专利名称：一种药用金线莲快速培植方法
技术领域：
本发明提供了一种新的药用金线莲快速培植方法，涉及植物人工生产培植技术。
背景技术：
金线莲(Anectochilus roxburhii)别名金线兰、金线入骨消，为兰科开唇兰属 (Anectochilus)多年生草本植物，属珍贵中药材，其可用于治疗肺痨咳血、肺病、糖尿病、高 血压、肾亏、肾炎等多种疾病。金线莲素有“乌人参”美称，具有较高的观赏和药用价值。中 国、印度、日本等亚洲国家都有分布，我国主要分布于福建、广东、云南等地。金线莲有极高的药用价值，具有凉血平肝、清热解毒的功效，常吃金线莲对防癌抗 癌和治疗糖尿病、肾炎、肝炎、小儿凉风、毒蛇咬伤有独特功效，还有美容作用。闽西、闽南人 遇有贵宾或重大节日都会用金线莲炖鸡、鸭或排骨汤。每天每日用鲜品50-100g，是人们养 生保健的一种不可多得的天然食品。金线莲由于其具有的多种药用功效日益引起医药界的 重视，民间称其为“神药”，台湾称为“药王”，据2008年1月市场调查，新鲜生草零售价格每 公斤1000元，由于金线莲对生态环境要求严格，自然繁殖和生长缓慢，加上鸟类嗜食和人 工大量采集，野生资源日益减少，已不能满足临床治疗需要，国内有关部门正在开展金线莲 快速繁殖研究。自然状况下，金线莲生长发育缓慢，种子不具胚乳，无发芽能力，只有在志真菌共 生条件下才能促进种子萌发生长，但其发芽率极低，因此其野生药材资源已濒临枯竭。采 用人工种子繁殖、分根繁殖、扦插繁殖等方法需要时间较长，且繁殖成活率不高，利用组织 培养技术进行幼苗的快速繁育是解决金线莲人工栽培的关健，对充分提供药源具有重要意 义。本发明采用植物组织培养方法，对菌种初期培育、外植体生长及后期的壮苗生根阶段进 行了优化，建立了 一套快速繁殖体系，为金线莲工厂化生产提供指导。
发明内容
1. 一种新的药用金线莲快速培植方法，其特征包括以下几个步骤(1)外植体培养野生金线莲材料一部分从山上采回后人工种植一段时间再消毒，一部分未经种植 直接消毒。先去除植株根部和叶片，截取其顶芽和侧芽的节段，用无菌蒸馏水冲洗20min， 75 %酒精漂洗30s，0. 1 %的升汞振荡消毒10 13min，再用无菌水冲洗3 6次，在超净工 作台上切取顶芽、侧芽接入启动培养基上。接种后放置在黑暗中15d，然后转移至光照下培 养一周，外植体开始膨胀，长出叶片。启动培养基为MS+6-BAl. Omg/L+NAAl. Omg/L.(2)丛生芽诱导将外植体切成长0. 5-1. Ocm且含有一个腋芽的茎段，接种于增值培养基上放置于 黑暗中培养IOd后转移至光照下培养40-50d。基本培养基为MS+KT1. Omg/L+NAA 0. 2mg/L±曾值培养基为MS+KT 1. 0mg/L+NAA 0. 2mg/L+6_BA2. Omg/L+2，4_D 0. 4mg/L
(3)诱导生根及移栽将长2. 0-2. 5cm的小苗接种于1/10MS培养基并附加NAAO. 5mg/L和IBAO. 5mg/L 进行生根诱导培养，同时添加5%香蕉泥和0. 05%活性炭，培养30天后选取根系发育良好 的健壮组培植株进行炼苗移栽。将敞开的组培瓶置于温室下炼苗5 7d后，洗去根部残留 的培养基并假植于蛭石中，保湿培养10 15d，直接移栽到消好毒的等量珍岩、河沙和泥炭 土的基质中。本发明提供了一种新的金线莲快速繁殖方法，该法操作简便，原材料易得，繁殖周 期短，适用于工厂化生产，具有良好的经济效益。
权利要求
1.一种药用金线莲快速培植方法，其特征包括以下几个步骤(1)外植体培养野生金线莲材料一部分从山上采回后人工种植一段时间再消毒，一部分未经种植直接 消毒。先去除植株根部和叶片，截取其顶芽和侧芽的节段，用无菌蒸馏水冲洗20min，75% 酒精漂洗30s，0. 1 %的升汞振荡消毒10 13min，再用无菌水冲洗3 6次，在超净工作台 上切取顶芽、侧芽接入启动培养基上。接种后放置在黑暗中15d，然后转移至光照下培养一 周，外植体开始膨胀，长出叶片。(2)丛生芽诱导将外植体切成长0. 5-1. Ocm且含有一个腋芽的茎段，接种于增值培养基上放置于黑暗 中培养IOd后转移至光照下培养40-50d。(3)诱导生根及移栽将长2. 0-2. 5cm的小苗接种于1/10MS培养基并附加NAA 0. 5mg/L和IBA 0. 5mg/L进 行生根诱导培养，同时添加5%香蕉泥和0. 05%活性炭，培养30天后选取根系发育良好的 健壮组培植株进行炼苗移栽。将敞开的组培瓶置于温室下炼苗5 7d后，洗去根部残留的 培养基并假植于蛭石中，保湿培养10 15d，直接移栽到消好毒的等量珍岩、河沙和泥炭土 的基质中。
2.如权利要求(1)所诉，其特征在于出发菌种为野生金线莲。
3.如权利要求(1)所诉，其特征在于启动培养基组成为MS+6-BA1. Omg/L+NAAl. Omg/L0
4.如权利要求( 所诉，其特征在于基本培养基选择MS培养基，增值培养基为MS+KT 1. Omg/L+NAA 0. 2mg/L+6_BA 2. Omg/L+2，4_D 0. 4mg/L,同时添加 6-BA 2. Omg/L+2，4_D 0. 4mg/L可使增值倍数达到8. 1。
5.如权利要求(2)所诉，其特征在于首先放于黑暗中培养后转移至光照下培养可产生 数量较多的丛生芽。
6.如权利要求(2)所诉，其特征在于光照时间为10h/d，光照强度为2000-3000LX。
7.如权利要求C3)所诉，其特征在于选择1/10MS培养基，含有低浓度无机盐的基本培 养基有利于组培苗的生根诱导和生长发育。
8.如权利要求(3)所诉，其特征在于生根培养基中添加了4种诱导物，分别为NAA 0. 5mg/L, IBA 0. 5mg/L，5%香蕉泥和0. 05%活性炭。通过添加4种诱导物可显著提高金线 莲的壮苗及生根。
全文摘要
本发明提供了一种药用金线莲快速培植方法，其步骤包括采用野生金线莲为出发菌株，消毒后去植株根叶，截取其顶芽和侧芽的节段在启动培养基上进行外植体培养，然后取外植体0.5-1.0cm茎段，接种于增值培养基放于黑暗中培养10-15d后转入光照下培养40-50d。最后，将小苗接种于精制的生根培养基进行诱导生根，移栽到消好毒的等量珍岩、河沙和泥炭土的基质中培植。本发明提供了一种新的金线莲快速繁殖方法，该法操作简便，原材料易得，繁殖周期短，适用于工厂化生产，具有良好的经济效益。
文档编号A01H4/00GK102067817SQ20091015463
公开日2011年5月25日 申请日期2009年11月23日 优先权日2009年11月23日
发明者史利斌, 吴菁 申请人:湖州来色生物基因工程有限公司