一种广谱农药检测金标试纸及方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种农药残留检测试纸及方法，特别涉及一种广谱农药检测金标试纸 及方法。
【背景技术】
[0002] 现有常用的农药有有机磷和氨基甲酸酯两大类，具体的各类多达40种，常用的也 有近20种。使用农药是有效减少作物病虫害的一种方法，但是不合理的使用农药会导致农 药残留，威胁人们的食品安全。
[0003] 随着人们对食品安全的日益重视，越来越多的人开始关注农药残留。传统的农药 残留检测方法有色谱法，这种方法的检测准确性高，但是耗时长，对操作和仪器的要求高， 无法满足现场快速检测的需要。
[0004] 基于抗体-抗原的免疫检测方法主要是利用抗体对抗原的特异性识别，并与之结 合，具有高度精确、灵敏、特异的特点。同时对操作的要求低，可以较为快速的给出定性检测 结果。基于这一原理开发的农药快速检测试剂有很多种。但是农药的种类繁多，而免疫检测 方法的高特异性导致其只能检测出某一种特定的农药。如果要实现全面检测，则需要使用 20种以上的农药免疫检测试剂，这将极大地增加农药快速检测的成本，导致农药的全面检 测实际上不可能实现。大量的农药无法检测出来，存在潜在的风险。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种广谱的农药检测金标试纸，该试纸可以快速检测出几 乎全部有机磷和氨基甲酸酯类农药。
[0006] 本发明所采取的技术方案是： 一种广谱农药检测试纸，试纸具有检测线、对照线和指示剂， 试纸的检测线上设有胆碱酯酶，对照线上设有捕获因子； 指示剂上连接有捕获标志A和B，其中捕获标志A可被胆碱酯酶捕获，捕获标志B可被对 照线上的捕获因子捕获。
[0007] 优选的，指示剂为物理指示剂。
[0008] 优选的，捕获标志A和有机磷或氨基甲酸酯类农药竞争性与胆碱酯酶结合。
[0009] 优选的，捕获标志A为有机磷或氨基甲酸酯类农药，有机磷或氨基甲酸酯类农药的 特征性残基，或有机磷或氨基甲酸酯类农药的偶联物。
[0010]优选的，捕获标志B为蛋白类高分子、多肽聚合物、易降解的高分子聚合物，对应的 捕获因子为其抗体； 或捕获标志B为寡核苷酸序列，对应的捕获因子为其互补序列； 或捕获标志B和其捕获因子构成亲和体系对。
[0011]优选的，有机磷或氨基甲酸酯类农药选自对硫磷、杀螟硫磷、甲基对硫磷、乐果、水 胺硫磷、马拉硫磷、毒死蜱及其偶联物。有机磷或氨基甲酸酯类农药特征性残基选自双硫 基。
[0012] 优选的，捕获标志B和其捕获因子构成亲和体系对为生物素-亲和素体系。
[0013] 优选的，指示剂为胶体金。
[0014] 一种农药快速检测方法，包括对样品进行处理，之后取样滴加在广谱农药检测试 纸上，根据指示的指示情况下，确定检测结果，其中，广谱农药检测试纸如上所述。
[0015] 本发明的有益效果是： 本发明的农药检测试纸，对各种有机磷和氨基甲酸酯类农药均具有较好的检测能力， 检测结果快，非常适用于蔬果的现场快速农药残留检测。
[0016] 本发明的农药检测试纸，制备工艺简单，检测结果可靠，可以实现低成本的农药残 留检测。
【具体实施方式】
[0017] -种广谱农药检测试纸，试纸具有检测线、对照线和指示剂， 试纸的检测线上设有胆碱酯酶，对照线上设有捕获因子； 指示剂上连接有捕获标志A和B，其中捕获标志A可被胆碱酯酶捕获，捕获标志B可被对 照线上的捕获因子捕获。
[0018] 捕获标志A和B可以分别直接或间接连接在指示剂上。或者捕获标志A连接在捕获 标志B上，然后再与指不剂连接。一般而言，当捕获标志A和B均为小分子时，捕获标志A和B均 独立连接在指示剂上可以避免相互干扰，获得更好的检测结果。而当捕获标志B为大分子 时，捕获标志A可以先连接在捕获标志B上，然后捕获标志B再与指示剂相连接。
[0019]本发明试纸的检测原理如下： 有机磷和氨基甲酸酯类农药均可与胆碱酯酶结合并抑制其活性，有机磷和氨基甲酸酯 类农药、指示剂上的捕获标志A竞争性与胆碱酯酶结合。因此，当样品中含有较多量的有机 磷或氨基甲酸酯类农药时，捕获标志A就较少的与胆碱酯酶结合，在检测线(T线）上聚集的 指示剂就相对较少，检测信号，如颜色就相对较弱；当指示剂扩散到对照线(C线)时，指示剂 上的捕获标志B被C线上的捕获因子捕捉，指示剂在C线上聚集，给出相应的检测信号。反之， 当样品中的有机磷和氨基甲酸酯类农药含量较少，甚至是无时，则T线和C线上均会具有可 观的能被检测到的信号。这样仅使用一种试纸条就实现了有机磷和氨基甲酸酯类农药的广 谱检测。
[0020] 优选的，指示剂为物理指示剂。这种指示剂可以给出可视的信号，如颜色改变。这 样就可以直观的判断出检测结果。
[0021] 优选的，捕获标志A和有机磷或氨基甲酸酯类农药竞争性与胆碱酯酶结合。
[0022] 优选的，捕获标志A为有机磷或氨基甲酸酯类农药，有机磷或氨基甲酸酯类农药的 特征性残基，或有机磷或氨基甲酸酯类农药的偶联物。有机磷或氨基甲酸酯类农药偶联物， 包括有机磷或氨基甲酸酯类农药的特征性残基偶联其他生物大分子或有机化合物形成的 大分子化合物，这些生物大分子可以是为蛋白类高分子、多肽聚合物、易降解的高分子聚合 物，其作用在于使有机磷或氨基甲酸酯类农药易于与指示剂或另一个捕获标志偶联;此外， 有机磷或氨基甲酸酯类农药的偶联物还包括有机磷或氨基甲酸酯类农药的衍生物，该衍生 物同样可以与胆碱酯酶结合。
[0023]优选的，捕获标志B为蛋白类高分子、多肽聚合物、易降解的高分子聚合物，对应的 捕获因子为其抗体;蛋白类高分子优选为白蛋白，更佳的，白蛋白为人血清白蛋白、牛血清 白蛋白、兔血清白蛋白、卵清白蛋白。易降解的高分子聚合物选自羧甲基纤维素、聚乙烯比 咯烷酮等为本领域技术人员所熟知的载体。
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