中，完成所述反应会导致产生一个信号。优选地，该信号以可见颜色或无颜色的形式产生。例如，在图2中，被划了阴影线的可视颜色的区域32至34的产生表明在该检验样品中无所述被分析物，而无色区域35至37表明在该检验样品中有所述被分析物。并不打算使本发明被局限在所采用的特定的结合测定、产生上述信号的方法、所产生的信号的类型、阳性和/或阴性结果的特定位置。
根据本发明，可通过施加一鉴别身体部位(例如，一个人的手指或脚)到一核对区域，并使得一预定的配位体/受体反应能发生，由此产生一个手印或脚印的图象，这样来完成产生一个鉴别提供该检验样品的人的图象或图案。在本发明的一个优选的实施例中，一个人的手指尖涂覆有一种产生信号的试剂，优选地是一种形成颜色的试剂，该手指尖施加到一个具有MIP的核对区域，此MIP会与涂覆在那个人的手指上的产生信号的试剂结合。在本发明的一个优选实施例中，完成免疫反应会导致产生一个可见颜色的图象，此图象对应于那个人的手印。图2示出了一个典型的、可视的手印。
在本发明的一个实施例中，特别是用于儿科，可形成的图象或图案可以是脚的或手的或者是脚的一部分。在这个实施例中，预先涂覆有一种带标记的试剂的脚或脚的一部分可以施加到本发明的装置上。
现在参照


本发明的典型实施例。
本发明的一个免疫测定装置10包括一种优选地安装在一个支座或基底部件12上的反应介质14。基底部件12优选地是一种多孔支座。在本发明的一个优选的实施例中，反应介质14至少包括一个反应区域20并至少包括一个核对区域16。在图1和图2所示的那些典型实施例中，免疫测定装置10包括六个反应区域20标号32至37和两个核对区域16和18。
在本发明的一个检测装置10中，那些反应区域20中的至少一个包括用于进行免疫测定的装置，以便优选地证实在一个检验样品中有无某种被分析物。在图3中所示的典型实施例中，反应区域20至少包括一种埋入到反应介质14中的载体，例如，颗粒物22。如所示的那样，用一种免疫对21的一个成员涂覆于颗粒物22。
在本发明的一个检测装置10中，核对区域16中的至少一个包括用于证实一个检验对象的身份的装置，该检验对象优选地包括一种免疫对的一个成员。在图4所示的典型实施例中，核对区域16包括一种埋入到反应介质14中的载体，例如颗粒物24。如所示的那样，用一种免疫对25的一个成员涂覆于颗粒物24。在本发明的一个优选的实施例中，MIP25能够结合到一种产生信号的试剂上，或结合到一种MIP—产生信号的试剂耦合物上。
通过参照图5至图8可说明本发明的典型方法。在图5中，可以确定在一已加入到一种MIP30的检验样品中有某种被分析物31。把生物流体施加到具有颗粒物22的反应区域20的表面上，颗粒物22是用一种免疫对21的一个成员涂覆。如果所述生物流体中有被分析物31，它将结合到MIP30或被MIP30所捕获，用MIP30与它混合并培养它，而且MIP30是专门用于被分析物31的。最终得到的免疫对50不会结合到MIP21或被MIP21捕获，而是会通过反应介质14。按照本发明的这个实施例而且在这种情况下，不形成颜色的试剂会结合到被涂覆的颗粒物22上。
在图6中，可以确定在一已被加入到一种MIP30的检验样品中没有某种分析物。把生物流体施加到具有颗粒物22的反应区域20的表面上，颗粒物22是用一种免疫对21的一个成员涂覆。在上述生物流体中没有被分析物，MIP30会被MIP21所结合或捕获。按照本发明的这个实施例而且在这种情况下，被施加到反应介质的表面上的一种形成颜色的试剂会结合到在所述被涂覆的颗粒物上的那些MIP30上。在本发明的一个可供选择的实施例中，MIP30可包括上述形成颜色的试剂。
图7和图8说明了在一个核对区域的表面上产生一个手印的图象的一种典型方法。一个人的手指表面60包括一些脊线61和一些沟线62。当用一种形成颜色的试剂102涂覆一个人的手指上时，较大部分的所述形成颜色的试剂会趋于汇集在那些沟线62中。当该手指施加到反应介质14的表面时，可以相信，较高浓度的形成颜色的试剂的区域位于所述那些沟的区域中。在核对区域的表面中的被涂覆的颗粒物一般会结合到较高比例的所述形成颜色的试剂，该试剂转而产生对应于上述人的手指的沟线的一种更强的可见颜色。
在本发明的一个优选实施例中，一般仅在几分钟内就完成了确定在一种生物流体中有无某种物质并产生一个手印图象。
本发明的装置和方法的快捷和较高的敏感性都归因于下述两个特点，即把试剂和/或检验样品施加到膜表面的装置和方式，以及在某种程度上，形成所述膜的那些材料。这样，如下所述，施加的方式和材料使得溶液中的那些试剂保持与所述膜表面接触一段较长的时间，以便促进更大程度的、在所述膜表面中的那些试剂和在溶液中的那些试剂之间的反应。这就导致较高的敏感性并需要较低浓度的试剂。
现在将更详细地说明本发明的各个方面。
配位体—受体测定根据本发明，可采用与任何用于检测感兴趣的被分析物的测定技术一起使用的检测装置。在所有使用的本发明的测定中，一种被分析物至少结合一种配位体或配位体—受体。典型的结合测定包括但并不限于那些带标记的配位体测定，这些测定包括一种固态相耦合到结合试剂的那些竞争性结合测定，例如采用一个或多个单独步骤的同时或顺序培养，且还包括位移测定；而且，典型的结合测定还包括但并不限于那些带标记的结合试剂的测定，这些测定包括非竞争性的和竞争性的结合测定，该测定包括其中固态相是结合试剂或配位体的那些测定和夹层测定，该夹层测定包括沉淀、放射免疫测定或连接酶的免疫吸附测定。在此并不打算使本发明限于所用的免疫测定的类型或用于进行该测定的特定记录。一些例子中示出了典型的免疫测定技术。
反应介质根据本发明，反应介质可以是任何适于进行配位体—受体测定的介质。如上所述，反应介质至少包括一个反应区域，以便示明有无某种被分析物，并且优选地至少包括一个核对区域，以便示明检验对象的身份。一般来说，配位体—受体测定可采用下述形式的反应介质来进行，该形式是珠、管、板、轮叶、一种多孔或无孔基质、或者多孔或无孔膜或过滤物。
反应介质可包括一种厚度的介质，其中，表面或该表面附近的一个区域至少包括一个反应区域。反应介质还可包括一种使一个反应区域作为一个表面层的叠层结构。根据本发明，反应和核对区域位于反应介质中，从而使得可易于目视一种产生信号的试剂(如果有的话)。
根据本发明，优选的反应介质是多孔的，而甚至更优选地，是一种多孔膜。在此并不打算使本发明限于所述反应介质的类型和结构。一个本领域的普通技术人员易于认识到反应介质的选择取决于所需要的物理性质，该物理性质包括但并限于下述这些性质，例如，敏感性，结合能力、稳定性、分子的类型或可结合的那些MIP的类型、以及与某种特殊的测定记录的相容性。
用于形成反应介质的典型材料包括但并不限于胶乳、硝化纤维素、尼龙、纤维素以及尼龙。
一种优选的反应介质是市场上可买到的Gelman Super牌膜。Super牌膜是一种具有亲水性表面的、低蛋白结合胶乳的聚砜膜。一个本领域的普通技术人员会认识到可能需要这种膜，因为它提供了优良的流速和颗粒物滞留量；光滑的表面；洁白且不透明，以便在检定试验中增强信号对比；萃取物少，以便减少样品污染和背景干扰；以及均匀的孔隙度，以便确保最终产品的一致性。采用这种膜还消除了对外部润湿剂的需要，可能会需要该润湿剂，以便控制引入不想要的萃取物。
另外的优选的膜，IAM运动抑制亲和性膜(ImmobilonAffinity Membrane)(市场上可从Millipore公司买到，例如，见美国专利文件第US 4,407,943号)，疏水性基底聚合物，聚偏二氟乙烯(Polyvinylidene difluoride)(PVDF)，结合蛋白质。IAM还使得能高度控制整个蛋白质结合的范围，而且使用者可以重复地在表面上把蛋白质的量从毫微克到微克加以固定，以便适合各种测定的需要。本领域已知道把一种配位体结合于IAM以及它的用途。
鉴于固态相的附加的便利、典型的高蛋白质结合能力及膜的流动穿过的特性，可能需要在本发明的反应介质中采用一些膜作为固体支座。硝化纤维素由于它对于蛋白质核酸、其它一些细胞抗原和一些细胞宏观分子的高的亲和性，是最通常采用的膜之一，而且，如果MIP的结合是离子型的或疏水性的话，可能需要硝化纤维素。硝化纤维素还为抹掉蛋白质和核酸提供了一种优良的基质。硝化纤维素可切分成所要求的任何形状，并具有这样有用的特性，即手印中的蛋白质的量是清楚可见的。
在膜上改变或加进不同的表面性质为了获得所需要的结果是包括在本发明的范围内的，例如，设计用于对于激素的竞争性结合测定的膜的表面性质可以不同于对于某种治疗药物的免疫计量测定法。例如，业已经表明，用乙醇胺处理一个亲水化了的PVDF膜减少了膜表面的非特异结合。某种特珠的表面处理试剂或者表面性质的选择可基于所要赋予该表面的化学特性；使在反应区域上或其中的生物活性试剂的功能度变性或赋予该功能度的能力丧失或降低；要实现某种被固定的生物活性分子的一定取向的要求；要促进某种被固定的生物活性分子的长期稳定性的要求；包含某种所需要的亲核替代物；以及处理试剂的可获得性和成本。采用其它一些表面处理试剂，其中包括双功能或多功能试剂，以便影响膜的表面性质，这些都包括在本发明的范围内。
一个本领域普通技术人员通过包括进一种多孔的反应介质易于认识到所带来的好处。阳性的检验样品将易于通过反应介质，消除了在加入形成颜色的试剂之前清洗反应介质表面的需要。尽管较少愿意这样，但还是打算使本发明包括非多孔介质。一种优选的支座材料是一种叫作Porex的有点刚性的多孔塑料材料。
如上所述，反应介质可以被支座或不被支座。在优选的实施例中，反应介质被支座，而甚至更优选地，该支座是多孔的。一种典型的支座包括但并不限于聚苯乙烯。
在本发明的另一个实施例中，支座可以是不能透过流体和在进行检验时所用的那些试剂；在这个实施例中，反应介质优选地是“厚”到在介质的表面或其附近足以有一反应区域。
在本发明的一些优选实施例中，其中所述装置全部或基本是自备的，即无需另外的试剂或至多只用几滴缓冲溶液或水来清洗反应介质，并且仅需最低水平的技术来完成精确的测定，优选另一种类型的材料来支座反应介质。对于这样一些用途，优选一种可压缩的芯或类似海绵的材料。这样，通过对邻近、接触或结合到可压缩的支座材料的一个基本上平的表面的反应介质的外部的基本上平的表面施加压力，导致在邻近反应介质的支座材料的表面的压缩或压坑，从而导致支座表面低于它的未被压缩的平的表面。当存在有某种液体时，在从可压缩的支座材料去掉压力后，并且当该可压缩的材料膨胀到它未被压缩的状态时，所述液体被抽进所述支座材料。这样，如果把一种液体样品、试剂溶液、缓冲溶液或水施加到反应介质上，并施加足够的压力，以引起在支座材料的表面中的变形，液体在所述支座材料膨胀到它原始状态时被拉进该支座材料。所施加的压力是所述材料的可压缩性的一个函数。一种优选的可压缩的支座材料是一种可压缩的、柔软的、成网状的聚氨酯泡沫，优选地，是一种具有约75到100ppi的孔隙等级的聚酯或聚醚聚氨酯泡沫，优选地，孔隙等级为80到90ppi。这样的一些材料可从E.M.Murray股份有限公司购买到。
核对区域在本发明的一个优选的实施例中，反应介质包括一个用于在确定一检验样品中有无某种被分析物时确立一参考点的核对区域(参照核对区域)，而最重要的是一个用于证实提供所述检验样品的检验对象的身份的核对区域(身份核对区域)。
根据本发明，用于证实提供检验样品的检验对象的身份的一个核对区域(身份核对区域)可包括任何结合了一种MIP的信号发出机构。例如，核对区域可包括一种免疫对的一个成员，该免疫对能结合一种产生信号的试剂，当通过接触检验对象的手指把该产生信号的试剂施加到身份核对区域的表面上时，就在检验装置上产生一个所述手指的图象。
如在此处所用的那样，“能够证实检验对象的身份”是指具体鉴别出提供被检验样品的对象的能力。在本发明的一个优选实施例中，核对区域包括一种免疫对的一个成员，当放置该免疫对与预先已涂有一种产生信号的试剂的检验对象的手指接触时，该免疫对能产生一手印的一种永久图象，优选地，是一种易于目视的手印图象。在另一个实施例中，本发明包括一个具有一种免疫对或核甙酸序列的一个成员的核对区域，该核苷酸序列是能够结合可用来鉴别检验对象的核苷酸序列。
根据本发明，用于在确定检验样品中有无某种被分析物时确立参考点的核对区域包括任何用于提供核对标准的用具。在一些例子中示出了用于提供核对标准的几个例子。在此，并不打算把本发明解释为局限于用于在判别检验结果时确立比较标准的装置或机构。
反应区域反应区域是指可以确定有无某种被分析物的位置。例如，反应区域优选地是在反应介质的表面上或其附近，或者，可以在该表面之下。在本发明的一个优选实施例中，反应区域至少包括一种配位体或结合到在某种基质或过滤物质中的一种颗粒物或小球的配位体—受体，该配位体或配位体—受体适于捕获某种感兴趣的被分析物。在本发明的另一个实施例中，上述那些反应区域中的至少一个可以是一种用于确立一参考点的核对物，例如，一种要显示无色的比较核对物。
产生信号的试剂产生信号的试剂是指任何产生某种可检测的信号或使得能检测某种配位体或配位体—受体的试剂或标记物。优选的产生信号的试剂是那些无需用仪器、优选地用目视方法就能检测被分析物的那些试剂。典型的产生信号的试剂包括但并不限于那些形成颜色的试剂，例如，酶、含有染料的聚合物、化学发光的试剂、荧光试剂、放射性同位素或铁磁性颗粒物。形成颜色的试剂可以是一种带颜色的颗粒物、一种带颜色的分子或某些能激发一系列导致形成某种带颜色的标记物的事件的物质，例如酶。带颜色的分子可以是一种荧光染料，例如荧光素或若丹明；一种化学发光的化合物；一种生物发光的化合物；或一种可通过吸收电磁辐射(且可能以另一波长重新发射)来检测的化合物，所述电磁辐射包括紫外辐射、可见辐射和红外辐射。带颜色的分子可直接或间接与某种配位体或配位体—受体相共轭。可以选择地，带颜色的分子可以结合成一种颗粒物，特别是一种微粒。
用于作为形成颜色的试剂包括碱性磷酸酯酶、辣根过氧化酶或B—半乳糖苷酶。这样的一些酶常与生色的基片一起使用。下面在例11中给出了可与一些酶颜色形成试剂一起使用的某些典型的生色的基片的表。
在本发明的一个优选实施例中，形成颜色的试剂可以是一种电子稠密的颗粒物，例如，胶体金、镀银的胶体金或铁朊。
在本发明的另一个实施例中，形成颜色的试剂能够与一种MIP结合。
本发明包括一种产生信号的试剂，该试剂可以是产生信号的试剂。优选地，产生信号的试剂包括一种带标记的MIP，用于检测在反应介质中或其上的某种被分析物或被分析物的共轭物的吸收。带标记的MIP可以包括大量的适合标记的任何一个，例如，酶、荧光化合物，生物发光的化合物、铁磁性原子或带颜色的颗粒物或者微粒。在一个优选的实施例中，用于本发明的标记是胶体金。金是生物惰性的、有良好的电荷分布且可以许多有用的形式被广泛采用。用几种沉积银的方法可增强它的检测，这些方法使得能用裸眼监控发展情况。市场可买到与广泛范围的抗免疫球蛋白抗体、蛋白质A或抗生蛋白链菌素共轭的胶体金颗粒物。
尽管一种胶体金基片优于其它染色的颗粒物或微粒，而一种生色的基片提供有一种用于酶共轭物的，可供选择的敏感的检测方法。
本发明的几个实施例涉及到袖珍测定装置和分析盒，该装置和分析盒包含所有或绝大多数对于定性和/或定量确定一种或多种被分析物所必需的那些试剂和材料。图11中示出了这样的装置的一个优选的实施例，图11显示了一种自备的测定装置110。该装置包括一个外壳111，在一个优选的实施例中，外壳111包括一第一部件111a和一第二部件111b。一种上述类型的反应介质114位于所述外壳的第一部分111a中，安装在一个基底部件112的一个升高了的台阶或平台部分的上表面上。基底部件112优选地包括一邻近、接触或结合到反应介质114的多孔支座。在本发明的一个优选的实施例中，反应介质114包括一个或多个反应区域120，每个反应区域120包括一种特定的试剂，例如，一种配位体/受体对的一个成员(它可以是一种免疫对的一个成员，例如，一种抗原或抗体)。在这个优选的实施例中的反应介质至少包括一个核对区域116。如在上面讨论过的那些实施例中那样，每个上述的反应区域包括一种适用于确定某种被析物的定性存在或定量范围的试剂。在本发明的一个优选的实施例中，一个核对区域适用于鉴别一检验样品的给与者。同样，核对区域116还包括一种用于鉴别检验对象的合适的检验试剂，该检验对象优选地是一种配位体/受体对的一个成员，例如，是一种免疫对的一个成员。
在每个反应区域中存在的那些试剂可人工施加，或优选地，采用一种自动化的方法，例如，采用用于喷墨印刷系统中的那种类型的一种喷墨喷洒器，以便把所述试剂施加到单个人和那些隔离开的反应区域中。
一种介质126位于外壳的第二部件116中，在介质126上散布有至少一种产生信号的试剂或指示被分析物的试剂，该试剂优选地是一种形成颜色的试剂。含有产生信号的试剂的介质126是由孔隙度比反应介质或用于容纳一检验样品(下面讨论的)的介质更低的材料形成的。优选地用作上面散布有产生信号的试剂的介质是一种封闭微孔的聚烯烃材料，例如，封闭微孔的聚乙烯或聚丙烯。一种优选的材料可从Voltek股份有限公司买到作为微细胞。如同本发明的其它那些实施例中所用的那样，产生信号的试剂优选地是一种配位体/受体对的一个带标记的成员，例如，一种免疫对的一个带标记的成员，例如一种胶体金标记的物质。含有产生信号的试剂的介质126以这样一种方式定位在外壳的第二部件111b中，即当把外壳的两部件闭合到一起处于一特定的封闭位置时，使介质126和反应介质116之间产生接触，从而使包含在介质126中的产生信号的材料转移到上述反应介质中。优选地，通过把介质126装设在底部128上来完成这一点，底部128类似一个升高了的台面或平台，在图11所示的优选实施例中，底部128具有类似于基底112的形状。这种安置方式中，含有产生信号的试剂的介质在一第一或打开位置与反应介质114隔开，并在一第二或特定的封闭位置把所述产生信号的试剂转移到反应介质114上，由于当所述含有产生信号的试剂的介质126与反应介质114接触时施加了压力，这种安置方式明显地获得更高的敏感度及增加了的速度。可采用超过大气压的压力，这取决于所涉及的特定的材料，优选地稍微低于约2psi到约5psi，在介质114和126放置或彼此接触后，经历一段约5秒到约20秒的时间足以把产生信号的试剂适当地保留在上述反应介质的表面或其附近。尽管一般可以采用更高的压力，以便转移上述产生信号的试剂、被分析物或用该被分析物的一种配位体受体形成的此被分析物的共轭物(如下面所讨论的那样)，由于压力和时间成反比变化，施加压力的持续时间减少。
图11中所示的自备的或“完整的”装置的另一个组成部分是一种用于容纳并转移一部分某种检验样品到反应介质114的介质185。用来保持一种检验样品和能与某种被分析物反应的一种试剂的介质185是一种亲水性材料，优选地，是某种亲水性海绵状物形式且由一种微孔聚酯氨基甲酸乙酯海绵状物材料形成的材料。一种优选的材料是聚酯聚氨基甲酸乙酯泡沫海绵状物材料，该材料孔隙度为100psi，且可从E.N.Murray有限公司购买到。介质185用于几个目的。首先，它能吸收取自一个给与者或检验对象的一种检验样品。它还能把该样品或存在于此样品中的某种被分析物所形成的一种共轭物以及抵抗该被分析物的一种受体转移到反应介质114。介质185还能为存在于所述检验样品中的那些物质以及存在于上述介质中的一种试剂这两者都提供扩散和反应场所。这种试剂优选地是一种配位体/受体对的一个成员，例如，上面讨论过的并在图5和图6中鉴别为MIP30的那种类型的一种免疫对的一个成员。在介质185中的试剂一般是一种抗体。这种试剂容纳在介质185中，优选地作为一种冷冻干的抗体。在这个实施例中，海绵状物介质185用一种试剂的溶液处理，而被处理过的海绵状物在一个冷冻干燥室中受到冷冻干燥处理，例如，在一个Speed-Vac.中。
优选地以被冻干形式的用于容纳检验样品的介质、以及该检验样品和试剂可装设在一个圆柱体140的一端。在图11所示的实施例中，相对于在其上安装有介质185的上述圆柱体的封闭端140b的敞开端140a的形状或直径都比在其上安装含有产生信号的试剂的介质126的外壳部件111b的基底部分128要大。优选地，圆柱体140的敞开端140a的形状与基底部分128的形状相应，从而使该圆柱体可易于容纳在外壳部件111b中在基底部分128的上方。圆柱体140的形状和结构使得在介质114和126以彼此隔开的关系处于之中的上述那些外壳部件处在一“打开”位置时，介质185也在外壳部件111a和111b的上述打开或第一位置与介质114和126两者都处于彼此隔开的关系。在外壳部件111a和111b的一第二或“封闭”位置，且同时与底部128和含有产生信号的试剂的介质126成彼此隔开的关系保持于外壳111中，使用于容纳样品的介质185与处于该样品中的那些物质和/或形成在此样品中所发现的某种被分析物和它的一种共轭物之间的一种配位体/受体对接触并转移到反应介质114。这样，在上述第二或封闭位置，由圆柱体的端部140b和在反应介质114上的介质185施力，该施力方式与呈现在含有产生信号的试剂的介质126和处于一第二封闭位置的上述反应介质之间的接触方式大致相同。下面讨论使用这种装置的方法。
尽管图11说明了采用一个两部件外壳111的本发明的一个实施例，该外壳111有一第一部件111a和一第二部件111b，所述实施例还有一个可拆卸的部件140，一种用于容纳一检验样品的海绵状物185附着在部件140上，但本发明还是考虑到其它方面和一些可供选择的实施例。例如，图11中所示的外壳部件111a和111b是用一柔软的铰链装置互相连接在一起的。当所述外壳由一种合适的塑料构成时，此塑料对用于装置的其它组成元件中的、或施加于此装置的那些介质的溶液中的任何试剂或材料是惰性的，这时，上述铰链可由一更薄部分的同样的塑性材料制成。这样，上述外壳可在一冲压工序中制成为一个单独的单元。可以选择地，另外的材料可用作上述铰链材料，且所述铰链用适当的装置连接到上述那些外壳部件。
在另一个实施例中，外壳部件111a和111b完全无需互相连接在一起。这样，要关闭装置，可把那些单独的部件构造成用一棘爪或某些类似的装置咬合就位，或者，那些单独的部件可用一带螺纹的装置或一卡口接合装置互相接合。
在本发明的又一个可供选择的实施例中，用于容纳样品和容纳一种检验试剂的介质185可以位于一第三外壳部件中，而不是装在图11所示类型的可拆卸的圆柱状部件140上。当互相永久性地连接在一起的那些外壳部件一起使用时，例如上面刚说明的那样，含有用于容纳一种检验样品的海绵状物的外壳部件可放置在容纳反应介质和含有产生信号的试剂的介质的那些独立的外壳部件(等效于外壳部件111a和111b)中间。不过，在这个例子中，含有海绵状物185的中间的外壳部件可接合另外两个外壳部件中的一个或两个，并当就位和形成该外壳的部件时，在第一外壳部件中与反应介质接触。当想要使反应介质114和含有产生信号的试剂的介质126接触时，还可以去除它。
在本发明的又一个实施例中，含有用于容纳一检验样品的亲水性海绵状物的外壳部件可用在第一外壳部件的边缘部分上的一个绞链连接到该第一外壳部件(等效于图11中所示的外壳部件111a)，这个边缘部分与连接于第二外壳部件的这第一外壳部件的边缘相对。这样，当想要把含有一检验样品的海绵状物放置得与反应介质接触时，含有该海绵状物的第三外壳部件可旋转到与所述反应介质接触的可转移物质的一第二位置，而此后可旋转到一个与上述反应介质彼此隔开的位置，且含有产生信号的试剂的介质126的外壳的第二部件可旋转成与上述反应介质可转移地接触。
含有三种介质(一种反应介质、一种用于容纳一检验样品的介质、及一种用于容纳一产生信号的试剂的介质)的本发明的上述实施例基本上是自备的。这样，为了完成测定就无需附加另外的试剂。至多，在最终步骤中使用一种缓冲溶液，例如一种磷酸盐缓冲溶液或水，以便清洗反应介质，从该反应介质的表面去除残余的那些试剂。可以选择地，当一种可压缩的多孔介质用作反应介质的支座时，可以无需使用任何附加材料。
本发明还考虑到只用两种介质的袖珍测定装置，而不只是上述三种介质的装置。这样，在图12所示的实施例中，尽管还保持反应介质114安装在外壳的一个第一部分中的基底112上，含有并且转移样品的海绵状物185可直接安装在基底128上，而不是含有产生信号的试剂的介质126位于那里。在这样的一个实施例中，可以免除圆柱体140，在图11所示的“三种介质”的实施例中，介质185安装在圆柱体140上。在这样的一个实施例中，可以与上述相同的方式使用含有一种缓冲剂、洗涤剂或水的清洗瓶。不过，在这个实施例中，产生信号的试剂可从一个试剂瓶中直接分发在检验对象的手指或其它检验身体部位上，而在检验样品已放置在装于基底128中的海绵状物185上、已开始培养且外壳已经封闭、从而在海绵状物185和反应介质114之间用适当的压力有可转移物质的接触之后，上述手指或其它身体部位可放置得与反应介质接触。
图13中示出了另一种两种介质的装置。就象图11中所示及上面讨论过的实施例，这包括装设在处于外壳的一第一部件中的基底112上的反应介质114和在外壳的第二部件中的含有产生信号的试剂的介质126。除了没有圆柱体140和用于容纳一检验样品的介质185，这基本对应于图11中所示的实施例。像图11中所示的三种介质的装置，这个实施例并不需要有检验对象存在，而因此当检验对象不存在时，不会产生检验对象的手印或其它鉴别标记。不过，可以选择地，在进行检验时有检验对象在场的话，可以产生手印。在这个实施例中，把样品与装置所配备的一种试剂混合，该试剂最适于装于一个试剂瓶中，作为分析盒的部件。所述试剂可包括一种或多种物质，此物质能示明一种或多种被分析物的存在，而且上述试剂优选地是一种配位体/受体对的一个成员，最优选地是一种能与一特定的被分析物形成共轭物的免疫对的一个成员。上述检验样品和试剂的混合物一滴一滴地施加到反应介质的表面，时间要足以使得培养能进行，且外壳封闭一段短的时间，从而在含有产生信号的试剂的介质126和所述反应介质之间产生足以把所述产生信号的试剂转移到上述反应介质的表面上的接触。如果在检验时有检验对象存在，不是关闭装置以使介质114和126之间有接触，而是可以使检验对象的一个手指在产生信号的试剂的介质126的表面上滚动，然后把该手指压在反应介质上。
本发明的另一个实施例是针对一种用于区分急性和慢性药物滥用者的装置及方法。这样，在一个使用药物的人的体内，不仅发现有该药物或某种代谢物的分子，而且该药物或这样的代谢物结合到一种载体分子上。不断使用某种药物刺激产生一种抵抗结合药物的载体的抗体。这样，在长期使用某种药物的人的体内不仅可发现该药物或它的代谢物的残余物，而且可发现有对于所述药物的人类抗体。在本发明装置的一个实施例中，可以把检验对象被怀疑使用的某些药物点置在反应介质中的一个反应区域。然后，如果在一检验样品中作为某种被分析物存在的话，就会形成一种具有对上述药物的人类抗体的共轭物。可采用相应的山羊或老鼠抗人类的带标记的抗体作为用于示明所述药物抗体存在的一种产生信号的试剂。
使用的方法本发明的一种测定方法包括对于在一测定装置的一个反应区域中的某种被分析物进行配位体—受体测定，由此确定在检验样品中有无某种被分析物，并在上述测定装置的一个核对区域中证实提供所述检验样品的人的身份。在本发明的一个优选的实施例中，可采用一些配位体—受体测定方法，例如，结合一种MIP到一种产生信号的试剂中，来完成证实提供检验样品的人的身份。
如上所述，把要被用来检验有无至少一种被分析物的生物流体样品施加到本发明的免疫测定装置的表面上。可采用把所述流体样品施加到检验仪器的任何装置上。例如，在本发明的一个实施例中，生物流体(例如，尿)可按标准的免疫测定技术与一种MIP结合，抽进一个吸管，并沉积在检验装置的表面上。
在另一个实例中，生物流体(例如，血)可收集在一个吸管中并沉积在检验装置的表面上，或者可以涂抹在一个固体施与物上，例如，手指尖。在一个优选的实施例中，把血涂布在检验对象的手指尖上，然后，把该手指尖接触地压按在检测装置的表面。在另一个优选的实施例中，生物流体在施加到反应介质上之前与一种MIP结合。还有一个实施例中，样品沉积在用于容纳一检验样品的介质的表面上。在一些例子中，说明了将检验样品施加到检测装置的另外一些典型的方法。
本发明的一个优选的实施例包括使用压力把一种或多种试剂或一种样品施加到检验装置的一个表面上。例如，已发现把一种产生信号的试剂涂抹在检验对象的手指尖上，并把该手指尖施加到检验装置上，显著地减少了所需要的产生信号的试剂的量，并显著地增加了敏感性和测定进行的速度。例如，为了完成测定，可把少至10微升的胶体金，优选地约12微升的胶体金涂抹在检验对象的手指尖上。比较起来，对于通常的流动穿过盒测定装置，一般需要多至100微升或更多的产生信号的试剂。以一种类似的方式，另一个优选的实施例包括在把样品施加到反应介质的表面上时使用了压力。
尽管并不打算局限于一种特定的操作理论，但应相邻当检验对象的手指放在测定装置上时所出现的压力和/或表面张力导致使配位体和配位体受体的增加了的浓度局部化，增加了那些试剂保持在测定装置的一个局部区域的时间，并且这可能涉及产生信号的试剂从手印的脊线到沟线的迁移，以在检验装置的表面上产生一个清楚的手印图案。
本发明所提供的更高敏感性及减少了的试剂量似乎是由于在可找到固定了的试剂的膜的表面发生了更完全的反应。更完全的反应显然是由于以液体形式施加到膜的表面上的那些试剂在那里保持了更长的一段时间。这样，如同最为常见的那些检验装置那样是典型的，液体样品和/或试剂以逐滴的形式施加到或含有试剂或含有检验样品的膜的表面上，并且很快地通过该膜被吸收，这是因为一种吸收剂与放置在它的下游表面上的所述膜接触，或者是因为所述膜材料的性质。不过，在本发明中，把含有试剂和/或样品的液体施加到反应介质的表面上，并通过施加大于大气压力的压力把所述液体作为一个薄膜保持在那里，该薄膜几乎显不出什么要完全穿过上述膜的趋势。这样，采用手指作为涂敷器，或采用另外的涂敷器装置，例如，作为装置的一部分所包括的一种涂敷器装置，把在所述涂敷器上的含有试剂的液体在压力下转移并保持在反应介质的上游表面处。这样，尽管不愿坚持任何理论，显然，上述液体的最初的表面张力，并结合其它一些因素，例如，涂敷器的毛细作用，以及可能还有在上面结合压力放置了上述液体的介质的孔隙度，只要在所述介质的外表面上保持上述压力，就会导致液体的薄膜保持在上游表面上而不是穿过所述介质。把一个薄膜保持在反应介质的表面时的表面张力的贡献表现为增加了存在于上述液体中的那个(那些)种物质对于所述介质中的一些试剂的可利用性。这样，采用一种涂敷器，例如用手指，使用大于大气压力的压力，一般低至约1psi到约5psi的压力，且直到一个检验对象愿正常并舒适地施加的一个压力那么大(例如，在按一个“正式手印”时按手指那样)，直到去除所述压力时，这些都防止了上述液体穿过薄膜。压力正常地施加一段约5到20秒的时间。把试剂保持在介质或膜的表面上这样一段时间足以保证了位于所述介质的上游表面处或直接处在其下面的那些试剂的更高的反应程度。尽管所述液体的性质，例如它的表面张力，以及构成上述膜和涂敷器的材料，与这种现象有某些关系，可见，可采用各种各样的材料，而且仍然出现上述液体薄膜保持在所述膜的表面的现象。进一步，而且还是不愿意坚持某一特定的理论，可见，本发明的装置和方法的测定试验的提高了的灵敏度及特别是快速性至少部分是由于在把一些液体溶液施加到反应介质表面时采用了压力。人们相信，所施加的压力大于大气压力且一般低至1psi时，优选地在约2到15psi的范围时，该压力就增加了特定反应发生的动量或速度。
检验装置优选地包括一种或多种在反应区域对应数量中的固定了的MIP。例如，如果感兴趣的被分析物是一种抗体，上述检验装置可包括一种结合到埋入反应区域中的微球或颗粒物的抗源。一个本领域的普通技术人员会认识到可把所需要量的抗源固定在反应区域中，并可用一个阈值浓度的所结合的MIP检测一个预定量的被分析物。在本发明的一个实施例中，检测装置包括几个反应区域，每个反应区域用于一种不同的被分析物，而且，每个反应区域包括一个预定的阈值浓度的所结合的MIP，以检测一个预定量的被分析物。如此处所用的那样，阈值量或浓度是指对于某种被分析物的浓度范围的下限。在本发明的另一个实施例中，检测装置包括几个反应区域，每个反应区域对同样的被分析物包括一种不同的阈值浓度。在这个实施例中，阈值浓度为确定某种被分析物的浓度范围的上限提供了一个参考点。如下面的那些例子中所示的那样，改变上述那些反应区域中的阈值浓度可提供一种确定一样品中的被分析物的量的典型方法。
在被检验的生物流体被施加到检验装置的表面上后，可以确定在检验样品中有无被分析物，优选地，通过目视确定一种颜色(信号)或无某种颜色(信号)。在本发明的一个实施例中，阳性反应，即示明在所述生物流体中有上述被分析物，对应于无色。在本发明的一个优选的实施例中，阴性反应，即示明在上述生物流体中无所述被分析物，对应于一种可见的颜色。不过，在本发明的一个实施例中，其中确定检验对象是否是一个慢性药物滥用者，检验到对某种药物的一种人类抗体，而且，存在于反应区域中的试剂是该药物本身，而带有标记的产生信号的试剂例如是一种带金标记的山羊或老鼠的抗人类抗体，一种示明有上述药物抗体的阳性反应对应于出现颜色。
按照本发明的一个方面，当被检验的生物流体是血时，现意外地发现金血可直接施加到检验装置的表面上而无需在把样品施加到该检验装置之前分离血清。根据本发明的这个实施例，把全血样品施加到检验装置的表面上之后，把一种洗涤剂施加到血液样品上。尽管人们知道，一些洗涤剂，例如非离子活性剂可用来从全血样品中去除红细胞及其类似物，已经意外地发现，施加清除试剂，例如，一种洗涤剂(优选的是一种包括离子洗涤剂和非离子洗涤剂的混合物及酒精的洗涤剂)的施加使得能把全血施加到测定装置的表面上，而无需在施加到所述装置之前从血清中分离细胞组份。优选的是施加一种洗涤剂，因为该洗涤剂破坏血细胞。之后，破坏了的细胞残骸穿过上述介质并从反应区域中去除，即不再干扰固定了的表面抗原。
一旦已经确定有无被分析物，可用按照本发明制作的检测装置来鉴别被检验生物流体的检验对象。在本发明的一个优选的实施例中，确定检验对象的身份包括进行配位体—受体测定，此测定导致显现出单个人的手印。按照本发明的一个优选的实施例，确定检验对象身份与任何和上述流体中的被分析物的反应无关。
根据本发明的方法，人的手指尖涂覆一种与某种MIP进行共轭的产生信号的试剂。当被涂覆的手指尖施加到一个核对区域的表面上时，所述产生信号的共轭物结合到埋入检验装置的核对区域中的一种MIP。尽管本发明并不限于某种特定的操作理论，人们应相信，一个人的手指尖的那些脊线和沟线提供了浓缩了的产生信号的共轭物的局部区域(对应于沟线)以及低浓度的产生信号的试剂的局部区域(对应于脊线)。当施加到本发明的一个装置的一个核对区域的表面上时，就产生一个手印的可清楚鉴别的图象，由此，可以给出提供所述检验样品的人的身份。
根据本发明，可以通过把样品施加到一种反应介质的表面上来确定在该样品中有无某种感兴趣的被分析物，所述反应介质至少包括一个反应区域，这个反应区域具有在其中的一种免疫对的一个成员；且上述确定还要通过施加一种直接或间接(例如，一种次级抗体)地结合到MIP或结合到上述感兴趣的被分析物的产生信号的试剂。
可如下面利用图11中所示的自备的检验装置把一种液体形式的检验样品，例如，一种体液(例如，唾液、尿或血液)，放置在用于容纳和转移检验样品的介质185的外表面上。直到可把约20滴检验样品施加到介质185上。由于这种装置比那些通常的检验装置提供有高得这么多的敏感性和速度，几乎没有一滴检验样品可被优选采用，不过，优选地使用约3到5滴检验样品。使圆柱体140以其敞开端置于基底128上面而在上述外壳中就位，并且使产生信号的介质126在外壳的第二部件111b中就位，把检验样品施加到介质185的外表面上，或者把该样品施加到所述介质和圆柱体140上，此后置于外壳部分111b中。存在于上述检验样品中的任何被分析物都经历了与以冻干形式存在于海绵状物185中的一种配位体/受体对的一个成员反应，优选的是一种免疫对的一个成员，以便形成一种共轭物。允许经过约1分钟到约4分钟的一段时间，优选地，约2分钟的一段时间，用于上述检验样品和配位体/受体对的成员的培养(反应)。使圆柱体140保持在上述外壳的第二部件111b中就位，把外壳111的两部件合并到一起至一第一封闭位置，在此位置，海绵状物185的外表面接触反应介质114并施加足够的压力，以便转移存在于上述检验样品中的那些物质上述配位体/受体对的成员以及形成在被分析物和所述配位体/受体对的成员之间的任何共轭物。在这个位置，尽管叫作一个“封闭了的位置”，但所述外壳并非可以整个封闭，这取决于所采用的特定的结构。保持这个封闭位置约1分钟到约4分钟的一段时间，优选的是约2分钟。此后，打开上述外壳，并且从外壳装置中取出容纳有海绵状物185的圆柱体。然后，关闭所述装置到一个完全封闭或第二封闭位置，在此位置，用足够的压力使含有产生信号的试剂的介质126接触反应介质116，以便转移该产生信号的试剂，例如，一种配位体/受体对的带金标记的一个成员，到所述反应介质。使上述外壳保持在这个第二或完全封闭的位置至少约5秒到约30秒钟的一段时间，优选的是约15秒的一段时间。
约一分钟后，通过显示适当的反应区域中的一个空白空间，装置就会示明存在任何被检验的被分析物或者存在超过一个预定浓度或预定量的一定量的被分析物。在绝大多数应用中，当不存在某种特定的被分析物或该被分析物存在的量使得浓度低于某一预定的值时，由适当区域的显色作用反映阴性检验。一个装置在这个阶段不会提供关于检验对象的身份的指示，除非在第二次打开外壳后该检验对象放置一个手指或身体的其它鉴别部分与反应介质114的核对区域116接触。可以选择地，在已使得介质126和114之间产生接触后不把上述手指或其它身体部分施加到所述反应介质的核对区域，而是省掉把上述两种介质压在一起的这个步骤，而且在上述检验对象的手指或其它身体部分第一次在含有产生信号的试剂的介质126上滚过之后，或者在用一涂敷器或分布器直接施加所述产生信号的试剂到上述手指或其它身体部分之后，所述检验对象的手指或其它身体部分可在压力下接触上述反应介质。尽管通过检验对象的一种永久性的和个人的特性鉴别该检验对象的那些方法中的每一种都是快速和灵感的(整个测定一般要不超过约3到5分钟)，在最后说明的方法中，产生信号的试剂直接施加到手指尖上，此手指尖然后施加到反应介质上，这最后说明的方法或许更有效，这在于可需要更少量的试剂和样品，而且该过程的速度或许更快些。不放置一个手指或其它鉴别身体部分与反应介质接触的方法由于所需的材料量和过程的速度从而效率最低，尽管在上述手指或其它身体部分与转移介质之间的接触效果中等。
检验分析盒在本发明的一个实施例中，按照本发明制作的装置可组装成一个分析盒。这分析盒还可包括大量用于进行配位体/受体测定的那些试剂中的任何一种。例如，所述分析盒可包括一检验装置、至少一种用于产生一种信号的试剂(或一种用于转移该产生信号的试剂到手指的“墨水”垫)、以及一种或多种冲洗、清洁或洗涤试剂。所述分析盒还可包括一种或多种配位体或配位体受体，例如，冻干了的初级抗体和一种次级抗体，并且还可包括一种或多种缓冲剂。所述配位体或配位体受体可以是一种带标记的材料。
当以分析盒的形式提供上述那些袖珍装置时，它们可以带有含有磷酸盐缓冲溶液的冲洗溶液。对上述讨论的图12和图13所示的本发明的装置的替代的两种介质的实施例，可以以一种分析盒的形式最有效地提供这样的冲洗瓶和/或试剂瓶。这样，不用图11所示的含有一个外壳和三种介质114、126和185的装置，而是采用包括一个外壳和上述三种介质中的两种介质的装置。
一些具体的实例例1按照下述方法制备本发明的免疫测定装置的一个实施例。通过把用人类血清白蛋白—苯甲酰芽子碱(HSA-BE)涂覆的聚苯乙烯颗粒物埋入装设在一个多孔支座上的一部分低蛋白质结合聚砜的膜(Gelman Super膜)，来构造一个反应区域。通过把用山羊抗老鼠抗体涂覆的聚乙烯颗粒物埋入上述膜的一个不同部分上来构造核对区域16。图3和图4中示出了上述反应和核对区域的典型的示意性剖面。
按照下述方法制备上述测定装置。首先用一种阻滞缓冲溶液(溶液A)清洗反应介质，该溶液由在磷酸盐缓冲的盐水溶液中的2％的聚乙烯醇(PVA)、1％的甘氨酸和0.05％的吐温—20组成。用一种聚苯乙烯胶乳的稀释溶液来标出免疫测定装置的中央井(核对区域16)，该聚苯乙烯胶乳用在含有4％的蔗糖、1.0％的BSA和0.05％的叠氮化物的磷酸盐缓冲的盐水中的山羊抗老鼠免疫球蛋白G(被吸收的抗人类血清)涂覆。用一种聚苯乙烯胶乳的稀释溶液标出所述反应区域，此聚苯乙烯胶乳用在0.2M碳酸氢钠中的人类血清白蛋白—苯甲酰芽子碱(HSA-BE)涂覆。然后把所述反应介质倒置在疏水性聚乙烯上，并在温度设定于80°F和100°F之间的一个干燥室中干燥一小时。在从上述疏水性聚乙烯上去除所述反应介质后，上述测定装置就准备好供使用。
例2从一个要被检验有无苯甲酸芽子碱的人身上得到唾液样品。把在磷酸盐缓冲的盐水中的老鼠抗苯甲酸芽子碱免疫球蛋白G(老鼠抗-BE IgG)的稀释溶液的等分试样200微升加到200微升的上述唾液样品的等分试样中，所述稀释溶液含有0.1％的牛血清白蛋白(BSA)和0.05％的吐温—20。允许最终得到混合物培养3分钟。在这段培养期间，把400微升的溶液A加到实例1中所制备的免疫测定装置的反应介质中，并使得这400微升的溶液A通过该反应介质排放。然后，把老鼠抗—BE IgG/唾液混合物加到上述反应介质上，并使培养能进行两分钟。然后，把另外400微升的溶液A的等分试样加到上述反应介质上，并使此另外的400微升的溶液A的等分试样能排放。在溶液A排放终结后，用在含有1.0％BSA、0.05％吐温—20及0.05％的叠氮化物的TRIS缓冲剂中的胶体金共轭的山羊抗—老鼠免疫球蛋白G的稀释溶液(以后叫作“金标记溶液”)15微升涂敷在提供上述唾液样品的那个人的一个手指上。使这个手指顶住上述免疫测定装置的反应介质缓慢压下，并保持就位3秒钟。然后，把这个手指仔细地滚离所述反应介质。在把另外400微升的溶液A的等分试样加到该反应介质上之前，使此反应介质能培养15秒钟。在完成这一程序后，反应区域显色，表明对于苯甲酰芽子碱的阴性检验结果(例如，如图2中反应区域32至34所示的那样)。
除了恰好在加入老鼠抗—BE IgG溶液之前加入较少量的苯甲酰芽子碱到唾液样品上外，重复上述测定。在这个例子中，在完成检验后，上述那些反应区域完全是白色的(例如，如图2中的反应区域35至37所示的那样)。在完成两个测定时，中央井核对区域包含提供上述唾液样品的那个人的那个手指的一个印记(例如，如图2中核对区域16上的手印62所示的那样)。
例3按照例1的方法制备免疫测定装置，除了该装置包括6个用于不同被分析物的反应区域外。每个反应区域包含一些聚苯乙烯颗粒物，这些聚苯乙烯颗粒物用埋入在膜中的一种不同的被分析物共轭物涂覆。反应区域32至37包含一些聚苯乙烯胶乳，这些聚苯乙烯胶乳分别涂覆柯卡因(32)、一些鸦片制剂(33)、PCP(34)、苯齐巨林/N-甲基苯丙胺(35)、四氢大麻酚(36)和乙醇(37)作为被分析物(如图1所示)。如例1那样，用一些涂覆有山羊抗—老鼠免疫球蛋白G、埋入膜中的聚苯乙烯颗粒物制备中央核对区域16。
从要被检验有无六种被分析物的一个人身上得到唾液样品。把在磷酸盐缓冲的盐水中的对于六种不同的被分析物的每一种的老鼠抗—被分析物免疫球蛋白G的稀释溶液(以后叫作“老鼠抗—被分析物IgG溶液I”)的等分试样200微升加入到200微升的上述唾液样品中。如实例2中所述，当培养这种混合物时，用溶液A预处理反应介质。在上述老鼠抗—被分析物IgG溶液I/唾液混合物加到所述反应介质上之后，进行实例2中所述的余下的检验程序。用溶液A处理上述反应介质，用已涂有胶体金共轭的山羊抗—老鼠免疫球蛋白G的稀释溶液的检验对象的一个手指接触所述反应介质，且然后再次用溶液A处理该反应介质。在进行了这个程序之后，中央核对区域16含有提供上述唾液样品的那个人的那个手指的印记。反应区域32至37都显色，表明对于存在所有六种被分析物的一个阴检验结果。
然后，用较少量的苯齐巨林/N-甲基苯丙胺、四氢大麻酚及乙醇抑制剩余的唾液。然后，把老鼠抗—被分析物IgG溶液I的等分试样200微升加入到200毫升的抑制过的唾液中，并且，对于未抑制过的样品如所述那样重复上述测定。在进行了所述程序后，测定装置展示了图2中所示的结果。中央核对区域16包含提供上述唾液样品的那个人的那个手指的印记。反应区域32至34显示了阴性的检验结果，并且都显色。反应区域35至37显示了阳性的结果，并且都是白色。
例4按照实例1的方法制备一种包含6个反应区域的免疫测定装置。如在实例3中那样，反应区域32至37分别包含一些聚苯乙烯胶乳，这些聚苯乙烯胶乳用柯卡因(32)、一些鸦片制剂(33)、PCP(34)、苯齐巨林/N-甲基苯丙胺(35)、四氢大麻酚(36)及乙醇(37)涂覆作为被分析物。不过，在这个例子中，如图1所制备的中央核对区域16包含一些聚苯乙烯颗粒物，这些聚苯乙烯颗粒物用埋入在膜中的老鼠抗—山羊免疫球蛋白G涂覆。从要被检验有无六种被分析物的一个人身上得到尿样品。把此尿的等分试样200微升与200微升的老鼠抗—被分析物IgG溶液I混合，然后严格地如实例2中所述进行检验程序。在进行测定之后，中央核对区域16包含提供上述尿样品的那个人的那个手指的印记，而且，反应区域32至37都显色，表明对于存在所有6种被分析物的阴性检验结果。
然后，用较少量的苯齐巨林/N-甲基苯丙胺、四氢大麻酚及乙醇抑制剩余的尿样品。之后，把老鼠抗—被分析物IgG溶液I的等分试样200微升加入到200微升的抑制过的尿中，并对于未抑制过的样品如所述那样重复上述测定。在完成测定之后，免疫测定装置展示了图2中所示的结果。中央核对区域16包含提供上述尿样品的那个人的那个手指的印记。反应区域32至34显色(阴性结果)，而反应区域35至37是白色的(阳性结果)。
例5按照实列1中所述的方法制备图9和图10中所示的免疫测定装置的反应介质83。反应介质83有6个反应区域32至37，这6个反应区域包含一些聚苯乙烯胶乳，这些聚苯乙烯胶乳分别涂覆有柯卡因(32)、一些鸦片制剂(33)、PCP(34)、N-甲基苯丙胺(35)、四氢大麻酚(36)及乙醇(37)作为被分析物，而反应介质83还有一个中央核对区域16，中央核对区域16含有一些聚苯乙烯颗粒物，这些聚苯乙烯颗粒物涂覆有老鼠抗—山羊免疫球蛋白G、埋入到膜中(如图1所示)。
把一个无菌拭子85放在一个人的舌头下面，要检验此人的唾液有无六种被分析物。一分钟之后，取出拭子85并放置在免疫测定装置的培养槽80和皿81中(如图9所示)。把三滴银的稀释液加到该唾液拭子上，所述银涂覆有对于上述六种不同的被分析物的每一种的老鼠抗—被分析物免疫球蛋白G的金的微粒共轭物(所述银的稀释液以后叫作“老鼠抗—被分析物IgG溶液II”)。在把提供上述唾液样品的人的一个手指82顶住所述拭子压下10秒钟之前，使被处理过的拭子能培养一分钟。然后，把上述手指抬离所述拭子，立刻压在免疫测定装置的反应介质上，并保持就位30秒钟。之后，使所述手指抬离该反应介质，而且，在辨认结果之前使得此介质能培养两分钟。这时，中央核对区域16包含提供上述唾液样品的那个人的那个手指的印记，而且，反应区域32至37都显色，表明对于存在所有六种被分析物的阴性检验结果。
除了在把老鼠抗—被分析物IgG溶液II加到一个新的无菌拭子之前把一滴含有较少量的N-甲基苯丙胺、四氢大麻酚及乙醇加到该拭子上这一点之外，用所述新的无菌拭子重复上述检验程序。完成检验之后，免疫测定装置显示了图2中所示的结果。中央核对区域16包含提供上述唾液样品的那个人的那个手指的印记。反应区域32至34显色(阴性结果)，而反应区域35至37是白色的(阳性结果)。
例6如实例5中那样制备免疫测定装置。用一个无菌拭子从一个要被检验有无六种被分析物的一个人的舌头下面收集唾液样品。当收集该唾液样品时，把800微升的老鼠抗—被分析物IgG溶液I与一滴PCP的稀释溶液一起放置在一个样品试管中。使得含有唾液的拭子能浸泡此样品试管中的溶液两分钟。把最终得到的混合物的等分试样400微升施加到反应介质上，并使得能培养这400微升的最终得到的混合物等分试样20秒钟。然后，加入到所述反应介质中溶液A的等分试样400微升并使得能排出。在已排放完溶液A之后，用15微升的带金标记溶液涂抹到提供上述唾液样品的那个人的一个手指。使这个手指立刻顶住上述测定装置的反应介质缓慢压下，并保持就位5秒钟。在使该手指小心滚离所述反应介质之后，使得此介质能在另外400微升的溶液A的等分试样加入到该反应介质前培养15秒钟。完成上述程序之后，反应区域完全是白色的，表明对于PCP的阳性检验结果。中央核对区域包含提供上述唾液样品的那个人的那个手指的一个印记。
例7按照实例1的方法制备免疫测定装置。反应介质包括一个尼龙膜。反应区域包含一些聚苯乙烯颗粒物，这些聚苯乙烯颗粒物涂覆有埋入在上述膜中的人类血清白蛋白—柯卡因。中央核对区域包括一些聚苯乙烯颗粒物，这些聚苯乙烯颗粒物用山羊抗—人类免疫球蛋白涂覆，埋入在上述膜中。
用一根针刺破一个要被检验血液中有无柯卡因的人的一个手指，以便得到一小滴血液。用一个无菌药刀摊开这小滴血液，以便在手指尖上形成一个血液薄膜。使这个摊开了的血液的手指尖顶住反应介质压下并保持就位约10秒钟。抬离该手指之后，用家用洗涤剂的稀释溶液处理所述反应介质，由此，从这反应介质上去除血液的红色。在已去除血液的红色之后，用碱性磷酸盐进行共轭的老鼠抗—柯卡因免疫球蛋白G的稀释溶液处理上述反应介质，并使得能培养此反应介质两分钟。然后，顺序用溶液A、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐和氮蓝四唑(BCIP/NBT)的一种稀释溶液、再用溶液A处理该反应介质。使得这反应介质能在所述BCIP/NBT处理和最终的溶液A处理之间培养几分钟。当完成最后的程序后，中央核对区域包含已经提供上述血液样品的那个人的那个手指的一个印记，而且反应区域显色，表明对于柯卡因的阴性检验结果。
例8如实例7中那样制备免疫测定装置。把500微升的、在磷酸盐缓冲的含有0.1％的牛血清白蛋白(BSA)和0.05％的吐温—20的盐水中的老鼠抗—柯卡因免疫球蛋白G的稀释溶液的等分试样(以后称作“老鼠抗—柯卡因IgG溶液)放置在一个小样品试管中。把含有较少量的柯卡因的一滴溶液加入到这个样品试管中。
用一根针刺破一个要在他们的血液中被检验有无柯卡因的人的一个手指，以便获得一小滴血，并且把两小滴血加入到样品试管中的混合物里。在使最终得到的混合物能在该样品试管中培养两分钟之后，把这混合物加入到免疫测定装置的反应介质上。在这反应介质上培养该混合物一分钟，然后，用溶液A清洗该混合物。用15微升的带金标记溶液涂抹已经提供了上述血液样品的那个人的一个手指。使这个手指顶住上述测定装置的反应介质缓慢地压下并保持就位5秒钟，然后，仔细地滚离该反应介质。在把另外的400微升的溶液A的等分试样加入到此反应介质上之前，使得能培养该反应介质15秒钟。完成上述程序之后，反应区域完全是白色的(对于柯卡因的阳性检验)，而且核对区域包含提供上述血液样品的那个人的那个手指的印记。
例9除了免疫测定装置包含6个反应区域外，按照实例l的方法制备免疫测定装置(见图1)。每个反应区域包含一些聚苯乙烯颗粒物，这些聚苯乙烯颗粒物用埋在膜中的不同量的胆固醇共轭物涂覆。反应区域32包含一种胆固醇共轭物，这种胆固醇共轭物当与具有大于或等于150毫克/分升全部胆固醇水平的一种生物流体接触时产生阳性信号。反应区域33至36包含有中等量的胆固醇共轭物，其中胆固醇共轭物的量从区域32到区域35顺序增加，即180mg/dl、240mg/dl、280mg/dl。上述反应介质还包括两个对应于30ml/dl和65ml/dl高密度脂蛋白的参考核对区域。
用一根针刺破一个要在他们的血液中被检验胆固醇量的人的一个手指，以便得到一小滴血。把这小滴血加入到一个小样品试管中，这个试管含有400毫升的、在磷酸盐缓冲的盐水中的老鼠抗—胆固醇免疫球蛋白G与胶体金共轭的老鼠抗—胆固醇免疫球蛋白G的稀释溶液，所述盐水含有0.1％的牛血清白蛋白(BSA)和0.05％的吐温-20(以后上述稀释溶液叫作“老鼠抗—胆固醇IgG溶液”)。培养三分钟之后，用一个无菌药刀把上述混合物的薄膜摊开在提供上述血液样品的那个人的一个手指尖上。使这个手指尖立刻顶住上述免疫测定装置的反应介质缓慢地压下。保持这个手指尖就位5秒钟后，小心地使该手指抬离所述反应介质。培养此反应介质一分钟，然后用家用洗涤剂的稀释溶液处理，以便从该反应介质上去除血液的红色。完成上述程序后，核对区域包含提供上述血液样品的那个人的那个手指的印记。反应区域32至33显色(对于胆固醇的阴性检验)，而反应区域34和35是白色的(对于胆固醇的阳性检验)。当至少预定的阈值量的胆固醇存在时，每个反应区域给出一个对于胆固醇的阳性检验。对于每个反应区域，相应于在那个区域的反应介质中所吸收的胆固醇共轭物的量，上述阈值胆固醇浓度不同。
例10下面是用本发明可以确定存在与否的大量其它药物的清单。这只是示例性的，并不意味着本发明局限于此。6-阻滞物利尿剂醋丁酰心安 醋唑磺胺心得舒 氨氯吡脒苯氧胺 苄氟噻嗪6-去氢睾酮-17-α-丙内酯5-〔1-羟-2-(1-甲3-丁氨基-4-苯氧基-5--3-苯丙氨基)乙基〕水杨酰胺 氨磺酰基苯甲酸美多心安氯汞甲氧丙尿萘羟心安氯噻酮烯丙氧心安 双氯磺酰胺心得安 利尿酸心得怡及一些相关的化合物呋喃苯胺酸双氢氯噻嗪汞撒利螺旋内酯甾酮三氨喋呤及一些相关的化合物兴奋药 麻醉药 镇痛药二乙胺苯丙酮安侬痛苯齐巨林对氨苯乙基去甲哌替啶苯丙胺苄氰 叔丁啡2，4-二氨基-5-苯噻唑可待因苄甲苯异丙胺吗散痛咖啡因 右旋达而丰去甲伪麻黄碱海洛英氯苯氧胺二氢可待因氯苄苯丙胺 4，4-二苯基-6-哌啶基己-3-酮氯喘通 六氢-1-甲-4-苯基氮罩-4-羧酸乙酯柯卡因 乙基吗啡N-(1-二甲氨甲酰丙基)-N- 羟甲在吗喃丙基巴豆酰胺巴酰乙酰胺 阿米痛二N-甲基苯丙胺 吗啡麻黄碱 环丁甲羟氢吗啡乙基麻黄碱 戊唑辛香草酰二乙胺 地美露N-乙基苯乙丙胺 非那唑辛苯乙胺去甲樟烷 γ-二甲度冷丁及相关的化合物苯丙氨乙茶碱氰乙苯丙胺糠甲苯丙胺氯丙苯丙胺N-甲基苯丙胺甲氧苯丙甲胺甲基麻黄碱利他林甲苯吗啉甲基安替比林可拉明匹莫林可拉唑3，4-二甲-2-苯基吗啉3-甲-2-苯基吗啉α，α-二甲苯乙胺N-去甲麻黄碱α，α--二苯基-2-哌淀甲醇1-苯基-2-吡咯烷基戊烷环己丙甲胺1-(4-甲苯基)-2-(1-吡咯烷基)-1-戊酮马钱子碱及一些相关的化合物促蛋白合成类固酮 致幻剂7α，17-二甲睾酮 麦角酸去氢睾酮 二乙酰胺氯睾酮三甲氧苯乙胺去氢甲基睾酮 苯环己派啶(PCP)氟羟甲睾酮氯胺酮1-甲氢睾酮2，5-二甲氧-4-去氧麻黄碱氢甲睾酮 四氢大麻酚去氢甲睾酮马力求那1-甲雄烯醇酮甲基睾酮19-去甲睾酮乙诺酮氧甲氢龙羟甲睾酮康复龙康力龙睾酮及一些相关的化合物鸦片制剂 镇静药/安眠药海洛英水合氯醛吗啡 导眠能美沙酮(Methandone)安宁哌替啶安眠酮可待因丙氧芬巴比妥类 苯并二氮罩类异戊巴比妥安定戊巴比妥 氯氮罩司可巴比妥利眠宁苯巴比妥 去甲羟基安定异丁巴比妥氟胺安定仲丁巴比妥氯羟去甲安定三唑安定抗精神病药/抗抑郁药 溶剂氯丙嗪乙醇氯哌三唑酮甲醇氟哌啶醇 异丙醇氯哌氧罩 乙二醇碳酸锂氯仿丙咪嗪镇痛药促蛋白合成甾类阿斯匹林 睾酮扑热息痛 甲基睾酮布洛芬19-去甲睾酮二氟苯水杨酸 康力龙保泰松氧甲氢龙去氢甲睾酮氯睾酮1-甲氢睾酮乙诺酮实例11
下面的表确立了四种典型的、产生不溶于水的产物的、生色的基片，所述不溶于水的产物可与一种适当的酶共轭物一起用于本发明，而不是与前述的胶体金标记一起用于本发明。采用一些酮/色原对的标记方法是众所周知的，而且一个本领域普通技术人员易于实施。
产生不溶于水的产物的生色基片

例12在这个实例中，采用实例7的装置和方法，除了下述这些方面之外，这些方面是测定装置包括实例3中所示的、用于那些被分析物的反应区域，用溶液A预先弄湿反应介质的表面，刺破检验对象的手指，以便产生足够量的血，把这些血涂布在该检验对象的手指尖上，并且使得被涂布的血在该对象的手指上干燥。然后，使带干燥的血的手指施加到测定装置的表面上，并保持与该装置接触约15秒钟。在该手指抬离后，用澄清的试剂的稀释溶液处理反应介质，由此，从该反应介质上去除血液的红色。在去除了血液的红色后，用结合到一种次级抗体上的胶体金的一些共轭物的稀释溶液处理上述反应介质，每种共轭物专门结合上述指定的那些被分析物。在培养约两分钟之后，用约10微升的、被共轭到一种专门用于在核对区域中的配位体受体的配位体的胶体金涂覆未用来施加上述血液的一个手指尖。在拿掉该手指尖后，中央核对区域包含已提供上述血液样品的那个人的那个手指的一个印记，而且，上述反应区域显色，表明对于所述那些被分析物的阴性检验结果。
例13在这个实例中，采用实例7的装置和方法，除了下述这些方面之外，这些方面是测定装置包括实例3中所示的、用于那些被分析物的反应区域，反应介质的表面是干燥的，刺破检验对象的手指，以便产生足够量的血，把这血涂布在该检验对象的手指尖上，并且，被涂布的血立刻(在干了之前)施加到反应介质上约15秒种。在抬离该手指后，使得反应介质能够干燥(典型地，约1到2分钟)，用澄清的溶液处理所述反应介质，以便去除红色的血细胞，并用澄清的试剂的溶液处理上述反应介质，由此，从该反应介质上去除血液的红色。在去除了血液的红色之后，用结合到一种次级抗体的胶体金的一些共轭物的稀释溶液处理所述反应介质，经每种共轭物专门结合之上述指定的那些被分析物之一。培养两分钟后，用约10微升的、共轭到专门用于在核对区域中的配位体受体的一种配位体的胶体金涂覆未用来施加上述血液的一个手指尖。在拿掉该手指尖后，中央核对区域包含已经提供上述血液样品的那个人的那个手指的一个印记，而且，反应区域显色，表明对于所述那些被分析物的阴性检验结果。
例14按照实例1的方法制备一种含有5个反应区域(对应图1中的区域32和34至37)的测定装置。如实例3中那样，反应区域包含一些聚苯乙烯胶乳，这些胶乳分别涂有柯卡因(32)、PCP(34)、苯齐巨林/N-甲基苯丙胺(35)、四氢大麻酚(36)和乙醇(37)作为被分析物。不过，在这个例子中，区域33并不包含任何被吸收的被分析物或抗体，而是作为一个参照核对区域，即一个在检验结束时会保持完全白色的区域。中央核对区域(对应于图1中的区域16的“身份核对区域”)如实例1中那样制备，除了它包含一些聚苯乙烯颗粒物之外，而这些聚苯乙烯颗粒物涂覆有埋入在膜中的山羊抗兔免疫球蛋白G。
用500微升的溶液A处理反应介质A，由此，弄湿该反应介质。从一个检验对象身上获得血液样品，以便检验在其血液中有无五种被分析物。该样品的一部分涂布在所述检验对象的手指尖上，并施加到五个反应区域和参考核对区域上。在上述反应介质上保持压力约10秒至15秒。
然后把一些滴，例如，500微升的、稀释家用洗涤剂溶液的等分试样加到反应介质上，并使得能排放。家用洗涤剂处理溶解任何存在上述反应介质中的红色的血液细胞，并把血液的深红颜色从该介质清洗掉。然后，用约10ml的、胶体金共轭的在TRIS缓冲剂中的老鼠抗—被分析物免疫球蛋白G的混合物的稀释溶液处理五个反应区域和参考核对区域，该TRIS缓冲剂含有1.0％的BSA、0.05％的吐温-20及0.05％的叠氮化物。
然后，用15微升的、胶体金共轭的在TRIS缓冲剂中的兔抗—山羊免疫球蛋白G的稀释溶液涂抹已提供血液样品的那个人的一个手指，该TRIS缓冲剂含有1.0％的BSA、0.05％的吐温-20及0.05％的叠氮化物。使上述手指顶住反应介质的身份鉴定区域缓慢地压下，并保持就位3秒钟。在所述手指仔细地抬离上述反应介质后，使得在把另外400微升的溶液A的等分试样加到该反应介质上之前能培养该介质15秒钟。
完成上述程序后，反应区域32和34至37显色，表明对于那些被分析物的阴性检验结果。参考核对区域33完全是白色的，而且身份核对区域包含提供上述血液样品的那个人的那个手指的印记。
尽管已经根据典型实施例说明了本发明，但并不是打算局限于这些实施例。本领域普通技术人员，特别是根据前述技术，可以作出一些仍就包括在本发明范围内的、可供选择的实施例、例子及改进。因此，下面的权利要求书试图覆盖可包括在由该权利要求书所确定的本发明的精神和范围内的任何可供选择的实施例、例子、改进或等效物。
权利要求
1.一种自备的测定检验装置，其包括(a)一个外壳；(b)一种具有至少一个位于所述外壳中的反应区域的反应介质；(c)一种含有位于所述外壳中的一种产生信号的试剂的介质；(d)一种用于容纳位于所述外壳中的一种检验样品的介质；所述介质(c)和(d)的每一种在一第一位置和一第二位置之间可独立移动；在所述第一位置与所述反应介质彼此隔开；而在所述第二位置可转移物质地与所述反应介质接触。
2.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述反应介质还包括一个核对区域，以便鉴别一个检验对象。
3.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述的至少一个反应区域包括用于确定在一个检验样品中有无被分析物的一种试剂。
4.如权利要求3所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述被分析物是一种药物或药物代谢物。
5.如权利要求1所述的一种自备的测定检测装置，其特征是所述反应区域包括一种药物或药物代谢物。
6.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述的至少一个反应区域包括一种配位体/受体对的一个成员。
7.如权利要求6所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述一种配位体/受体对的成员是一种抗原/抗体对的一个成员。
8.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述反应介质是一种低蛋白质结合的、亲水性的聚砜膜。
9.如权利要求2所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述核对区域包括一种配位体/受体对的一个成员。
10.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述反应介质包括一种配位体/受体对的一个成员，这种配位体/受体对与对某种药物的一种人类抗体构成一种共轭物。
11.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述产生信号的试剂结合到一种配位体/受体对的一个成员上。
12.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述产生信号的试剂是一种用胶体金标记的配位体/受体对的一个成员。
13.如权利要求9所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述产生信号的试剂与在所述核对区域中的一种配位体/受体对的所述成员构成一种共轭物。
14.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述用于容纳一种检验样品的介质包括一种能与正在寻找的一种被分析物反应的检验试剂。
15.如权利要求1所述的一种自备的测定检测装置，其特征是所述用于容纳一种检验样品的介质包括一种配位体/受体对的一个成员，这种配位体/受体对能够与正在寻找的一种被分析物构成一种共轭物。
16.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述用于容纳一种检验样品的介质装设在一个圆柱体的一端上。
17.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述用于容纳一种检验样品的介质包括一种亲水性吸收膜。
18.如权利要求17所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述用于容纳一种检验样品的介质包括一种亲水性海绵状材料。
19.如权利要求1所述的一种自备的测定检验装置，其特征是在2psi到15psi的压力下出现可转移物质的接触。
20.一种自备的测定检验装置，其包括一个两部件的外壳；一种具有至少一个装设在所述两部件的外壳的一第一部件中的反应区域的反应介质；一种含有装设在所述两部件的外壳的一第二部件中的某种产生信号的试剂的介质；一种用于容纳一种检验样品的可去除的介质，该检验样品位于所述外壳的所述第一和所述第二部件的中间，而且，当所述外壳的所述第一和第二部件处于所述外壳的一第一封闭位置时，上述检验样品与所述反应介质可转移物质地接触；以及所述含有某种产生信号的试剂的介质当所述外壳的所述第一和第二部件处于一第一封闭位置时，与所述反应介质可转移物质地接触。
21.如权利要求20所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述外壳的所述第一和第二部件通过一个铰链连接在一起。
22.如权利要求20所述的一种自备的测定检验装置，其特征是所述反应介质还包括一个核对区域，这个核对区域具有用于鉴别一个检验对象的配位体/受体对的一个成员，而所述的至少一个反应区域包括用于确定上述检验样品中存在一种被分析物的一种配位体/受体对的一个成员，所述含有一种产生信号的试剂的介质是用胶体金标记的一种配位体/受体对的一个成员，所述用于容纳一种检验样品的可去除的介质是一种亲水性海绵状材料，这种亲水性海绵状材料包括一种配位体/受体对的一个成员，此种配位体/受体对能与正在寻找的一种被分析物形成一种共轭物，而所述亲水性海绵状材料装设在一个圆柱体的一端上。
23.一种测定装置，其包括(a)一个外壳；(b)一种具有至少一个位于所述外壳中的反应区域的反应介质；以及(c)一种用于容纳位于所述外壳中的一种检验样品的介质，而这种介质可在一第一位置和一第二位置之间移动，在所述第一位置与所述反应介质彼此隔开，而在所述第二位置与所述反应介质可转移物质地接触。
24.如权利要求23所述的一种测定装置，其特征在于在压力大于大气压力时出现可转移物质的接触。
25.如权利要求23所述的一种测定装置，其特征是在压力为2psi到15psi时出现可转移物质的接触。
26.一种测定装置，其包括(a)一个外壳；(b)一种具有至少一个位于所述外壳中的反应区域的反应介质；以及(c)一种容纳位于所述外壳中的一种产生信号的试剂的介质，而这种介质可在一第一位置和一第二位置之间移动，在所述第一位置与所述反应介质彼此隔开，而在所述第二位置与所述反应介质可转移物质地接触。
27.如权利要求26所述的一种测定检验装置，其特征是所述反应介质还包括一个核对区域，以便鉴别一个检验对象。
28.一种测定检验装置，其包括(a)一个外壳；(b)一种具有至少一个位于所述外壳中的反应区域的反应介质；以及(c)一种用于容纳位于所述外壳中的一种检验样品的介质，而这种介质可在一第一位置和一第二位置之间移动，在所述第一位置与所述反应介质彼此隔开，而在所述第二位置与所述反应介质可转移物质地接触。
29.如权利要求28所述的一种测定检验装置，其特征是所述反应介质还包括一个核对区域，以便鉴别一个检验对象。
30.一种用于进行一种测定的分析盒，其包括(i)一种测定检验装置；该装置包括(a)一个外壳；(b)一种具有至少一个位于所述外壳中的反应区域的反应介质；以及(c)一种容纳位于所述外壳中的一种产生信号的试剂的介质，这种介质可在一第一位置和一第二位置之间移动，在所述第一位置与所述反应介质彼此隔开，而在所述第二位置与所述反应介质可转移物质地接触；(ii)一种包括一种配位体/受体对的一个成员的试剂，这种配位体/受体对能与一种被分析物形成一种共轭物。
31.如权利要求30所述的一种测定分析盒，其特征是所述反应介质还包括一个核对区域，以便鉴别一个检验对象。
32.一种测定分析盒，其包括(i)一种测定检验装置，该装置包括(a)一个外壳；(b)一种具有至少一个位于所述外壳中的反应区域的反应介质；和(c)一种用于容纳位于所述外壳中的一种检验样品的介质，而这种介质可在一第一位置和一第二位置之间移动，在所述第一位置与所述反应介质彼此隔开，而在所述第二位置与所述反应介质可转移物质地接触；(ii)一种产生信号的试剂，这种试剂能与一种配位体/受体对的一个成员反应。
33.如权利要求32所述的一种检验分析盒，其特征是所述反应介质包括一个核对区域，以便鉴别一个检验对象。
34.一种用于确定在一个检验对象中存在一种被分析物的方法，此方法包括(a)当一种用于容纳并转移一种检验样品的介质处于一第一位置时，使所述用于容纳并转移一种检验样品的介质与一种检验样品的一部分接触，所述第一位置与一种具有至少一个反应区域的反应介质彼此隔开；(b)移动所述用于容纳并转移一种检验样品的介质到一第二位置，在这个第二位置与所述反应介质可转移物质地接触；以及(c)从一第一位置移动一种含有一种产生信号的试剂的介质到一第二位置，在所述第一位置与所述反应介质彼此隔开，而在所述第二位置与所述反应介质可转移物质地接触；以及(d)确定来自上述反应介质的检验样品中有无上述被分析物。
35.一种如权利要求34所述的确定存在一种被分析物的方法，其特征是所述反应介质包括一个核对区域，而且在上述反应介质和上述含有一种产生信号的试剂的介质之间出现可转移物质的接触之后，使一个检验对象的身体的一部分放置得与上述核对区域接触。
全文摘要
提供了一种测定装置和方法，该装置和方法使得能确定在一样品中存在某种被分析物，而且同时还鉴别检验对象。自备的测定装置(110)包括一个具有一第一部件(111a)和一第二部件(111b)的外壳(111)。反应介质(114)位于第一部件(111a)内，并装设在一个基底部件(112)上。基底部件(112)包括一个多孔的支座，此支座可邻接反应介质(114)，反应介质(114)包括至少一个反应区域(120)和一个核对区域(116)。含有一种产生信号的试剂的介质(126)位于外壳的第二部件(111b)中并装设在基底部分(128)上。上述装置另外还包括一个圆柱体(140)，圆柱体(140)有一敞开的端部(140a)和一个封闭的端部(140b)，用于容纳和转移一部分检验样品到反应介质(114)的介质(185)装设在封闭端(140b)上。
文档编号G01N37/00GK1135259SQ94194176
公开日1996年11月6日 申请日期1994年9月16日 优先权日1993年9月17日
发明者劳夫·A·古伊尔古斯 申请人:拉明纳公司