专利名称：一种利用蜜蜂蜂脾麻醉装置进行蜜蜂群体麻醉的方法
技术领域：
本发明属于生态毒性测试领域，具体涉及一种改进的蜜蜂蜂脾麻醉试验装置以及利用该装置进行的蜜蜂蜂脾群体麻醉方法。
背景技术：
在蜜蜂种类活跃性昆虫的观察研究过程中，往往需要对其进行近距离的操作，对蜜蜂进行麻醉等前处理过程后将会大大有利于后期近距离操作过程的开展，目前可采用的麻醉方法主要有乙醚麻醉法和二氧化碳麻醉法。采用乙醚麻醉法对蜜蜂等活跃性昆虫进行麻醉，需操作者具有良好的操作经验，并严格控制乙醚的使用量，且乙醚易对受试昆虫造成 一定的伤害，影响后期试验结果的准确性，过多的使用乙醚，也会对实验室室内环境造成污染，影响到试验人员的身体健康。因此目前采用二氧化碳麻醉已成为昆虫麻醉方法的趋势，但目前已有的一些二氧化碳麻醉装置，由于采用的多为小容量的麻醉装置，麻醉前，需进行蜜蜂的转移，这一过程往往费时费力，试验人员也易受蜜蜂叮咬造成人身伤害，如开展试验需麻醉批量的蜜蜂时,整个麻醉过程将耗时耗力，大大增加试验成本,并减缓试验进程；而且现有的一些麻醉装置结构复杂，使用繁琐，麻醉工作量大。因此，在开展蜜蜂生态毒理规模测试等试验时，提供一种简单易操作、成本低、对环境污染小、麻醉效果好的麻醉方法，也成为了在本研究领域关注的热点。
发明内容
本发明的目的是针对目前蜜蜂麻醉方法中存在的材料毒性大，环境危害高，耗时耗力，麻醉试验成本增加，试验过程易受减缓，试验人员健康易受伤害等问题，提供一种利用蜜蜂蜂脾麻醉装置进行蜜蜂群体麻醉的方法。本发明的另一目的是提供一种应用于上述蜜蜂群体麻醉的蜜蜂蜂脾麻醉装置。本发明的目的可以通过以下措施达到一种利用蜜蜂蜂脾麻醉装置进行蜜蜂群体麻醉的方法，其包括以下步骤A、将从蜂箱中取出的蜂脾放入蜜蜂蜂脾麻醉装置的蜂脾槽中，并置于蜜蜂蜂脾麻醉装置的箱体内；B、从蜜蜂蜂脾麻醉装置箱体的上方向箱体内通入二氧化碳气体，排出该箱体内的空气，将蜜蜂蜂脾麻醉装置的收集槽和装有蜂脾的蜂脾槽完全移入箱体内，通入箱体内的二氧化碳对蜂脾槽进行局部麻痹，并通过蜂脾槽封闭面和蜜蜂收集槽封闭面与箱体之间的间隙流出箱体；C、待蜂脾上的蜜蜂全部麻醉后，停止通入二氧化碳气体，将蜜蜂抖入收集槽中，取出麻醉的蜜蜂。本发明还公开了一种蜜蜂蜂脾麻醉装置，即上述麻醉方法中所采用的蜜蜂蜂脾麻醉装置，其包括二氧化碳供应装置、导管和箱体，所述导管的一端连接二氧化碳供应装置的出气口，导管的另一端连接所述箱体的顶部或侧壁上部；其所述箱体的内部设有蜂脾槽和蜜蜂收集槽，蜜蜂收集槽位于所述蜂脾槽的下方，所述蜂脾槽和蜜蜂收集槽分别与箱体活动连接，在蜂脾槽的外端设有蜂脾槽封闭面，在蜜蜂收集槽的外端设有蜜蜂收集槽封闭面，当蜂脾槽和蜜蜂收集槽完全移入箱体内时，通入箱体内的二氧化碳仅通过蜂脾槽封闭面和蜜蜂收集槽封闭面与箱体之间的间隙流出箱体。本发明中所讲的蜜蜂主要为人工饲养的蜜蜂，蜜蜂在蜂箱中生长，蜂箱中由多块方形或条块状的立体的蜂脾组成。箱体的整体或至少一面采用透明的有机玻璃制成，优选整体上采用透明的有机玻璃制成。箱体一般采用方形，箱体的宽度匹配一个或多个蜂脾的宽度。当箱体内只设一个蜂脾槽和蜜蜂收集槽时，箱体长度优选4(T50厘米，宽度优选2(T30厘米，与目前人工饲养蜜蜂的蜂脾宽度匹配，高度优选3(T40厘米，与蜂脾槽与收集槽叠加厚度匹配。箱体内还可设有多个蜂脾槽和蜜蜂收集槽，蜂脾槽为多个时，可纵列、横列或两者混杂的方式排布；蜜蜂收集槽为多个时，可以在每个蜂脾槽之下都设一蜜蜂收集槽，也可在箱体的下部并排设多个蜜蜂收集槽。在蜜蜂收集槽和蜂脾槽之间需间隔有通气空间。蜂脾槽用于静态放置蜂脾待麻醉，蜜蜂收集槽用以收集麻醉后的蜜蜂，待进一步的生物试验所需。蜜蜂收集槽和蜂脾槽与箱体之间的活动连接可以通过设在箱体内部或内壁上的滑槽实现，蜜蜂收集槽也可以直接在箱体底部上滑动。蜜蜂收集槽和蜂脾槽还可以直接从箱体内取出，以利于放置和取出操作的进行。蜂脾槽封闭面的长度和宽度一般大于与之(即蜂脾槽封闭面)平行的蜂脾槽槽体截面的长度和/或宽度，其长度和宽度也可以略小于槽体截面的长度和/或宽度，优选大于；蜜蜂收集槽封闭面的长度和宽度一般大于与之(即蜜蜂收集槽封闭面)平行的蜜蜂收集槽槽体截面的长度和/或宽度，其长度和宽度也可以略小于槽体截面的长度和/或宽度，优选大于。蜂脾槽和蜜蜂收集槽完全移入箱体后的封闭面与箱体之间的间隙或通道用于排出箱体内的原有空气，并减缓空气进入箱体内部，同时将二氧化碳导出箱体外。这种设置可以使通入箱体内的二氧化碳通过蜂脾槽封闭面和蜜蜂收集槽封闭面与箱体之间的间隙流出箱体。在所述二氧化碳供应装置的出气口处或者在所述导管上设有通气开关，优选在导管的接近箱体处设置该开关，以控制气体输入。二氧化碳供应装置可以为直接产生二氧化碳的装置，也可以为贮存二氧化碳的装置，一般可采用二氧化碳气瓶。在所述二氧化碳供应装置的出气口处还设有气体压力控制装置，其可以为气体减压装置；通过气体压力控制装置调节输出气体压力，一般将输出压力控制在0.01 0. 5MPa，优选0. IMPa0在蜜蜂群体麻醉方法中，收集槽和装有蜂脾的蜂脾槽完全移入箱体后，二氧化碳气体的通入时间一般调整为2 20min，优选5 15min，其中在IOmin (0. IMPa条件下)时可达到对试验或检测用的麻醉蜜蜂基本无明显的毒害且麻醉时间不超出一般的毒性测试的染毒或观察等工作。本发明的操作过程可以在环境温度下进行。本发明采用蜜蜂蜂脾麻醉装置，可将蜜蜂蜂脾整体放置于非完全密封装置中，无 需对蜜蜂进行扰动，也无需单个捕捉及转移蜜蜂，之后向装置中通入二氧化碳，控制通入二氧化碳的流速和麻醉时间，以及后期恢复时间等参数，进行批量蜜蜂蜂脾的群体性麻醉，在蜜蜂整体麻醉后,将麻醉的蜜蜂抖入收集槽,完成蜜蜂整体收集,供下步试验所需,特别是用于批量蜜蜂的生态毒性试验及其他试验或检测。本发明中采用的蜜蜂蜂脾麻醉装置，材料为有机玻璃、二氧化碳钢瓶和通气管等，材料易得，成本较低。采用的蜜蜂蜂脾麻醉试验装置进行蜜蜂麻醉的方法简单易操作，成本低，对环境污染小，麻醉效果好，适用于蜜蜂生态毒性测试试验等蜜蜂生物体需求量较大的试验的前期批量蜜蜂的准备过程，是一种经济实用的的批量蜜蜂麻醉方法。采用本发明时，控制好二氧化碳通气的流速和时间，可控制好稳定的蜜蜂恢复时间，并可稳定获得批量的麻醉蜜蜂，麻醉蜜蜂的活力没有明显变化，可有效加快蜜蜂生态毒性试验的实施进度，提高试验的易操作性。
图I是本发明的蜜蜂蜂脾麻醉装置结构示意图。
图中1、二氧化碳气瓶，2、压力控制装置，3、导气管，4、通气开关，5、箱体，6、蜂脾槽，7、收集槽，8、蜂脾槽封闭面，9、收集槽封闭面。
具体实施例方式以下通过附图的实施例对本发明做进一步说明。一种蜜蜂蜂脾麻醉装置的结构如图I所示，其包括二氧化碳气瓶、导气管、箱体、蜂脾槽和收集槽，二氧化碳气瓶的气体出口处设有压力控制装置，调节输出的CO2压力，导管的一端连接二氧化碳供应装置的出气口，导管的另一端连接箱体的顶部或侧壁上部，通气开关设置在导管的接近箱体处。箱体采用透明的有机玻璃制成，为方形，其宽度匹配蜂脾的宽度。蜂脾槽和蜜蜂收集槽活动连接于箱体内部，蜂脾槽在上，蜜蜂收集槽在下，二者之间留有适当的通气空间。在蜂脾槽的外端设有蜂脾槽封闭面，在蜜蜂收集槽的外端设有蜜蜂收集槽封闭面，当蜂脾槽和蜜蜂收集槽完全移入箱体内时，通入箱体内的二氧化碳仅通过蜂脾槽封闭面和蜜蜂收集槽封闭面与箱体之间的间隙流出箱体。下述各例中利用上述蜜蜂蜂脾麻醉装置进行蜜蜂群体麻醉的具体方法为先将从蜂箱中取出的蜂脾放入蜂脾槽中，并置于箱体内；再经过导管从箱体的上方向箱体内通入二氧化碳气体，排出该箱体内的空气，将收集槽和装有蜂脾的蜂脾槽完全移入箱体内，通入箱体内的二氧化碳对蜂脾槽进行局部麻痹，并通过蜂脾槽封闭面和蜜蜂收集槽封闭面与箱体之间的间隙流出箱体；控制通入的CO2压力条件和通入时间，待蜂脾上的蜜蜂全部麻醉后，停止通入二氧化碳气体，将蜜蜂抖入收集槽中，取出麻醉的蜜蜂，待之后蜜蜂生物试验所用。实施例I :蜜蜂麻醉的环境条件室内温度25°C ;通入的0)2压力0. IMpa，全部共计117只蜜蜂待麻醉。持续通入C025min后，停止通入CO2,麻醉蜜蜂经过5min恢复后，恢复率为
3.41% ；8min后恢复率为71. 8% ； IOmin后恢复率为100%。实施例2 采用实例I中蜜蜂麻醉的环境条件及通入的CO2压力条件，全部共计115只蜜蜂待麻醉。通CO2IOmin后，停止通入CO2,麻醉蜜蜂经过5min恢复后，恢复率为0% ; IOmin后恢复率为I. 74% ；15min后恢复率为49. 6% ；20min后恢复率为98. 3%, 25min后恢复率为100%。实施例3 采用实例I中蜜蜂麻醉的环境条件及通入的CO2压力条件，全部共计128只蜜蜂待麻醉。通C0215min后，停止通入CO2，麻醉蜜蜂经过5min恢复后，恢复率为0% ； IOmin后恢复率为0. 86% ；15min后恢复率为23. 5% ；20min后恢复率为86. 4%, 25min后恢复率为99. 6%。实施例4 根据蜜蜂农药生态毒性测试标准操作方法 及相应的标准操作规程，采用乐果作为标准农药研究其对蜜蜂的急性毒性能力，对未进行CO2麻醉的蜜蜂进行进行毒性测试，得到农药乐果对蜜蜂的24h急性毒性LC50为0. 29 i! g/蜂(置信限为0. 22 ~ 0. 39 u g/蜂)，48h急性毒性LC50为0. 21 ii g/蜂(置信限为0. 16 ~ 0. 28 u g/蜂)。实施例5 采用实例4中的乐果对蜜蜂的急性毒性测试方法，对实例I中麻醉后恢复的批量蜜蜂进行农药乐果急性毒性测试，得到乐果对该批蜜蜂的24h急性毒性LC5tl为0. 27 Ug/蜂(置信限为0. 21 0. 35 ii g/蜂),48h急性毒性LC5tl为0. 18 y g/蜂(置信限为0. 13 0. 23ii g/蜂)。实施例6 采用实例4中的乐果对蜜蜂的急性毒性测试方法，对实例2中麻醉后恢复的批量蜜蜂进行农药乐果急性毒性测试，得到乐果对该批蜜蜂的24h急性毒性LC5tl为0. 22 Ug/蜂(置信限为0. 18 0. 28 ii g/蜂),48h急性毒性LC5tl为0. 15 y g/蜂(置信限为0. 11 0. 19ii g/蜂)。实施例I 采用实例4中的乐果对蜜蜂的急性毒性测试方法，对实例3中麻醉后恢复的批量蜜蜂进行农药乐果急性毒性测试，得到乐果对该批蜜蜂的24h急性毒性LC5tl为0. 20 y g/蜂(置信限为0. 16 ~ 0. 25 u g/蜂),48h急性毒性LC50为0. 12 y g/蜂(置信限为0. 08
0.15 V- g/ 蜂)。安全性分析 采用本发明中的装置进行蜜蜂麻醉的方法，麻醉过程中采用的二氧化碳对环境及试验人员无危害，最优控制二氧化碳通气时间IOmin (0. IMpa压力条件下),对试验用的麻醉蜜蜂基本无明显的毒害，对后期开展的蜜蜂测试的生态毒性结果也没有明显的影响。麻醉后的恢复时间优选lOmin，在IOmin内可完成蜜蜂生态毒性测试的染毒或观察等工作，也可避免对试验人员产生不必要的蜜蜂咬伤伤害及其他繁琐情况，因此，采用改进的蜜蜂蜂脾麻醉试验装置进行蜜蜂群体麻醉的的方法，是一种环境风险较低、易操作、对蜜蜂影响较小的可靠方法。
权利要求
1.一种利用蜜蜂蜂脾麻醉装置进行蜜蜂群体麻醉的方法，其特征在于包括以下步骤 A、将从蜂箱中取出的蜂脾放入蜂脾槽中，并置于蜜蜂蜂脾麻醉装置的箱体内； B、从蜜蜂蜂脾麻醉装置箱体的上方向箱体内通入二氧化碳气体，排出该箱体内的空气，将收集槽和装有蜂脾的蜂脾槽完全移入箱体内，通入箱体内的二氧化碳对蜂脾槽进行局部麻痹，并通过蜂脾槽封闭面和蜜蜂收集槽封闭面与箱体之间的间隙流出箱体； C、待蜂脾上的蜜蜂全部麻醉后，停止通入二氧化碳气体，将蜜蜂抖入收集槽中，取出麻醉的蜜蜂； 其中所述的蜜蜂蜂脾麻醉装置，包括二氧化碳供应装置、导管和箱体，所述导管的一端连接二氧化碳供应装置的出气口，导管的另一端连接所述箱体的顶部或侧壁上部；在所述箱体的内部设有蜂脾槽和蜜蜂收集槽，蜜蜂收集槽位于所述蜂脾槽的下方，所述蜂脾槽和蜜蜂收集槽分别与箱体活动连接，在蜂脾槽的外端设有蜂脾槽封闭面，在蜜蜂收集槽的外端设有蜜蜂收集槽封闭面，当蜂脾槽和蜜蜂收集槽完全移入箱体内时，通入箱体内的二氧化碳仅通过蜂脾槽封闭面和蜜蜂收集槽封闭面与箱体之间的间隙流出箱体。
2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于收集槽和装有蜂脾的蜂脾槽完全移入箱体后,二氧化碳气体的通入时间为2 20min。
3.根据权利要求I所述的方法，其特征在于通入蜜蜂蜂脾麻醉装置箱体内的二氧化碳气体的压强为0. IMPa0
4.根据权利要求I所述的方法，其特征在于所述箱体的整体或至少一面采用透明的有机玻璃制成。
5.根据权利要求I所述的方法，其特征在于所述蜜蜂收集槽和蜂脾槽之间间隔有通气空间；所述蜂脾槽封闭面的长度和宽度大于与之平行的蜂脾槽槽体截面的长度和/或宽度；所述蜜蜂收集槽封闭面的长度和宽度大于与之平行的蜜蜂收集槽槽体截面的长度和/或宽度。
6.根据权利要求I所述的方法，其特征在于在所述二氧化碳供应装置的出气口处或者在所述导管上设有通气开关，在所述二氧化碳供应装置的出气口处设有气体压力控制装置。
7.—种蜜蜂蜂脾麻醉装置，包括二氧化碳供应装置、导管和箱体，所述导管的一端连接二氧化碳供应装置的出气口，导管的另一端连接所述箱体的顶部或侧壁上部，其特征在于在所述箱体的内部设有蜂脾槽和蜜蜂收集槽，蜜蜂收集槽位于所述蜂脾槽的下方，所述蜂脾槽和蜜蜂收集槽分别与箱体活动连接，在蜂脾槽的外端设有蜂脾槽封闭面，在蜜蜂收集槽的外端设有蜜蜂收集槽封闭面，当蜂脾槽和蜜蜂收集槽完全移入箱体内时，通入箱体内的二氧化碳仅通过蜂脾槽封闭面和蜜蜂收集槽封闭面与箱体之间的间隙流出箱体。
8.根据权利要求7所述的蜜蜂蜂脾麻醉装置，其特征在于所述箱体的整体或至少一面采用透明的有机玻璃制成。
9.根据权利要求7所述的蜜蜂蜂脾麻醉装置，其特征在于所述蜜蜂收集槽和蜂脾槽之间间隔有通气空间；所述蜂脾槽封闭面的长度和宽度大于与之平行的蜂脾槽槽体截面的长度和/或宽度；所述蜜蜂收集槽封闭面的长度和宽度大于与之平行的蜜蜂收集槽槽体截面的长度和/或宽度。
10.根据权利要求7所述的蜜蜂蜂脾麻醉装置，其特征在于在所述二氧化碳供应装置的出气口处或者在所述导管上设有通气开关，在所述二氧化碳供应装置的出气口处设有气体压力 控制装置。
全文摘要
本发明公开了一种利用蜜蜂蜂脾麻醉装置进行蜜蜂群体麻醉的方法先将从蜂箱中取出的蜂脾放入蜂脾槽中，并置于箱体内；再经过导管向箱体内通入二氧化碳气体，排出该箱体内的空气，将收集槽和蜂脾槽完全移入箱体内，通入箱体内的二氧化碳对蜂脾槽进行局部麻痹；待蜂脾上的蜜蜂全部麻醉后，停止通入二氧化碳气体，将蜜蜂抖入收集槽中，取出麻醉的蜜蜂，待之后蜜蜂生物试验所用。本发明克服了以往方法麻醉的生物体个数少、易产生污染的缺点，可安全的批量麻醉蜜蜂，具有麻醉数量大、处理成本低，可操作性强等特点，适合于需大量蜜蜂的生态毒性测试试验所用，是一种高效安全经济的生态毒性测试试验蜜蜂生物体准备方法。
文档编号A01K67/033GK102640734SQ20121015498
公开日2012年8月22日 申请日期2012年5月17日 优先权日2012年5月17日
发明者单正军, 卜元卿, 周军英, 沈飞, 焦少俊, 程燕, 陈源, 韩志华 申请人:环境保护部南京环境科学研究所