一种批量染色制作组织切片的自动化方法
【专利摘要】本发明公开了一种批量染色制作组织切片的自动化方法，该方法包括：(1)将待加工的样本浸泡在含有细胞构筑染料的加工液中；(2)加工液中的染料分子从样本表面处向样本深处渗透，经过一定时间后，样本表面的浅层部分细胞构筑被染色；(3)利用刀具对样本已染色的浅层部分进行切片；(4)加工液中的染料分子从切片断面处向样本深处渗透至浅层部分细胞构筑被染色，将通过计算机控制，将样本抬升与切片厚度相同的高度；(5)重复上述步骤(3)～(4)，直至将整个样本切成已细胞构筑染色的脑片。本发明方法在染色过程中利用在切片间隙染料的自然渗透，避免了手工操作的干扰，省时省力，特别适合批量染色、制作组织切片。
【专利说明】
一种批量染色制作组织切片的自动化方法
技术领域
[0001 ]本发明涉及生物组织切片的制作，具体地指一种批量染色制作组织切片的自动化方法，属于生命科学研究技术领域。
【背景技术】
[0002]为了在介观或微观水平研究不同脑区的神经结构与功能信息，研究者通常需要将脑组织切成100微米或更薄的脑片，再利用标记与成像手段对这些脑片逐片进行染色、成像。
[0003]由于神经系统以脑区划分，不同脑区的神经存在较大差异，因此，在对神经结构与功能信息进行分析时，需要首先对其所在脑区进行定位。目前，实现脑区定位的方法主要是利用不同脑区细胞构筑分布的差异性来进行，对脑片进行细胞构筑染色后，可以获得该脑片的细胞构筑信息，对照参考脑图谱，如《AlIen Reference Atlas》，比对相似成像结果，以确认所在脑区。然而，这样的信息获取，通常是经历切片后再逐片进行染色的手工过程，即使小鼠鼠脑外轮廓尺寸也达10几毫米，需要切成几十或数百张脑片。生物学实验往往需要进行大量实验以获得统计性规律，消除个体差异性带来的误差。因此，这种低效费力的切片、染色方法不能满足现有研究的需要。亟待发展一种自动化批量染色、制作组织切片的方法。
【发明内容】
[0004]本发明目的在于克服上述现有技术的不足而提供一种批量染色制作组织切片的自动化方法，该方法包括以下步骤:
[0005](I)将待加工的样本浸泡在含有细胞构筑染料的加工液中；
[0006](2)加工液中的染料分子从样本表面处向样本深处渗透，经过一定时间后，样本表面的浅层部分细胞构筑被染色；
[0007](3)利用刀具对样本已染色的浅层部分进行切片；
[0008](4)加工液中的染料分子从切片断面处向样本深处渗透至浅层部分细胞构筑被染色，将通过计算机控制，将样本抬升与切片厚度相同的高度；
[0009](5)重复上述步骤(3)?(4)，直至将整个样本切成已细胞构筑染色的脑片。
[0010]在上述技术方案中，所述样本侧面涂有防止染料渗透的介质。
[0011 ]本发明方法具有以下优点:
[0012]将染色与切片过程自动化进行，本发明方法的操作是先对样本表面的浅层部分细胞构筑染色，然后对样本已染色的浅层部分进行切片，并循环上述“染色-切片”的操作，因而能够通过自动控制的方式实现本发明方法。该方法与原有先切片再逐片染色的工作方式相比，提高了对脑片进行逐片处理的效率。染色过程利用在切片间隙染料的自然渗透，避免了手工操作的干扰，省时省力。
[0013]本发明特别适合批量染色、制作组织切片，为大规模获取神经科学研究的实验数据提供了新的实验工具。
【附图说明】
[0014]图1为通过本发明方法批量染色制作组织切片的示意图。
【具体实施方式】
[0015]下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
[0016]如图1所示，本发明方法先将样本I固定在水槽3中，水槽3中充满了含有细胞构筑染料的加工液2，将样本I完全淹没。本发明所用样本的侧面涂有防止染料渗透的介质，例如指甲油，使得染料无法从样本的侧面渗透。静置足够时间后，加工液2向样本I中渗透，使得表面浅层样本的细胞构筑被染色。利用刀具5对样本I进行切片，使得已染色的浅层部分4被切离样本，暴露下一个待染色、切片的表面。加工液中的染料分子从切片断面处向样本深处渗透至浅层部分细胞构筑被染色，通过计算机自动控制，将样本抬升与切片厚度相同的高度。染色-切片过程循环可自动化重复进行，直至样本被切完。
【主权项】
1.一种批量染色制作组织切片的自动化方法，其特征在于，包括: (1)将待加工的样本浸泡在含有细胞构筑染料的加工液中； (2)加工液中的染料分子从样本表面处向样本深处渗透，经过一定时间后，样本表面的浅层部分细胞构筑被染色； (3)利用刀具对样本已染色的浅层部分进行切片； (4)加工液中的染料分子从切片断面处向样本深处渗透至浅层部分细胞构筑被染色，将通过计算机控制，将样本抬升与切片厚度相同的高度； (5)重复上述步骤(3)?(4)，直至将整个样本切成已细胞构筑染色的脑片。2.根据权利要求1所述批量染色制作组织切片的自动化方法，其特征在于:所述样本侧面涂有防止染料渗透的介质。
【文档编号】G01N1/28GK105910861SQ201610228177
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年4月13日
【发明人】龚辉, 李向宁, 袁菁
【申请人】华中科技大学