测定糖代谢能力的方法及用于该方法的组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种测定受试者的糖代谢能力的方法、以及适用于该方法的组合物。 具体而言，本发明涉及利用 13C等标记C-呼气试验测定及监测受试者的糖代谢能力的方法、 以及适用于该方法的组合物。此外，本发明涉及利用标记C-呼气试验测定受试者的糖代 谢能力、从而判定糖尿病发病后的病态阶段或/及糖尿病发病的前阶段的方法（以下，在 本说明书中，也将糖尿病发病后的病态阶段及糖尿病发病的前阶段统称为"糖尿病病态阶 段"。）。
【背景技术】
[0002] 对于糖尿病的诊断，通常首先利用尿糖检查或空腹时的血糖值检查进行初筛，在 上述检查为阳性的情况下，进行葡萄糖负荷试验，从而确诊。近来，有时也在使用葡萄糖的 糖负荷试验之前检查血中的HbAlC或果糖胺。
[0003] 但是，就尿糖检查、空腹时的血糖值检查等现有方法而言，由于许多糖尿病患者的 尿糖呈阴性，血糖值显示为正常值，因此也经常漏诊糖尿病患者，其灵敏度低已成为问题。 因此，就现有方法而言，由于其无法判定糖尿病虽未发作但为糖尿病前阶段的状态，因此从 预防医学的方面考虑是不充分的。此外，虽然使用葡萄糖的糖负荷试验是优异的检查方法， 但已指出其存在因摄取大量葡萄糖而导致副作用的问题，并且，由于需要对受试者进行历 经数小时的约束，并反复进行采血，因此受试者的身体负担大，现实中只能对有限的对象者 实施该方法。此外，HbAic或果糖胺的结果直到下次就医时才能知晓，故存在快速性不足的 缺点。
[0004] 此外，作为用于诊断糖尿病的病型（胰岛素依赖型、非胰岛素依赖型）、确定治疗 方针、以及调查糖尿病的治疗效果的检查，以往主要通过对血中胰岛素浓度的测定、对血中 或尿中的C-肽的测定、使用葡萄糖的糖负荷试验中对血糖值、血中胰岛素浓度的经时变化 的测定来进行。但是，如上文所述，由于使用葡萄糖的糖负荷试验给受试者的身体带来较大 负担，所以实际很少实施，血中胰岛素浓度、血中或尿中C-肽的结果直到下次就医时才能 知晓，快速性不足。
[0005] 另一方面，提出了应用所谓的标记C-呼气试验（即，施予用13C标记过的葡萄糖， 测定以二氧化碳的形式排出至呼出气中的 13CO2)来诊断糖尿病（参见专利文献1~3)。具 体而言，专利文献1中记载了下述方法：使用将特定位置的碳用 13C取代而得的葡萄糖进行 呼气试验，测定排出至呼出气中的13CO2浓度的增加率，由此诊断有无糖尿病并区分糖尿病 的病型（1型糖尿病、2型糖尿病）。此外，专利文献2及3中记载了下述内容：与专利文献1 同样地使用用 13C标记过的葡萄糖进行呼气试验，可以以呼出气中的13C与12C之比（ 13C/12C， 其是根据排出至呼出气中的13CO2浓度算出的）是比健康受试者低的值为指标来诊断糖尿 病患者、胰岛素抵抗患者或糖耐量受损患者。
[0006] 但是，无论哪一文献中均未记载或暗示通过使用葡萄糖的标记C-呼气试验，能够 高精度地检测受试者的糖代谢能力，其结果，不仅能够测定、监测已出现糖尿病病症的患者 的病态阶段，而且能够测定、监测糖尿病发病的前阶段的状态。
[0007] 此外，专利文献4中记载了下述方法：将用2H标记过的葡萄糖施予至受试者，测定 该受试者体内的重水（ 2H2O)的总量，以该重水（2H2O)的总量除以胰岛素量或胰岛素浓度曲 线下面积（胰岛素 AUC)而得到的值为指标，确定受试者的胰岛素抵抗性的方法；此外，专利 文献5中记载了下述方法：根据施予检查用食品后测得的血糖值及胰岛素浓度，求出胰岛 素浓度曲线下面积（胰岛素 AUC)与葡萄糖浓度曲线下面积（葡萄糖AUC)的乘积（"胰岛 素 AUCX葡萄糖AUC"），以该值为指标确定受试者的胰岛素抵抗性的方法。
[0008] 如上所述，上述文献中虽然记载了在对受试者的胰岛素抵抗性的评价中考虑胰岛 素浓度曲线下面积（胰岛素 AUC)，但无论哪一文献中均未记载或暗示通过使用葡萄糖的标 记C-呼气试验，能够高精度地检测受试者的糖代谢能力，其结果，不仅能够测定、监测已出 现糖尿病病症的患者的病态阶段，而且能够测定、监测糖尿病发病的前阶段的状态。
[0009] 现有技术文献
[0010] 专利文献
[0011] 专利文献1 :日本特开平10-67689号公报
[0012] 专利文献2 :日本特表2002-513911号公报
[0013] 专利文献3 :日本特开2008-292506号公报
[0014] 专利文献4 :日本特表2008-543787号公报
[0015] 专利文献5 :日本特开2010-44093号公报
【发明内容】
[0016] 本发明的目的在于提供一种通过使用了被同位素标记过的葡萄糖的标记C-呼气 试验、高精度且快速地检测受试者的糖代谢能力的方法。此外，本发明的目的在于提供一种 用于测定及监测已出现糖尿病病症的患者的病态阶段、以及糖尿病发病的前阶段的状态的 方法。
[0017] 此外，本发明的目的在于提供一种用于测定糖代谢能力的组合物，以用于上述方 法。
[0018] 为了解决上述课题，本申请的发明人反复进行了锐意研宄，结果发现：根据施予用 同位素标记过的葡萄糖后、被排出至呼出气中的同位素标记二氧化碳（CO 2)的量、及由该量 算出的呼出气中含有的二氧化碳的存在比例（标记(：02量相对于未标记CO 2量的比例或标 记〇)2量相对于CO 2总量的比例）的行为，能够高精度且快速地测定受试者的糖代谢能力。 此外，本申请的发明人发现，通过将如上所述进行测定而得到的受试者的糖代谢能力作为 指标，不仅能够测定已出现糖尿病病症的患者的病态阶段，还能够测定糖尿病发病的前阶 段的状态，并且可对其进行经时监测。进而，本申请的发明人发现，通过将上述受试者的糖 代谢能力作为指标，能够判定药物（糖尿病治疗药）对糖尿病患者的治疗效果，并且也能够 对其进行经时监测。本发明是基于上述发现而完成的。
[0019] 即，本发明包括下述方案：
[0020] (1)测宙糖代谢能力的方法
[0021] (1-1)测定受试者的糖代谢能力的方法，包括下述工序（a)及（b):
[0022] 工序（a)，将以经至少一个同位素 C标记的葡萄糖为有效成分的组合物施予至受 试者，采集呼出气，所述葡萄糖将在机体内被转化为标记二氧化碳而被排出至呼出气中；以 及
[0023] 工序（b)，求出呼出气中含有的标记(：02量相对于未标记CO 2量的比例或标记CO2 量相对于CO2总量的比例。
[0024] 需要说明的是，该工序（b)可以像下文所述那样通过求出例如Λ % 13CC3C浓度变 化量：atom% )或Λ 13C值（δ 13C值变化量：％。）来进行。
[0025] (1-2)如（1-1)所述的糖代谢能力测定方法，还包括下述工序（c):
[0026] 工序（c)，将工序（b)中得到的受试者的"标记0)2量相对于呼出气中含有的未标 记CO 2量或CO 2总量的比例"（受试者值）与从健康受试者得到的"呼出气中含有的标记CO 2 量相对于未标记(1)2量的比例或标记CO 2量相对于CO 2总量的比例"（对照值）进行比较， 将受试者值低于对照值的情况确定为受试者的糖代谢能力降低，将受试者值高于对照值的 情况确定为受试者的糖代谢能力亢进。
[0027] (1-3)如（1-1)或（1-2)所述的糖代谢能力测定方法，其中，上述同位素为13C。
[0028] (1-4)如（1-1)~（1-3)中任一项所述的糖代谢能力测定方法，其中，上述组合物 的施予形态为经口施予形态或注射施予形态。
[0029] (1-5)如（1-1)~（1-4)中任一项所述的糖代谢能力测定方法，其特征在于，针对 处于糖负荷状态的受试者实施工序（a)。
[0030] (1-6)如（1-5)所述的糖代谢能力测定方法，其中，处于糖负荷状态的受试者是在 工序（a)之前摄取了糖类、或者含有糖或被代谢成为糖的物质的饮食品的受试者。
[0031] (1-7)如（1-6)所述的糖代谢能力测定方法，上述饮食品是除糖或被代谢成为糖 的成分以外还含有选自由蛋白质（包括半消化态蛋白质）、氨基酸、脂肪、电解质、微量元素 类及维生素类组成的组中的至少1种物质的液态、半液态或固态的饮食品。
[0032] (2)检测糖尿病发病后的病杰阶段及糖尿病发病的前阶段的方法
[0033] (2-1)将利用（1-1)~（1-7)中任一项所述的糖代谢能力测定方法得到的受试者 的糖代谢能力作为指标、检测受试者的糖尿病发病的前阶段或/及糖尿病发病后的病态阶 段的方法。
[0034] 以下，本说明书中也将"糖尿病发病的前阶段或/及糖尿病发病后的病态阶段"统 称为"糖尿病病态阶段"。
[0035] (2-2)如（2-1)所述的检测糖尿病病态阶段的方法，包括下述工序：将在（1-2)~ (1-7)中任一项所述的糖代谢能力测定方法中被确定为糖代谢能力亢进的受试者确定为处 于糖尿病发病的前阶段。
[0036] 具体而言，该本发明的方法可改述为下述[2-a]~[2-g]。
[0037] [2-a]检测受试者的糖尿病病态阶段的方法，包括下述工序（a)~（c'）：
[0038] 工序（a)，将以经至少一个同位素 C标记的葡萄糖（标记C-葡萄糖）为有效成分 的组合物施予至受试者，采集呼出气，所述葡萄糖（标记C-葡萄糖）在机体内将被转化为 标记二氧化碳而被排出至呼出气中；
[0039] 工序（b)，求出呼出气中含有的标记〇}2量相对于未标记CO 2量的比例或标记CO 2 量相对于CO2总量的比例；以及
[0040] 工序（c'），将上述工序（b)中得到的受试者的"呼出气中含有的标记CO2量相对 于未标记(302量的比例或标记CO 2量相对于CO 2总量的比例"（Δ % 13C (atom% )或Δ 13C值 (%。））（受试者值）与从健康受试者得到的相应的"呼出气中含有的标记CO2量相对于未 标记〇} 2量的比例或标记〇}2量相对于CO2总量的比例"（Δ % 13C(atom% )或者A13C值 (%。））（对照值）进行比较，受试者值低于对照值时，将该受试者确定为已出现糖尿病病症， 受试者值高于对照值时，将该受试者确定为处于糖尿病发病的前阶段。
[0041] [2-b]如[2-a]所述的检测方法，其中，上述同位素为13C。
[0042] [2-c]如[2-a]或[2-b]所述的检测方法，其中，上述组合物的施予形态为经口施 予形态或注射施予形态。
[0043] [2-d]如[2-a]~[2-c]中任一项所述的检测方法，其特征在于，针对处于糖负荷 状态的受试者实施上述工序（a)。
[0044] [2-f]如[2-d]所述的检测方法，其中，处于糖负荷状态的受试者是在工序（a)之 前摄取了糖类、或者含有糖或被代谢成为糖的物质的饮食品的受试者。
[0045] [2-g]如[2-f]所述的检测方法，其中，上述饮食品是除糖或代谢成为糖的成分以 外还含有选自由蛋白质（包括半消化态蛋白质）、氨基酸、脂肪、电解质、微量元素类及维生 素类组成的组