专利名称：一种蜈蚣藻丝状体的诱导方法
技术领域：
本发明涉及蜈蚣藻的种苗培育技术，具体涉及一种蜈蚣藻丝状体的诱导方法。
技术背景
蜈蚣藻(Grateloupia)，含有丰富的卡拉胶，在食品工业作为增稠剂、稳定剂；在纺织工业作为上浆材料；由于卡拉胶寡糖在免疫领域也具有发展潜力，所以也是具有食疗价值的经济海藻；因此蜈蚣藻的原料需求量越来越大。但蜈蚣藻的来源非常有限，目前主要采集野生的资源，自然分布的空间少，数量不稳定，质量难保证；而人工养殖的瓶颈是种苗问题，虽然有通过组织切段诱导丝状体产生与丝状体快速培养的蜈蚣藻丝状体的诱导研究，如张泽宇(大连水产学院学报、2007年，第22卷第3期、164-169)报道了在含有营养液的培养皿中，将蜈蚣藻切段(长50 250微米)在10、15、20°C条件下培养试验；试验表明蜈蚣藻切段在20°C下丝状体形成最快，数量最大，在15°C下丝状体生长最快；经过2个月左右的室内培养，生长出蜈蚣藻幼苗。但培养皿比表面积大，所以水分挥发快，容易污染，不利于丝状体的诱导；这些切段大部分只形成再生幼芽(藻体基部、主枝中部、主枝顶端部及侧顶的切段可以长出幼芽，但不能产生假根)，无法成为种苗，少部分才形成丝状体(藻体固着器可以产生假根成为丝状体)，该诱导方法与自然繁殖基本相同，因此目前蜈蚣藻丝状体的诱导方法还不能用于实际育苗过程。发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种蜈蚣藻丝状体的诱导方法，该诱导方法水分挥发慢，污染少，有利丝状体的诱导，且藻体固着器能形成丝状体，藻体基部易形成丝状体，主枝中部也可以形成丝状体，因此该诱导方法诱导快速、丝状体诱导量较大，解决了蜈蚣藻人工养殖的种苗瓶颈。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为一种蜈蚣藻丝状体的诱导方法， 由下述步骤组成a、诱导液制备将洁净海水煮沸后冷却得到清洗液，在所述清洗液加入氧化锗、硝酸钠和磷酸钠，搅拌均勻得到诱导液，所述诱导液中所述氧化锗的浓度为1 :3mg/L，所述硝酸钠的浓度为20 50mg/L，所述磷酸钠的浓度为5 10mg/L ；b、消毒和切段将蜈蚣藻的藻体固着器、基部和主枝中部用所述清洗液清洗干净，浸入质量百分浓度为5 10%的双氧水中浸泡2 5分钟，浸泡完毕，取出蜈蚣藻的藻体固着器、 基部和主枝中部，用所述清洗液冲洗干净；然后将冲洗干净的蜈蚣藻的藻体固着器、基部和主枝中部切成长为0. 1 5mm的切段，所述切段用所述清洗液漂洗干净，得到藻体切段；c、诱导在M孔板的每一孔中加满所述诱导液，在每一孔中再放入1 3段所述藻体切段，在温度22°C、光照强度为200 400Lx的条件下诱导培育(约4 7天培育)至丝状体长度为0. 05 0. 18mm，得到诱导丝状体；d、培育将上述诱导丝状体转移至盛有所述诱导液的三角烧瓶中，在温度22°C、光照强度为200 400Lx的条件下培育成蜈蚣藻幼苗，该三角烧瓶每隔15 25天更换所述诱导液。
与现有技术相比，本发明的优点在于一种蜈蚣藻丝状体的诱导方法，通过诱导液制备、消毒和切段、诱导和培养过程，诱导液为洁净海水煮沸、冷却后加入适量的营养盐(硝酸钠和磷酸钠)和氧化锗，蜈蚣藻的藻体切段是在温度22°C、光照强度为200 400Lx的 24孔板的孔中诱导为诱导丝状体，诱导丝状体在盛有诱导液的三角烧瓶中培育为蜈蚣藻幼苗。该诱导方法中由于是在添加有诱导液的M孔板的孔中诱导，诱导时比表面小，水分挥发慢，污染少，有利丝状体的诱导，诱导速度快，4 7天就能诱导得到0. 05 0. 18mm的诱导丝状体，且藻体固着器、基部的藻体切段基本都可诱导形成丝状体，主枝中部的藻体切段也有部分可以诱导形成丝状体，丝状体诱导量较大，解决了蜈蚣藻人工养殖的种苗瓶颈问题。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1一种蜈蚣藻丝状体的诱导方法，由下述步骤组成a、诱导液制备将洁净海水煮沸后冷却得到清洗液，在该清洗液加入氧化锗、硝酸钠和磷酸钠，搅拌均勻得到诱导液，诱导液中氧化锗的浓度为ang/L，诱导液中硝酸钠的浓度为 35mg/L，磷酸钠的浓度为8mg/L ；b、消毒和切段用清洗液将蜈蚣藻的藻体固着器、基部和主枝中部清洗干净，放入质量百分浓度为7%的双氧水中浸泡3分钟，浸泡后取出，用清洗液将蜈蚣藻的藻体固着器、基部和主枝中部冲洗干净；然后将冲洗干净的蜈蚣藻的藻体固着器、基部和主枝中部切成长为 0. 1 5mm的切段，切段用清洗液漂洗干净，得到藻体切段；c、诱导在M孔板的每一孔中加满诱导液，在每一孔中再放入1 3段藻体切段，在温度22°C、光照强度为200 400Lx的条件下诱导培育至丝状体长度为0. 05 0. 18mm，得到诱导丝状体；d、培育将上述诱导丝状体转移至盛有诱导液的三角烧瓶中，该三角烧瓶每隔15 25 天更换诱导液，在温度22°C、光照强度为200 400Lx的条件下培育成蜈蚣藻幼苗。
实施例2与实施例1基本相同，所不同的只是诱导液中氧化锗的浓度为lmg/L，诱导液中硝酸钠的浓度为50mg/L，磷酸钠的浓度为5mg/L。双氧水的质量百分浓度为5%，藻体固着器、基部和主枝中部浸泡时间为5分钟。
实施例3与实施例1基本相同，所不同的只是诱导液中氧化锗的浓度为:3mg/L，诱导液中硝酸钠的浓度为20mg/L，磷酸钠的浓度为10mg/L。双氧水的质量百分浓度为10%，藻体固着器、基部和主枝中部浸泡时间为2分钟。
权利要求
1.一种蜈蚣藻丝状体的诱导方法，其特征在于由下述步骤组成a、诱导液制备将洁净海水煮沸后冷却得到清洗液，在所述清洗液加入氧化锗、硝酸钠和磷酸钠，搅拌均勻得到诱导液，所述诱导液中所述氧化锗的浓度为1 :3mg/L，所述诱导液中所述硝酸钠的浓度为20 50mg/L，所述诱导液中所述磷酸钠的浓度为5 10mg/L ；b、消毒和切段将蜈蚣藻的藻体固着器、基部和主枝中部用所述清洗液清洗干净，浸入质量百分浓度为5 10%的双氧水中浸泡2 5分钟，浸泡完毕，取出蜈蚣藻的藻体固着器、 基部和主枝中部，用所述清洗液冲洗干净；然后将冲洗干净的蜈蚣藻的藻体固着器、基部和主枝中部切成长为0. 1 5mm的切段，所述切段用所述清洗液漂洗干净，得到藻体切段；c、诱导在M孔板的每一孔中加满所述诱导液，在每一孔中再放入1 3段所述藻体切段，在温度22°C、光照强度为200 400Lx的条件下诱导培育至丝状体长度为0. 05 0. 18mm，得到诱导丝状体；d、培育将上述诱导丝状体转移至盛有所述诱导液的三角烧瓶中，在温度22°C、光照强度为200 400Lx的条件下培育成蜈蚣藻幼苗，该三角烧瓶每隔15 25天更换所述诱导液。
2.如权利要求1所述的一种蜈蚣藻丝状体的诱导方法，其特征在于步骤a中，所述诱导液中所述氧化锗的浓度为ang/L，所述硝酸钠的浓度为35mg/L，所述磷酸钠的浓度为8mg/ L0
3.如权利要求1所述的一种蜈蚣藻丝状体的诱导方法，其特征在于步骤b中，所述双氧水的质量百分浓度为7%，所述蜈蚣藻的藻体固着器、基部和主枝中部在所述双氧水中浸泡时间为3分钟。
全文摘要
本发明公开了一种蜈蚣藻丝状体的诱导方法，通过诱导液制备、消毒和切段、诱导和培养过程，诱导液为洁净海水煮沸、冷却后加入适量的营养盐和氧化锗，蜈蚣藻的藻体切段是在温度22℃、光照强度为200～400Lx的24孔板的孔中诱导为诱导丝状体，诱导丝状体在盛有诱导液的三角烧瓶中培育为蜈蚣藻幼苗。由于是在添加有诱导液的24孔板的孔中诱导，诱导时比表面小，水分挥发慢，污染少，有利丝状体的诱导，诱导速度快，4～7天就能诱导得到0.05～0.18mm的诱导丝状体，且藻体固着器、基部的藻体切段基本都可诱导形成丝状体，主枝中部的藻体切段也有部分可以诱导形成丝状体，丝状体诱导量较大，解决了蜈蚣藻人工养殖的种苗瓶颈问题。
文档编号A01H4/00GK102511389SQ20111038300
公开日2012年6月27日 申请日期2011年11月28日 优先权日2011年11月28日
发明者严小军, 周成旭, 徐善良, 朱艺峰, 谢贞优, 骆其君 申请人:宁波大学