水体的沉积物中多种酸性药物的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于环境保护和分析化学领域，具体涉及一种水体的沉积物中多种酸性药 物的检测方法。
【背景技术】
[0002] 水环境中药物残留问题已引起国内外广泛关注，成为当前环境领域的研究热点。 药物的大量使用及滥用，使得该类物质及其活性组分被持续不断地输入到水体环境中，并 通过扩散吸附等形式进入沉积物环境，在特定环境下有可能从沉积物环境中释放出来重新 进入水环境中，造成潜在的环境风险。为了分析沉积物中药物的污染情况，掌握药物在水环 境和沉积物环境中的迀移转化规律，就必须建立完善一套药物在沉积物环境中的分析检测 技术。
[0003]近年来，我国关于水体中药物的污染研究较多，而对于沉积物中的药物残留污染 情况的研究较少涉及。目前对于水样中药物的分析检测技术较为成熟，主要集中于使用固 相萃取-高效液相色谱串联质谱方法。目前对于沉积物中药物的分析检测技术，检出限高、 检测精度差，存在一定缺陷。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于针对现有对沉积物中药物检测方法的不足，提供一种使用超声 提取-固相萃取-高效液相色谱串联质谱的水体的沉积物中多种酸性药物的检测方法，该方 法的优点是操作简便、耗时较短、高灵敏度、高检测限。
[0005]本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
[0006] 本发明涉及一种水体的沉积物中酸性药物的检测方法，所述方法包括如下步骤：
[0007] S1、沉积物预处理:将沉积物冷冻干燥，研磨后，通过60~200目筛，得到预处理后 的沉积物样；
[0008] S2、超声萃取：在所述预处理后的沉积物样中加入柠檬酸-乙二胺四乙酸钠 (Mcllvaine-Na2EDTA)缓冲液，超声10~15min后，旋转离心收集上清液；
[0009] S3、固相萃取：
[0010] 将收集的所述上清液旋转蒸发去除甲醇，用去离子水稀释后调节pH至3~4,以5~ 10mL/min的速度通过活化后的固相萃取柱后，用去离子水淋洗固相萃取柱，净化去除杂质， 废弃淋洗液；
[0011] 将净化后的固相萃取柱真空抽干脱水后，用6~10mL的甲醇溶液洗脱，控制流速为 0.5~lmL/min，收集洗脱液；
[0012] 将收集的洗脱液在室温氮气流下吹至近干，用甲醇溶液定容后，经(0.22μπι左右） 有机相针孔滤膜过滤后，得到待测样品；
[0013] S4、液相色谱串联质谱检测：采用液相色谱-串联质谱检测系统（LC-MS/MS， API4000，ThermoFisherScientific,USA)对所述待测样品进行测定；
[0014] S5、将步骤S4测得的测试样品色谱图上的得到的峰面积在标准工作曲线上回归， 计算得到所述酸性药物的浓度。
[0015]优选的，所述酸性药物包括非留体抗炎药物和回收率指示物涕丙酸。
[0016] 优选的，所述非留体抗炎药物包括酮洛芬、萘普生、苯扎贝特、氯贝酸、吲哚美辛、 双氯酚酸、吉非罗齐中的一种或几种。
[0017] 优选的，步骤S2中，每3~5g预处理后的沉积物样中加入的柠檬酸-乙二胺四乙酸 钠缓冲液为10~15mL。
[0018] 优选的，步骤S2中，重复所述超声萃取2~4次。更优选为3次。
[0019] 优选的，步骤S3中，所述活化后的固相萃取柱指的是:将固相萃取柱(C18,500mg/ 3mL)依次用6~10mL甲醇和6~10mL去离子水活化。更优选为用10mL甲醇和10mL去离子水活 化。
[0020] 优选的，步骤S3中，所述去离子水稀释中，去离子水的体积用量为去除甲醇后的上 清液体积的8~10倍;所述pH是采用稀盐酸调节;所述去离子水淋洗中，去离子水用量为5~ 10mL。所述真空抽干的时间为5~lOmin。
[0021] 优选的，步骤S3中，所述甲醇溶液定容为用10% (体积浓度）甲醇水溶液定容至0.5 ~lmL。更优选定容至0.5mL。
[0022] 优选的，步骤S4中，所述色谱条件为：
[0023] 色谱柱:AgilentEclipseXDBCis反相柱（150mmX2·lmm,5μηι);
[0024] 进样体积：10yL;柱温:30°C;
[0025] 流动相A:含0.1 % (体积浓度)乙酸的去离子水溶液，B:甲醇；
[0026]梯度洗脱程序为：10% (体积比）流动相A在12min内线性增加至90 % (体积比）并保 持7min，然后在5min内将流动相A线性降低至10% (体积比）；
[0027] 流速：200yL/min。
[0028] 优选的，步骤S4中，质谱条件为：
[0029] 离子源:电喷雾负离子化(ESI)源；
[0030] 检测模式:负离子模式检测：
[0031] 干燥气温度：350°C;
[0032] 干燥气流速10L/min;
[0033] 扫描方式:多重反应检测(MRM);
[0034] 毛细管电压:3000V;
[0035] 喷雾针压力：40psi。
[0036] 优选的，步骤S5中，所述标准工作曲线是用不同浓度的所述酸性药物分别配制为 标准溶液，用液相色谱-串联质谱法检测其色谱峰面积，相对于浓度绘制而得的标准曲线。
[0037] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
[0038] 1、本发明创新性的公开了一种能够精确测定水体的沉积物环境中多种酸性药物 的超声提取一固相萃取一液相色谱串联质谱方法。该方法通过超声提取法富集沉积物中的 药物，避免了索氏提取法在富集过程中对目标药物造成损失。
[0039] 2、本发明方法回收率高，检测过程耗时少，检测的精确度和灵敏度高，检出限低。
[0040] 3、本发明检测方法操作简便，萃取溶剂(有机试剂)用量小，环境毒性低，是一种适 用于沉积物中多种酸性药物的快速、灵敏、准确的分析方法。
【附图说明】
[0041]图1为实施例1中沉积物环境中7种酸性药物和1种回收率指示物的色谱图。
【具体实施方式】
[0042]下面结合实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员 进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员 来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干调整和改进。这些都属于本发明的保 护范围。
[0043]实施例1
[0044]本实施例涉及一种使用超声提取-固相萃取-高效液相色谱串联质谱的沉积物环 境中多种酸性药物的检测方法。
[0045] 所需试剂溶液的配置方法如下:柠檬酸-乙二胺四乙酸钠(Mcllvaine-Na2EDTA)缓 冲液(PH5.0):称取10.5g-水合柠檬酸，14.5g磷酸氢二钠，1.86g乙二胺四乙酸钠用蒸馏水 溶解并定容至500mL，与500mL甲醇混合;酸性药物混合标准溶液:分别称取酮洛芬、萘普生、 苯扎贝特、氯贝酸、吲哚美辛、双氯酚酸、吉非罗齐、涕丙酸的标准品各l〇mg，用超纯水定容 至500mL。用所得混合标准溶液与不同体积甲醇混合，配置浓度为5、20、50、100、200、500yg/ L六种标准样品。
[0046]沉积物基质加标回收实验;包括如下步骤：
[0047] (1)样品制备:采用标准加入法，针对不同性质的未受药物污染的沉积物，将沉积 物样品冷冻干燥，研磨通过60目筛;称取5.Og样品于50mL离心管中，加入8种酸性药物混合 标准溶液，避光阴凉处静置48h备用。每一组回收率实验包括注入混合标准溶液样品3个，未 注入混合标准溶液的空白样品3个。
[0048] (2)超声提取：向上述样品中加入10mL的柠檬酸-乙二胺四乙酸钠(Mcllvaine- Na2EDTA)缓冲液，超声15min，用50