酯，在200rpm搅拌条件下反应5h，反应完成后将产物用去离子水洗涤至中性；
[0113] (3)用无水乙醇配制0.1 %~0.3% (w/v)浓度的细菌磁颗粒，用冰乙酸调节溶液pH 值至4.0，取20mL上述溶液加入至30mL 10%3-氨丙基三乙氧基硅烷乙醇溶液中，在200rpm 搅拌条件下反应3h，反应完成后将产物用去离子水洗涤至中性，制得经过处理的细菌磁颗 粒；
[0114] (4)用乙酸-乙酸钠缓冲溶液(pH为6.0)洗涤经过处理的细菌磁颗粒，并配制成1 % ~5 % (w/v)浓度的悬液；
[0115] (5)取2mL上述细菌磁颗粒悬液，加入100yL浓度为10%(w/v)的EDC溶液和100yL 10 % (w/v)的NHS溶液，室温150rpm涡旋振荡反应3h，然后用去离子水洗去过量的EDC和NHS， 并最终悬浮至2mL，，制得活化后的细菌磁颗粒；
[0116] (6)将活化后的细菌磁颗粒悬液与红细胞膜混合；
[0117] (7)加入等体积的20% (W/V)聚乙二醇4000,室温作用30min，轻轻震荡；
[0118] (8)磁铁吸附，弃上清，将沉淀溶于磷酸盐缓冲液中并洗涤3次，制得细菌磁颗粒红 细胞膜复合颗粒。
[0119] 实施例12-种细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒的制备方法
[0120] 该制备方法与实施例11不同的是，步骤7)中加入了重量份数比为2:6.3:2的壳聚 糖、海藻酸钠和聚乙二醇4000的混合物。
[0121 ]实施例13-种细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒的制备方法
[0122 ]该制备方法与实施例7不同的是，该制备方法还包括细菌磁颗粒的制备方法，其包 括如下步骤：
[0123] 1)将趋磁细菌MSR-1菌株进行扩大培养；
[0124] 2)离心并收集趋磁细菌MSR-1菌株，用Tris-HCl缓冲液悬浮，得悬浮液；
[0125] 3)超声波破碎悬浮液中的细胞；
[0126] 4)磁铁吸附破碎后的细胞，静置过夜，弃去上清，用磷酸盐缓冲液重新悬浮吸附到 的沉淀，超声波清洗，磁铁再次吸附，弃上清，将吸附到的沉淀用磷酸盐缓冲液悬浮，洗涤3 次，即得细菌磁颗粒。
[0127] 实施例14 一种细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒的制备方法
[0128] 该制备方法与实施例13不同的是，细菌磁颗粒的制备方法包括如下步骤：
[0129] (1)将趋磁细菌MSR-1菌株进行扩大培养。
[0130] (2)离心收集菌株（10000rpm，5min)，用适量Tris-HCl缓冲液(pH7.4)悬浮，得悬浮 液；
[0131] (3)超声波破碎悬浮液中的细胞，超声波破碎条件为:超声功率300w，超声时间5s， 间隔时间5s，超声次数90次，重复3次，至细胞完全破碎；
[0132] (4)磁铁吸附破碎后的菌体细胞，静置过夜后，弃去上清，用1 OmM磷酸盐缓冲液重 新悬浮吸附到的沉淀，超声波清洗，磁铁再次吸附，弃上清，磷酸盐缓冲液悬浮，重复洗涤3 次，超声波清洗条件为:超声功率80w，超声时间5s，间隔时间5s，超声次数50次；
[0133] (5)纯净的细菌磁颗粒在蒸馏水中超声波清洗两次，磁铁吸附，将吸附的细菌磁颗 粒用蒸馏水悬浮;冷冻干燥后-20 °C保存备用。
[0134] 实施例15-种细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒的制备方法
[0135] 该制备方法与实施例7不同的是，该方法还包括红细胞膜的制备方法，其包括如下 步骤：
[0136] (1)采集新鲜红细胞，用0.9% (W/V)NaCl溶液洗涤至上清澄清；
[0137] (2)弃上清，向压积红细胞中加入等体积的0.6% (W/V)NaCl溶液，混匀后室温作用 5分钟，离心(2000rpm，5min)并收集沉淀；
[0138] ( 3 )弃上清，加入等体积的0.2 % (W / V) N a C1溶液，混匀后室温作用5分钟， (3000rpm, lOmin)离心并收集沉淀；
[0139] (4)弃上清，加入等体积的蒸馏水，混匀后室温作用5分钟，离心（3000rpm，lOmin) 并收集沉淀并用PBS悬浮，即得红细胞膜。
[0140] 实施例16-种细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒的制备方法
[0141 ]该制备方法与实施例13不同的是，该方法还包括趋磁细菌MSR-1菌株的扩大培养， 其包括如下步骤：
[0142] a.在培养罐内加入第一培养基，107°C灭菌lOmin，静置lh后，将趋磁细菌MSR-1菌 株接种到培养罐中，进行第一次培养，获得第一培养液;第一次培养的条件为:起始pH值为 5.8，培养温度为30 °C，培养时间为5天，摇床转速为300转/分钟，培养过程中通入氧气，通入 氧气的方式为：间隔20min，通入50min氧气；
[0143] b.将第一培养液加入含有第二培养基的培养罐中，无氧状态进行第二次培养;第 二次培养的条件为:起始pH值为6.5，培养温度为25 °C，培养时间为2天，摇床转速为150转/ 分钟；
[0144] 其中，第一培养基由重量份数为7.5份的谷氨酰胺、2份麦芽糖醇、3份、0.7份泛酸 钙、0.7份酪蛋白酸钠、0.3份磷酸二氢钾、0.7份月桂酸肌氨酸和1.5份氯化钠组成；
[0145] 所述第二培养基由重量份数为2.5份蛋白胨、3份生物素、1.5份甘氨酸、0.75份酒 石酸钠、1.5份硝酸铵、1.5份磷酯酰丝氨酸和0.3份月桂醇硫酸酯钠的组成。
[0146] 对照例1
[0147] 该对照例与实施例16不同的是：
[0148] 第一次培养的条件为:起始pH值为5，培养温度为32°C，培养时间为5天，摇床转速 为200转/分钟，培养过程中一直通入氧气；
[0149] 第二次培养的条件为:起始pH值为7.2，培养温度为30°C，培养时间为2天，摇床转 速为250转/分钟；
[0150] 第一培养基由重量份数为7.5份的谷氨酰胺、3份、0.7份泛酸钙、0.7份酪蛋白酸 钠、〇. 3份磷酸二氢钾和1.5份氯化钠组成；
[0151] 第二培养基由重量份数为2.5份蛋白胨、1.5份甘氨酸、0.75份酒石酸钠、1.5份硝 酸铵、和0.3份月桂醇硫酸酯钠的组成。
[0152] 对照例2
[0153] 该对照例与实施例16不同的是：
[0154]第一次培养的条件为:起始pH值为6.2，培养温度为25 °C，培养时间为5天，摇床转 速为350转/分钟，培养过程中不通入氧气;第二次培养的条件为:起始pH值为6，培养温度为 15 °C，培养时间为2天，摇床转速为100转/分钟；
[0155] 第一培养基由重量份数为7.5份的谷氨酰胺、2份麦芽糖醇、3份、0.7份泛酸钙、0.7 份酪蛋白酸钠、〇. 3份磷酸二氢钾、2份琼脂、0.7份月桂酸肌氨酸和1.5份氯化钠组成；
[0156] 第二培养基由重量份数为2.5份蛋白胨、3份生物素、1.5份甘氨酸、0.75份酒石酸 钠、1.5份硝酸铵、2份琼脂、2份葡萄糖、1.5份磷酯酰丝氨酸和0.3份月桂醇硫酸酯钠的组 成。
[0157] 试验例1红细胞血型抗体检测
[0158] 1.红细胞反定型检测
[0159] 用已知血型的A型红细胞、B型红细胞、0型红细胞按上述【具体实施方式】制备A型细 囷磁颗粒红细胞I旲复合颗粒、B型细困磁颗粒红细胞|旲复合颗粒、0型细困磁颗粒红细胞月旲 复合颗粒，以替代新鲜红细胞进行ΑΒ0血型系统反定型，即血浆中抗A、抗B检测。
[0160] 检测步骤如下：
[0161] (1)取洁净试管三支，分别标记Α、Β、0;
[0162] (2)各加入待检样本(血清或血浆)50ul;
[0163] (3)对应管分别加入制备的A型细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒、B型细菌磁颗粒红 细胞膜复合颗粒、〇型细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒50ul;
[0164] (4)混匀，室温反应lmin;
[0165] (5)磁铁吸附，振荡试管并判定结果，若细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒发生凝集， 则为阳性反应;反之，若细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒不发生凝集，则为阴性反应。反应格 局判定标准如下：
[0166]
[0167] 2.红细胞不规则抗体检测
[0168] 用已知血型的覆盖我国临床有意义红细胞抗原的多人份0型红细胞按上述具体实 施方式制备成细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒，以替代新鲜红细胞进行红细胞不规则抗体检 测 。
[0169] 检测步骤如下：
[0170] (1)取洁净试管，做好标记；
[0171] (2)加入待检样本(血清或血浆)50ul;
[0172] (3)加入上述细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒50ul;
[0173] (4)混匀，室温反应lmin;
[0174] (5)磁铁吸附，振荡试管并判定结果，若细菌磁颗粒红细胞膜复合颗粒发生凝集 (阳性反应），表明待检样本中含有与该颗粒抗原相对应的抗体，反之，若