于例如提供是否继续用益生元治疗以预防 重量增加，或是否将受试者切换至替代治疗方案的指示。
[0048] 在替代实施方案中，该方法可用于确定或量化受试者先前食用益生元的效应。例 如，该方法可用于提供益生元施用是否已预防重量增加的指示，特别地在这不能仅通过确 定受试者的重量来确定时。例如，在规定的测试期内，可能不知道在缺少益生元施用的情况 下、特别是如果受试者的膳食的热量值是可变的和/或未知的话，受试者是否已增加或损 失重量。
[0049] 夸试者
[0050] 本发明的方法可在任何重量的受试者中进行，以便预测益生元在预防膳食诱导的 重量增加中的功效。因此受试者可以为重量不足的、正常的、过重的或肥胖的受试者。
[0051] 特别地在重量不足的、过重的或肥胖的受试者中，本发明的方法可阐明受试者对 重量增加的遗传和代谢倾向。基于此，和理想地在进一步考虑它们的一般健康状态和生活 方式下，可开发可能有助于保持或恢复健康状态的个性化营养方案。
[0052] 在一个实施方案中，特别是在缺少益生元治疗的情况下，待测试的受试者易受膳 食诱导的重量增加的影响。例如，受试者可以为过重或肥胖的受试者，指示向其施用益生元 以预防重量增加。在一些实施方案中，受试者可正在食用高脂肪膳食、或高热量膳食。
[0053] 对于成人而言，"过重"被定义为具有25至30之间的BMI。"体重指数"或"BMI" 意指重量（以kg计）除以身高（以米计）的平方的比值。"肥胖症"为这样的疾患，其中 贮存于动物、特别地人和其他哺乳动物的脂肪组织中的自然能量储备增至其与某些健康状 况或增加的死亡率相关的点。对于成人而言，"肥胖"被定义为具有大于30的BMI。对于成 人而言，"正常重量"被定义为18. 5至25的BMI，而"重量不足的"可被定义为小于18. 5的 BMI0
[0054] 高脂肪膳食可被定义为受试者从脂肪得到超过其总热量20 %的膳食。在一些实施 方案中，高脂肪膳食可在脂肪中含有超过其总热量的约30%。在其他实施方案中，受试者可 从脂肪得到超过其总热量的约40%。
[0055] 因此，高脂肪膳食的实际脂肪含量可根据膳食的总热量值、以及例如受试者的性 另IJ、年龄、身体活动水平、体形、高度和重量而变。通常对于适度身体活动水平和2, 700千卡 的日热量摄取的70kg男性而言，高脂肪膳食可被认为是食用大于60g脂肪/天（约540千 卡能量值）。可选地，此类受试者中的高脂肪膳食可被定义为90g脂肪/天（810千卡/天） 或120g脂肪/天（1080千卡/天）的过量。
[0056] 高热量膳食可被定义为受试者食用大于推荐的日热量摄取，例如基于受试者的性 另IJ、年龄、身体活动水平、体形、高度和重量。例如，典型的70kg男性的高热量膳食可被定义 为食用大于2, 700千卡/天、大于3, 000千卡/天或大于3, 500千卡/天。对于女性而言， 高热量膳食可含有大于2, 100千卡/天、大于2, 500千卡/天、或大于3, 000千卡/天。
[0057] 本发明的方法中测试的受试者已食用益生元。通常，受试者已食用益生元作为指 定的重量管理方案的部分。例如，确定剂量的益生元可作为膳食补充剂向受试者施用或供 应，以便预防重量增加。
[0058] 优选地，受试者已食用益生元达至少一天、两天、三天、一周、两周、一个月、两个月 或三个月的时间，之后获得待测试的样品。在优选的实施方案中，在启动食用益生元后3天 至14天之间，例如在开始益生元治疗后约7天获得样品。例如，在一些实施方案中，受试者 已在上文定义的时间段内食用益生元至少Ig/天、至少2g/天、至少5g/天或至少IOg/天 的量。
[0059] 在一个实施方案中，受试者为人。然而，本发明的方法不限于人。其也可用于非人 动物，例如用于伴侣动物如猫或狗。基于此，可设计将促成良好健康状态的陪伴动物的长寿 命的营养方案。
[0060] 在一些实施方案中，受试者是婴儿或幼儿。术语"婴儿"是指低于12月龄的儿童。 表述"幼儿"是指年龄为1至3岁的儿童，也称为幼童。婴儿可以为足月或早产婴儿。"早 产（preterm/premature)"婴儿是指没有在足月出生的婴儿。一般其是指在妊娠36周前出 生的婴儿。在一些实施方案中，婴儿可通过剖腹出生，和/或小胎龄婴儿和/或低出生重量 婴儿。"通过剖腹出生的婴儿"意指通过剖腹产出生的婴儿，即非阴道出生的婴儿。
[0061] 益牛元
[0062] 益益生元为非-可消化食物成分，其通过选择性刺激结肠中的一种细菌或有限数 量的细菌的生长和/或活性来有益地影响宿主，且由此改善宿主健康。此类成分为非可消 化的，在这个意义上说，它们在胃或小肠中不被降解和吸收，因此完整通过结肠，在结肠它 们被有益细菌选择性发酵。
[0063] 益生元的实例包括某些低聚糖，如低聚果糖（FOS)、半乳低聚糖（GOS)、低聚异麦 芽糖、低聚木糖、BMO(牛乳低聚糖）、糖基蔗糖（GS)、低聚乳果糖（LS)、乳果糖（LA)、低聚帕 拉金糖（PAO)、低聚麦芽糖（MOS)、树胶和/或其水解物、果胶和/或其水解物、及其任何混 合物。BMO可选自以下列表：包含N-乙酰化低聚糖、唾液酸化低聚糖及其任何混合物。BMO 可以为"CM0S-G0S"（奶牛乳低聚糖-半乳低聚糖）。
[0064]可使用益生元的组合，如90% GOS和10%短链低聚果糖，如以Raftilose?商标 销售的产品，或90% GOS和10%菊粉，如以商标Ra_ftiline⑧销售的产品。
[0065] 特别优选的益生元为一种或多种低聚半乳糖、一种或多种N-乙酰化低聚糖和一 种或多种唾液酸化低聚糖的混合物，其中一种或多种N-乙酰化低聚糖包含（表示）0. 5 至4. 0 %的低聚糖混合物，一种或多种低聚半乳糖包含（表示）92. 0至98. 5%的低聚糖 混合物，且一种或多种唾液酸化低聚糖包含（表示）I. 0至4. 0 %的低聚糖混合物。该混 合物在下文被称为"CM0S-G0S"。优选地，根据本发明使用的组合物含有2. 5至15.Owt% CMOS-GOS(以干物质计），条件是组合物包含至少0. 02wt%的N-乙酰化低聚糖、至少 2.Owt%的低聚半乳糖和至少0. 04wt%的唾液酸化低聚糖。W02006087391和W02012160080 提供生产"CMOS-GOS"的一些实施例。
[0066] "N-乙酰化低聚糖"意指具有N-乙酰基残基的低聚糖。适合的N-乙酰化低聚糖 包括GalNAca1，3GalP1，4Glc和GalP1，6GalNAca1，3GalP1，4Glc。N-乙酰化低聚糖可 通过氨基葡糖苷酶和/或氨基半乳糖苷酶（galactosaminidase)对N-乙酰基-葡萄糖和 /或N-乙酰基半乳糖的作用来制备。同样地，N-乙酰基-半乳糖基转移酶和/或N-乙酰 基-糖基转移酶可用于此目的。N-乙酰化低聚糖也可通过使用各自酶（重组或天然）的发 酵技术和/或微生物发酵来生产。对于后者，微生物可表达它们的天然酶和底物或可被工 程化以生产各自底物和酶。可以使用单个微生物培养物或混合培养物。N-乙酰化低聚糖 形成可通过从任何聚合度（DP)(从DP= 1起）开始的受者底物来启动。另一选择是游离 或结合于低聚糖（例如乳果糖）的酮-己糖（例如果糖）化学转化成含有低聚糖的N-乙 酰基己糖胺或N-乙酰基己糖胺，如在Wrodnigg,T.M. ;Stutz，A.E. (1999)Angew.Chem.Int. Ed38:827-828 中所述。
[0067] "低聚半乳糖"意指包含两个或更多个半乳糖分子且无电荷和无N-乙酰 基残基的低聚糖。适合的低聚半乳糖包括Gal1，6Gal、Gal1，6Gal1，4Glc GalPl，6Gal0l，6Glc、GalPl，3Gal0l，3Glc、GalPl，3Gal0l，4Glc、 GalPl，6Gal0l，6Gal0l，4Glc、GalPl，6Gal0l，3Gal0l，4Glc Gal0 1，3Gal0 1，6Gal0 1，4Glc、Gal0 1，3Gal0 1，3Gal0 1，4Glc、Gal0 1，4Gal0 1，4Glc 和GalP1，4GalP1，4GalP1，4Glc。合成的低聚半乳糖如GalP1，6GalP1，4Glc GalP1，6GalP1，6Glc、GalP1，3GalP1，4Glc、GalP1，6GalP1，6GalP1，4Glc、 GalP1，6GalP1，3GalP1，4Glc和GalP1，3GalP1，6GalP1，4Glc、GalP1，4GalP1，4Glc 和GalP1，4GalP1，4GalP1，4Glc及其混合物以Vicinal? 和Elix'《r@ 商购可得。低 聚糖的其他供应商为Dextra实验室、Sigma-AldrichChemieGmbH和KyowaHakkoKogyo Co.，Ltd。可选地，特异性糖基转移酶如半乳糖基转移酶可用于生产中性低聚糖。
[0068] "唾液酸化低聚糖"意指具有携带相关电荷的唾液酸残基的低聚糖。适合的唾液 酸化低聚糖包括NeuAca2, 3GalP1，4Glc和NeuAca2, 6GalP1，4Glc。这些唾液酸化低聚 糖可通过色谱或过滤技术从天然来源如动物乳分离。可选地，它们也可通过使用特异性唾 液酸基转移酶的生物技术、通过基于酶的发酵技术（重组或天然酶）或通过微生物发酵技 术来生产。对于后者，微生物可表达它们的天然酶和底物或可被工程化以生产各自底物和 酶。可以使用单个微生物培养物或混合培养物。唾液酸基-低聚糖形成可通过从任何聚合 度（DP)(从DP= 1起）开始的受者底物来启动。
[0069] 在特别优选的实施方案中，益生元包含低聚半乳糖（GOS)。在另一个特别优选 的实施方案中，益生元包含牛乳低聚糖（BMOS)，更优选地奶牛乳低聚糖-半乳低聚糖 (CMOS-GOS)。在另一个优选实施方案中，益生元包含菊粉和低聚果糖（FOS)。
[0070]
[0071] 本发明方法包括确定获自受试者的尿样品中硫酸吲哚酚的水平的步骤。
[0072] 因此，本发明方法通常在人或动物体外实施，即对先前获自待测试的受试者的体 液（尿）样品实施。使用尿作为待测试的体液具有这样的优势，即其可使用完全确立的程 序常规且非侵入性地获得。也可在没有医疗人员支持的情况下获得样品。
[0073] 确宙样品中硫酸吲哚酚的水平
[0074] 样品中硫酸吲哚酚的水平可通过本领域中已知的任何方式检测且定量。例如，可 以使用1H-NMK质谱法例如UPLC-ESI-MS/MS。也可使用其他方法如其他光谱方法、色谱方 法、标记技术、或定量化学方法。优选样品中的硫酸吲哚酚水平和参照值通过相同方法确 定。
[0075]比较硫酸吲哚酚水平与参照倌
[0076] 本发明方法还包括比较受试者的硫酸吲哚酚水平与预定参照值的步骤。
[0077] 预定参照值可基于所测试的对照群体例如未食用益生元的群体的体液中的平均 硫酸吲哚酚水平。对照群体可以为至少3个、优选至少10个、更优选至少50个具有类似遗 传背景、年龄和健康状态的一组人。优选对照群体为一组已食用与待测试受试者类似的膳 食（除了就益生元之外）的受试者。通常对照群体中的受试者已食用高脂肪膳食，但未食 用益生元或已食用低于待测试受试者的益生元的水平。
[0078] 在另一个实施方案中，预定参照值为在食用益生元前待测试受试者的尿中的硫酸 吲哚酚水平。因此该方法可以包括监测响应于食用益生元的受试者尿中的硫酸吲哚酚水平 的变化。例如，在一个实施方案中，尿样品可获自受试者以提供硫酸吲哚酚水平的参照值， 之后启动益生元治疗。随后另一（测试）尿样品可在益生元食用的指定时间段后获得，如 上所论述。然后，将测试样品中的硫酸吲哚酚水平与参照样品比较，以确定该受试者的硫酸 吲哚酚水平是否已响应于益生元治疗而增加或减少。
[0079] 基于硫酸吲哚酚水平的比较确宙益牛元功效