一种甜玉米单倍体化学浸种加倍方法
【专利摘要】本发明涉及农业【技术领域】，具体涉及一种甜玉米单倍体化学浸种加倍方法。该方法包含如下具体步骤：首先对甜玉米种子表面消毒，再将消毒后的种子放入含有秋水仙素的营养液中进行加倍处理，然后播种移栽；所述的加倍处理的条件为：含质量分数为0.02％秋水仙素的营养液32℃下加倍处理30h、含质量分数为0.02％秋水仙素的营养液32℃下加倍处理24h或含质量分数为0.06％秋水仙素的营养液32℃下加倍处理30h。该方法机械损伤少、操作方便、植物药害率低、对人体的毒害作用小，平均加倍率为11.82％～14.29％，高于传统加倍方法和自然加倍方法的6～7倍，便于规模化应用。
【专利说明】
【技术领域】
[0001] 本发明涉及农业【技术领域】，具体涉及一种甜玉米单倍体化学浸种加倍方法。 一种甜玉米单倍体化学浸种加倍方法
【背景技术】
[0002] 甜玉米籽粒含有丰富和均衡的营养成分，具有较好的口感，已经成为不可或缺的 营养和保健食品之一。单倍体技术因其育种周期短、效率高、自交系纯度高，是玉米育种的 首选方法。
[0003] 目前，单倍体育种技术在普通玉米中应用非常广泛，但甜玉米的相关研究却报道 较少。限制单倍体育种主要障碍之一是单倍体的加倍率偏低，影响因素非常多，除了加倍材 料的遗传背景外，温度、湿度、时间、时机、试剂的浓度与类型等均显著影响加倍率。相关研 究在普通玉米中已经比较全面和深入，但针对甜玉米的研究非常缺乏。甜玉米因抗性较弱， 加倍过程因药物毒性植株极易死亡；同时其单倍体幼苗弱小、抗逆性差，对加倍过程的机械 损伤非常敏感，因此，选择机械损伤少、操作方便的加倍方法，对甜玉米的单倍体育种应用 非常关键。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种甜玉米单倍体化学浸种 加倍方法。
[0005] 本发明的目的通过下述技术方案实现：
[0006] -种甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，包含如下具体步骤：
[0007] (1)种子消毒
[0008] 甜玉米单倍体种子先用乙醇消毒，再用次氯酸钠溶液处理，之后再用无菌水冲 洗；
[0009] (2)种子加倍
[0010] 将步骤（1)中消毒过的甜玉米单倍体种子放入含有秋水仙素的营养液中进行加 倍处理，加入营养液的量以恰好浸没种子为准；之后，再用清水冲洗；
[0011] ⑶播种
[0012] 将步骤（2)处理过的甜玉米种子播种到育苗盘中，常温下育苗；
[0013] ⑷移栽
[0014] 待玉米苗长至3?4片叶后，移栽至大田；
[0015] 步骤⑴中所述的甜玉米优选为甜玉米"粤甜13号"；
[0016] 步骤⑴中所述的乙醇的体积分数优选为75%，消毒时间为lmin?2min ;
[0017] 步骤（1)中所述的体积分数为75%的乙醇消毒的时间优选为lmin ;
[0018] 步骤⑴中所述的次氯酸钠溶液的体积分数为15%，处理时间为15min?20min ;
[0019] 步骤（1)中所述的体积分数为15%的次氯酸钠溶液处理的时间优选为15min ;
[0020] 步骤⑴中所述的无菌水的冲洗次数为3?5次；
[0021] 步骤⑴中所述的无菌水的冲洗次数优选为3次；
[0022] 步骤（2)所述的加倍处理的条件为：含质量分数为0. 02%秋水仙素的营养液32°C 下加倍处理30h、含质量分数为0. 02%秋水仙素的营养液32°C下加倍处理24h或含质量分 数为0. 06%秋水仙素的营养液32°C下加倍处理30h ;
[0023] 步骤（2)所述的加倍处理的条件优选为含质量分数为0. 02%秋水仙素的营养液 32°C下加倍处理30h ;
[0024] 步骤（2)中所述的营养液包含MS大量元素、MS微量元素和20g/L蔗糖；
[0025] 步骤（2)中所述的清水冲洗的时间为30min?40min ;
[0026] 步骤⑵中所述的清水冲洗的时间优选为30min ;
[0027] 步骤（3)中所述的常温为25°C?28°C ;
[0028] 本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0029] (1)本发明提供的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法在浸种加倍前不经过清水浸 泡，而是经过种子消毒后直接采用秋水仙素加倍，不仅极大地节约了种子处理时间，更重要 的是可有效降低甜玉米单倍体种子的药害率，提高加倍效率；
[0030] (2)本发明提供的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法秋水仙素使用浓度低，在减少 化学药品消耗、有效地降低实验成本的同时，可有效地降低甜玉米苗的药害率，以及减轻播 种时对人体的毒害作用；
[0031] (3)本发明提供的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法平均加倍率为11. 82 %? 14. 29%，加倍率明显高于改良前的传统化学浸种加倍方法，便于规模化应用。
【专利附图】
【附图说明】
[0032] 图1是秋水仙素浓度对甜玉米单倍体植株的散粉率、结实率和药害率影响的结果 分析图。
[0033] 图2是加倍时间对甜玉米单倍体植株的散粉率、结实率和药害率影响的结果分析 图。
[0034] 图3是加倍温度对甜玉米单倍体植株的散粉率、结实率和药害率影响的结果分析 图。
【具体实施方式】
[0035] 下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限 于此。
[0036] 实施例和对比实施例数据计算方式：
[0037] 散粉率（％ )=散粉株数/存活双单倍体数X 100%
[0038] 药害率（％ )=药害株数/出苗数X 100%
[0039] 结实率（％)=结实株数/存活双单倍体数X 100%
[0040] 实施例中所用甜玉米品种"粤甜13号"由广东省农业科学院作物研究所玉米室提 供，秋水仙素购于广州市丛源仪器有限公司，表1为营养液详细配方。
[0041] 表1营养液配方
[0042]
【权利要求】
1. 一种甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，其特征在于包含如下具体步骤： (1) 种子消毒 甜玉米单倍体种子先用乙醇消毒，再用次氯酸钠溶液处理，之后再用无菌水冲洗； (2) 种子加倍 将步骤（1)中消毒过的甜玉米单倍体种子放入含有秋水仙素的营养液中进行加倍处 理，加入营养液的量以恰好浸没种子为准；之后，再用清水冲洗； (3) 播种 将步骤（2)处理过的甜玉米种子播种到育苗盘中，常温下育苗； (4) 移栽 待玉米苗长至3?4片叶后，移栽至大田。
2. 根据权利要求1所述的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，其特征在于： 步骤（1)中所述的甜玉米为甜玉米"粤甜13号"。
3. 根据权利要求1所述的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，其特征在于： 步骤（2)所述的加倍处理的条件为：含质量分数为0. 02%秋水仙素的营养液32°C下加 倍处理30h、含质量分数为0. 02%秋水仙素的营养液32°C下加倍处理24h或含质量分数为 0. 06 %秋水仙素的营养液32°C下加倍处理30h。
4. 根据权利要求3所述的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，其特征在于： 步骤（2)所述的加倍处理的条件为含质量分数为0.02%秋水仙素的营养液32°C下加 倍处理30h。
5. 根据权利要求1所述的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，其特征在于： 步骤（1)中所述的乙醇的体积分数为75%，消毒时间为lmin?2min。
6. 根据权利要求5所述的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，其特征在于： 步骤（1)中所述的体积分数为75%的乙醇消毒的时间优选为lmin。
7. 根据权利要求1所述的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，其特征在于： 步骤（1)中所述的次氯酸钠溶液的体积分数为15%，处理时间为15min?20min。
8. 根据权利要求7所述的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，其特征在于： 步骤（1)中所述的体积分数为15%的次氯酸钠溶液处理的时间为15min。
9. 根据权利要求1所述的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，其特征在于： 步骤（1)中所述的无菌水的冲洗次数为3?5 ; 步骤（2)中所述的清水冲洗的时间为30min?40min。
10. 根据权利要求1所述的甜玉米单倍体化学浸种加倍方法，其特征在于： 步骤（2)中所述的营养液包含MS大量元素、MS微量元素和20g/L鹿糖。
【文档编号】A01H1/08GK104082132SQ201410290716
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年6月24日 优先权日:2014年6月24日
【发明者】胡建广, 李高科, 陈新振, 李春艳 申请人:广东省农业科学院作物研究所