-a-甲基-2-萘乙酰氯与(RS)-2_氨基丁醇衍生物用流动相溶解后采用高效 液相色谱进行检测分析。液相色谱条件:迪马C18色谱柱，流动相为80%甲醇-20%盐酸溶液， 所述盐酸溶液的摩尔浓度为〇.2111〇1/1，？!1值为4.5。紫外检测波长为25411111，流速为1.〇1]117 min，柱温为30°C，进样体积20yL，保留时间和手性e. e. %值同实施例1。
[0031 ]:称取(RS)-2-氨基丁醇3.09g(0.03mol)，溶于50mL石油醚中，0°C下搅拌，缓慢加 入（1〇-€1-甲基-2-萘乙酰氯65.588(0.3111〇1)。孔(：监测反应，反应结束后蒸干得（1〇-€ [-甲 基-2-萘乙酰氯与(RS )-2-氨基丁醇衍生物。
[0032]将（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与(RS)-2_氨基丁醇衍生物用流动相溶解后采用高效 液相色谱进行检测分析。液相色谱条件:迪马C18色谱柱，流动相为80%甲醇-20%盐酸溶液， 所述盐酸溶液的摩尔浓度为〇.2111〇1/1，？!1值为4.5。紫外检测波长为25411111，流速为1.〇1]117 min，柱温为30°C，进样体积20yL，保留时间和手性e. e. %值同实施例1。
[0033]:称取(RS)-2-氨基丁醇3.09 g (0.03mol)，溶于80mL四氢咲喃中，在0°C下搅拌， 缓慢滴加（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯24.05g (0.11111〇1)。孔(：监测反应，反应结束后蒸干得 (R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与(RS)-2_氨基丁醇衍生物。
[0034]将（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与(RS)-2_氨基丁醇衍生物用流动相溶解后采用高效 液相色谱进行检测分析。液相色谱条件:迪马C18色谱柱，流动相为80%甲醇-20%盐酸溶液， 所述盐酸溶液的摩尔浓度为〇.2111〇1/1，？!1值为4.5。紫外检测波长为25411111，流速为1.〇1]117 min，柱温为30°C，进样体积20yL，保留时间和手性e. e. %值同实施例1。
[0035]:取(RS)-2-氨基丁醇 3.09g(0.03mol)，溶于 80mL(石油醚：四氢呋喃 1:2)中，38°C 下搅拌，缓慢加入（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯13.128(0.06!11〇1)。11(：监测反应，反应结束后蒸 干得（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与(RS)-2_氨基丁醇衍生物。
[0036] 将（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与(RS)-2_氨基丁醇衍生物用流动相溶解后采用高效 液相色谱进行检测分析。液相色谱条件:迪马C18色谱柱，流动相为80%甲醇-20%盐酸溶液， 所述盐酸溶液的摩尔浓度为〇.2111〇1/1，？!1值为4.5。紫外检测波长为25411111，流速为1.〇1]117 min，柱温为30°C，进样体积20yL，保留时间和手性e. e. %值同实施例1。
[0037] 实施例3:色谱条件考察试验 (1)衍生化 取(RS)-2-氨基丁醇3.09g(0.03mol)，溶于50mL二氯甲烷中，30°C下搅拌，缓慢加入 (R)-a-甲基-2-萘乙酰氯19.678(0.09111〇1)。11(：监测反应，反应结束后蒸干得（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与(RS )-2-氨基丁醇衍生物。
[0038] (2)对（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与（RS)-2_氨基丁醇衍生物采用以下不同色谱条 件进行分离检测 A.将（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与(RS)-2_氨基丁醇衍生物用流动相溶解后采用高效液 相色谱进行检测分析。液相色谱条件:迪马C18色谱柱，流动相为40%乙腈-60%盐酸溶液，所 述的盐酸溶液的浓度为〇. 3mol/L，pH值为3.5。紫外检测波长为254nm，流速为1. OmL/min，柱 温为30°C，进样体积20yL，手性e. e. %值同实施例1。
[0039] B.将（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与(RS)-2_氨基丁醇用流动相溶解后采用高效液相 色谱进行检测分析。液相色谱条件:迪马C18色谱柱，流动相为80%异丙醇-20%盐酸溶液所述 的盐酸溶液的浓度为〇.3mol/L，pH值为3.0。紫外检测波长为254nm，流速为1.0 mL/min，柱 温为25°C，进样体积20yL，手性e. e. %值同实施例1。
[0040] C.将（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与(RS)-2_氨基丁醇衍生物用流动相溶解后采用高 效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：迪马C18色谱柱，流动相为80%乙醇-20%盐酸溶 液，所述的盐酸溶液的浓度为ο · 3mol/L，pH值为4 · 5。紫外检测波长为254nm，流速为1 · OmL/ min，柱温为25°C，进样体积20yL，手性e. e. %值同实施例1。
[0041] D.将（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与（RS)-2_氨基丁醇衍生物用流动相溶解后采用 高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件:迪马C18色谱柱，流动相为30%甲醇-70%盐酸溶 液水溶液，所述的盐酸溶液的浓度为〇. lmol/L，pH值为5.0。紫外检测波长为254nm，流速为 1. OmL/min，柱温为30°C，进样体积20yL，手性e. e. %值同实施例1。
[0042] E.将（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯与（RS)-2_氨基丁醇衍生物用流动相溶解后采用 高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件:迪马C18色谱柱，流动相为60%乙醇-40%盐酸溶 液，所述的盐酸溶液的浓度为〇 · lmol/L，pH值为6 · 0。紫外检测波长为254nm，流速为1 · OmL/ min，柱温为30°C，进样体积20yL，手性e. e. %值同实施例1。
[0043]以上所述实施方式仅为本发明的优选实施例，而并非本发明可行实施的穷举。对 于本领域一般技术人员而言，在不背离本发明原理和精神的前提下对其所作出的任何显而 易见的改动，都应当被认为包含在本发明的权利要求保护范围之内。
【主权项】
1. 一种2-氨基下醇手性纯度的HPLC分析方法，其特征在于，具体包含如下步骤： 步骤一、衍生化 将2-氨基下醇溶于有机溶剂中，在一定的溫度条件下，W (R)-Q-甲基-2-糞乙酷氯为 衍生化试剂，控制2-氨基下醇和（R)-Q-甲基-2-糞乙酷氯的摩尔比，进行双衍生化反应，得 到衍生化后的2-氨基下醇，反应式见式I;式I 步骤二、分离检测 采用反相高效液相色谱-紫外检测器对衍生化后的2-氨基下醇进行定性、定量和对映 体过量率测定。2. 根据权利要求1所述的一种2-氨基下醇手性纯度的HPLC分析方法，其特征在于，所述 的有机溶剂选自二氯甲烧、1,2-二氯乙烧、甲苯、二甲苯、石油酸、四氨巧喃、氯仿和四氯化 碳中的一种或两种W上的组合。3. 根据权利要求1所述的一种2-氨基下醇手性纯度的HPLC分析方法，其特征在于，所述 的有机溶剂与2-氨基下醇的体积比为0.5~300:1，优选的为2~20:1。4. 根据权利要求1所述的一种2-氨基下醇手性纯度的HPLC分析方法，其特征在于，所述 的一定溫度是指从〇°C到回流溫度，优选为20~35°C。5. 根据权利要求1所述的一种2-氨基下醇手性纯度的HPLC分析方法，其特征在于，所述 的2-氨基下醇和（R)-Q-甲基-2-糞乙酷氯的摩尔比为1:4~20。6. 根据权利要求1所述的一种2-氨基下醇手性纯度的HPLC分析方法，其特征在于，所述 的紫外检测器的检测波长为200~300nm，优选230~260nm。7. 根据权利要求1所述的一种2-氨基下醇手性纯度的HPLC分析方法，其特征在于，所述 的反相高效液相色谱使用的色谱柱是普通反相柱。8. 根据权利要求1所述的一种2-氨基下醇手性纯度的HPLC分析方法，其特征在于，所述 的反相高效液相色谱的流动相由酸的水溶液和有机溶剂组成，有机溶剂选自甲醇、乙醇、异 丙醇和乙腊中的一种或两种;有机溶剂占流动相的体积比例范围为30%~90%，优选的为60%~ 80〇/〇。9. 根据权利要求8所述的一种2-氨基下醇手性纯度的HPLC分析方法，其特征在于，所述 的流动相的酸选自有机酸或无机酸;优选为无机酸，包括醋酸、硫酸、硝酸、和盐酸，更优选 为盐酸。10. 根据权利要8所述的一种2-氨基下醇手性纯度的HPLC分析方法，其特征在于，所述 的反相高效液相色谱的流动相酸的水溶液的pH值为2.0~6.0，优选pH值为3.0~5.0。
【专利摘要】本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种2-氨基丁醇手性纯度的HPLC分析方法。本发明采用？(<i>R</i>)-α-甲基-2-萘乙酰氯为衍生化试剂与2-氨基丁醇进行快速双衍生化反应，生成有紫外吸收的衍生物后，然后使用高效液相色谱与紫外联用对其进行定性、定量以及手性纯度的测定。该方法衍生反应条件快速、温和，检测灵敏度高、重复性好，可有效地用于检测2-氨基丁醇手性纯度，易于标准化操作，因此具有实际应用价值与现实意义。
【IPC分类】G01N30/89
【公开号】CN105510510
【申请号】CN201610043273
【发明人】孙凤霞, 周蒙, 孔飞飞, 张琛, 王美玲, 蒲寒莹
【申请人】河北科技大学
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2016年1月23日