一种含有海藻酸钠寡糖的植物伤口愈合剂及其用途的制作方法

本发明属于农业技术领域，具体为促进植物伤口愈合技术领域，具体涉及一种主要成分为海藻酸钠寡糖的植物伤口愈合保护剂。

背景技术：
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果树产业是农业经济的重要组成之一，果树栽培种植存在顶端优势，实际生产中常通过对果树进行修剪，人为地制造丰产树形，提高果品的产量和质量，延长结果年限。此外为了改良品种，改变收获期，改善产品质量，增加产量，常对果树进行嫁接。而修剪和嫁接都会在果树上形成伤口，对果树的生长发育及优质果品的生产带来不利的影响，主要表现在以下两个方面：一是机械伤口造成果树流胶的原因之一，如葡萄、猕猴桃、桃树、核桃、柑桔、柠檬等，结果导致树势衰弱、产量减少、果品品质的下降；二是机械损伤的产生使得病菌更容易侵入树体，最终造成树势的衰弱直至死亡，如腐烂病菌的侵入。上述问题制约了果树产业的发展，目前生产中果树伤口愈合主要采用涂抹杀菌剂，也有使用硫酸铜和石灰粉制作糊状保护剂，还有使用接蜡、油漆或者封剪油。其主要作用是抗菌和形成保护层，然而上述方法应用范围有限，应用效果差，使用后还存在在植物体及周围环境中有残留、不易降解、对周围生物及环境产生毒害等问题。因此，需要开发一种安全高效而又具有实用价值的伤口愈合剂，以解决林果树木伤口愈合问题。

海藻酸钠是从海带等海藻中提取的天然多糖碳水化合物，海藻酸钠寡糖是其降解产物，由а-L-甘露糖醛酸(mannuronic acid,M)与b-D-古罗糖醛酸(guluronic acid,G)通过1，4-糖苷键连接并由不同片段(MM段、GG段和MG段)组成的低聚糖，具有相对分子质量小、吸收性强等优点。海藻酸钠寡糖对植物生长发育具有一定的调节功能，对植物的抗逆和提高品质也有显著效果。但目前作为植物伤口愈合剂研究和开发应用的还未见文献和专利报道。海藻酸钠寡糖为来源于天然产物，具有安全、环保、低残留等特点，用于植物伤口愈合剂，相对于其它手段而言更具有优势。本发明本着绿色环保、预防为主的防治思想，旨在提供一种符合环保要求、易于减少伤口发病、促进伤口愈合的植物伤口愈合剂。

技术实现要素：
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本发明目的是提供一种含有海藻酸钠寡糖的植物伤口愈合剂。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

本发明所述的植物伤口愈合剂是一种含有海藻酸钠寡糖的植物伤口愈合剂，其中海藻酸钠寡糖平均分子量为500-5000Da,含量为0.001％-0.02％。

本发明所述的植物伤口愈合剂，还含有植物诱抗剂、营养剂、杀菌剂、杀虫剂、成膜剂中的一种或几种。

本发明所述的植物伤口愈合剂中所含的植物诱抗剂具体为寡聚半乳糖醛酸，平均分子量为500-3000Da,占重量白分比为0.005％-0.01％。

本发明所述的植物伤口愈合剂中所含的植物营养剂具体为腐殖酸，占植物愈合剂重量百分比为1％-5％。

本发明所述的植物伤口愈合剂中所含的杀菌剂具体为苦参碱、小檗碱、除虫菊素、印楝素、鱼藤酮中的一种或几种，占植物愈合剂重量百分比为0.05％-1％。

本发明所述的植物伤口愈合剂中所含的杀虫剂具体为藜芦碱、烟碱中的一种或几种,占植物愈合剂重量百分比为0.05％-1％。

本发明所述的植物伤口愈合剂中所含的成膜剂具体为壳聚糖、海藻酸钠、卡拉胶、普罗兰多糖、可德兰多糖中的一种或多种,占植物愈合剂重量百分比为0.5％-5％。

本发明所述的植物伤口愈合剂，可根据植物种类、病害以及伤口等实际情况制成任何的膏状制剂和液体制剂，液体制剂优选为水剂、微乳剂、悬浮剂或水份分散剂。

本发明所述植物伤口愈合剂可在植物修剪、嫁接或环剥前1-3天，或植物修剪、嫁接或环剥后3天内，在伤口上使用上述愈合剂。

本发明具有的优点和有益效果：

(1)本发明提供的植物伤口愈合剂，综合考虑了诱导果树抗性、促生长、营养、抑菌、保持水分等促进伤口愈合多方面的因素。通过海藻酸钠寡糖处理，促进伤口部位细胞的生长；通过寡聚半乳糖醛酸处理，增强果树伤口部位的抗性；通过腐殖酸处理，为伤口部位的愈合提供充足的营养；通过杀菌剂处理，抑制微生物生长和繁殖；通过杀虫剂处理，驱避害虫侵染和繁殖；通过壳聚糖或海藻酸钠等天然多糖处理，控制伤口部位水份的散失；综合起到了更加理想的伤口愈合效果，可加快伤口的愈合，显著减少腐烂病菌的侵染，在已进行的实施例中，效果优于已有的商品化试剂处理效果。

(2)本发明提供的植物伤口愈合剂所使用的促生长剂海藻酸钠寡糖、诱抗剂寡聚半乳糖，成膜剂壳聚糖、海藻酸钠、卡拉胶、普罗兰多糖、可德兰多糖都属于天然产物，所使用的杀菌剂和杀虫剂都属于植物源来源，用于促进植物伤口愈合剂使用时，对环境无污染，对人体无健康危害。而且和单纯使用杀菌剂保护伤口相比，所用杀菌剂使用量大幅下降。因此是一种新型的、绿色的植物伤口愈合剂。

(3)本发明所提供的植物伤口愈合剂剂型多样，可以在植物修剪、嫁接或环剥前后使用，具有预防和治疗双重效果，植物发病少，伤口愈合快，长势旺。施用方法简单，成本低、易于推广应用。与现有技术相比，解决 果树伤口愈合慢、易受病虫危害、且影响果树生长的问题。使用方便、效果好，具有良好的开发应用前景。

附图说明

图1海藻酸钠寡糖处理烟草细胞中IAA含量随浓度变化。

图2海藻酸钠寡糖处理烟草细胞中IAA含量随处理时间的变化。

具体实施方式

下面结合实施实例对本发明作进一步说明：

实施例1.海藻酸钠寡糖伤口愈合剂对苹果树腐烂病的伤口愈合效果

在陕西洛川果园进行了海藻酸钠寡糖对苹果腐烂病的防治实验。

制剂含量配方为：

海藻酸钠寡糖 0.02g；

寡聚半乳糖醛酸 0.05g；

腐殖酸 10g；

印楝素 0.5g；

藜芦碱 0.5g；

壳聚糖：20g；

补水至 1000g

其它三组处理分别为清水对照、843康复剂和未加海藻酸钠的伤口愈合剂。

在果园随机选取120个病疤进行实验，首先将病灶坏死部分刮去，然后在病疤上均匀涂抹四种药剂，并在距病疤外部1-2cm也涂上愈合剂，共涂抹3次，每次间隔时间10天。随后在处理后60d、180d和270d统计愈合效果。

实验结果如下表所示：

药剂对病疤刮除后的愈合结果(愈伤组织宽度mm)

海藻酸钠植物伤口愈合剂防治苹果树腐烂病的复发结果

上述结果显示海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂对苹果腐烂病伤口愈合有明显的促进作用，三次涂抹后，处理愈伤组织宽度，是生产上常用药剂843康复剂处理宽度的4.33倍。同时次年腐烂病复发结果表明，海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂涂抹3次处理的相对防效是96.16％,而843康复剂相对防效不到70％，结果还显示不加海藻酸钠寡糖，其余成分相同的制剂对苹果腐烂病的伤口愈合也有很好的促进作用。

实施例2.海藻酸钠寡糖伤口愈合剂对苹果树腐烂病的伤口愈合效果

在辽宁金州果园进行了海藻酸钠寡糖对苹果腐烂病的防治实验。

制剂含量配方为：

海藻酸钠寡糖 0.05g；

寡聚半乳糖醛酸 0.1g；

腐殖酸 20g；

苦参碱 0.5g；

烟碱 0.5g；

海藻酸钠：50g；

补水至 1000g

其它三组处理分别为清水对照、福美胂和未加海藻酸钠寡糖的伤口愈合剂。

在果园随机选取120个病疤进行实验，首先将病灶坏死部分刮去，然后涂抹四种药剂，涂抹1次。随后在处理后60d、180d和270d统计愈合效果。

实验结果如下表所示：

药剂对病疤刮除后的愈合结果(愈伤组织宽度mm)

海藻酸钠植物伤口愈合剂防治苹果树腐烂病的复发结果

上述结果显示涂抹海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂仅1次，对苹果腐烂病伤口愈合也有明显的促进作用，处理愈伤组织宽度，是生产上常用药剂8福美胂处理宽度的3.56倍。同时次年腐烂病复发结果表明，海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂涂抹1次处理的相对防效是90.00％,而福美胂相对防效为60％，结果同样显示不加海藻酸钠寡糖，其余成分相同的制剂对苹果腐烂病的伤口愈合也有很好的促进作用。

实施例3.

在陕西兴平果园进行了海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂对苹果腐烂病的防治实验。

制剂含量配方为：

海藻酸钠寡糖 0.02g；

寡聚半乳糖醛酸 0.05g；

腐殖酸 20g；

印楝素 0.5g；

藜芦碱 0.5g；

壳聚糖：20g；

补水至 1000g

其它四组处理分别为清水对照、果腐康、福美胂和多菌灵。

在果园随机选取100个病疤进行实验，首先将病灶坏死部分刮去，然后在病疤上均匀涂抹五种药剂，并在距病疤外部1-2cm也涂上愈合剂，共涂抹2次，间隔时间15天。4个月后调查病疤复发率、防治效果及测量病疤愈合宽度。试验结果表明,海藻酸钠寡糖愈合剂处理没有复发,防效最好,平均愈合宽度达15mm。

实施例4.海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂对枣树环剥伤口的愈合效果

在陕西安康枣园进行了海藻酸钠寡糖愈合剂促进枣树环剥伤口的愈合实验。

制剂含量配方为：

海藻酸钠寡糖 0.01g；

寡聚半乳糖醛酸 0.075g；

腐殖酸 30g；

鱼藤酮 0.5g；

烟碱 0.5g；

卡拉胶：30g；

补水至 1000g

四组处理分别为Ⅰ.清水对照、Ⅱ.海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂环剥前处理，Ⅲ.海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂环剥后处理，和Ⅳ.海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂环剥前处理+海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂环剥后处理。

试验材料为4年生冬枣幼树。按树势随机选择120棵分为四组进行试验，环剥时期为盛花期，海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂环剥前处理时间为环剥前1天进行涂抹处理，环剥宽度为0.9cm。环剥后再进行海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂的后处理。30天后检测伤口的愈合率。并于坐果后检测不同处理的坐果率。

海藻酸钠植物伤口愈合剂对枣树环剥伤口愈合的作用效果

上述结果显示海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂在环剥前处理，对环剥伤口愈合也有明显的促进作用，愈合率显著高于清水对照。而在环剥前后同时使用海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂，对环剥伤口的愈合具有更加明显的 促进作用，愈合率高达93.3％。同时对环剥后枣树的坐果率也有明显的提高作用。

实施例5.海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂对枣树环剥伤口的愈合效果

在河北献县枣园进行了海藻酸钠寡糖愈合剂促进枣树环剥伤口的愈合实验。

制剂含量配方为：

海藻酸钠寡糖 0.05g；

寡聚半乳糖醛酸 0.05g；

腐殖酸 20g；

小檗碱 0.5g；

烟碱 1g；

普罗兰多糖：30g；

补水至 1000g

四组处理分别为Ⅰ.清水对照、Ⅱ.海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂环剥前处理，Ⅲ.海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂环剥后处理，和Ⅳ.海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂环剥前处理+海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂环剥后处理。

试验材料为金丝小枣。按树势随机选择200株分为四组进行试验，环剥时期为盛花期，海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂环剥前处理时间为环剥前3天进行涂抹处理，环剥宽度为0.8cm。环剥后再进行海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂的后处理。30天后检测伤口的愈合率。并于坐果后检测不同处理的坐果率。

海藻酸钠植物伤口愈合剂对枣树环剥伤口愈合的作用效果

实施例6.海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂对嫁接梨成活率率的影响

在陕西蒲城果园进行了海藻酸钠寡糖愈合剂对梨嫁接成活率的影响实验。

制剂含量配方为：

海藻酸钠寡糖 0.1g；

寡聚半乳糖醛酸 0.05g；

腐殖酸 25g；

除虫菊素 0.5g；

藜芦碱 0.5g；

海藻酸钠：30g；

补水至 1000g

将上述配方制剂用于100棵梨树的嫁接，以清香梨一年生枝条为接穗进行嫁接改造，当接穗嫁接到砧木后伤口涂抹本制剂，包扎待成活；按常规嫁接方法为对照。30天后以接穗萌芽为标准，调查接穗成活率；调查结果表明，常规嫁接成活率67％，使用本愈合剂嫁接成活率96％。1年后调查接穗生长情况，1年后接穗平均长度50.21cm，平均枝条直径为1.13cm，而对照接穗平均长度42.67cm，平均枝条直径为1.07cm平均长度。上述结果显示海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂对嫁接植物伤口的愈合有明显促进作用，能显著提高嫁接植物的成活率，而且和对照相比，嫁接后植物长势更旺盛。

实施例7.海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂对嫁接果树成活率率的影响

在陕西安塞果园进行了海藻酸钠寡糖愈合剂对苹果嫁接成活率的影响实验。

制剂含量配方为：

海藻酸钠寡糖 0.01g；

寡聚半乳糖醛酸 0.05g；

腐殖酸 10g；

苦参碱 0.5g；

烟碱 0.5g；

海藻酸钠：20g；

补水至 1000g

上述配方制剂用于200棵果树的嫁接，以红富士一年生枝条为接穗进行嫁接改造，当接穗嫁接到砧木后伤口涂抹本制剂，包扎待成活；按常规嫁接方法为对照。30天后以接穗萌芽为标准，调查接穗成活率；调查结果表明，常规嫁接成活率7％，使用本愈合剂嫁接成活率97％。

实施例8.海藻酸钠寡糖伤口愈合剂促进牡丹伤口愈合实验

在山东菏泽牡丹种植基地进行了海藻酸钠寡糖愈合剂对牡丹伤口愈合的影响实验。

制剂含量配方为：

海藻酸钠寡糖 0.01g；

寡聚半乳糖醛酸 0.05g；

腐殖酸 10g；

苦参碱 0.5g；

烟碱 0.5g；

壳聚糖：30g；

补水至 1000g

随机选取20棵正常生长的植株，在其根部人为造成直径5mm的伤口， 之后分为2组，空白对照组不做任何处理，直接将土填回；实验组使用海藻酸钠寡糖伤口愈合剂涂抹伤口，然后将土填回。两周后，查看伤口情况，对照组伤口愈合率10％，实验组伤口愈合率100％。上述结果显示海藻酸钠寡糖植物伤口愈合剂也适用于花卉类植物伤口的处理，可明显促进伤口愈合。

实施例9.海藻酸钠寡糖对烟草中IAA含量的影响

取烟草组培悬浮细胞，过滤，收集细胞，将细胞悬浮培养在新配制的液体培养基中，并将细胞浓度调到1.5×10⁶个ml^-1，稳定2小时后进行处理。

1ml细胞加入离心管中，按处理加入不同浓度的海藻酸钠寡糖，分别在遮光条件下摇床培养不同时间后，对细胞样品进行测定。

IAA的测定：细胞样品10000g离心5min,在含有0.025μM的辣根过氧化物酶及0.1μM的MTTA-Eu³⁺荧光探针的0.05M pH4醋酸缓冲液体系中加入离心上清液遮光反应20min,在1420荧光计数仪上测定荧光强度。

不同浓度的海藻酸钠寡糖(0.1-100mg/kg)处理对烟草细胞中IAA含量的影响极为显著。海藻酸钠寡糖处理的烟草细胞IAA含量最适宜浓度为1.0mg/kg。从试验结果(图1)看，处理烟草细胞8h后，细胞内IAA含量最高的为1.0mg/kg，0.12μM。

海藻酸钠寡糖(1mg/L)即可显著诱导烟草细胞中IAA含量升高。先在诱导后2h出现一个小的高峰，之后IAA含量持续升高，14h时达到最大，为0.35μM。此后又逐渐降低，24h时含量接近对照，为0.06μM(图2)。

上述结果显示海藻酸钠寡糖可诱导植物内源性生长素的产生，研究显示生产中外源植物激素可也以促进植物伤口的愈合，但是使用浓度需要严格控制，浓度过高时，会起到副作用，而浓度较低时，促进伤口愈合的效果又不明显。主要原因是外源性生长素易受光分解，进入植物体后又容易被相关酶水解，导致其促进伤口愈合的效果不明显。因此海藻酸钠寡糖可能会通过合理调控植物内源生长素累积，进而达到促进伤口愈合的效果，而不会产生药害，是其作为植物伤口愈合剂使用的优势之一。