专利名称：一种中草药动物生长促进剂的制作方法
技术领域：
本发明属于动物饲料添加剂领域，具体地说是一种中草药动物生长促进剂，该促进剂中含有抑制磷酸二酯酶活性的组分，所述的抑制磷酸二酯酶活性的组分对于磷酸二酯酶(Phosphodiesterase，简称PDE)活性抑制率大于20％。
背景技术：
使用饲料添加剂提高动物生长性能是畜牧养殖业的重要手段。目前可见到的饲料添加剂主要有类固醇激素、β-受体兴奋剂、生长激素类促蛋白合成剂、外源性环核苷酸制剂(cAMP)、天然物中草药饲料添加剂、酶制剂、微生态制剂、寡糖(低聚糖)和有机酸等，其中前4类或由于成本高，或应用范围小，或安全性问题禁止或严格受到限制。外源性cAMP制剂虽然具有安全，作用范围广的有点，但鉴于任何cAMP制剂都不能确保能够到达正常情况下它在细胞内可能起作用的部位，加之体内半衰期短也限制了作用的发挥。天然物中草药饲料添加剂、酶制剂、微生态制剂、寡糖(低聚糖)和有机酸是今后研究比较多的领域，其中酶制剂、微生态制剂、寡糖(低聚糖)和有机酸由于工艺复杂成本过高和效果不稳定等因素而不易推广。中草药制剂由于其安全、有效、作用既快又持久等固有优势，又顺应了人类回归自然的趋势，已经被欧盟等列为优先发展的领域。在美国，天然物中草药饲料添加剂的使用也得到了认可。亚洲的一些国家和企业如日本和正大集团已经开始在中国国内寻找合作伙伴，用中药生产既安全又具有保健作用的“汉方鸡″；而中草药饲料添加剂是中国人创立的，具有中国特色的宝贵财富，理应继续发扬光大。
虽然人们对中草药饲料添加剂寄予了很大的希望，而悠久的历史也证明了其有效性和安全性然而不足之处是有效成份不明，作用原理研究缺乏客观指标，制剂工艺粗糙，剂型单一，用量大等都限制了其作用的发挥和应用范围的扩大更难以适应当前国际市场的需求，因此市场上更需要进行剂型改革和有效成份的研究。为此，市场上需要一种新型的中草药动物生长促进剂。
发明内容
本发明的目的在于提供一种中草药动物生长促进剂，该促进剂中含有抑制磷酸二酯酶活性的组分，所述的抑制磷酸二酯酶活性的组分对于磷酸二酯酶活性抑制率大于20％。
本发明的目的是下述的另一技术方案实现的 所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为牛蒡子提取物； 所述的牛蒡子提取物的提取方法为 A.将牛蒡子原料药加水浸泡30min后，先用武火煎至沸腾，再用文火煎煮30min，得到首次煎液置于另一容器中； B.将所述的煎煮过的牛蒡子原料药中再加水煎煮30min，得到二次煎液，将该二次煎液与首次煎液合并，得到总煎液； C.将所述的总煎液减压浓缩，使生药浓度达到4g/ml，得到所述的牛蒡子提取物，即为含有抑制磷酸二酯酶活性的组分； 所述的动物试验的结果证明，上述的牛蒡子提取物具有抑制磷酸二酯酶活性，通过升高内源性cAMP含量，进而促进动物生长的潜能。
本发明的目的是由下述的另一技术方案实现的 所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为牛蒡子苷。
本发明的目的是下述的另一技术方案实现的 一种中草药动物生长促进剂，所述的中草药动物生长促进剂中含有抑制磷酸二酯酶活性的组分，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为芦根、香附、黄芪、泡桐叶，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为芦根1-50，香附1-50，黄芪1-150，泡桐叶1-500； 一种中草药动物生长促进剂的制备方法，所述的中草药动物生长促进剂含有抑制磷酸二酯酶活性的组分，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为芦根、香附、黄芪、泡桐叶，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为芦根1-50，香附1-50，黄芪1-150，泡桐叶1-500，制备步骤如下 按上述配比将所述的芦根、香附、黄芪、泡桐叶分别进行粉碎处理并混合均匀，得到混合粉末并过筛，得到所述的中草药动物生长促进剂。
所述的中草药动物生长促进剂的使用方法为将该所述的中草药动物生长促进剂拌入于动物饲料中给动物喂食；所述的中草药动物生长促进剂与动物饲料的重量比为0.5％-4％； 本发明的目的是下述的另一技术方案实现的 一种中草药动物生长促进剂，所述的中草药动物生长促进剂中含有抑制磷酸二酯酶活性的组分，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为香附、黄芪、泡桐叶、小茴香，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为香附1-50，黄芪1-150，泡桐叶1-200，小茴香1-480； 一种中草药动物生长促进剂的制备方法，所述的中草药动物生长促进剂含有抑制磷酸二酯酶活性的组分，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为香附、黄芪、泡桐叶、小茴香；所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为香附1-50，黄芪1-150，泡桐叶1-200，小茴香1-480；制备步骤如下 按上述配比将所述的香附、黄芪、泡桐叶、小茴香分别进行粉碎处理并混合均匀，得到混合粉末并过筛，得到所述的中草药动物生长促进剂。
所述的中草药动物生长促进剂的使用方法为将该所述的中草药动物生长促进剂拌入于动物饲料中给动物喂食；所述的中草药动物生长促进剂与动物饲料的重量比为2％。
本发明与现有技术相比具有的有益效果为 本发明中含有从天然物中草药中筛选的具有抑制磷酸二酯酶活性的药物、有效组合或其有效成分。该成分可以提高机体尤其是骨骼肌细胞的内源性cAMP，继而激活cAMP依赖性蛋白激酶，最终抑制蛋白质的水解，促进蛋白质积累，增加肌肉重量，从而促进动物生长。
具体实施例方式 实施例1 一种中草药动物生长促进剂，该促进剂中含有抑制磷酸二酯酶活性的组分；所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为牛蒡子提取物； 所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分的提取方法为 A.将牛蒡子原料药加水浸泡30min后，先用武火煎煮至沸腾，再用文火煎煮30min，得到首次煎液置于另一容器中；所述的原料药与水的重量比为1∶10； B.将所述的煎煮过的牛蒡子原料药中再加水煎煮30min，得到二次煎液，将该二次煎液与首次煎液合并，得到总煎液；所述的煎煮过的牛蒡子原料药与水的重量比为1∶10； C.将所述的总煎液减压浓缩处理，使生药浓度达到4g/ml，得到该原料药的浓缩液，所述的浓缩液即为所述的牛蒡子提取物，即为含有抑制磷酸二酯酶活性的组分；所述的减压浓缩的温度为70℃； D.将所述的浓缩液进行喷雾干燥处理，得到牛蒡子提取物颗粒，即得成品。
本实施例中所述的煎煮采用的仪器为YZN50型液体真空浓缩煎药机， 所述的减压浓缩处理采用的仪器为R501型旋转蒸发器； 本实施例中所述的喷雾干燥处理采用的仪器为YC-015型实验喷雾干燥机。
本实施例中所述的牛蒡子原料药为常规产品，可以在市场购买得到； 上述的牛蒡子提取物具有抑制磷酸二酯酶活性，通过升高内源性cAMP含量，进而促进动物生长的潜能。
本实施例中，上述的牛蒡子提取物原料药的提取物基于以下机理，能够促进动物生长一切生命活动都是在细胞信息传递和调控下进行的，大多数饲料添加剂对动物体的作用，实际上也是体内细胞对胞外信息的转导，并最终在胞内产生特定效应的一系列复杂的信号转导和调控的过程。在这一过程中，大多数饲料添加剂是作为第一信使作用于细胞膜表面的受体，或直接作用于受体，或模拟第二信使cAMP的作用，激活蛋白激酶导致蛋白磷酸化，最终实现细胞效应。可见cAMP是信息转导的中心环节在体内cAMP水平受腺苷酸环化酶(AC)和磷酸二酯酶(PDE)的调节。AC使cAMP生成增加，PDE使cAMP分解而减少，而且越来越多的研究证明，PDE是调节cAMP水平的关键。
研究证明PDE最大的特点是不同组织中分布有不同的亚型，具有不同的酶动力学与理化性质，有不同的底物特性、组织细胞分布与亚细胞定位，对激动剂与抑制剂的敏感性也不同。根据这一特点，医学上，以选择性PDE同功酶抑制剂为探针，来评价各种PDE同功酶在完整组织环核苷酸含量中的作用，为寻找新药开辟新的方向已经发现的PDE抑制剂类药物有促智药、抗血栓药、血管扩张药、平喘药、抗变态反应药、抗抑郁药。这些作用主要是由于抑制PDE，升高了环核苷酸水平，激活蛋白激酶(APK)，增加蛋白磷酸化所致。同理，鉴于cAMP在动物体内的重要性和PDE的广泛分布与特异性作用，选用特异性的抑制剂，就能实现相应的促进生产性能的目的。
医学领域的相关研究证明中草药或其提取物对PDE活性具有显著的抑制作用。如服用中药黄芪的有效部分或全草后可以抑制血小板磷酸二酯酶(PDE)活性，增加血小板内cAMP含量，以发挥抑制血小板聚集作用心肌细胞PDE活性抑制cAMP含量上升继而导致心肌收缩力加强，这些从分子水平揭示了中药的益气化瘀作用。相关研究也证明一些中药的有效成份如两面针碱、槲皮素、三氟啦嗪对钙调素依赖型PDE具有明显的抑制作用。日本有人还报道了一些中药复方如“麻杏石甘汤″等对PDE的抑制作用说明，中草药及其有效成份与复方制剂对PDE的抑制作用是客观存在的。
在兽医领域大量的研究证明泌乳等生产性能与cAMP水平显著正相关，中草药通过提高cAMP水平，对泌乳、增重、产蛋、产毛等生产性能有显著的提高作用。间接提示，通过抑制PDE活性提高cAMP水平，进而提高生产性能是可行的。
既然大多数生产增进剂的作用是通过cAMP发挥，而PDE是调节cAMP水平的关键，中草药又确具有抑制PDE活性的作用，而且，不同的PDE同功酶组织分布和生理意义又各不相同，不同的PDE抑制剂的作用也具有相对特异性，因此以PDE抑制效应为指标，进行中草药饲料添加剂的筛选和应用，就能有选择性地，更好地提高机体的生物调节水平，实现增产增效的目的。
实施例2 本实施例中，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为牛蒡子苷； 所述的牛蒡子苷购自(arctin)中国药品生物制品检定所(北京)； 本实施例和实施例1的检测结果如下 所述的牛蒡子提取物与所述的牛蒡子苷对小鼠骨骼肌cAMP及其磷酸二酯酶活性和生长性能的影响 1.材料与方法 1.1仪器 旋转蒸发仪、W-O升降恒温油水浴锅(上海申顺生物科技有限公司)，循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)，HZQ-F160全温度振荡培养箱(太仓市华美生化仪器厂)，高效液相色谱仪(HPLC)(Agilent 1100LC，安捷伦科技有限公司)，酶标仪(BIO-RAD，美国)。
1.2主要试剂 cAMP标准品(Sigma，美国)，牛蒡子苷(arctiin)(中国药品生物制品检定所，北京)，茶碱(Alexis，瑞士)，甲醇(色谱纯)(Fisher，美国)。
1.3实验动物与处理方法 将购自北京大学医学部实验动物中心的断奶ICR小鼠雌雄各半共80只，随机分为10组，每组8只，室温分笼饲养，自由采食，自动饮水。
实验分为生理盐水对照组和不同剂量的牛蒡子提取物、牛蒡子苷及茶碱组，分别灌服0.5ml的生理盐水以及各浓度的溶液。每天一次，给药时间基本一致，共14天，每天对食物进行称重，计算每只小鼠的采食量；第一次给药前和第14天各称重一次。
各组每只小鼠的给药剂量分别牛蒡子提取物1.00g、0.50g和0.25g；牛蒡子苷1.50mg、0.75mg和0.38mg；茶碱0.75mg、0.38mg和0.19mg。
平均日采食量(g/d·只)＝(给料量-余料量)/小鼠数量 饲料转化率＝日增重量/日采食量 1.4ELISA法测定骨骼肌和血浆cAMP含量 第14天给药4h后，断头处死小鼠，采集全血于肝素抗凝(每毫升全血20U肝素)的离心管中，3000r/min 4℃离心15min，收集血浆。之后立即取后肢骨骼肌组织，快速冷冻，并置于-80℃冰箱中保存备用。
按照R&D Systems试剂盒(R&D Systems，美国)的使用说明测定骨骼肌组织和血浆中cAMP含量，根据标准曲线计算血浆中cAMP含量。
1.5HPLC法测定骨骼肌cAMP PDE活性 该方法记载于学术论文《猪嗜中性粒细胞cAMP磷酸二酯酶的提取与活性检测》(北京农学院学报，2003，18(4)241-244.) 1.5.1HPLC检测条件 色谱柱采用安捷伦分析柱ZORBAX Eclipse XDB-C18，规格为150mm×4.6，5μm，检测波长为254nm，灵敏度为0.05AUFS，柱温为25℃，cAMP测定流速为1.0ml/min。分析流动相由甲醇和50mmol/L磷酸缓冲液(pH 6.6)组成，容积比为1∶9。
1.5.2cAMP PDE制备 第14天给药4h后，断头处死小鼠，立即取后肢肌肉，称重，按每克组织加9ml钙镁PBS(pH 7.4)的比例，冰浴条件下玻璃匀浆器手动匀浆，匀浆立即使用或≤-20℃保存备用。
1.5.3cAMP PDE水解cAMP反应 cAMP水解反应100μl反应体系中，cAMP(100μmol/L)70μl，酶样品量20μl，PBS(pH 7.4)10μl；空白对照管cAMP(100μmol/L)70μl，PBS 30μl。
反应条件在35℃震荡式培养箱反应30min，然后于沸水浴中加热2min终止反应，4℃、15000r/min离心30min，取80μl上清液，用超纯水做10倍稀释，过直径0.22μm微孔滤膜，吸取10μl进行HPLC检测，平行进样两次。
1.5.4cAMP PDE活性计算 PDE活性以底物水解百分率表示 PDE活性％＝(空白对照管吸收峰积分面积-加酶管吸收峰积分面积)/空白对照管吸收峰积分面积×100％ 1.6统计学分析 数据用平均数±标准误(x±s)表示，采用独立样本T-test、单因子方差分析(one-way ANOVA，LSD)和直线相关性分析；P＜0.05表示差异显著，P＜0.001和P＜0.01表示差异极显著。
2.结果与分析 2.1牛蒡子提取物、牛蒡子苷和茶碱对小鼠生长性能的影响 在灌喂牛蒡子提取物和牛蒡子苷溶液后数小时各剂量组的小鼠出现活动性降低，但会逐渐恢复，至下次给药前完全恢复正常，随着给药次数的增加，小鼠活动性降低的时间逐渐缩短。对照组和茶碱各组在给药后活动性降低的时间较短。
三个剂量的牛蒡子提取物，1.50mg和0.75mg的牛蒡子苷以及三个剂量的茶碱与生理盐水相比，都显著或极显著地促进了小鼠的增重(P＜0.05，或P＜0.01，或P＜0.001)；但剂量为1.00g和0.50g的牛蒡子提取物和三个剂量的牛蒡子苷都显著或极显著地降低了小鼠的采食量(P＜0.01，或P＜0.01，或P＜0.001)，而茶碱则对采食量没有显著性影响(P＞0.05)；牛蒡子提取物、牛蒡子苷和茶碱各个剂量组的饲料转化率都极显著高于生理盐水对照组(P＜0.01，或P＜0.001)。
结果见表1。
2.2牛蒡子提取物、牛蒡子苷和茶碱对小鼠骨骼肌cAMP PDE活性、cAMP含量和血浆cAMP含量的影响 牛蒡子提取物、牛蒡子苷和茶碱各组在给药后4h骨骼肌cAMP PDE活性均有所降低，与生理盐水对照组相比，各剂量牛蒡子提取物组、0.75mg和0.38mg的牛蒡子苷组，以及0.38mg和0.19mg的茶碱均极显著降低(P＜0.01或P＜0.001)，1.5mg的牛蒡子苷和0.75mg的茶碱显著降低了骨骼肌cAMP PDE的活性(P＜0.05)。
给药后4h，各组小鼠骨骼肌组织中cAMP含量均高于生理盐水对照组。牛蒡子提取物各组、0.75mg和0.38mg的牛蒡子苷组以及0.38mg和0.19mg的茶碱组都极显著高于对照组(P＜0.01或P＜0.001)，0.75mg的茶碱组显著高于对照组(P＜0.05)，而1.5mg的牛蒡子苷与对照组相比则差异不显著(P＞0.05)。另外，骨骼肌组织cAMP含量与cAMP PDE活性具有极显著的负相关性，相关系数为r＝-0.402(P＜0.001)。
实验组小鼠血浆cAMP水平均高于生理盐水对照组。牛蒡子提取物的三个剂量组和茶碱0.38mg剂量组的cAMP水平极显著升高(P＜0.01或P＜0.001)，牛蒡子苷的三个剂量组和茶碱0.19mg剂量组则显著升高(P＜0.05)。此外，血浆cAMP含量与骨骼肌组织cAMP含量呈极显著的正相关性，相关系数为r＝0.553(P＜0.001)；与骨骼肌组织cAMP PDE活性呈负相关，相关系数为r＝-0.436，但差异不显著(P＞0.05)。
结果见表2。
表1牛蒡子、牛蒡子苷和茶碱对小鼠生长性能的影响
与生理盐水对照组相比，a表示P＜0.05，b表示P＜0.01，c表示P＜0.001； 表2牛蒡子提取物、牛蒡子苷和茶碱对小鼠cAMP PDE活性和cAMP含量的影响
与生理盐水对照组相比，a表示P＜0.05，b表示P＜0.01，c表示P＜0.001。
3.结论 本研究结果表明牛蒡子提取物和牛蒡子苷可以通过抑制骨骼肌cAMPPDE，且磷酸二酯酶活性抑制率大于20％，提高内源性cAMP水平，降低采食量，提高饲料转化率，促进小鼠生长。因此，以PDE为靶点，筛选骨骼肌特异性中药PDE抑制剂作为新型动物生长促进剂具有可行性。
实施例3 本实施例是本发明的另一技术方案，所用原料(组分)的品质与实施例1相同； 一种中草药动物生长促进剂，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为芦根、香附、黄芪、泡桐叶，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为 芦根1-50，香附1-50，黄芪1-150，泡桐叶1-500； 本实施例中采用的单位是克，也可以是毫克，也可以是千克； 一种中草药动物生长促进剂的制备方法，所述的中草药动物生长促进剂含有抑制磷酸二酯酶活性的组分，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为芦根、香附、黄芪、泡桐叶，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为芦根1-50，香附1-50，黄芪1-150，泡桐叶1-500，制备步骤如下 按上述配比将所述的芦根、香附、黄芪、泡桐叶分别进行粉碎处理并混合均匀，得到混合粉末并过筛，得到所述的中草药动物生长促进剂；所述的混合粉末的粒径为0.5-2mm；所述的粉碎处理中，采用的设备为CD65*27型饲料粉碎机，由山东章丘市宇龙机械有限公司生产。
所述的中草药动物生长促进剂的使用方法为将该所述的中草药动物生长促进剂拌入于动物饲料中给鸡喂食；所述的中草药动物生长促进剂与动物饲料的重量比为0.5％-4％；所述的鸡的品种为北京油鸡。
实施例4 本实施例是实施例3基础上的优选方案，所用原料(组分)的品质与实施例3相同； 一种中草药动物生长促进剂，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为芦根、香附、黄芪、泡桐叶，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为 芦根1，香附1，黄芪3，泡桐叶10； 本实施例中采用的单位是克，也可以是毫克，也可以是千克； 所述的中草药动物生长促进剂的使用方法为将该所述的中草药动物生长促进剂拌入于动物饲料中给鸡喂食；所述的中草药动物生长促进剂与动物饲料的重量比为0.5％-4％；所述的鸡的品种为北京油鸡。
本实施例的检测结果如下 1动物实验 选用50日龄健康北京油鸡120只，雌雄不限，随机分为4组(高、中、低三个中药添加剂组和一个对照组)，每组设3个重复，每个重复10只。采用笼养，自由采食及饮水。
设置2-3天的预适应期然后开始给药测定实验。正式试验期为20天。
2中药添加剂的处理及应用 将本实施例中所述的细末，按照低剂量组添加量为0.5％，中剂量组为2％，高剂量组为3.5％。按每只鸡实验期间耗料量为5kg计算，共需中药添加剂为9kg。
3测定指标 3.1鸡舍温度、湿度检测 试验在高温季节时进行，每天上午8:00，下午2:00，晚上20:00，3次测量鸡舍温度、湿度，并计算日平均温度和湿度。
3.2试验鸡体重、血样采集与耗料量检测 实验前及用药后第5、10、15和20天早晨空腹秤各笼鸡的体重。分别自每组中抽取6只鸡(每个重复3只)，静脉采血2mL(肝素抗凝)。
记录各组每天的耗料量逐日记录每笼鸡每日的给料量，余料量。
3.3中草药动物生长促进剂对鸡cAMP PDE活性的影响 本实施例的检测方法与实施例2相同，按照R&D Systems试剂盒(R&DSystems，美国)的使用说明测定血浆中cAMP含量，根据标准曲线计算血浆中cAMP含量。通过检测鸡血浆中cAMP浓度的变化，反映出所述的中草药动物生长促进剂对鸡cAMP PDE活性的影响； 4.结果 表3所述的中草药动物生长促进剂对北京油鸡生长的影响(单位g)
由上表可见，0.5％中药组增重率最高，为64.34％。
在喂养试验中，0.5％中药组增重率高于对照组，也高于2％和4％中药组，说明所选方剂在低剂量既对北京油鸡增重具有明显促进作用。分组统计结果显示，0.5％组对中等体重组在给药开始后第一周即产生了显著的增重效应，并一直持续到试验结束。
表4所述的中草药动物生长促进剂对鸡血浆中cAMP的影响
对cAMP的水平的测定结果表明，中药组鸡血浆中cAMP含量明显上升，提示所选中药复方具有抑制鸡体内磷酸二酯酶活性的作用，且磷酸二酯酶活性抑制率大于20％，进而具有提高cAMP水平的作用。
结果说明，以磷酸二酯酶活性为指标，本实施例中所述的中草药动物生长促进剂对北京油鸡的生长具有见效快，用量小的优势。
实施例5 本实施例是实施例3基础上的优选方案，所用原料(组分)的品质与实施例3相同； 一种中草药动物生长促进剂，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为芦根、香附、黄芪、泡桐叶，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为 芦根23，香附23，黄芪55，泡桐叶125； 本实施例中采用的单位是克，也可以是毫克，也可以是千克； 所述的中草药动物生长促进剂的使用方法为将该所述的中草药动物生长促进剂拌入于动物饲料中给鸡喂食；所述的中草药动物生长促进剂与动物饲料的重量比为0.5％-4％；所述的鸡的品种为北京油鸡。
本实施例的检测结果如下 本实施例的检测方法与实施例4相同； 表5所述的中草药动物生长促进剂对北京油鸡生长的影响
由上表可见，0.5％中药组增重率最高，为66.29％。
在喂养试验中，0.5％中药组增重率高于对照，也高于2％和4％中药组，说明所选方剂在低剂量既对北京油鸡增重具有明显促进作用。分组统计结果显示，0.5％组对中等体重组在给药开始后第一周即产生了显著的增重效应，并一直持续到试验结束。
表6所述的中草药动物生长促进剂对鸡血浆中cAMP的影响
对cAMP的水平的测定结果表明，中药组鸡血浆中cAMP含量明显上升，提示所选中药复方具有抑制鸡体内磷酸二酯酶活性的作用，且磷酸二酯酶活性抑制率大于20％，进而具有提高cAMP水平的作用。
结果说明，以磷酸二酯酶活性为指标，本实施例中所述的中草药动物生长促进剂对北京油鸡的生长具有见效快，用量小的优势。
实施例6 本实施例是实施例3基础上的优选方案，所用原料(组分)的品质与实施例3相同； 一种中草药动物生长促进剂，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为芦根、香附、黄芪、泡桐叶，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为 芦根47，香附47，黄芪150，泡桐叶450； 本实施例中采用的单位是克，也可以是毫克，也可以是千克； 所述的中草药动物生长促进剂的使用方法为将该所述的中草药动物生长促进剂拌入于动物饲料中给鸡喂食；所述的中草药动物生长促进剂与动物饲料的重量比为0.5％-4％；所述的鸡的品种为北京油鸡。
本实施例的检测结果如下 本实施例的检测方法与实施例3相同； 表7所述的中草药动物生长促进剂对北京油鸡生长的影响
由上表可见，0.5％中药组增重率最高，为68.07％。
在喂养试验中，0.5％中药组增重率高于对照，也高于2％和4％中药组，说明所选方剂在低剂量既对北京油鸡增重具有明显促进作用。分组统计结果显示，0.5％组对中等体重组在给药开始后第一周即产生了显著的增重效应，并一直持续到试验结束。
表8所述的中草药动物生长促进剂对鸡血浆中cAMP的影响
对cAMP的水平的测定结果表明，中药组鸡血浆中cAMP含量明显上升，提示所选中药复方具有抑制鸡体内磷酸二酯酶活性的作用，且磷酸二酯酶活性抑制率大于20％，进而具有提高cAMP水平的作用。
结果说明，以磷酸二酯酶活性为指标，本实施例中所述的中草药动物生长促进剂对北京油鸡的生长具有见效快，用量小的优势。
实施例7 本实施例是本发明的另一技术方案，所用原料(组分)的品质与实施例1相同； 一种中草药动物生长促进剂，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为香附、黄芪、泡桐叶、小茴香，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为 香附1-50，黄芪1-150，泡桐叶1-200，小茴香1-480； 本实施例中采用的单位是克，也可以是毫克，也可以是千克； 一种中草药动物生长促进剂的制备方法，所述的中草药动物生长促进剂含有抑制磷酸二酯酶活性的组分，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为香附、黄芪、泡桐叶、小茴香，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为香附1-50，黄芪1-150，泡桐叶1-200，小茴香1-480，制备步骤如下 按上述配比将所述的香附、黄芪、泡桐叶、小茴香，分别进行粉碎处理并混合均匀，得到混合粉末并过筛，得到所述的中草药动物生长促进剂。所述的混合粉末的粒径为0.5-2mm；所述的粉碎处理中，采用的设备为CD65*27型饲料粉碎机，由山东章丘市宇龙机械有限公司生产。
所述的中草药动物生长促进剂的使用方法为将该所述的中草药动物生长促进剂拌入于动物饲料中给猪喂食；所述的中草药动物生长促进剂与动物饲料的重量比为2％；所述的猪的品种为市场上的常规品种，可以是约克夏猪、兰德瑞斯猪、杜洛克猪、汉普夏天猪、河套大耳猪、迪卡猪中的一种。
实施例8 本实施例是实施例7基础上的优选方案，所用原料(组分)的品质与实施例7相同； 一种中草药动物生长促进剂，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为香附、黄芪、泡桐叶、小茴香，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为 香附1，黄芪1，泡桐叶3，小茴香10； 本实施例中采用的单位是克，也可以是毫克，也可以是千克； 本实施例中，选用断奶仔猪进行试验，检测该动物生长促进剂的效果。因为，仔猪断奶之后环境饮食发生变化，机体容易发生疾病。磷酸二酯酶抑制作用中药可能通过提高细胞环核苷酸水平和免疫力，改善机体机能状态减少疾病发生促进生长发育。
本实施例中，检测结果如下 磷酸二酯酶抑制作用中药复方对断奶仔猪的影响 1.材料和方法 1.1实验动物 河南焦作地区某商品猪猪场，选两窝临床检查健康的断奶仔猪(断奶后8天)，分为两组，其中对照组7头，实验组9头。
1.2药物 以本实施例中所述的粉末定组成复方2％的比例饲料添加。
1.3测定指标 试验期间观察仔猪食欲、粪便及健康状况。
2.结果 2.1综合观察 试验组精神状态良好，被毛平顺有光泽，皮肤色红健康，无发病死亡。
对照组精神状态良好，被毛凌乱，肤色不如试验组理想，也无发病死亡现象。
2.2体重变化 表9所述的中草药动物生长促进剂对断奶仔猪体重的影响 (单位kg)
由表7可见，两组断奶仔猪的体重，初始时试验组较对照组多8.3kg，第10天多9.8kg，第20天多15kg。
2.3所述的中草药动物生长促进剂对猪cAMP PDE活性的影响 本实施例的检测方法与实施例2相同，按照R&D Systems试剂盒(R&DSystems，美国)的使用说明测定血浆中cAMP含量，根据标准曲线计算血浆中cAMP含量。通过检测猪血浆中cAMP浓度的变化，反映出所述的中草药动物生长促进剂对猪cAMP PDE活性的影响； 表10所述的中草药动物生长促进剂对断奶仔猪血浆中cAMP的影响
对cAMP的水平的测定结果表明，中药组猪血浆中cAMP含量明显上升，提示所选中药复方具有抑制猪体内磷酸二酯酶活性的作用，且磷酸二酯酶活性抑制率大于20％，进而具有提高cAMP水平的作用。
3.讨论与结论 中药一般有一定的气味，在饲料添加初期对食欲有一定的影响。本试验未观察到明显的适口性反应。体重的变化说明，添加中药增加显著，而且被毛平顺有光泽，皮肤色红健康，从经验预示身体健壮后期生长更快。显示磷酸二酯酶抑制作用中药复方有望显著促进断奶仔猪体重的生长。本实施例中所述的中草药动物生长促进剂猪的生长具有见效快，用量小的优势。
实施例9 本实施例是实施例7基础上的优选方案，所用原料(组分)的品质与实施例7相同； 一种中草药动物生长促进剂，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为香附、黄芪、泡桐叶、小茴香，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为 香附23，黄芪23，泡桐叶55，小茴香125； 本实施例中采用的单位是克，也可以是毫克，也可以是千克； 本实施例的检测结果如下 本实施例的检测方法与实施例8相同； 表11所述的中草药动物生长促进剂对断奶仔猪体重的影响(单位kg)
由表11可见，两组断奶仔猪的体重，初始时试验组较对照组多5.4kg，第10天多8.1kg，第20天多13.4kg。
表12所述的中草药动物生长促进剂对断奶仔猪血浆中cAMP的影响
对cAMP的水平的测定结果表明，中药组猪血浆中cAMP含量明显上升，提示所选中药复方具有抑制猪体内磷酸二酯酶活性的作用，且磷酸二酯酶活性抑制率大于20％，进而具有提高cAMP水平的作用。
讨论与结论 中药一般有一定的气味，在饲料添加初期对食欲有一定的影响。本试验未观察到明显的适口性反应。体重的变化说明，添加中药增加显著，而且被毛平顺有光泽，皮肤色红健康，从经验预示身体健壮后期生长更快。显示磷酸二酯酶抑制作用中药复方有望显著促进断奶仔猪体重的生长。本实施例中所述的中草药动物生长促进剂猪的生长具有见效快，用量小的优势。
实施例10 本实施例是实施例7基础上的优选方案，所用原料(组分)的品质与实施例7相同； 一种中草药动物生长促进剂，所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为香附、黄芪、泡桐叶、小茴香，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为 香附47，黄芪47，泡桐叶150，小茴香450； 本实施例中采用的单位是克，也可以是毫克，也可以是千克； 本实施例的检测结果如下 本实施例的检测方法与实施例8相同； 表13所述的中草药动物生长促进剂对断奶仔猪体重的影响(单位kg)
由表13可见，两组断奶仔猪的体重，初始时试验组较对照组多2.7kg，第10天多9.1kg，第20天多14.7kg。
表14所述的中草药动物生长促进剂对断奶仔猪血浆中cAMP的影响
对cAMP的水平的测定结果表明，中药组猪血浆中cAMP含量明显上升，提示所选中药复方具有抑制猪体内磷酸二酯酶活性的作用，且磷酸二酯酶活性抑制率大于20％，进而具有提高cAMP水平的作用。
讨论与结论 中药一般有一定的气味，在饲料添加初期对食欲有一定的影响。本试验未观察到明显的适口性反应。体重的变化说明，添加中药增加显著，而且被毛平顺有光泽，皮肤色红健康，从经验预示身体健壮后期生长更快。显示磷酸二酯酶抑制作用中药复方有望显著促进断奶仔猪体重的生长。本实施例中所述的中草药动物生长促进剂猪的生长具有见效快，用量小的优势。
权利要求
1.一种中草药动物生长促进剂，其特征在于该促进剂中含有抑制磷酸二酯酶活性的组分，所述的抑制磷酸二酯酶活性的组分对于磷酸二酯酶活性抑制率大于20％。
2.根据权利要求1所述的一种中草药动物生长促进剂，其特征在于所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为牛蒡子提取物、牛蒡子苷中的一种；
所述的牛蒡子提取物的提取方法为
A.将牛蒡子原料药加水浸泡30min后，先用武火煎至沸腾，再用文火煎煮30min，得到首次煎液置于另一容器中；
B.将所述的煎煮过的牛蒡子原料药中再加水煎煮30min，得到二次煎液，将该二次煎液与首次煎液合并，得到总煎液；
C.将所述的总煎液减压浓缩，使生药浓度达到4g/ml，得到所述的牛蒡子提取物，即为含有抑制磷酸二酯酶活性的组分。
3.根据权利要求1所述的一种中草药动物生长促进剂，其特征在于所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为芦根、香附、黄芪、泡桐叶，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为
芦根1-50，香附1-50，黄芪1-150，泡桐叶1-500；
所述的中草药动物生长促进剂制备步骤如下
按上述配比将所述的芦根、香附、黄芪、泡桐叶分别进行粉碎处理并混合均匀，得到混合粉末并过筛，得到所述的中草药动物生长促进剂。
4.根据权利要求3所述的一种中草药动物生长促进剂，其特征在于所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为
芦根1，香附1，黄芪3，泡桐叶10。
5.根据权利要求3所述的一种中草药动物生长促进剂，其特征在于所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为
芦根23，香附23，黄芪55，泡桐叶125。
6.根据权利要求3所述的一种中草药动物生长促进剂，其特征在于所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为
芦根47，香附47，黄芪150，泡桐叶450。
7.根据权利要求1所述的一种中草药动物生长促进剂，其特征在于所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为香附、黄芪、泡桐叶、小茴香，所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为
香附1-50，黄芪1-150，泡桐叶1-200，小茴香1-480；
所述的中草药动物生长促进剂制备步骤如下
按上述配比将所述的香附、黄芪、泡桐叶、小茴香分别进行粉碎处理并混合均匀，得到混合粉末并过筛，得到所述的中草药动物生长促进剂。
8.根据权利要求7所述的一种中草药动物生长促进剂，其特征在于所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为
香附1，黄芪1，泡桐叶3，小茴香10。
9.根据权利要求7所述的一种中草药动物生长促进剂，其特征在于所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为
香附23，黄芪23，泡桐叶55，小茴香125。
10.根据权利要求7所述的一种中草药动物生长促进剂，其特征在于所述的中草药动物生长促进剂中各组分的重量比为
香附47，黄芪47，泡桐叶150，小茴香450。
全文摘要
本发明提供一种中草药动物生长促进剂，该促进剂中含有抑制磷酸二酯酶活性的组分，该组分对于磷酸二酯酶活性抑制率大于20％。所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为牛蒡子提取物、牛蒡子苷中的一种；所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为芦根、香附、黄芪、泡桐叶，各组分的重量比为1-50∶1-50∶1-150∶1-500；所述的含有抑制磷酸二酯酶活性的组分为香附、黄芪、泡桐叶、小茴香，各组分的重量比为1-50∶1-150∶1-200∶1-480。本发明中含有从天然物中草药中筛选的具有抑制磷酸二酯酶活性的药物、有效组合或其有效成分，可以提高机体内源性cAMP，继而激活cAMP依赖性蛋白激酶，最终抑制蛋白质的水解，促进蛋白质积累，增加肌肉重量，从而促进动物生长。
文档编号A23K1/14GK101574119SQ200910084208
公开日2009年11月11日 申请日期2009年5月14日 优先权日2009年5月14日
发明者武 陈, 谷金妮, 姜代勋 申请人:北京农学院