用于调节代谢途径的组合物和方法
【专利摘要】在此提供了可用于诱导脂肪酸氧化或线粒体生物发生的升高、减少体重增加、诱导体重减轻或增加Sirt1、Sirt3或AMPK活性的组合物和方法。此类组合物可以包含协同量的抗衰老酶途径激活剂，包括但不限于白藜芦醇组合β-羟基甲基丁酸酯(HMB)、酮异己酸(KIC)、亮氨酸、或HMB、KIC和亮氨酸的组合。
【专利说明】用于调节代谢途径的组合物和方法
交叉引用
[0001]本申请要求以下申请的权益:2011年7月15日提交的美国申请N0.61/508，139 ;2012年4月20日提交的美国申请N0.61/636,597 ;2012年4月20日提交的美国申请N0.61/636, 598 ;2012年4月20日提交的美国申请N0.61/636，603 ;2012年4月20日提交的美国申请N0.61/636，605 ;2012年4月20日提交的美国申请N0.61/636，608 ;2012年4月20日提交的美国申请N0.61/636，610 ;所有这些申请均通过引用整体并入本文。
【背景技术】
[0002]所有的生物体都开发了通过平衡其能量摄入和代谢与其生物支出需求而保持体内能量稳态的精妙的代谢途径。在哺乳动物中，这些途径调节食物摄取、葡萄糖稳态、脂肪和/或肌肉中的能量储存以及通过例如身体活动进行能量调动。通常由相对于能量支出而言过度的能量摄取所导致的这些途径功能失常，导致能量稳态不平衡，并可能导致多种代谢紊乱，例如肥胖、糖尿病、高血压、动脉硬化、高胆固醇和高脂血症。
[0003]人类代谢紊乱的高发病率及其对健康和死亡率的相关影响代表了对公共健康的显著威胁。例如，肥胖，在临床上定义为人体质量指数超过30kg/m2，据估计其影响35.7%的美国成年人口。肥胖增加了很多疾病的可能性，例如心脏疾病和II型糖尿病，后者为世界上主要的可预防的死亡原因之一。在美国，经估计肥胖导致了每年约110，000-365，000例死亡。糖尿病是一种代谢紊乱，其特征为高血糖水平或低葡萄糖耐量，据估计其影响了 8%的美国人口。糖尿病还与由血管疾病、癌症、肾病、传染病、外部原因、故意自残、神经系统紊乱和慢性肺病导致的较高死亡风险显著相关(N Engl J Med2011 ;364:829_841)。据估计，受试者表现出向心性肥胖和至少两种其它代谢紊乱(例如高胆固醇、高血压或糖尿病)的代谢综合征影响了 25%的美国人口。
[0004]抗衰老酶(Sirtuins)是一种高度保守的蛋白质去乙酰化酶和/或ADP-核糖基转移酶，已显示其能够延长低等模型生物如酵母、秀`丽线虫(C.elegans)和果蝇的寿命。在哺乳动物中，抗衰老酶已显示能作为代谢传感器，响应于环境信号，以协调调节多种能量稳态途径的基因的活性。例如，研究显示，抗衰老酶活化模拟热量限制——一种证明能显著延长寿命的措施——的效果，并激活能改善葡萄糖稳态和通过脂肪酸氧化将脂肪转化为能量的基因。
[0005]已经进行了很多努力来尝试开发通过靶向特定的能量代谢途径的代谢紊乱治疗方法。这些努力已经导致开发了，例如，异黄酮类(美国专利申请N0.20110165125)、四氢利普司他汀(美国专利N0.6，004, 996)和调节SIRTl和AMPK途径的组合物(美国专利申请N0.20100210692,20100009992,20070244202 和 20080176822)。然而，这些努力成就有限。例如，SIRTl激活剂白藜芦醇在人体中的应用受到了其有限的生物利用度的限制，需要很高的剂量，这会引发安全考虑。因此，仍然亟需能够通过安全地调控代谢途径来解决多种代谢紊乱的治疗方法。
【发明内容】
[0006]本申请提供了可用于诱导受试者中脂肪酸氧化和线粒体生物发生增加的组合物。该组合物还导致Sirtl和Sirt3的活化，从而调节有益的下游效应，包括对糖尿病、心血管疾病和炎性疾病的预防和治疗。这类组合物包含协同量的抗衰老酶途径激活剂(例如白藜芦醇)与支链氨基酸和/或其代谢物(例如羟基甲基丁酸酯(HMB)、亮氨酸、酮异己酸(KIC)或HMB、KIC和/或亮氨酸的组合)的组合。本申请还提供了增加受试者中脂肪酸氧化的方法，包括施用所公开的组合物。
[0007]本发明提供了一种组合物，其包含:(a) —种或多种类型的支化氨基酸(例如亮氨酸)和/或其代谢物和(b)抗衰老酶途径激活剂，其任选地可以亚治疗量存在，其中该组合物较之单独使用时的组分(a)或(b)而言，能协同有效地使抗衰老酶途径输出增加至少约I倍(例如至少约1、2、3、4、5倍或更多倍)。在一些实施方案中，当(i)将来自用该组合物处理的肌管或脂肪细胞的培养基施用至其它肌管或脂肪细胞，(?)将组合物施用至肌管或脂肪细胞，和/或(iii)将组合物施用至受试者时，观察到协同效应。
[0008]在此描述的任一方面的一些实施方案中，抗衰老酶途径输出的增加由选自下述的生理效应的升高所证实:线粒体生物发生、脂 肪酸氧化、葡萄糖摄取、棕榈酸盐摄取、氧消耗、二氧化碳生成、体重减轻、热量产生、内脏脂肪组织减少、呼吸交换率、胰岛素敏感度、炎症标志物水平、体温、脂肪细胞褐化、鸢尾素产生和血管舒张。抗衰老酶途径输出的增加可以由SIRT1、SIRT3和PGCl-α中的一种或多种的表达或活性水平的升高来证明。抗衰老酶途径输出的增加可以是至少约1、3、5、6、8、10、15、20或50倍。
[0009]本发明的另一方面提供了一种组合物，其包含:(a) —种或多种类型的支化氨基酸(例如亮氨酸)和/或其代谢物，和(b)抗衰老酶途径激活剂，其中所述组合物中组分(a)与(b)的摩尔比大于约20，且其中当施用至有需要的受试者时，该组合物协同地增强由受试者的体重增加降低、受试者的内脏脂肪体积减小、受试者的脂肪氧化增加、受试者的鸢尾素产量增加、受试者的胰岛素敏感度升高、受试者的肌肉中葡萄糖摄取增加、炎症标志物降低、血管舒张增强和/或体温升高所测量的线粒体生物发生。在一些实施方案中，所述组合物中组分(a)与(b)的摩尔比大于约 5、10、15、20、25、30、35、40、60、80、100、150、200、250或更多。
[0010]本发明的另一方面提供了一种组合物，其包含:适于口服的单位剂量，所述单位剂量包含:(a) —种或多种类型的支化氨基酸(例如亮氨酸)和/或其代谢物，和(b)基本上同质的一组多酚或多酚前体分子，且其中该单位剂量能有效诱导由受试者的体重增加降低、受试者的内脏脂肪体积减小、受试者的脂肪氧化增加、受试者的胰岛素敏感度升高、受试者的肌肉中葡萄糖摄取增加、血管舒张增强和/或体温升高所测量的抗衰老酶途径输出的增加。在一些实施方案中，该单位剂量被配制为片剂、胶囊或凝胶胶囊。
[0011]多酚或多酚前体分子可以以有效增加抗衰老酶途径输出(例如约、少于约或多于约I倍、3倍、5倍、6倍、8倍、10倍、15倍、20倍、50倍或更多)的量存在。多酚或多酚前体分子可以以有效地使抗衰老酶途径输出增加至少约1、2、3、4、5倍或更多倍的量存在。多酚分子能够激活SIRTl和/或SIRT3。多酚能够激活AMPK。多酚能够激活PGCl α。多酚可以为白藜芦醇或其类似物。多酚可以为绿原酸。多酚可选自绿原酸、白藜芦醇、咖啡酸、奎尼酸、白皮杉醇、鞣花酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、葡萄籽提取物、肉桂酸、阿魏酸及其任意类似物。
[0012]本发明的另一方面提供了一种食物组合物，其包含:(a) —种或多种类型的支化氨基酸(例如亮氨酸)和/或其代谢物；(b)抗衰老酶途径激活剂，其中(a)和(b)以协同实现由受试者的体重增加降低、受试者的内脏脂肪体积减小、受试者的脂肪氧化增加、受试者的胰岛素敏感度升高、受试者的肌肉中葡萄糖摄取增加、血管舒张增强和/或体温升高所测量的抗衰老酶途径输出的升高的量存在；和(C)食物载体。
[0013]所述组合物可以是包装成液体(例如饮料)、固体(例如固体食品)或半固体(例如半固体食品)的膳食补充剂。在一些实施方案中，食物载体是果汁、咖啡、茶、苏打或小吃棒。可将组合物配制为口服剂型。可将组合物包装为单位剂量。可将单位剂量配制为片剂、胶囊或凝胶胶囊。
[0014]本发明的另一方面提供了一种组合物，其包含:协同有效量的(a) —种或多种类型的支化氨基酸(例如亮氨酸)和/或其代谢物；和(b)抗衰老酶途径激活剂，其中该组合物基本上不含非支化氨基酸，其中当施用至有需要的受试者时，该组合较之对受试者单独施用组分(a)或组分(b)而言，以更大的程度增强线粒体生物发生，且其中增强的线粒体生物发生由受试者的体重降低、受试者的内脏脂肪体积减小、受试者的脂肪氧化增加、受试者的胰岛素敏感度升高、受试者的肌肉中葡萄糖摄取增加、血管舒张增强和/或体温升高来测量。线粒体生物发生的增强可以为至少约1、2、3、4、5、6、8、10、15、20或50倍(其中I倍的增加等于100%的增加)。在一些实施方案中，线粒体生物发生和/或其一种或多种量度的变化为约或多于约 10%、20%、50%、100%、200%、300%、400%、500%、750%、1000%、2000%、5000%或更多。
[0015]本发明的另一方面提供了一种组合物，其包含:(a) —种或多种类型的支化氨基酸(例如亮氨酸)和/或其代谢物，和(b)抗衰老酶信号途径中PGCla下游的信号分子。PGCla下游的信号分子可以是鸢尾素或其类似物。在一些实施方案中，该一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物可选自亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、4-羟基异亮氨酸、酮异己酸(KIC)、a -羟基-异己酸和HMB。该组合物基本上不含非支化氨基酸。
[0016]在一个方面，本发明提供`了一种组合物，其包含:(a) —种或多种类型的支化氨基酸(例如亮氨酸)和/或其代谢物，和(b)亚治疗量的选自双胍、氯茴苯酸、磺酰脲、噻唑烷二酮、α葡萄糖苷酶抑制剂和麦角生物碱的一种或多种抗糖尿病剂；其中当对受试者施用该组合时，较之对受试者单独施用组分(a)或组分(b)而言，该组合协同地增加所述受试者中的胰岛素敏感度。在一些实施方案中，抗糖尿病剂为抗衰老酶途径激活剂。在一些实施方案中，抗糖尿病剂为双胍(例如二甲双胍或其任意类似物)。在一些实施方案中，胰岛素敏感度的增加为至少约I倍的增加(例如至少约1、2、3、4、5、6、8、10、15、20或50倍)。在一些实施方案中，本发明提供了一种加强双胍的治疗效果的方法，包括将本发明组合物的组分(a)和组分(b)同时或相继施用至受试者，其中(a)和(b)的施用量能协同增加胰岛素敏感度，且其中组分(b)为双胍(例如二甲双胍)。
[0017]本发明还提供了一种加强选自双胍、氯茴苯酸、磺酰脲、噻唑烷二酮、α葡萄糖苷酶抑制剂和麦角生物碱的一种或多种抗糖尿病剂的治疗效果的方法，包括对受试者同时或相继施用(a)亚治疗量的所述抗糖尿病剂和(b) —种或多种支化氨基酸，其中(a)和(b)的施用能有效地减轻所述受试者的糖尿病症状。糖尿病症状的实例包括但不限于多尿症、烦渴、体重减轻、多食、视力模糊、高血压、脂蛋白代谢异常和牙周病。双胍可以是二甲双胍。该一种或多种抗糖尿病剂可包含格列吡嗪和/或二甲双胍。该一种或多种抗糖尿病剂可以是噻唑烷二酮。
[0018]在一个方面，本发明提供了一种增加鸢尾素的水平，例如增加细胞或受试者中鸢尾素的产生的方法。在一些实施方案中，该方法包括施用一种组合物，该组合物包含:(a)一种或多种类型的支化氨基酸(例如亮氨酸)和/或其代谢物，和(b)抗衰老酶途径激活剂；其中所述施用增加细胞的鸢尾素产量。在一些实施方案中，鸢尾素产量的增加(或提供其证据的指示物的增加)是增加约、少于约或多于约5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、125%、150%、175%、200%或更多。在一些实施方案中，鸢尾素产量的增加(或提供其证据的指示物的增加)是增加约、少于约或多于约I倍、3倍、5倍、6倍、8倍、10倍、15倍、20倍、50倍或更多。在一些实施方案中，鸢尾素产量的增加由(例如根据mRNA和/或蛋白质水平所测量的)FNDC5表达的升高所证实。在一些实施方案中，鸢尾素产量的增加由脂肪细胞褐化的一种或多种指示物的升高(例如脂肪酸氧化，和/或脂肪组织中一种或多种褐色脂肪选择性基因表达的升高)所证实。在一些实施方案中，鸢尾素产量的增加由来自细胞或在受试者中的鸢尾素的分泌增加(例如由培养细胞的培养基或受试者中的循环血浆所测量的)所证实。在一些实施方案中，该组合物包含亮氨酸和白藜芦醇。在一些实施方案中，该组合物包含亮氨酸和肉桂酸。在一些实施方案中，该组合物包含HMB和白藜芦醇。在一些实施方案中，该组合物包含HMB和肉桂酸。
[0019]在此描述的任一方面的一些实施方案中，所述组合物适于口服。该组合物可以是适于非口服施用至受试者的液体形式。该组合物可以是适于注射施用至受试者的液体形式。该组合物可以配制为用于口服施用至受试者。
[0020]本发明提供了一 种增强有需要的受试者中的脂肪氧化的方法，包括对受试者施用在此描述的任一组合物一段时间，其中受试者中的脂肪氧化在此段时间内增强。本发明提供了一种降低有需要的受试者中的炎症应答的方法，包括对受试者施用在此描述的任一组合物一段时间，其中受试者中的炎症应答在此段时间内降低。本发明提供了一种升高或保持受试者体温的方法，包括对受试者施用在此描述的任一组合物一段时间，其中受试者的体温在此段时间内升高。本发明提供了一种诱导血管舒张的方法，包括对受试者施用在此描述的任一组合物一段时间，其中受试者中的血管舒张在此段时间内被诱导。本发明提供了一种治疗糖尿病的方法，包括对受试者施用在此描述的任一组合物一段时间，其中受试者中的胰岛素敏感度在此段时间内升高。在一些实施方案中，胰岛素敏感度升高由血浆胰岛素水平的降低和/或葡萄糖利用的增加(例如响应于葡萄糖负荷的更快的葡萄糖摄取)所证实。在一些实施方案中，脂肪氧化的增加和/或胰岛素敏感度的增加为约、少于约或多于约 5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、125%、150%、175%,200% 或更多。在一些实施方案中，脂肪氧化和胰岛素敏感度的增加为多于约5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、125%、150%、175%,200%或更多。在一些实施方案中，脂肪氧化的增加和/或胰岛素敏感度的增加为约、少于约或多于约I倍、3倍、5倍、6倍、8倍、10倍、15倍、20倍、50倍或更多。在一些实施方案中，脂肪氧化的增加和/或胰岛素敏感度的增加为多于约I倍、3倍、5倍、6倍、8倍、10倍、15倍、20倍、50倍或更多。
[0021]本发明提供了一种制备在此描述的任一组合物的方法，包括将组分混合形成基本上同质的混合物并使组合物形成单位剂量。
[0022]在此描述的任一方面的一些实施方案中，该一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物选自亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、4-羟基异亮氨酸、酮异己酸(KIC)、α-羟基-异己酸和羟基甲基丁酸酯(HMB)。该组合物可以基本上不含非支化氨基酸。该组合物可包含至少约500mg的亮氨酸和/或至少约200mg的该一种或多种代谢物。
[0023]在此描述的任一方面的一些实施方案中，抗衰老酶途径激活剂可激活SIRT1、SIRT3、AMPK和PGCla中的一种或多种。在一些实施方案中，抗衰老酶途径激活剂为多酚或多酚前体。在一些实施方案中，抗衰老酶途径激活剂为白藜芦醇或其类似物。多酚可以为绿原酸。多酚或多酚前体可选自绿原酸、白藜芦醇、咖啡酸、肉桂酸、阿魏酸、白皮杉醇、鞣花酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、葡萄籽提取物及其任意类似物。抗衰老酶途径激活剂可选自肉桂酸、奎尼酸、褐藻素、双胍、罗格列酮或其任意类似物。双胍可以是二甲双胍。
[0024]在此描述的任一方面的一些实施方案中，该组合物具有一种或多种额外的性质。在一些实施方案中，该组合物为食物组合物。该组合物可以是包装成液体(例如饮料)、固体(例如固体食品)或半固体(例如半固体食品)的食品或膳食补充剂。在一些实施方案中，将组合物配制为口服剂型。在一些实施方案中，可将组合物包装为单位剂量。可将单位剂量配制为片剂、胶囊或凝胶胶囊。在一些实施方案中，该组合物进一步包含药物活性剂。在一些实施方案中，该组合物进一步包含抗糖尿病剂。该组合物可以为进一步包含药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在一些实施方案中，对受试者施用组合物能协同增加线粒体生物发生至少约I倍、3倍、5倍、6倍、8倍、10倍、15倍、20倍或50倍或更多。在一些实施方案中，对受试者施用组合物能协同增加抗衰老酶途径输出至少约I倍、3倍、5倍、6倍、8倍、10倍、15倍、20倍或50倍或更多。
[0025]此外，还提供了下述非限制性实施方案:
[0026]本发明提供了一种组合物，其包含协同量的白藜芦醇、协同量的β_羟基甲基丁酸酯(HMB)、协同量的酮异己酸(KIC);和/或协同量的亮氨酸。在一些实施方案中，该组合物包含协同量的白藜芦醇和协同量的ΗΜΒ，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg，且所述协同量的HMB为约(或至少)0.20g至约3.0g。
[0027]在一些实施方案中，该组合物包含协同量的白藜芦醇和协同量的亮氨酸，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg;并且所述协同量的亮氨酸为约(或至少)0.75g至约3.0g。该组合物可包含协同量的白藜芦醇和协同量的KIC，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg ;并且所述协同量的KIC为约(或至少)0.75g至约3.0g。该组合物可包含协同量的白藜芦醇、协同量的HMB和协同量的亮氨酸，条件是所述组合物中HMB和亮氨酸的总量少于(或少于约)3.0g，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg ;所述协同量的HMB为约(或至少)0.20g至约3.0g ;并且所述协同量的亮氨酸为约(或至少)0.50g至约3.0g。该组合物可包含协同量的白藜芦醇、协同量的KIC和协同量的亮氨酸，条件是所述组合物中KIC和亮氨酸的总量少于(或少于约)3.0g，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg ;所述协同量的KIC为约(或至少)0.50g至约3.0g ;并且所述协同量的亮氨酸为约(或至少)0.50g至约3.0g。该组合物可包含协同量的白藜芦醇、协同量的HMB和协同量的KIC，条件是所述组合物中HMB和KIC的总量少于(或少于约)3.0g，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg ;所述协同量的HMB为约(或至少)0.20g至约3.0g ;并且所述协同量的KIC为约(或至少)0.50g至约3.0g。
[0028]该组合物可包含协同量的白藜芦醇、协同量的KIC、协同量的HMB和协同量的亮氨酸，条件是所述组合物中KIC、HMB和亮氨酸的总量少于(或少于约)3.0g,其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg ;所述协同量的HMB为约(或至少)0.20g至约3.0g ；所述协同量的KIC为约(或至少)0.50g至约3.0g;并且所述协同量的亮氨酸为约(或至少)0.50g 至约 3.0g0
[0029]在一些实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg ;并且所述协同量的HMB为约(或至少)0.40g至约3.0g。在其它实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg ;并且所述协同量的亮氨酸为约(或至少)0.75g至约3.0g。在一些实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg ;所述协同量的HMB为至少0.40g至约3.0g ;并且所述协同量的亮氨酸为至少0.75g至约3.0go在其它实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg ;所述协同量的KIC为至少0.75g至约3.0g ；并且所述协同量的亮氨酸为至少0.75g至约3.0g。在一些实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg ;所述协同量的HMB为至少0.40g至约3.0g ;并且所述协同量的KIC为至少0.75g至约3.0go
[0030]在一些实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg ;所述协同量的HMB为至少0.40g至约3.0g ;所述协同量的KIC为至少0.75g至约3.0g ;并且所述协同量的亮氨酸为至少0.75g至约3.0g。
[0031]在此描述的一些实施方案中，HMB、KIC、亮氨酸或亮氨酸、KIC和/或HMB的组合的量可小于或等于3.0g。
[0032]在此描述的一些实施方案中，所述组合物可排除一种或多种选自以下的氨基酸:赖氨酸、谷氨酸、脯氨酸、精氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、苏氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、组氨酸、丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、谷氨酰胺、牛磺酸、肉碱、胱氨酸和半胱氨酸。`
[0033]在此描述的一些实施方案中，所述组合物可排除一种或多种以下成份:烟酸、维生素B6、维生素B12、泛酸、咖啡因、绿茶提取物、瓜拉那种子提取物或瓜拉那植物提取物。
[0034]在此描述的一些实施方案中，所述组合物可排除一种或多种选自以下的氨基酸:赖氨酸、谷氨酸、脯氨酸、精氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、苏氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、组氨酸、丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、谷氨酰胺、牛磺酸、肉碱、胱氨酸和半胱氨酸。
[0035]在此描述的一些实施方案中，所述组合物可排除一种或多种以下成份:烟酸、维生素B6、维生素B12、泛酸、咖啡因、绿茶提取物、瓜拉那种子提取物或瓜拉那植物提取物。
[0036]在此描述的一些实施方案中，所述组合物可排除一种或多种选自以下的氨基酸:赖氨酸、谷氨酸、脯氨酸、精氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、苏氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、组氨酸、丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、谷氨酰胺、牛磺酸、肉碱、胱氨酸和半胱氨酸。在一些实施方案中，该组合物排除缬氨酸和/或异亮氨酸。
[0037]在此描述的一些实施方案中，该组合物可进一步包含增香剂。在此描述的任一实施方案中，所述组合物为固体、液体、乳液、凝胶或糊剂。
[0038]本发明提供了一种增加受试者中脂肪酸氧化的方法，包括以有效增加脂肪酸氧化的量对受试者施用包含协同量的白藜芦醇、协同量的β_羟基甲基丁酸酯(HMB)、协同量的酮异己酸(KIC)和/或协同量的亮氨酸的组合物。
[0039]在一个方面，本发明提供了一种在受试者中减少体重增加或诱导体重减轻的方法，包括以有效减少体重增加或诱导体重减轻的量对受试者施用包含协同量的白藜芦醇、协同量的β_羟基甲基丁酸酯(HMB)、协同量的酮异己酸(KIC)和/或协同量的亮氨酸的组合物。
[0040]在另一方面，本发明提供了一种刺激Sirtl或Sirt3的方法，包括以有效刺激Sirtl或Sirt3的量对受试者施用包含协同量的白藜芦醇、协同量的β_羟基甲基丁酸酯(HMB)、协同量的酮异己酸(KIC)和/或协同量的亮氨酸的组合物。
[0041]本发明提供了一种激活脂肪细胞、平滑肌、骨骼肌或心肌的代谢活性的方法，包括以足以激活所述肌肉的代谢活性的量对受试者施用包含协同量的白藜芦醇、协同量的β-羟基甲基丁酸酯(HMB)、协同量的酮异己酸(KIC)和/或协同量的亮氨酸的组合物。
[0042]在其它实施方案中，本发明提供了一种升高或保持受试者体温的方法，包括以足以升高或保持受试者的体温的量对所述受试者施用包含协同量的白藜芦醇、协同量的β-羟基甲基丁酸酯(HMB)、协同量的酮异己酸(KIC)和/或协同量的亮氨酸的组合物。
[0043]本发明提供了一种治疗受试者中的2型糖尿病的方法，包括以足以治疗受试者中的2型糖尿病的量对所述受试者施用包含协同量的白藜芦醇、协同量的β_羟基甲基丁酸酯(HMB)、协同量的酮异己酸(KIC)和/或协同量的亮氨酸的组合物。
[0044]本发明还提供了一种降低受试者中的炎症应答的方法，包括以足以降低受试者中的炎症应答的量对所述受试者施用包含协同量的白藜芦醇、协同量的β_羟基甲基丁酸酯(HMB)、协同量的酮异己酸(KIC)和/或协同量的亮氨酸的组合物。
[0045]本发明提供了一种诱导血管舒张的方法，包括以足以诱导受试者中的血管舒张的量对所述受试者施用包含协同量的白藜芦醇、协同量的β_羟基甲基丁酸酯(ΗΜΒ)、协同量的酮异己酸(KIC)和/或协同量的亮氨酸的组合物。
[0046]在一些实施方案中，该组合物包含协同量的白藜芦醇和协同量的ΗΜΒ，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg，且所述协同量的HMB为约(或至少)0.20g至约3.0g0
[0047]在一些实施方案中，该组合物包含协同量的白藜芦醇和协同量的亮氨酸，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg，且所述协同量的亮氨酸为约(或至少)0.75g至约3.0g。
[0048]在其它实施方案中，该组合物包含协同量的白藜芦醇和协同量的KIC，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg，且所述协同量的KIC为约(或至少)0.75g至约3.0g0
[0049]在一些实施方案中，该组合物包含协同量的白藜芦醇、协同量的HMB和协同量的亮氨酸，条件是所述组合物中HMB和亮氨酸的总量少于(或少于约)3.0g，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg，所述协同量的HMB为约(或至少)0.20g至约3.0g,且所述协同量的亮氨酸为约(或至少)0.50g至约3.0g。
[0050]在一些实施方案中，该组合物包含协同量的白藜芦醇、协同量的KIC和协同量的亮氨酸，条件是所述组合物中KIC和亮氨酸的总量少于(或少于约)3.0g，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg，所述协同量的KIC为约(或至少)0.50g至约3.0g,且所述协同量的亮氨酸为约(或至少)0.50g至约3.0g。
[0051]在其它实施方案中，该组合物包含协同量的白藜芦醇、协同量的HMB和协同量的KIC，条件是所述组合物中HMB和KIC的总量少于(或少于约)3.0g，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg,所述协同量的HMB为约(或至少)0.20g至约3.0g,且所述协同量的KIC为约(或至少)0.50g至约3.0g。
[0052]在一些实施方案中，该组合物包含协同量的白藜芦醇、协同量的KIC、协同量的HMB和协同量的亮氨酸，条件是所述组合物中KIC、HMB和亮氨酸的总量少于(或少于约)3.0g，其中:所述协同量的白藜芦醇为至少35mg至约500mg，所述协同量的HMB为约(或至少)0.20g至约3.0g，所述协同量的KIC为约(或至少)0.50g至约3.0g，且所述协同量的亮氨酸为约(或至少)0.50g至约3.0g。
[0053]在一些实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg，且所述协同量的HMB为约(或至少)0.40g至约3.0g。
[0054]在一些实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg,且所述协同量的亮氨酸为约(或至少)0.75g至约3.0g。
[0055]在一些实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg,所述协同量的HMB为至少0.40g至约3.0g,且所述协同量的亮氨酸为至少0.75g至约3.0g。
[0056]在一些实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg,所述协同量的KIC为至少0.75g至约3 .0g,且所述协同量的亮氨酸为至少0.75g至约3.0g。
[0057]在一些实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg，所述协同量的HMB为至少0.40g至约3.0g,且所述协同量的KIC为至少0.75g至约3.0g。
[0058]在一些实施方案中，所述协同量的白藜芦醇为至少50mg至约500mg,所述协同量的HMB为至少0.40g至约3.0g，所述协同量的KIC为至少0.75g至约3.0g，且所述协同量的亮氨酸为至少0.75g至约3.0g。
[0059]在此描述的一些实施方案中，HMB、KIC、亮氨酸或亮氨酸、KIC和/或HMB的组合的量为少于或等于3.0g。
[0060]在此描述的一些实施方案中，该组合物进一步包含增香剂。在此描述的任一实施方案中，所述组合物为固体、液体、乳液、凝胶或糊剂。在此描述的任一实施方案中，所述受试者为人类或非人动物。在此描述的任一实施方案中，所述组合物经口服、肠胃外、静脉内或腹膜内施用。在任一用于根据任一实施方案减少体重增加或诱导体重减轻的实施方案中，所述受试者不限制饮食。
[0061]在任一用于根据任一实施方案减少体重增加或诱导体重减轻的实施方案中，所述受试者采用限制热量的饮食。在此描述的任一实施方案中，所述组合物包含:a)约50至IOOmg白黎芦醇和约400mg至约500mg ΗΜΒ, b)约50至IOOmg白黎芦醇和约750mg至约1250mg亮氨酸，或c)约50至IOOmg白藜芦醇和约750mg至约1250mg KIC。
[0062]在此描述的任一实施方案中，所述组合物包含约50mg至约IOOmg白藜芦醇，和a)HMB和KIC组合，其量为约400mg和约1250mg，b)HMB和亮氨酸组合，其量为约400mg和约1250mg, c) KIC和亮氨酸组合，其量为约400mg和约1250mg，或d) HMB,KIC和亮氨酸组合，其量为约400mg和约1250mg。援引并入
[0063]本说明书中提到的所有出版物、专利以及专利申请在此通过引用而以相同程度并入本文，如同每个单独的出版物、专利或专利申请特别地和单独地被指出通过引用而并入。
【专利附图】
【附图说明】
[0064]本发明的新特征在随附的权利要求中具体阐述。通过参考以下对在其中利用到本发明原理的示例说明性实施方案加以阐述的详细描述和附图，将会获得对本发明的特征和优点更好的理解，在附图中:
[0065]图1描绘了显示亮氨酸和雷帕霉素对脂肪酸氧化的影响的图。
[0066]图2描绘了显示HMB、KIC和亮氨酸对脂肪酸氧化的影响的图。
[0067]图3描绘了显示HMB、KIC、亮氨酸和缬氨酸对线粒体生物发生的影响的图。
[0068]图4描绘了显示HMB、KIC和亮氨酸对线粒体调控和成分基因表达的影响的图。
[0069]图5描绘了显示白藜芦醇(Resv)、苏拉明、亮氨酸、KIC、HMB和亮氨酸对SIRTl活化的影响的图。
[0070]图6描绘了显示白藜芦醇、亮氨酸、HMB以及HMB和白藜芦醇的联合组合物对Sirt3活化的影响的图。
[0071]图7描绘了显示亮氨酸和HMB与白藜芦醇在低葡萄糖条件下对脂肪酸氧化的协同效应的图。
[0072]图8描绘了显示亮氨酸和HMB与白藜芦醇在高葡萄糖条件下对脂肪酸氧化的协同效应的图。`
[0073]图9描绘了两个FDG-PET图像，其显示了使用DG-PET扫描分析得到的白藜芦醇和HMB对葡萄糖摄取的协同效应。
[0074]图10描绘了显示白藜芦醇、亮氨酸和HMB在饮食诱导肥胖的小鼠中对脂肪组织SIRTl活性的影响的图。
[0075]图11描绘了显示抗衰老酶途径的图解。
[0076]图12描绘了显示绿原酸(500nM)与HMB (5 μ Μ)和白藜芦醇(200ηΜ)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0077]图13描绘了显示绿原酸(500ηΜ)和HMB (5 μ Μ)对脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化。*Ρ=0.05)。
[0078]图14描绘了显示绿原酸(500ηΜ)与HMB (5 μ Μ)和亮氨酸(0.5mM)对3T3-L1脂肪细胞中的Sirtl活性的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*p=0.005 ；**ρ=0.0001)。
[0079]图15描绘了显示绿原酸(500ηΜ)与HMB (5 μ Μ)和亮氨酸(0.5mM)对葡萄糖利用的交互作用的图(*p=0.045 ;**p=0.007)。葡萄糖利用被测量为对葡萄糖注射的胞外酸化响应。包括了对胰岛素(5nM)的响应作为参比。
[0080]图16描绘了显示咖啡酸(I μ Μ)与亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0081]图17描绘了显示咖啡酸(I μ M)与HMB (5 μ Μ)和白藜芦醇(200ηΜ)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0082]图18描绘了显示咖啡酸(I μ Μ) ,HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管和3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的 % 变化;*ρ=0.05 ;**ρ=0.016) ο
[0083]图19描绘了显示奎尼酸(500ηΜ)与HMB (5 μ Μ)和白藜芦醇(200ηΜ)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0084]图20描绘了显示奎尼酸(500ηΜ)与亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0085]图21描绘了显示奎尼酸(500nM)、HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管和3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的%变化;*Ρ=0.05 ;**ρ=0.012)。
[0086]图22描绘了显示奎尼酸(500nM)、HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对AMPK活性的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*p=0.0001)。
[0087]图23描绘了显示奎尼酸(500nM)、HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对葡萄糖利用的交互作用的图。葡萄糖利用被测量为对葡萄糖注射的胞外酸化响应(*ρ=0.05 ;**ρ=0.0003)ο
[0088]图24描绘了显示肉桂酸(500ηΜ)与HMB (5 μ Μ)和白藜芦醇(200ηΜ)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0089]图25描绘了显示肉桂酸(500ηΜ)与亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0090]图26描绘了显示肉桂酸(500nM)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*ρ=0.004 ;**ρ=0.006)。 [0091]图27描绘了显示肉桂酸(500ηΜ)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*ρ=0.02 ;**ρ=0.05)。[0092]图28描绘了显示肉桂酸(500nM)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对AMPK活性的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*p=0.0001)。
[0093]图29描绘了显示阿魏酸(500nM)与HMB (5 μ Μ)和白藜芦醇(200ηΜ)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0094]图30描绘了显示阿魏酸(500ηΜ)与ΗΜΒ(5μΜ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化;*ρ=0.018)
[0095]图31显示了阿魏酸(500ηΜ)与亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0096]图32描绘了显示阿魏酸(500nM)与ΗΜΒ(5μΜ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化;*ρ=0.034) ο
[0097]图33描绘了显示阿魏酸(500ηΜ)与ΗΜΒ(5μΜ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对AMPK活性的交互作 用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*p=0.05)。
[0098]图34描绘了显示白皮杉醇(InM)与亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0099]图35描绘了显示白皮杉醇(InM)与HMB (5 μ Μ)和白藜芦醇(200ηΜ)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0100]图36描绘了显示白皮杉醇(InM)与HMB(5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*ρ=0.039)ο
[0101]图37描绘了显示表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG) (I μ Μ)、HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中葡萄糖利用的交互作用的图。葡萄糖利用被测量为对葡萄糖注射的胞外酸化响应Op=0.015 ;**p=0.017)。
[0102]图38描绘了显示褐藻素(IOOnM)与HMB (5 μ M)和白藜芦醇(200ηΜ)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的影响的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0103]图39描绘了显示褐藻素(IOOnM)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0104]图40描绘了显示褐藻素(IOOnM)与HMB(5 μ M)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*ρ=0.033 ;**ρ=0.05) ο
[0105]图41描绘了显示褐藻素(IOOnM)、ΗΜΒ (5 μ Μ)和亮氨酸(0.5mM)对C2C12肌管中葡萄糖利用的交互作用的图。葡萄糖利用被测量为对葡萄糖注射的胞外酸化响应(*P〈0.04)。
[0106]图42描绘了显示褐藻素(IOOnM)、HMB (5 μ M)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中葡萄糖利用的交互作用的图。葡萄糖利用被测量为对葡萄糖注射的胞外酸化响应(*P=0.02 ;**p=0.003)。
[0107]图43描绘了显示葡萄籽提取物(lyg/mL)与HMB (5 μ Μ)和白藜芦醇(200ηΜ)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0108]图44描绘了显示葡萄籽提取物(lyg/mL)与HMB (5 μ Μ)和白藜芦醇(200ηΜ)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*ρ=0.04) ο
[0109]图45描绘了显示葡萄籽提取物(lyg/mL)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞和C2C12肌管中AMPK活性的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*P=0.01)。
[0110]图46描绘了显示二甲双胍(Met) (0.1mM)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*ρ=0.03 ;**ρ=0.0001 ;***ρ=0.001)。
[0111]图47描绘了显示二甲双胍(0.1mM)与ΗΜΒ(5μΜ)和亮氨酸(0.5mM)对C2C12肌管中葡萄糖利用的交互作用的图。葡萄糖利用被测量为对葡萄糖注射的胞外酸化响应(*ρ=0.03) ο
[0112]图48描绘了显示二甲双胍(0.1mM)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中AMPK活性的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*ρ=0.031 ;**ρ=0.026 ;***ρ=0.017)
[0113]图49描绘了显示二甲双胍(0.1mM)与HMB (5 μ Μ)和亮氨酸(0.5mM)对线粒体生物发生的交互作用的图(*P=0.001 ;**ρ=0.013)。
[0114]图50描绘了显示罗格列酮(InM)与ΗΜΒ(5μΜ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*ρ=0.009)ο
[0115]图51描绘了显示罗格列酮(InM)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化;*ρ=0.004 ;**ρ=0.023 ;***ρ=0.003)。
[0116]图52描绘了显示罗格列酮(InM)与ΗΜΒ(5μΜ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中葡萄糖利用的交互作用的图。葡萄糖利用被测量为对葡萄糖注射的胞外酸化响应(*ρ=0.05 ;**ρ=0.001)。[0117]图53描绘了显示咖啡因(IOnM)与HMB (5 μ M)、亮氨酸(0.5mM)、白藜芦醇(200nM)和二甲双胍(0.1mM)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的 % 变化；*ρ=0.03 ;**ρ=0.05 ;***ρ=0.013)。
[0118]图54描绘了显示咖啡因(IOnM)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)，白藜芦醇(200nM)和二甲双胍(0.1mM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化。*P=0.008)。
[0119]图55描绘了显示咖啡因(IOnM)与HMB (5 μ M)和白藜芦醇(200ηΜ)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0120]图56描绘了显示茶碱(ΙμΜ)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对C2C12肌管中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*ρ=0.03 ;**ρ=0.05)。
[0121]图57描绘了显示茶碱(ΙμΜ)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0122]图58描绘了显示茶碱(ΙμΜ)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的％变化；*ρ=0.006)ο
[0123]图59描绘了显示可可提取物/可可碱(0.1 μ g/mL)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图。脂肪酸氧化被测量为对棕榈酸盐注射的O2消耗响应，并`表示为相对于注射前基线的％变化(垂直线表示棕榈酸盐注射时间；该线左侧的数据点为基线测量值，该线右侧的数据点显示了 O2消耗响应)。
[0124]图60描绘了显示可可提取物/可可碱(0.1 μ g/mL)与HMB (5 μ Μ)、亮氨酸(0.5mM)和白藜芦醇(200nM)对3T3-L1脂肪细胞中脂肪酸氧化的交互作用的图(数据表示为相对于对照值的 ％ 变化;*Ρ=0.021 ;**ρ=0.00035)。
[0125]图61描绘了显示标准剂量的二甲双胍(在此为1.5g 二甲双胍/kg饮食)、低剂量的二甲双胍(在此为0.75g 二甲双胍/kg饮食)和非常低剂量的二甲双胍(在此为0.25g二甲双胍/kg饮食)较之[低剂量的二甲双胍+12.5mg白藜芦醇和2g CaHMB/kg饮食]和[非常低剂量的二甲双胍+12.5mg白藜芦醇和2g CaHMB/kg饮食]在db/db小鼠中对血浆胰岛素的影响的图(*相对于对照p〈0.02)。
[0126]图62描绘了显示标准剂量的二甲双胍(在此为1.5g 二甲双胍/kg饮食)、低剂量的二甲双胍(在此为0.75g 二甲双胍/kg饮食)和非常低剂量的二甲双胍(在此为0.25g二甲双胍/kg饮食)较之[低剂量的二甲双胍+12.5mg白藜芦醇和2g CaHMB/kg饮食]和[非常低剂量的二甲双胍+12.5mg白藜芦醇和2g CaHMB/kg饮食]在db/db小鼠中对HOMAik(胰岛素耐量的稳态评价)的影响的图(*相对于对照p〈0.025)。
[0127]图63描绘了显示标准剂量的二甲双胍(在此为1.5g 二甲双胍/kg饮食)、低剂量的二甲双胍(在此为0.75g 二甲双胍/kg饮食)和非常低剂量的二甲双胍(在此为0.25g二甲双胍/kg饮食)较之[低剂量的二甲双胍+12.5mg白藜芦醇和2g CaHMB/kg饮食]和[非常低剂量的二甲双胍+12.5mg白藜芦醇和2g CaHMB/kg饮食]在db/db小鼠中对30-分钟胰岛素(0.75U/kg体重)血浆葡萄糖响应的影响的图(*相对于对照p〈0.02)。
[0128]图64描绘了显示标准剂量的二甲双胍(在此为1.5g 二甲双胍/kg饮食)、低剂量的二甲双胍(在此为0.75g 二甲双胍/kg饮食)和非常低剂量的二甲双胍(在此为0.25g二甲双胍/kg饮食)较之[低剂量的二甲双胍+12.5mg白藜芦醇和2g CaHMB/kg饮食]和[非常低剂量的二甲双胍+12.5mg白藜芦醇和2g CaHMB/kg饮食]在db/db小鼠中对内脏脂肪量的影响的图(*相对于对照P〈0.03)。
[0129]图65描绘了显示标准剂量的二甲双胍(在此为1.5g 二甲双胍/kg饮食)、低剂量的二甲双胍(在此为0.75g 二甲双胍/kg饮食)和非常低剂量的二甲双胍(在此为0.25g二甲双胍/kg饮食)较之[低剂量的二甲双胍+12.5mg白藜芦醇和2g CaHMB/kg饮食]和[非常低剂量的二甲双胍+12.5mg白藜芦醇和2g CaHMB/kg饮食]在db/db小鼠中对内脏脂肪量的影响的图(*相对于对照P〈0.05)。
[0130]图66描绘了显示白藜芦醇(200nM)、亮氨酸(0.5mM)、HMB (5 μ M)和肉桂酸(ΙμΜ)对脂肪酸氧化的交互作用的图(*相对于对照P=0.035)。
[0131]图67描绘了显示白藜芦醇(200ηΜ)、亮氨酸(0.5mM)、ΗΜΒ (5 μ Μ)和肉桂酸(ΙμΜ)对由蛋白质印迹测定的C2C12细胞裂解物中鸢尾素前体蛋白FNDC5表达的交互作用的图(值为归一化的谱带强度单位；*相对于对照Ρ〈0.03)。
[0132]图68描绘了响应于亮氨酸(0.5mM)或ΗΜΒ(5μΜ)与白藜芦醇(200ηΜ)或肉桂酸(ΙμΜ)组合的向培养 基中分泌鸢尾素的代表性蛋白质印迹。定量数据相对于对照归一化:白藜芦醇/HMB:增加73%(ρ〈0.01);白藜芦醇/亮氨酸，增加271%(ρ〈0.01)，肉桂酸/ΗΜΒ7%(不显著)，肉桂酸/亮氨酸，238%(ρ〈0.01)。
[0133]图69描绘了显示白藜芦醇(200ηΜ)、亮氨酸(0.5mM)和HMB (5 μ Μ)对C2C12肌管向培养基中分泌鸢尾素的交互作用的图(*相对于对照P=0.0008 相对于对照P=0.00001)。
[0134]图70描绘了显示白藜芦醇和白藜芦醇/亮氨酸组合在饮食诱导的肥胖的小鼠中对血浆鸢尾素的交互作用的图(*相对于对照P=0.03)。
[0135]图71描绘了显示奎尼酸(QA ;500ηΜ)、亮氨酸(Leu ;0.5mM)、HMB (5 μ Μ)对由蛋白质印迹测定的C2C12细胞裂解物中FNDC5蛋白表达的交互作用的图。值为归一化的谱带强度单位(*相对于对照Ρ〈0.005)。
[0136]图72描绘了 C2C12细胞响应于与奎尼酸(500ηΜ)组合的亮氨酸(0.5mM)或HMB (5 μ M)向培养基中分泌鸢尾素的代表性蛋白质印迹。
[0137]图73描绘了显示与奎尼酸(500ηΜ)组合的亮氨酸(0.5mM)或HMB (5 μ Μ)对C2C12细胞向培养基中分泌鸢尾素的影响的定量评价的图(*相对于对照Ρ〈0.05)。
[0138]图74描绘了显示绿原酸(CA ；500ηΜ)、咖啡因(Cafn ； IOnM)、亮氨酸(Leu ；0.5mM)和HMB (5 μ Μ)对C2C12肌管向培养基中分泌鸢尾素的交互作用的图(*相对于对照ρ〈0.05)。
[0139]图75描绘了显示白藜芦醇、白藜芦醇/亮氨酸和白藜芦醇/HMB组合在饮食诱导的肥胖的小鼠中对皮下UCPlmRNA表达的影响的图。数据对18S归一化(*相对于对照p=0.05)。
[0140]图76描绘了显示白藜芦醇、白藜芦醇/亮氨酸和白藜芦醇/HMB组合在饮食诱导的肥胖的小鼠中对皮下PGCl a mRNA表达的影响的图。数据对18S归一化(*相对于对照P=0.04) ο
【具体实施方式】
[0141]本发明的几个方面参考用于说明的实例应用描述如下。应当理解，为了提供对本发明的完整理解，阐述了很多具体的细节、关系和方法。然而，相关领域普通技术人员将很容易地认识到，可以不使用一种或多种的所述具体细节或可以用其它方法来实践本发明。除非另有说明，否则本发明不限于所述的行为或事件的顺序，因为一些行为可能以不同的顺序发生和/或与其它行为或事件同时发生。此外，并非需要所有描述的行为或事件来实施根据本发明的方法。公开的组合物中多种组分的浓度是示例性的，并不意味着被限制于所提及的浓度本身。
[0142]如在此使用的术语“受试者”或“个体”包括哺乳动物。哺乳动物的非限制性例子包括人和小鼠，包括转基因和非转基因小鼠。在此描述的方法可用于人体治疗、临床前和兽医应用。在一些实施方案中，受试者为哺乳动物，在一些实施方案中，受试者为人。其它哺乳动物包括但不限于，猿、黑猩猩、猩猩、猴子；驯养动物(宠物)，如狗、猫、豚鼠、仓鼠、小鼠、大鼠、兔和雪貂；驯养家畜，如牛、水牛、野牛、马、驴、猪、绵羊和山羊；或通常在动物园中见到的野生动物，例如熊、狮、虎、豹、象、河马、犀牛、长颈鹿、羚羊、树懒、瞪羚、斑马、角马、草原犬鼠、无尾熊、袋鼠、熊猫、大熊猫、鬣狗、海豹、海狮和海象。
[0143]术语“施用(administer)”、“施用(administered) ”、“施用(administers) ”和“施用(administering) ”定义为通过本领域已知的途径向受试者提供组合物，所述途径包括但不限于静脉内、动脉内、口服、肠胃外、口腔、局部、经皮、直肠、肌内、皮下、骨内、经粘膜或腹膜内施用途径。在本申请的某些实施方案中，施用组合物的口服途径可能是优选的。
[0144]如在此使用的，“药剂”或“生物活性剂”指生物学、药学或化学化合物或其它部分。非限制性的例子包括简单或复杂的有机或无机分子、肽、蛋白质、肽核酸(PM)、寡核苷酸(包括，例如，适体和多核苷酸)、抗体、抗体衍生物、抗体片段、维生素衍生物、碳水化合物、毒素或化疗化合物。可以合成各种化合物，例如，小分子和低聚物(例如，寡肽和寡核苷酸)，以及基于多种核心结构的合成有机化合物。另外，多种天然源可以提供用于筛选的化合物，例如植物或动物提取物等。技术人员可以容易地认识到，对于本发明的药剂的结构性质没有限制。
[0145]术语“有效量”或“治疗有效量”是指在此所述的化合物的量足以实现预期的应用，包括但不限于如下定义的疾病治疗。治疗有效量可能根据预期的应用(体外或体内)或治疗的受试者和疾病状况(例如，受试者的体重和年龄、病情的严重程度、给药方式等)而发生变化，其可以容易地由本领域普通技术人员确定。该术语也适用于能导致靶细胞特定响应，例如，减少增殖或下调靶蛋白活性的剂量。特定剂量将根据所选的特定化合物、要遵循的给药方案、其是否与其他化合物联合施用、给药时间、其所施用的组织和携带它的物理递送系统而变化。
[0146]途径的“调节剂”是指调节映射(mapped)到相同的特定信号转导途径的一种或多种细胞蛋白质的活性的物质或药剂。调节剂可以增强或抑制信号分子的活性和/或表达水平或模式。调节剂可以通过直接结合至组分来激活途径中的组分。调节剂也可以通过与一个或多个相关组分相互作用来间接地激活途径中的组分。途径的输出可以用蛋白质的表达或活性水平来测量。途径中的蛋白质的表达水平可以通过相应的mRNA或相关转录因子的水平以及该蛋白质在亚细胞定位中的水平来反映。例如，某些蛋白质通过在特定的亚细胞组分内部或外部改变位置而被激活，所述亚细胞组分包括但不限于细胞核、线粒体、核内体、溶酶体或细胞的其他膜性结构。途径的输出也可以用生理效应如线粒体生物发生、脂肪酸氧化或葡萄糖摄取来测量。
[0147]“激活剂”是指以增加途径输出的方式影响途径的调节剂。特定靶标的激活可以是直接的(例如，通过与靶标相互作用)或间接的(例如，通过与包含靶标的信号传导途径中的靶标上游的蛋白质相互作用)。
[0148]“抑制剂”可以是以通过减少途径输出的方式影响途径的调节剂。
[0149]在此使用的术语“基本上不含”指具有少于约10%、少于约5%、少于约1%、少于约0.5%、少于0.1%或更少的特定组分的组合物。例如，基本上不含非支链氨基酸的组合物可以含有少于约1%的非支链氨基酸赖氨酸。
[0150]药剂、激活剂或治疗剂的“亚治疗量”是这样的量:其少于该药剂、激活剂或治疗剂的有效量，但是当与有效量或亚治疗量的另一种药剂或治疗剂联合时，由于例如得到的有效作用中的协同效应和/或减少的副作用，可以产生期望的结果。
[0151]“协同的”或“协同”效应可以使得联合组合物的一种或多种效应大于每个单独组分的一种或多种效应，或其可以大于每个单独组分的一种或多种效应之和。协同效应可以大约为或者大于约单独施用时单独的一种组分对受试者的效应或每种组分的叠加效应的10%、20%、30%、50%、75%，100%、110%、120%、150%、200%、250%、350% 或 500% 或更多。该效应可以是在此描述的任何可测量的效应。
[0152]鉬合物`
[0153]本发明提供了能够增加或调节抗衰老酶途径的输出的组合物。该抗衰老酶途径包括但不限于信号分子，例如Sirtl、Sirt3和AMPK。该途径的输出可以通过表达水平和/或途径的活性和/或生理效应进行测定。在一些实施方案中，Sirtl途径的活化包括PGCl- α的刺激和/或随后的线粒体生物发生和脂肪酸氧化的刺激。通常，抗衰老酶途径激活剂是激活或增加抗衰老酶途径的一种或多种组分的化合物。抗衰老酶途径的增强或活化可通过途径中的组分蛋白质活性的升高而观察到。例如，所述蛋白质可以是SirtUPGCl-α、ΑΜΡΚ、Epacl、腺苷酸环化酶、Sirt3或任意其它蛋白质及其各自沿着图11所示的信号途径的相关蛋白质(Park等人,“Resveratrol Ameliorates Aging-Related Metabolic Phenotypes byInhibiting cAMP Phosphodiesterases, ” Celll48,421-433, 2012 年 2 月 3 日)。可作为抗衰老酶途径输出的量度的生理效应的非限制性实例包括线粒体生物发生、脂肪酸氧化、葡萄糖摄取、棕榈酸盐摄取、氧消耗、二氧化碳生成、体重减轻、热量产生、内脏脂肪组织减少、呼吸交换率、胰岛素敏感度、炎症标志物水平、血管舒张、脂肪细胞褐化和鸢尾素产生。脂肪细胞褐化的指示物的例子包括但不限于增加的脂肪酸氧化和一种或多种褐化脂肪选择性基因(例如Ucpl、Cidea、Prdml6和Ndufsl)的表达。在一些实施方案中，可作为抗衰老酶途径输出量度的一种或多种生理效应的变化由例如通过施用本发明的组合物而增加鸢尾素产量而诱导。
[0154]线粒体生物发生的升高可通过新线粒体形成的增加和/或线粒体功能的增强来证实，例如受试者中脂肪酸氧化增加、热量产生增加、胰岛素敏感度升高、葡萄糖摄取增加、血管舒张增强、体重减轻、脂肪体积减小和炎性应答或标志物的减少。
[0155]组合物可以是联合组合物，其可以包含一种或多种协同组分。在一些实施方案中，联合组合物的协同效应能够允许剂量减少，从而导致对受试者的副作用减轻并降低治疗成本。在其它实施方案中，协同效应可以获得任何其它常规治疗均无法获得的结果。本发明的联合组合物提供了能量代谢调节的显著改善。
[0156]在一些实施方案中，组合物可以是一种或多种支链氨基酸和/或其代谢物与可以具有一种或多种特性的抗衰老酶途径激活剂的联合组合物。该联合组合物(a)可具备增加抗衰老酶途径输出的协同效应，(b)使抗衰老酶途径输出增加至少约1、2、5、7、10或20倍，(c)具有大于约20的支链氨基酸和/或其代谢物与抗衰老酶途径输出的摩尔比，(d)被配制为用于口服的单位剂量，其中抗衰老酶途径激活剂是基本上同质的一组多酚分子，和(e)可具备协同效应并进一步包含食物载体。在此描述的任一组合物可具备这些特性中的一种或多种。
[0157]在一些实施方案中，本发明提供了一种组合物，其包含(a) —种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物和(b)以亚治疗量存在的抗衰老酶途径激活剂，其中该组合物较之单独使用时的组分(b)而言，协同有效地使抗衰老酶途径输出增加至少约5、10、50、100、200、500倍或更多倍。
[0158]在一些实施方案中，抗衰老酶途径激活剂或AMPK途径激活剂可以是多酚。例如，该多酚可以为绿原酸、白藜芦醇、咖啡酸、白皮杉醇、鞣花酸、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、葡萄籽提取物或其任意类似物。在一些实施方案中，激活剂可以是白藜芦醇、其类似物或其代谢物。例如，激活剂可以是蝶芪或白藜芦醇的小分子类似物。白藜芦醇的小分子类似物的例子描述于美国专利申请N0.20070014833,20090163476和20090105246，这些申请通过引用整体并入本文。
[0159]多酚可以为基本上同质的一组多酚。多酚可以为一种类型的多酚，其中该组合物可以排除所有其他类型 的多酚。在其它实施方案中，该组合物可包含2、3或4种类型的多酚并排除所有其他类型的多酚。在一些实施方案中，该组合物可包含1、2、3或4种类型的多酚和少于0.1%、0.5%、1%或2%的任意其它类型的多酚。在一些实施方案中，组合物进一步包含磷酸二酯酶O3DE)抑制剂和/或其它抗衰老酶途径激活剂。
[0160]在一些实施方案中，抗衰老酶激活剂是以下所示的任何一种或多种化合物:
【权利要求】
1.一种增加细胞中的鸢尾素产量的方法，其包括施用一种组合物，该组合物包含: (a)亮氨酸和/或其一种或多种代谢物；和 (b)抗衰老酶途径激活剂； 其中所述施用增加细胞中鸢尾素的产量。
2.权利要求1的方法，其中所述组合物包含亮氨酸和一种或多种(i)白藜芦醇和(ii)肉桂酸。
3.权利要求1的方法，其中所述组合物包含HMB和一种或多种(i)白藜芦醇和(ii)肉桂酸。
4.权利要求1的方法，其中所述鸢尾素的产量增加了至少约2倍。
5.权利要求1的方法，其中所述抗衰老酶途径激活剂为磷酸二酯酶抑制剂。
6.权利要求1的方法，其中所述鸢尾素的产生由所述细胞中鸢尾素分泌的增加所证实。
7.权利要求1的方法，其中所述抗衰老酶途径激活剂为多酚或多酚前体。
8.权利要求7的方法，其中所述多酚或多酚前体选自绿原酸、白藜芦醇、咖啡酸、肉桂酸、阿魏酸、白皮杉醇、鞣花酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、葡萄籽提取物及其任意类似物。
9.权利要求1的方法,其中所述组合物包含至少约500mg亮氨酸和/或至少约200mg的所述一种或多种代谢物。`
10.一种组合物，其包含协同有效量的: (a)一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物；和 (b)抗衰老酶途径激活剂； 其中所述组合物基本上不含非支化氨基酸， 其中当施用至有需要的受试者时，所述组合较之对受试者单独施用组分(a)或组分(b)而言，以更大的程度增强线粒体生物发生，且 其中增强的线粒体生物发生由受试者的体重降低、受试者的内脏脂肪体积减小、受试者的脂肪氧化增加、受试者的胰岛素敏感度升高、受试者的肌肉中葡萄糖摄取增加、血管舒张增强和/或体温升高所测量。
11.一种食物组合物，其包含: (a)一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物； (b)抗衰老酶途径激活剂； 其中(a)和(b)以协同地实现受试者的体重增加降低、受试者的内脏脂肪体积减小、受试者的脂肪氧化增加、受试者的胰岛素敏感度升高、受试者的肌肉中葡萄糖摄取增加、血管舒张增强和/或体温升高的量存在；和(C)食物载体。
12.权利要求11的组合物，其中所述食物载体为果汁、咖啡、茶、苏打或小吃棒。
13.一种组合物，其包含: (a)一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物；和 (b)以亚治疗量存在的抗衰老酶途径激活剂； 其中较之单独使用时的组分(b)而言，所述组合物协同有效地使抗衰老酶途径输出增加至少约5倍。
14.一种配制用于口服的组合物，其包含: (a)亮氨酸和/或一种或多种其代谢物；和 (b)抗衰老酶途径激活剂； 其中较之单独使用时的组分(a)或(b)而言，所述组合物协同有效地使抗衰老酶途径输出增加至少约I倍， 其中，当(i)将来自用所述组合物处理的肌管或脂肪细胞的培养基施用至其它肌管或脂肪细胞，(ii)将所述组合物施用至肌管或脂肪细胞，或(iii)将所述组合物施用至受试者时，所述增加的抗衰老酶途径输出由选自下述的生理效应的升高所证实:脂肪酸氧化、线粒体生物发生、葡萄糖摄取、棕榈酸盐摄取、氧消耗、体重减轻、内脏脂肪组织减少、胰岛素敏感度、炎症标志物水平、血管舒张和体温。
15.权利要求14的组合物，其中较之单独使用时的组分(a)或(b)而言，所述组合物能协同有效地使抗衰老酶途径输出增加至少约I倍，其中，当(i)将来自用所述组合物处理的肌管或脂肪细胞的培养基施用至其它肌管或脂肪细胞，或(ii)将所述组合物施用至肌管或脂肪细胞时，所述增加的抗衰老酶途径输出由选自下述的生理效应的升高所证实:脂肪酸氧化、葡萄糖摄取、氧消耗、胰岛素敏感度。
16.一种组合物，其包含: (a)一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物；和 (b)抗衰老酶途径激活剂； 其中所述组合物中组分(a)与(b)的摩尔比大于约20，且其中当施用至有需要的受试者时，所述组合物协同地增强线粒体生物发生，所述线粒体生物发生通过受试者的体重增加降低、受试者的内脏脂肪体积减小、受试者的脂肪氧化增加、受试者的鸢尾素产量增加、受试者的胰岛素敏感度升高、受试者的肌肉中葡萄糖摄取增加、炎症标志物降低、血管舒张增强和/或体温升高进行测量。
17.—种组合物，其包含适于口服的单位剂量，所述单位剂量包含: (a)一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物；和 (b)基本上同质的一组多酚或多酚前体分子； 其中所述单位剂量能有效地诱导抗衰老酶途径输出升高，所述抗衰老酶途径输出通过受试者的体重增加降低、受试者的内脏脂肪体积减小、受试者的脂肪氧化增加、受试者的胰岛素敏感度升高、受试者的肌肉中葡萄糖摄取增加、血管舒张增强和/或体温升高进行测量。
18.一种组合物，其包含: (a)一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物；和 (b)抗衰老酶信号途径中的PGCla下游的信号分子。
19.权利要求18的组合物，其中所述PGCla下游的信号分子为鸢尾素或其类似物。
20.一种组合物，其包含: (a)一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物；和 (b)亚治疗量的一种或多种抗糖尿病剂，其选自双胍、氯茴苯酸、磺酰脲、噻唑烷二酮、α葡萄糖苷酶抑制剂和麦角生物碱；其中当施用至受试者时，所述组合较之对受试者单独施用组分(a)或组分(b)而言，协同增加所述受试者中的胰岛素敏感度。
21.权利要求20的组合物，其中所述一种或多种抗糖尿病剂选自双胍和噻唑烷二酮。
22.权利要求20的组合物，其中所述一种或多种抗糖尿病剂包含格列吡嗪和二甲双胍。
23.权利要求20的组合物，其中所述抗糖尿病剂是抗衰老酶途径激活剂。
24.前述任一权利要求的组合物，其中一种或多种组分的以协同地实现抗衰老酶途径输出升高的量存在。
25.权利要求24的组合物，其中所述抗衰老酶途径输出的增加通过受试者的体重增加降低、受试者的内脏脂肪体积减小、受试者的脂肪氧化增加、受试者的胰岛素敏感度升高、受试者的肌肉中葡萄糖摄取增加、血管舒张增强和/或体温升高进行测量。
26.权利要求24的组合物，其中所述抗衰老酶途径输出的增加由选自下述的生理效应的升高所证实:线粒体生物发生、脂肪酸氧化、葡萄糖摄取、棕榈酸盐摄取、氧消耗、二氧化碳生成、体重减轻、热量产生、内脏脂肪组织减少、呼吸交换率、胰岛素敏感度、炎症标志物水平和血管舒张。
27.权利要求24的组合物，其中抗衰老酶途径输出的增加由SIRTl、SIRT3和PGCl-α组成的组中的一种或多种的表达或活性水平的升高所证实。
28.权利要求24的组合物，其中所述抗衰老酶途径输出的增加是至少约1、3、5、6、8、10、15、20 或 50 倍。
29.前述任一权利要求的组合物，其中所述一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物选自亮氨酸和其一种或多种代谢物。
30.权利要求14或29的组合物，其中所述一种或多种亮氨酸代谢物选自酮异己酸(KIC)、α -羟基-异己酸和HMB。
31.前述任一权利要求的组合物，其中所述一种或多种类型的支化氨基酸和/或其代谢物选自亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、4-羟基异亮氨酸、酮异己酸(KIC)、α-羟基-异己酸和 ΗΜΒ。
32.前述任一权利要求的组合物，其中所述抗衰老酶途径激活剂激活SIRT1、SIRT3、AMPK和PGCl α中的一种或多种。
33.前述任一权利要求的组合物，其中所述组合物基本上不含非支化氨基酸。
34.前述任一权利要求的组合物，其中所述抗衰老酶途径激活剂为多酚或多酚前体。
35.权利要求17和34中任一项的组合物，其中所述多酚或多酚前体分子以有效增加抗衰老酶途径输出的量存在，该抗衰老酶途径输出的增加由选自以下的生理效应的升高所证实:脂肪酸氧化、线粒体生物发生、葡萄糖摄取、棕榈酸盐摄取、氧消耗、体重减轻、内脏脂肪组织减少、胰岛素敏感度、炎症标志物水平和血管舒张。
36.权利要求17和34中任一项的组合物，其中所述多酚或多酚前体选自绿原酸、白藜芦醇、咖啡酸、肉桂酸、阿魏酸、白皮杉醇、鞣花酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、葡萄籽提取物及其任意类似物。
37.权利要求17和34中任一项的组合物，其中所述多酚或多酚前体为白藜芦醇或其类似物。
38.权利要求17和34中任一项的组合物，其中所述多酚或多酚前体为绿原酸。
39.前述任一权利要求的组合物，其中所述抗衰老酶途径激活剂为磷酸二酯酶抑制剂。
40.前述任一权利要求的组合物，其中所述组合物为膳食补充剂。
41.权利要求40的组合物，其中所述膳食补充剂被包装为饮料、固体食品或半固体食品O
42.前述任一权利要求的组合物，其中所述组合物被包装为液体、固体或半固体。
43.前述任一权利要求的组合物,其中所述组合物包含至少约500mg的亮氨酸和/或至少约200mg的所述一种或多种代谢物。
44.前述任一权利要求的组合物，其中所述组合物中的组分(a)与组分(b)的摩尔比大于约 20、40、150、250 或 500。
45.前述任一权利要求的组合物，其中当施用至有需要的受试者时，所述组合物协同地增强由受试者的体重增加降低、受试者的内脏脂肪体积减小、受试者的脂肪氧化增加、受试者的鸢尾素产量增加、受试者的胰岛素敏感度升高、受试者的肌肉中葡萄糖摄取增加、炎症标志物降低、血管舒张增强和/或体温升高所测量的线粒体生物发生。
46.权利要求45的组合物，其中线粒体生物发生增加了至少约1、3、5、6、8、10、15、20或50倍。
47.前述任一权利要求的组合物，其中所述抗衰老酶途径激活剂选自奎尼酸、褐藻素、双胍、罗格列酮或其任意类似物。
48.权利要求20、21和47中任一项的组合物，其中所述双胍为二甲双胍。
49.前述任一权利要求的组合物，其中所述组合物为食物组合物。
50.前述任一权利要求的组合物，其中所述组合物被配制为口服剂型。
51.前述任一权利要求的组合物，其中所述组合物为适于对受试者非口服施用的液体形式。
52.前述任一权利要求的组合物，其中所述组合物为适于对受试者注射施用的液体形式。
53.前述任一权利要求的组合物，其中所述组合物被包装为单位剂量。
54.权利要求17和53的组合物，其中所述单位剂量被配制为片剂、胶囊或凝胶胶囊。
55.前述任一权利要求的组合物，其进一步包含药物活性剂。
56.前述任一权利要求的组合物,其中所述组合物进一步包含抗糖尿病剂。
57.前述任一权利要求的组合物，其中所述组合物为进一步包含药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
58.一种增强有需要的受试者中的脂肪氧化的方法，包括对所述受试者施用前述任一权利要求的组合物一段时间，其中所述受试者中的脂肪氧化在此段时间内增强。
59.一种治疗糖尿病的方法，包括对所述受试者施用前述任一权利要求的组合物一段时间，其中所述受试者中的胰岛素敏感度在此段时间内升高。
60.一种降低有需要的受试 者中的炎症应答的方法，包括对所述受试者施用前述任一权利要求的组合物一段时间，其中所述受试者中的所述炎症应答在此段时间内降低。
61.一种升高或保持受试者的体温的方法，包括对所述受试者施用前述任一权利要求的组合物一段时间，其中所述受试者的体温在此段时间内升高。
62.一种诱导血管舒张的方法，包括对所述受试者施用前述任一权利要求的组合物一段时间，其中所述受试者中的血管舒张在此段时间内被诱导。
63.一种制备前述任一权利要求的组合物的方法，包括将组分(a)和(b)混合以形成基本上同质的混合物，并使组合物形成为单位剂量。
64.一种增强双胍的治疗效果的方法，包括对受试者同时或相继施用前述任一权利要求的组分(a)和组分(b)，其中(a)和(b)以协同增加胰岛素敏感度的量施用。
65.前述 任一权利要求的组合物，其中所述组合物使胰岛素敏感度增加至少约I倍。
【文档编号】A61K31/195GK103889411SQ201280045267
【公开日】2014年6月25日 申请日期:2012年7月13日 优先权日:2011年7月15日
【发明者】麦克·泽梅尔, E·道格拉斯·格林德斯塔夫二世, 安提亚·布鲁克鲍尔 申请人:纽斯尔特科学公司