一种含有石榴葡聚糖与咪鲜胺锰盐的杀细菌组合物及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种杀细菌组合物，其特征在于，所述组合物含有活性成分石榴葡聚糖和咪鲜胺锰盐，其中二者的重量比为30:1-1:30。所述杀细菌组合物不但可以有效的用于水果保鲜，而且具有环境相容性好、不易产生抗性、物理化学稳定性好、药效时间长、低毒、低残留等优点，是一种新型的保鲜剂。该药剂相比单剂具有良好的增效作用，且能延缓单剂的抗药性，同时安全无毒、环境友好。
【专利说明】-种含有石摺葡聚糖与咪鲜胺猛盐的杀细菌组合物及其应 用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及农药领域，特别是农用保鲜领域；具体而言，涉及一种农用保鲜杀细菌 组合物及其制备方法和应用，特别是涉及一种含有石恼葡聚糖与咪鲜胺猛盐的保鲜杀细菌 组合物及其保鲜应用。 技术背景
[0002] 石恼为石恼科石恼属植物，在我国栽培广泛，栽植面积达6466她m2,居世界首位， 产量达38万多吨，主要分布于陕西、山东、安徽、四川和云南五省。石恼是一种药食两用植 物，石恼果实不仅营养丰富，而且是历代药典中的重要中药。现代科学研究也证实，石恼果 实在预防和治疗也脑血管疾病、癌症等方面有特效，而该些功效很可能来自于果实中的多 酷类物质。石恼果实的各部位，包括果皮、果肉、种子内都含有一定量的多酷类物质，其中W 果皮中含量最为丰富。石恼皮为石恼加工废料，目前除少数药用外，大多未加W利用，探寻 石恼皮加工利用的途径和方法，具有重要的社会、经济价值。
[0003] 报道的石恼皮的用途为；石恼皮是中药：（石恼皮、石恼根皮）石恼皮；（收涩药： 止泻药）酸、涩，温。归大肠经。功效：止泻，杀虫。应用；1、用于久泻久痴及便血，脱化。可 炒炭研末服。久泻脱化，脾胃虚弱，可与黄茂、白术、升麻等配伍。久痴而湿热未尽者，应与 黄连、黄柏等配伍。2、用于蝴虫、缘虫、烧虫等寄生虫病。可与滨柳配伍。
[0004] 咪鲜胺猛盐；咪鲜胺猛盐具有内吸、传导、预防、保护、治疗等多重作用，属于咪哇 类杀细菌剂，对子囊菌引起的多种作物病害有特效。通过抑制留醇的生物合成而起作用的。 主要用于番茄、西葫芦、梨树、苹果、火龙果、巧橘、水稻、小麦、大白菜、生菜、玻菜等防治腐 烂病、晚疫病、黑星病等。
[0005] 农业生产上，除了作物生长期的病虫害防治外，在果子、蔬菜等鲜活农产品采收后 常常需要对库存产品做防腐保鲜处理，既利于长途运输也延长了农产品新鲜程度。
[0006] 目前，农产品果子保鲜主要为北方的苹果、梨、縣猴桃、葡萄、冬巧，南方的巧橘、厮 澄、香蕉等。果品类农产品保鲜主要解决的问题是产品胆藏期的病害，如苹果炭痘病、红黑 点病，霉星病及各种生理性病害，葡萄炭痘病、褐斑病，冬巧的炭痘病、红斑病等，巧枯胆藏 期的病害主要有青（绿）霉病、炭痘病、蒂腐病、黑腐病、褐腐病、酸腐病、干瘤病等。据不完 全统计如果果子采收入库前不进行正常的保鲜处理，由于W上病害常常会造成20-30%的 烂果，严重地可达60%，损失很大。如我们在陕西最大的苹果经销商陕西华圣果业公司调 研，库存苹果每年发生浸染性病害的损耗占55. 8%;生理性病害的损耗占15. 2%;病果损失 率一般在4 %左右，个别年份病果损失率高达8 %左右。
[0007] 在四川广安县巧橘产区，我们调研，在运输、胆藏过程中由于腐烂、霉变造成的巧 橘损失一般在10 % W上，温度高、湿度大时损失在30 % W上。
[0008] 蔬菜保鲜主要为南菜北运地区产品，如每年春节海南、广东等地的反季节蔬菜。由 于新鲜蔬菜在采收后，水分含量很高，在加上库存和运输过程中温度变化，常常会发生腐烂 病、炭痘病、黑斑病等。据不完全统计仅此问题如果处理不好，就会造成蔬菜产品20-40% W 上的损失。
[0009] 目前市场上用于果蔬防腐保鲜的产品主要为化学农药为主，如咪鲜胺系列，百可 得、腐霉利、己霉哇等等，总体效果还不错，但随着该些药剂的大量使用，效果越来越差。而 生物药剂防腐保鲜的药剂目前还不多。
[0010] 由于果蔬农产品直接用于人们生活，涉及食品安全。保鲜产品就必须严格要求高 效、安全、低毒、无残留。
[0011] 因此，开发合理、高效、低毒、环保的生物性或复配的防腐保鲜产品成为农业生产 上的必须。
【发明内容】
[0012] 本发明为解决上述技术背景中的不足，提供了一种用于巧橘、苹果、香蕉等保鲜的 药剂及其制备方法，该药剂不但可W有效的用于水果保鲜，而且具有环境相容性好、不易产 生抗性、物理化学稳定性好、药效时间长、低毒、低残留等优点，是一种新型的保鲜剂。该药 剂相比单剂具有良好的增效作用，且能延缓单剂的抗药性，同时安全无毒、环境友好。
[0013] 为实现上述目的，本发明是通过W下技术方案实现的。
[0014] 本发明涉及一种杀细菌组合物，其特征在于，所述组合物含有活性成分石恼葡聚 糖和咪鲜胺猛盐，其中二者的重量比为30:1-1:30。
[0015] 优选地，该杀细菌组合物中石恼葡聚糖和咪鲜胺猛盐的重量比为10:1?1:10。
[0016] 更优选地，该杀细菌组合物中石恼葡聚糖和咪鲜胺猛盐的重量比为5:1?1:5。
[0017] 本发明涉及一种杀细菌剂，其特征在于，该杀细菌剂含有1?90重量％的如上所 述的杀细菌组合物，余量为农药上可接受的载体和助剂。
[0018] 优选地，该杀细菌剂含有3?80重量％的如上所述的杀细菌组合物。
[0019] 更优选地，该杀细菌剂含有15?70重量％的如上所述的杀细菌组合物。
[0020] 所述石恼葡聚糖是采用如下方法制得的：
[0021] 石恼皮原料来源于陕西临撞，提取工艺方法参考王岩--辟辟学院毕业论文《正交 法优化怀远石恼皮多糖提取工艺》及赵盈、张海生等人陕西师范大学食品工程与营养科学 院、陕西教育学院生命科学院《石恼皮多糖的水浸提取工艺优化》论文中的方法。即本发明 的石恼葡聚糖采用水浸提取工艺，即提取温度8(TC，提取时间化，料液比1:20,提取次数3 次，合并提取液，最后提取液经真空浓缩，喷雾干燥，得到本发明的石恼葡聚糖。
[0022] 石恼葡聚糖采用高效液相色谱法测定含量。具体测定方法是；试样用流动相溶解， W己膳+0. 1 %磯酸水溶液（体积比为5:佩为流动化使用W Ci8为填料的不镑钢柱和紫 外检测器，在波长258nm下，对试样中的石恼葡聚糖进行反相高效液相色谱分离和测定，外 标法定量。石恼葡聚糖的保留时间为6. Imin和7. 8min)。实施工艺中提取物中的石恼葡聚 糖含量> 6.0%即为合格品。
[0023] 咪鲜胺猛盐从市场购买，生产厂家为南京红太阳化工股份有限公司。
[0024] 二者复配用已知的方法可W制备成适合农业使用的任意一种剂型，比较好的剂型 为可湿性粉剂和水分散粒剂。
[00巧]进一步地，本申请涉及将上述杀细菌组合物或杀细菌剂用于防治细菌病害的用 途。
[002引本发明中使用的辅助成分包括；润湿齐U、分散齐U、粘结齐U、稳定剂、助息剂、崩解剂、 吸附剂和填充料等及其它有益于有效成分在制剂中稳定和药效发挥的已知物质，都是农药 制剂中常用或允许使用的各种成分，并无特别的限定，具体成分和用量根据配方要求通过 简单试验确定。
【具体实施方式】
[0027] W下用具体实施例进行说明。所有配方中百分比均为重量百分比。本发明组合物 各种制剂的加工工艺均为现有技术，根据不同情况可W有所变化。
[0028] 本发明的石恼葡聚糖采用水浸提取工艺来进行提取，提取温度8(TC，提取时间 2h，料液比1: 20 (重量比），提取次数3次，合并3次提取的提取液，提取液经真空浓缩，喷雾 干燥，得到本发明的石恼葡聚糖。
[0029] 石恼葡聚糖采用高效液相色谱法测定含量。具体测定方法是；试样用流动相溶解， W己膳+0. 1 %磯酸水溶液（体积比为5:佩为流动化使用W Ci8为填料的不镑钢柱和紫 外检测器，在波长258nm下，对试样中的石恼葡聚糖进行反相高效液相色谱分离和测定，外 标法定量。石恼葡聚糖的保留时间为6. Imin和7. 8min)。实施工艺中提取物中的石恼葡聚 糖含量> 6.0%即为合格品。
[0030] 实施例1:35%石恼葡聚糖?咪鲜胺猛盐可湿性粉剂（W 1000公斤为例）
[0031] 石撤倾聚擲巧巧 潮 50公斤 睐鲜胺M訊 ：泌％ :;〇{)公斤 润湿剂权#粉 觸 郎公斤 分駿剂難） WI, 80公斤 勘M剂姑酸读《! 1% 10公斤 啜附剂1'1炭呢 i纖 100公斤 巧化料扣岭J补足100靖 .'1{的公斤
[003引生产工艺；依次将400公斤填充料高岭±、100公斤防结块剂白炭黑、10公斤助息 剂娃酸镇铅、50公斤石恼葡聚糖母药、300公斤咪鲜胺猛盐、80公斤分散剂NN0和60公斤润 湿剂拉开粉投入1000升的前混合罐中，揽拌30分钟，经气流粉碎到325目W上，粉碎后的 物料在1000升的后混合罐揽拌1小时，取样分析，合格后包装入库。
[003引实施例2 ;80%石恼葡聚糖?咪鲜胺猛盐可湿性粉剂（W 1000公斤为例）
[0034] 備補萊總 2(觀 200 &订- 咪鲜較输献 60。;， 600公斤 润湿剂I.汾1 31 30公巧 分敞剂1''1) 51 5()公斤
[00 巧] 啜附剂I彭涧.I-. 6黯 朗公斤 填充料轻摄碳酸巧 补化100% 抓公厅
[0036] 生产工艺同实施例1
[0037] 实施例3 ; 10. 1 %石恼葡聚糖?咪鲜胺猛盐水分散粒剂（W 1000公斤为例）
[0038] ^5鑛葡簾? 0.1黯 1公斤 mmtm& i〇% i〇〇 公斤 涧靈麵LWET/P 3% 30公斤 勢散綱2500 4% .10公斤 tt鑛摘貧** 1% !()公斤 扁解麵30% 孤0公斤 漢變鱗湯5? 20% 200公斤 壞繁料玉米淀善 补儿1 ()? 319公斤
[0039] 生产工艺；依次将填充料319公斤玉米淀粉和200公斤滑石粉、10公斤粘结剂黄 糊精、300公斤崩解剂氯化馈、1公斤石恼葡聚糖母药、100公斤咪鲜胺猛盐、40公斤分散剂 2500和30公斤润湿剂LWET/F投入1000升的前混合罐中，揽拌30分钟，经气流粉碎到500 目W上，粉碎后的物料在1000升的后混合罐揽拌1小时，取样分析，合格后将物料投入捏合 机，加适量水捏合，经造粒机造粒后干燥，用筛分筛出需要颗粒大小，不合适的颗粒重新捏 合造粒，合适的颗粒分析合格后包装入库。
[0040] 实施例4 ;50%石恼葡聚糖?咪鲜胺猛盐水分散粒剂（W 1000公斤为例）
[0041] 片權鑛聚鶴 10% 100公斤 咪鲜駭猛盐 40% 400公斤 润湿剂故M0 沉 訊公斤 分鼓剂2700 2% 20公斤 分教剂NOW 8% 撕公厅 粘结剂聚乙---:解 1% 10公斤 崩瞬剂硫酸按 15% 巧0公斤 填宛料巧峰上 补足100。。 190公斤
[0042] 生产工艺同实施例3。
[0043] 生测试验如下：
[0044] 石恼葡聚糖与咪鲜胺猛盐组合对巧橘青霉菌、巧橘绿霉菌的毒力测定
[004引 1.试验条件
[0046] 1. 1供试病原菌：
[0047] 巧橘青霉菌（PeniciIlium italicum Wehmer)巧橘绿霉菌（PeniciIlium digitatum Sacc)在西北农林科技大学植保学院植物病理研究室提纯、保存并提供。1.2培 养条件：
[0048] 供试菌种及试验后病菌的培养条件为温度为18?27C，相对湿度90% W上。
[004引 2.试验设计
[0050] 2. 1供试药剂：
[0051] 石恼葡聚糖（口11]1；[03肖拘]131：111]11(16义付3]1)含量6%母粉，由陕西恒田化工有限公 司研发室提供。
[0052] 咪鲜胺猛盐（prochloraz-manganese chloride complex) 98 %原药，由江苏辉丰 公司提供。
[0053] 2. 2药剂浓度和配比设计及溶液配制：
[0054] 石恼葡聚糖溶液；称取0. Olg石恼葡聚糖母粉，用0. 2血甲醇溶解，加入含0. 1% TweenSO乳化剂的无菌水98. 3ml，揽拌均匀，配制成lOOmg/L母液，再用含0. 1 % TweenSO乳 化剂的无菌水稀释成1〇、5、2. 5、1. 25、0. 625、0. 3125mg/L浓度备用；
[00巧]咪鲜胺猛盐溶液；称取0. 01g98 %咪鲜胺猛盐原药，用0. 2ml甲醇溶解，加入含 0. 1 % TweenSO乳化剂的无菌水96. 8ml配制成lOOmg/L母液，再用含0. 1 % TweenSO乳化剂 的无菌水稀释成10、5、1、0. 5、0. 1、0. 05mg/L浓度备用；
[0056] 各混配溶液；分别取5、5、5、50、150ml lOmg/L石恼葡聚糖溶液分别加入到5、50、 150、5、5ml lOmg/L咪鲜胺猛盐溶液中制成lOmg/L石恼葡聚糖?咪鲜胺猛盐 1:30、10:1和30:1溶液，再用含0. 1% TweenSO乳化剂的无菌水稀释成各试验浓度。
[0057] 对照溶液；0. 2ml甲醇加95ml含0. 1 % TweenSO乳化剂的无菌水。
[00则 3.测J定方法：
[0059] 参照生测标准方法NY/T1156. 3-2006,采用平皿叶片法。
[0060] 抱子囊息浮液配制；选取培养好的巧橘青霉菌、巧橘绿霉菌抱子囊，用4C蒸觸水 稀释，浓度控制在每毫升1 X 1〇5个--1 X 1〇7个抱子囊，4C下存放备用。
[0061] 选取成熟较好无病害的巧橘果实300个，每10个一组，用消毒过的刀片在巧橘果 实表皮轻轻划开少许伤口，将配制好的药液均匀喷施于果子上，待药液自然风干后，按处理 标记后排放在保湿盒中。在药剂处理24小时后，将准备好的抱子囊息浮液点滴10 y L接种 于果子表皮上。每果子接种4滴，每处理10个果子，试验设不含药剂处理的空白对照。接 种后盖上皿盖，置于人工气候培养箱内，在没有光照，温度18?27C，相对湿度控制在90 % W上条件下培养。
[0062] 4.数据调查与统计分析
[006引 4. 1调查方法：
[0064] 每天观察果子霉菌的发病情况，3天后待空白对照发病时调查防治效果，7天、15 天后分别再调查果子发病情况，统计果子发病率和病情指数，计算防效。
[0065] 4. 2增效作用评价方法
[0066] 参照生测标准方法NY/T1156. 6-2006,根据Sun&Johnson(1960)的共毒系数法 (CTC)来评价药剂混配的增效作用，即CTC《80为枯抗作用，80 < CTC < 120为相加作用， CTC> 120为增效作用。
[0067] 所有数据均采用SAS6. 12系统软件进行分析，求出毒力回归方程式、相关系数（r) 和EC50(95%置信度）。
[006引 5.结果与分析：
[0069] 采取5点法取5个代表性的配比，并将该5个配比和标准药剂进行毒力测定。石 恼葡聚糖和咪鲜胺猛盐复配对巧橘青、绿霉菌的毒力测定结果见表1。由表1可见，石恼葡 聚糖与咪鲜胺猛盐W 1:1、1:10、1:30、10:1和30:1的比例混配对巧橘青、绿霉菌均表现出 增效作用，其ECs。值分别为2. 67、3. 17、3. 07、3. 29和3. 43mg/L，共毒系数分别为137. 80、 143. 82U59. 40、145. 54和138. 00,其中W 1:30的比例混配增效作用最好。
[0070] 表1甲基营养型芽抱杆菌和叶枯哇复配对烟草青枯病的毒力测定结果
[0071]
【权利要求】
1. 一种杀细菌组合物，其特征在于，所述组合物含有活性成分石榴葡聚糖和咪鲜胺锰 盐，其中二者的重量比为30:1-1:30。
2. 根据权利要求1所述的杀细菌组合物，其特征在于，二者的重量比为10:1?1:10。
3. 根据权利要求2所述的杀细菌组合物，其特征在于，二者的重量比为5:1?1:5。
4. 一种杀细菌剂，其特征在于，该杀细菌剂含有1?90重量％的权利要求1至3任一 所述的杀细菌组合物，余量为农药上可接受的载体和助剂。
5. 根据权利要求4所述的杀细菌剂，其特征在于，该杀细菌剂含有3?80重量％的如 上所述的杀细菌组合物。
6. 根据权利要求5所述的杀细菌剂，其特征在于，该杀细菌剂含有15?70重量％的如 上所述的杀细菌组合物。
7. 将权利要求1至3任一所述的杀细菌组合物或权利要求4至6任一所述的杀细菌剂 用于防治细菌病害的用途。
【文档编号】A01N59/16GK104397025SQ201410653919
【公开日】2015年3月11日 申请日期:2014年11月17日 优先权日:2014年11月17日
【发明者】唐满仓, 马玉明, 叶龙江, 李林强 申请人:陕西恒田化工有限公司