阿克曼氏菌属用于治疗代谢病症的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及代谢病症的治疗，所述代谢病症例如与超重和肥胖症相关的代谢病 症，例如，糖尿病或高胆固醇。本发明更具体地涉及用于治疗代谢病症的包含阿克曼氏菌属 的种（Akkermansia spp)或其片段的组合物。
【背景技术】
[0002] 肥胖症是世界性问题，肥胖症成人的估计数量为约2亿5千万。这一肥胖症流行 病与肥胖症相关病症的发生率大幅度增加相关，所述肥胖症相关病症例如糖尿病、高血压、 心脏病（cardiac pathology)和肝病。由于这些高度失能性疾病，因此肥胖症目前在西方 国家被视为最重要的公共健康问题之一。因此，真正需要用于治疗或预防肥胖症和/或肥 胖症相关病症的组合物和方法。
[0003] 肥胖症和肥胖症相关疾病与以下相关：（i)代谢功能障碍（例如对葡萄糖稳态和 脂质代谢具有影响）；（ii)与较高的血液脂多糖（LPS)水平相关的低级炎症状态（还被称 作代谢性内毒素血症）；和（iii)受损的肠道屏障功能（即增加的肠道渗透性）。为了治疗 肥胖症，因此需要影响这3种因素中的至少一种、优选2种且更优选3种。
[0004] 人肠道被多种多样的复杂且动态的微生物群定殖，所述微生物群代表了超过 1000个与宿主不断相互作用的不同种（Zoetendal, Rajilic-Stojanovic和de Vos, Gut 2008, 57:1605-1615)。肠道微生物群的稳态取决于宿主特征（年龄、性别、遗传背景……) 和环境条件（应力、药物、胃肠道手术、感染原和毒性剂……），而且还取决于每日饮食 变化。增长的证据支持肠道微生物群在肥胖和相关病症的发展中的作用（Delzenne和 Cani, Annu. Rev. Nutr. 2011, 31:15-31) 〇
[0005] 因此，用靶向肠道微生物群的产品进行治疗表现为用于治疗肥胖症和相关病症的 有前景的治疗工具。这些产品可例如在多数益生菌的情况下由活微生物组成，或含有死微 生物或其片段。另外，这些产品可例如在益生元的情况下包含被肠道微生物群利用的底物， 或含有改变肠内微生物群的平衡的化合物，例如特异性抗微生物化合物。
[0006] 例如，WO 2008/076696描述了作为用于治疗肥胖症和相关病症的治疗靶的肠道微 生物群。WO 2008/076696具体地描述了通过向受试者施用抗生素和/或益生菌来改变该受 试者的肠道中拟杆菌属（Bacteroides)和/或硬壁菌门（Firmicutes)的丰度的方法。
[0007] 此外，EP 2 030 623涉及通过调节肠道中肠杆菌的量来预防和/或治疗代谢病 症，例如，肥胖症相关病症。EP 2 030 623公开了通过施用益生菌来降低肠道中肠杆菌的 量，所述益生菌例如双歧杆菌属（Bifidobacterium)、乳球菌属（Lactococcus)、链球菌属 (Streptococcus)、肠球菌属（Enterococcus)或乳杆菌属（Lactobacillus)。
[0008] 此外，申请人描述了益生元治疗的肥胖症小鼠中，肠道微生物群被改变（Everard 等，Diabetes，2011年ll月；60(ll):2775-86)。此外，益生元（l)改善肥胖症小鼠中的葡 萄糖和脂质代谢，（2)降低肥胖症小鼠中的血浆LPS并且改善其肠道屏障功能（例如减少 炎症），（3)诱导肥胖症小鼠中的肠内分泌L细胞数增加，并且（4)改善饮食诱导性肥胖症 和糖尿病小鼠中的瘦素敏感性和葡萄糖稳态。
[0009] 由对肥胖症小鼠的益生元治疗诱导的改变中，有相当大变化的是肠道微生物 群组成，其特征在于⑴拟杆菌门（Bacteroidetes)、乳杆菌属的种和拟杆菌属-普 雷沃氏菌属（Bacteroides-Prevotella)群细菌的降低的丰度；以及（ii)双歧杆菌属 的种、直肠真杆菌（E. rectale)/球形梭菌（C. coccoides)群的细菌和属于琉微菌门 (Verrucomicrobia)的嗜粘蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia muciniphila)的增加的丰度。 嗜粘蛋白阿克曼氏菌（首先由申请人于2004年鉴别的细菌）占健康成人的总微生物群的 约 1%到 3% (Derrien 等，International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2004, 54:1469-1476 ；Derrien 等，Applied Environmental Microbiology 2008,74, 1646-1648.)〇
[0010] 间接证明表明了嗜粘蛋白阿克曼氏菌的丰度与肠功能障碍或肥胖症相关病症之 间的关系。例如，WO 2011/107481描述受试者的肠道中不存在嗜粘蛋白阿克曼氏菌以及存 在多毛拟杆菌（Bacteroides capillosus)和柔嫩梭菌（Clostridium Ieptum)指不该受 试者正罹患溃疡性结肠炎。此外，Hansen和同事证明，向新生NOD小鼠（N0D小鼠模型是糖 尿病模型）施用抗生素万古霉素抑制糖尿病的临床发作并且使嗜粘蛋白阿克曼氏菌繁殖 (Hansen等，Diabetologia, 2012年8月；55 (8) : 2285-94)。然而，这可能是由于肠阿克曼氏 菌属的种对所用抗生素的不敏感性所致的间接效果。
[0011] 因此，这些结果表明在小鼠中施用益生元后，肠道微生物群的完全组成被改变。更 具体地，没有证据表明一个种的细菌（例如，嗜粘蛋白阿克曼氏菌）在对益生元施用的有益 反应中的特定作用。此外，据申请人所知，还从未描述或提示过直接施用嗜粘蛋白阿克曼氏 菌的有益作用。
[0012] 这里，本申请人惊讶地证明，重复施用单独的嗜粘蛋白阿克曼氏菌影响与肥胖症 和相关病症相关的三种潜在的功能障碍，即代谢功能障碍、与较高的血液脂多糖（LPS)水 平相关的低级炎症状态和受损的肠道屏障功能。因此，本发明涉及嗜粘蛋白阿克曼氏菌或 其片段用于治疗肥胖症和相关病症的用途。
【发明内容】
[0013] 因此，本发明涉及用于治疗有需要的受试者的代谢病症的、或在所述治疗中被使 用的嗜粘蛋白阿克曼氏菌或其片段。在本发明的一个实施方案中，所述代谢病症是肥胖症。 在本发明的另一实施方案中，所述代谢病症选自包含以下各项的组：代谢综合征、胰岛素缺 乏或胰岛素抵抗相关的病症、糖尿病（例如，2型糖尿病）、葡糖耐受不良、异常脂质代谢、 动脉粥样硬化、高血压、心脏病、中风、非酒精性脂肪肝病、高血糖症、肝性脂肪变性、血脂异 常、与超重和肥胖症相关的免疫系统功能障碍、心血管疾病、高胆固醇、升高的甘油三酸酯、 哮喘、睡眠呼吸暂停、骨关节炎、神经变性、胆囊疾病、X综合征、炎症性和免疫性病症、致动 脉粥样化性血脂异常和癌症。
[0014] 本发明还涉及用于增加受试者的能量消耗的嗜粘蛋白阿克曼氏菌或其片段，优选 地不影响所述受试者的食物摄入。本发明还涉及用于增加受试者的饱腹感的嗜粘蛋白阿克 曼氏菌或其片段。
[0015] 在本发明的一个实施方案中，向有需要的受试者施用嗜粘蛋白阿克曼氏菌的活细 胞。
[0016] 在本发明的一个实施方案中，嗜粘蛋白阿克曼氏菌被口服施用。
[0017] 在本发明的一个实施方案中，向受试者施用约I. IO2Cfu到约I. IO15CfiK优选约 I. IO4Cfu到约I. 1012cfu、更优选约I. IO5Cfu到约I. IOiciCfu且甚至更优选约I. IO6Cfu到约 I. IO9Cfu范围的量的嗜粘蛋白阿克曼氏菌。在本发明的另一实施方案中，向受试者施用约 I. IO4Cfu到约I. 1012cfu、更优选约I. IO5Cfu到约I. IO11Cfu且甚至更优选约I. IO6Cfu到约 I. IOltlCfu范围的量的嗜粘蛋白阿克曼氏菌。
[0018] 在本发明的一个实施方案中，嗜粘蛋白阿克曼氏菌被施用至少每日一次。在本发 明的一个实施方案中，嗜粘蛋白阿克曼氏菌被施用至少每周三次。在本发明的另一实施方 案中，嗜粘蛋白阿克曼氏菌被施用至少每周一次。
[0019] 在本发明的一个实施方案中，嗜粘蛋白阿克曼氏菌与另一益生菌菌株和/或与一 种或多种益生元共同施用。
[0020] 本发明的另一目标是用于治疗受试者的代谢病症或在所述治疗中被使用的、或用 于增加受试者的能量消耗或用于增加受试者的饱腹感的组合物，所述组合物包含如上文所 述的嗜粘蛋白阿克曼氏菌或其片段以及赋形剂。在一个实施方案中，所述组合物是营养组 合物。在本发明的一个实施方案中，所述组合物被口服施用。
[0021] 本发明还涉及用于治疗受试者的代谢病症或在所述治疗中被使用的、或用于增加 受试者的能量消耗或用于增加受试者的饱腹感的药物组合物，所述药物组合物包含与药学 上可接受的媒介物联合的如上文所述的嗜粘蛋白阿克曼氏菌或其片段。
[0022] 本发明的另一目标是用于治疗受试者的代谢病症或在所述治疗被使用的、或用于 增加受试者的能量消耗或用于增加受试者的饱腹感的药剂，所述药剂包含如上文所述的嗜 粘蛋白阿克曼氏菌或其片段。
[0023] 本发明的另一目标是嗜粘蛋白阿克曼氏菌或其片段用于促进有需要的受试者的 重量减轻的用途。
[0024] 本发明还涉及用于促进有需要的受试者的重量减轻的包含嗜粘蛋白阿克曼氏菌 或其片段的美容组合物。
[0025] 定义
[0026] 在本发明中，以下术语具有以下含义：
[0027] - "治疗（treatment)"意指防止（即阻止发生）、降低或缓解疾病、病症或健康状 况（condition)的至少一种不利影响或症状。因此，该术语是指治疗性处理和预防性或防 止性措施两者；其中目标是预防或减慢（减轻）靶定病理病况或病症。在本发明的一个实 施方案中，那些需要治疗的受试者包括那些已经患病的受试者以及那些易患病的受试者或 那些待预防病症的受试者。
[0028] 有效量"是指在不引起对靶标的显著的负面副作用或不利副作用的情况下旨在 以下的药剂水平或药剂量：（1)延迟或防止代谢病症的发作；（2)减慢或停止代谢病症的一 种或多种症状的进展、加重或恶化；（3)使代谢病症的症状减轻；(4)降低代谢病症的严重 性或发病率；（5)治愈代谢病症；或（6)恢复嗜粘蛋白阿克曼氏菌在待治疗受试者肠道中的 正常量和/或比例。有效量可在代谢病症发作前被施用，用于预防性或防止性作用。或者 或另外，有效量可在代谢病症起始后被施用，用于治疗性作用。
[0029] - "嗜粘蛋白阿克曼氏菌"是指由 Derrien (Derrien 等，International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2004, 54:1469-1476)鉴别的严格厌氧的 粘蛋白降解细菌。细胞是椭圆形的、非运动性的和革兰氏染色阴性的。嗜粘蛋白阿克曼氏 菌还可被称作阿克曼氏菌属的种或阿克曼氏菌样细菌。它属于衣原体科（Chlamydiae)/琉 微菌门（Verrucomicrobia)群；琉微菌门。如果分类学变化，则本领域技术人员将了解如何 适应分类学的变化以推断可用于本发明中的菌株。此外，申请人已确定嗜粘蛋白阿克曼氏 菌的完整基因组（van Passel等，PLoS One 6, 2011:el6876)。通常认为具有约70%的基 因组相似性的菌株可被视为相同种。
[0030] - "益生菌"是指当以有效量施用时，提供对受试者的保健或健康有益作用的微生 物细胞制剂（例如，活微生物细胞）或微生物细胞组分。根据定义，所有益生菌都具有被证 明的非病原特性。在一个实施方案中，这些健康益处与改进胃肠道中人或动物的微生物群 平衡和/或恢复正常微生物群相关。
[0031] - "益生元"是指可能不被人消化、可被肠道微生物群细菌使用并且意在促进肠中 益生菌生长的物质，例如，食品物质。
[0032] - "超重"是指如下的受试者状况，其中所述受试者的体重指数（BMI)在25到30 范围内。如本文所用的，BMI被定义为个体的体重（kg)除以其身高（米）的平方。"肥胖" 是指如下的受试者状况，其中所述受试者的BMI高于或等于30。
[0033] - "受试者"是指动物，优选哺乳动物，更优选人。在一个实施方案中，受试者是雄 性。在另一实施方案中，受试者是雌性。在本发明的一个实施方案中，受试者还可指宠物， 例如狗、猫、豚鼠、仓鼠、大鼠、小鼠、雪貂、兔等。
[0034] - "约"在数字之前意指所述数字的值加或减20%、优选10%。
[0035] 片段"可指源于嗜粘蛋白阿克曼氏菌代谢的细胞组分、代谢物、分泌的分子和化 合物以及诸如此类。可例如通过回收嗜粘蛋白阿克曼氏菌培养物的上清液或通过从嗜粘蛋 白阿克曼氏菌培养物提取细胞组分或细胞级分、代谢物或分泌的化合物获得片段。术语片 段还可指降解产物。片段可对应于来自嗜粘蛋白阿克曼氏菌的分离形式的组分、或来自嗜 粘蛋白阿克曼氏菌的一种或多种组分的任何混合物。在一个实施方案中，片段可对应于存 在于嗜粘蛋白阿克曼氏菌中的一种或多种此类组分，所述组分是以另一种方式（例如使用 重组DNA技术）在微生物宿主中或在任何其它（生物）合成过程中产生的。
[0036] 代谢病症"是指由以下引起或特征在于以下的病症、疾病和病况：异常的重量增 加、能量使用或消耗；对摄取的或内源性营养素、能源、激素或机体内的其它信号传导分子 的反应改变；或碳水化合物、脂质、蛋白质、核酸的代谢改变；或其组合。代谢病症可与导致 碳水化合物、脂质、蛋白质和/或核酸的代谢失衡的代谢途径缺乏或过量相关。代谢病症的 示例包括但不限于代谢综合征、胰岛素缺乏或胰岛素抵抗相关的病症、糖尿病（例如，2型 糖尿病）、葡糖耐受不良、异常脂质代谢、动脉粥样硬化、高血压、心脏病、中风、非酒精性脂 肪肝病、高血糖症、肝性脂肪变性、血脂异常、与超重和肥胖症相关的免疫系统功能障碍、心 血管疾病、高胆固醇、升高的甘油三酸酯、哮喘、睡眠呼吸暂停、骨关节炎、神经变性、胆囊疾 病、X综合征、炎症性和免疫性病症、致动脉粥样化性血脂异常和癌症。
【具体实施方式】
[0037] 本发明涉及用于治疗有需要的受试者的代谢病症、或在所述治疗中被使用的嗜粘 蛋白阿克曼氏菌或其片段。
[0038] 如本文所用的，代谢病症是与改变的代谢稳态（例如，改变的糖类或脂质稳态）相 关的病症。
[0039] 在本发明的一个实施方案中，所述代谢病症是肥胖症。
[0040] 其它代谢病症的示例包括但不限于代谢综合征、胰岛素缺乏或胰岛素抵抗相关的 病症、糖尿病（例如，2型糖尿病）、葡糖耐受不良、异常脂质代谢、动脉粥样硬化、高血压、心 脏病、中风、非酒精性脂肪肝病、高血糖症、肝性脂肪变性、血脂异常、与超重和肥胖症相关 的免疫系统功能障碍、心血管疾病、高胆固醇、升高的甘油三酸酯、哮喘、睡眠呼吸暂停、骨 关节炎、神经变性、胆囊疾病、X综合征、炎症性和免疫性病症、致动脉粥样化性血脂异常和 癌症。
[0041] 在另一实施方案中，所述代谢病症是超重和/或肥胖症相关的代谢病症，即可与 超重和/或肥胖症相关或由超重和/或肥胖症引起的代谢病症。超重和/或肥胖症相关的 代谢病症的示例包括但不限于代谢综合征、胰岛素缺乏或胰岛素抵抗相关的病症、糖尿病 (例如，2型糖尿病）、葡糖耐受不良、异常脂质代谢、动脉粥样硬化、高血压、心脏病、中风、 非酒精性脂肪肝病、高血糖症、肝性脂肪变性、血脂异常、与