蜈蚣藻的丝状体育苗及其海上养殖方法
【专利摘要】本发明提供一种蜈蚣藻丝状体育苗及海上养殖方法，所述方法通过人工手段对蜈蚣藻丝状体无性细胞系进行诱导全能性表达，获得可在海上养殖的蜈蚣藻苗株。本发明不同于传统的孢子采苗养殖，能够不受季节限制，随时利用丝状体进行人工育苗。
【专利说明】蜈蚣藻的丝状体育苗及其海上养殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及藻类培养【技术领域】，具体的说是蜈蚣藻的丝状体育苗及其海上养殖方法。
【背景技术】
[0002]蜈蚁藻(Gra teloupia fiIicina )因含有丰富的卡拉胶在食品工业、纺织工业中都有广泛的应用，近年来蜈蚣藻的原料需求量越来越大，但蜈蚣藻的来源有限，野生资源日渐减少，且生长速度较慢，难以保证供应，而人工养殖的瓶颈是种苗问题。
[0003]除海带、紫菜、裙带菜以外，多数经济海藻仍沿用采种藻一采孢子一育苗一海上养殖的生产模式，除受季节限制外，由于大型海藻生活史复杂，难以大量保存优良种质，不仅给人工育苗造成困难，而且难以实现良种化养殖。
[0004]蜈蚣藻丝状体是由蜈蚣藻的单细胞克隆组成，具有较高的全能性，除具有与藻体相同的光合色素组成外，还能够在合适条件下重新发育成蜈蚣藻个体。用无性系取代孢子育苗是实现规模化育苗和养殖的最佳模式，只有用无性系取代孢子育苗才有可能实现规模化育苗和养殖，而不是现用的简单的分枝繁殖。优良品种的丝状体不仅有利于长期保存，而且可以大量扩繁作为种苗来源，不再需要通过采孢子育苗。但由于蜈蚣藻丝状体生长速度较慢、易污染而无法进行大量培养，给人工养殖造成许多限制。
【发明内容】
[0005]本发明针对上述问题，提供一种用蜈蚣藻丝状无性系取代孢子进行人工育苗，不受季节限制，并且实现了海上养殖的方法。
[0006]为实现上述目的，本发明采用的技术方案是:蜈蚣藻丝状体育苗及海上养殖方法，通过人工手段对蜈蚣藻丝状体无性细胞系进行诱导全能性表达，获得可在海上养殖的蜈蚣藻苗株。
[0007]其中，所述方法包括以下步骤:
a.蜈蚣藻丝状体通过搅拌器打碎，至平均每个单列藻丝含有10个以下细胞程度；
b.打碎的蜈蚣藻丝状体喷洒到基质上，遮光静置24小时以上；
c.接种好丝状体的基质添加富含无机氮磷的海水培养基,室温下培养；
d.丝状体在基质表面形成盘状体后，肉眼可见，在原有培养条件不变的情况下，通气培
养;
e.盘状体上出现直立枝后，可继续人工室内培养至蜈蚣藻小苗达到3-5mm左右，下海培养。
[0008]其中，所述步骤b的基质是指贝壳、玻璃片或苗绳及其他具有硬质或光滑表面的基质。
[0009]其中，所述步骤c的室温下培养是指在室温下，自然光或35-70 μ ΕmΥ1的人工光源下静置培养10-14天，光暗周期为12h:12h。[0010]其中，人工光源为52 μ EnT2S'
[0011]其中，所述步骤d中丝状体在基质表面形成盘状体的时间是2周至20天。
[0012]其中，所述步骤e中盘状体上出现直立枝的时间是20至30天。
[0013]其中，所获得的蜈蚣藻苗可直接在海上长成藻体至收获；也可以在藻体长至6cm以上时将其从原附苗基质上采下，夹到苗绳上继续培养至藻体养成。
[0014]蜈蚣藻丝状体由单列细胞丝状体构成，藻丝呈辐射状向外生长。该无性系细胞不再继续分化，可以通过光生物反应器进行大量扩繁。本发明中蜈蚣藻丝状体的获得有孢子发生、盘状体外植体和直立枝外植体三条获得途径；然后通过光生物反应器进行大量扩繁。
[0015]本发明采用的蜈蚣藻丝状无性系是利用细胞工程手段获得，具有全能性的细胞克隆系，是自然界中没有的形态，已经跳脱了蜈蚣藻原有生活史；该种无性系材料可以通过光生物反应器大量培养，不受季节限制，可随时根据应用需要进行扩培。
[0016]采用蜈蚣藻丝状体进行育苗，由于是完全意义上的克隆，所养殖的藻体具有一致性。利用此方法可以有效进行良种化育苗，并建立良种繁育系。
[0017]本发明针对的是蜈蚣藻丝状体规模化育苗、人工养殖，可以全年育苗，根据需要随时进行海上养殖，这是其他采用孢子采苗等方法无法做到的。由于不同于传统的孢子采苗养殖，本发明不受季节限制，可以随时利用丝状体进行人工育苗。
[0018]蜈蚣藻丝状体人工育苗及海上养殖，是海藻细胞工程育苗领域的重大突破，意味着海藻养殖不再依赖传统的采孢子育苗；通过光生物反应器可对海藻优良品种的丝状体进行快速扩繁作为种苗来源，还可使更多经济海藻如角叉菜、石花菜等实现大规模、高品质人工育苗和养殖。
【专利附图】
【附图说明】
[0019]图1为本发明实施例的蜈蚣藻丝状体无性系育苗过程。
[0020]图2为本发明实施例的蜈蚣藻丝状体苗海上养殖过程。
【具体实施方式】
[0021]下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本发明所限定的范围。
[0022]实施例1
蜈虫公藻(Grateloupia filicina)丝状体2g (鲜重),组织捣碎机中打碎至每个丝状藻段含有细胞不超过10个。
[0023]打碎的丝状体接种到文蛤壳上静置；2天后加入富含无机氮磷的海水培养基照光培养，表面光照强度为52 μ EnT2iT1，光暗周期为12h:12h。每5天更换一次海水，10天后通气培养。20天后，文蛤壳表面布满盘状体；25天，长出直立枝；40天，贝壳上布满l_2mm蜈蚣藻小苗，培养过程如图1所示。
[0024]图1中的培养过程按箭头指向分为以下步骤:蜈蚣藻丝状体状态一丝状体采贝壳—形成盘状体一盘状体出直立枝一直立枝培养一直立枝长成小苗一夹苗培养，其中也可改用玻璃板或牡蛎壳来采苗。[0025]9月底，蜈蚣藻丝状体苗在青岛8号码头养殖区下海培养，40天后，长成长16-20cm的蜈蚣藻成体，海上培养过程如图2所示。图2中从A的采苗到C的种苗长成仅需40天时间。
[0026]本发明不同于传统的孢子采苗养殖，能够不受季节限制，随时利用丝状体进行人
工育苗。
[0027]以上为对本发明实施例的描述，通过对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
【权利要求】
1.蜈蚣藻丝状体育苗及海上养殖方法，其特征在于:通过人工手段对蜈蚣藻丝状体无性细胞系进行诱导全能性表达，获得可在海上养殖的蜈蚣藻苗株。
2.按权利要求1所述的蜈蚣藻丝状体育苗及海上养殖方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤: a.蜈蚣藻丝状体通过搅拌器打碎，至平均每个单列藻丝含有10个以下细胞程度； b.打碎的蜈蚣藻丝状体喷洒到基质上，遮光静置24小时以上； c.接种好丝状体的基质添加富含无机氮磷的海水培养基,室温下培养； d.丝状体在基质表面形成盘状体后，肉眼可见，在原有培养条件不变的情况下，通气培养; e.盘状体上出现直立枝后，可继续人工室内培养至蜈蚣藻小苗达到3-5mm左右，下海培养。
3.按权利要求2所述的蜈蚣藻丝状体育苗及海上养殖方法，其特征在于，所述步骤b的基质是指贝壳、玻璃片或苗绳及其他具有硬质或光滑表面的基质。
4.按权利要求2所述的蜈蚣藻丝状体育苗及海上养殖方法，其特征在于，所述步骤c的室温下培养是指在室温下，自然光或35-70 HiEnT2iT1的人工光源下静置培养10-14天，光暗周期为12h:12h。
5.按权利要求2所述的蜈蚣藻丝状体育苗及海上养殖方法，其特征在于，人工光源为52 mEm2S 、
6.按权利要求2所述的蜈蚣藻丝状体育苗及海上养殖方法，其特征在于，所述步骤d中丝状体在基质表面形成盘状体的时间是2周至20天。
7.按权利要求2所述的蜈蚣藻丝状体育苗及海上养殖方法，其特征在于，所述步骤e中盘状体上出现直立枝的时间是20至30天。
8.按权利要求1或2所述的蜈蚣藻丝状体育苗及海上养殖方法，其特征在于:所获得的蜈蚣藻苗可直接在海上长成藻体至收获；也可以在藻体长至6cm以上时将其从原附苗基质上采下，夹到苗绳上继续培养至藻体养成。
【文档编号】A01G33/00GK103461090SQ201310455703
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年9月30日 优先权日:2013年9月30日
【发明者】王金霞, 董瑞琪, 张海霞, 周百成 申请人:南通中国科学院海洋研究所海洋科学与技术研究发展中心, 中国科学院海洋研究所