一种8×9苹果多品种高接获得杂交种子的方法与流程

本发明涉及一种8×9苹果多品种高接获得杂交种子的方法，尤其涉及一种苹果单株多品种高接自然杂交培育实生育种的杂交后代方法，属于果树育种领域。

背景技术：

随着我国苹果栽培面积迅速扩大，市场上对苹果的品质要求显著提高，无论是出于消费者还是栽培者的角度，苹果品种创新显得尤为重要。

目前苹果育种的方法有很多，杂交育种虽然古老依然占有统治地位，如目前我国广为栽培的苹果主栽品种‘富士’、‘嘎啦’、‘秦冠’、‘华冠’、‘乔纳金’，欧美广泛栽培的主栽品种‘布瑞本’、‘粉红佳人’、‘密脆’、‘太平洋玫瑰’等都是通过人工杂交手段获得的，这些杂交后选育出的苹果品种，普遍表现出前所未有的优良品质，受到市场追捧，占目前栽培面积的70％以上。因此在目前阶段，通过杂交手段选育苹果新品种依然具有极大的现实意义。

但是传统的人工杂交实生方法，获得杂交种子，是十分琐碎的艰辛的工作。人工杂交需要耗费大量的人力进行人工授粉，包括采粉、去雄、杂交、套袋等种种程序，费时又费力。仅仅杂交一个环节，一个熟练的操作者，一天大约可以授粉300朵，按照目前的育种规律，每个组合至少应该取得1000粒上的种子才能捕获足够变异，以座果率30％计算，每个果实获得5粒正常种子计算，需要工作两天。由于花期有限，往往一个生长季只能完成2-3个组合的杂交工作。工作环境恶劣，工作量大，生产成本不断增加，制约了大规模杂交育种的进行，这也导致了我国育种效率不高、突出品种较少的现状。急需一种节约人力物力、组合多样、变异丰富的杂交技术。

技术实现要素：

本发明的目的是为了克服现有生产中苹果品种人工杂交繁琐的不足，提供一种方便操作、变异类型多、易于选择的8×9苹果多品种高接获得杂交种子的方法。

为了达到上述目的，本发明采用以下方案：

1)选取3-5年生长势健壮的苹果树作为母株，所述母株品种选用龙富短枝；

2)在苹果母株上同时分别多头高接金帅、美国8号、蜜脆(Honey crisp)、秦冠、首红(Red chief)、红爱(red love)、粉红佳人(pink lady)和龙红蜜八个品种作为母本；嫁接时，将首红嫁接在母株顶端高处，其余八个品种均匀嫁接在母株四周，每株母株上嫁接20-30个位点，每个品种嫁接2-3头，每个品种之间互不临接；嫁接完成后对未嫁接的枝条全部重剪，使之和嫁接后的枝条一同生长；期间按常规管理；一般2年即可恢复树冠，3年完全可以丰产结实；

3)结果后，根据母本分类采摘果实，得到多品种杂交苹果种子；第二年春天层积播种，便于下一年进一步播种观察；

4)步骤3)中播种的种子出苗结果后，采用常规实生育种程序，发现丰产优质的优系以后，取嫩叶或新梢通过SSR或AFLP技术鉴定其父本来源，用做进一步研究的优系。

在本发明中，所选用的龙富为短枝苹果芽变新品种，是山东农业大学选育的性状优良品种，具有树冠比较紧凑，更新能力强，不易早衰，叶片肥大而厚，同化能力强，成花容易，丰产性和稳定性极好，连续结果能力强，果实整齐度高，着色速度快，优质果多，香味浓厚，口感品质优良等优点，其综合性状明显优于目前栽培的烟富6等晚熟苹果品种，发展前景广阔。它既能体现富士传统的优良口感，又具有紧凑的树形何易于成花的优良特性，所以选择它作为嫁接母体；金帅后代容易出现多倍体，丰产性能好；首红具有浓郁的香气，是培育香味品种的重要资源；美国8号外观好，果形优美，遗传效率高；蜜脆质地细腻，口味酸甜，是现在欧美育种的重要亲本；秦冠丰产性极佳，尤其在粗放管理条件下，无出其右；红爱果肉具有花色苷，有较高的保健价值；粉红佳人果形指数高，含酸量高，耐贮藏性强；龙红蜜果实蜡质厚，表光特别好，口味甜；特别是这几个品种在以往的杂交育种中都有着较好的表现，是从外观、风味、丰产性综合考量最具育种潜力的杂交组合。

综上所述，本发明的有益效果：

1、一次嫁接，可保证多年收获杂交种子，成本低廉，极大地节约了人力物力资源；

2、龙富为短枝品种，多品种嫁接后可以给其他果树授粉，具有授粉树的作用；

3、果园中长期多品种果树长期混合，有利于获得更多的变异品种的后代；

4、理论上建立72个杂交组合，一亩地栽植55棵，以2000千克普通生产水平计，年可获种子60000粒，育种效率极大提高。

5、本发明利用苹果具有异花授粉的特性，多品种花近距离接触，在授粉过程中，使其自然授粉，不需要借助人力即可形成具有不同亲本的果实，操作简单。

附图说明

图1、3-5年生龙富短枝树体示意图；

图2、＝为示高接换头短截部位；

图3、高接换头嫁接示意图，其中1为嫁接首红的枝条，2-9为可随机嫁接金帅、美国8号、蜜脆、秦冠、红爱、粉红佳人和龙红蜜八个品种的枝条，注意间歇性保留不嫁接枝条，因为母株本身也是一个杂交亲本；

图4、树冠恢复和结果示意图。

具体实施方式

1、接穗准备

如果想在春季时枝接，应该在前一年冬季修剪时，在剪下的一年生枝条中，选取长势好、无病虫害、粗度适宜的枝条保留，剪取这些枝条的中间一段，作为下一年枝接的接穗使用。

分别将剪取好的八个苹果品种(即金帅、美国8号、蜜脆、秦冠、首红、红爱、粉红佳人和龙红蜜)的接穗分类束成捆，做好标记，埋在阴凉微湿的沙土中，防止水分蒸发，以保持接穗的生命力，而且可以延迟枝条的萌发时间。在埋入沙土前，将每条接穗的两端涂上石蜡，更好的防止水分的蒸干。埋入沙土时，务必做好埋入地址的记录，便于来年寻找。第二年春天嫁接时，将埋在沙土中的接穗取出使用，取出后用湿布包裹，防止水分流失。

2、嫁接时间

选取春季枝接时间在早春树液流动，芽眼萌发时或萌发后进行。

3、嫁接方法

选取3-5年生长势健壮的龙富短枝苹果树作为母株。

采用枝接的嫁接方法，具体方法如下：选取接穗枝条的一段在砧木树的骨干枝或者中央领导枝干上进行枝接。嫁接前先对砧木修剪整形，以便留出更好的位置嫁接其他的品种。选取剪锯口下2-3cm直径的幼龄枝条嫁接，太粗的枝条愈合慢；骨干枝和侧枝用舌接等方法。

4、嫁接数量

将八个品种分别均匀嫁接在母株四周，3-5年生母株树可嫁接部位约有40个左右，选择20个左右位点嫁接，每个品种嫁接2-3头，品种之间互不临接。嫁接后对未嫁接枝条全部重剪，使之和嫁接枝条一同生长，精心管理，一般2年即可恢复树冠，3年完全可以丰产结实。

5、嫁接后管理

(1)、浇水

砧木树高接后要浇水两次左右，供给水分，提高树木成活率。

(2)、选取合适时间解开捆绑物

枝接当新梢长到30-40cm时，解除捆绑物，发现未成活的接芽时及时补接。

(3)、新梢绑护

为了防止高接的新品种枝条风吹后损毁，要用小木棍延伸着新梢生长的方向捆绑固定。

(4)、新梢摘心

当枝接新梢长到40-50cm时，摘除新梢嫩尖，当二次新梢长出时留2叶或3叶摘心。

(5)、病虫害防治

嫁接后的病虫害以防为主，防治结合。早春树液开始流动,芽眼萌发前对母株骨干枝、主干枝杈及全树冠均匀喷一次波美3°～5°石灰硫磺合剂,杀死各种病菌和越冬虫卵。在枝条长出新叶时每隔半月喷一次1∶1.5∶200倍波尔多液,在新梢叶片旺长时及时喷雾溴氰菊酯和杀螨类菌剂等防治红蜘蛛的发生。

(6)、根外追肥

当新梢长出3～5片叶时，交替喷施尿素0.2％水溶液或磷酸二氢钾0.2％水溶液，10～15d喷1次，以叶片滴水为度。增加叶片营养，促进新梢长势，加速愈合。

6、果实和种子的获取

秋季果实成熟后，按照不同的接穗分类采摘果实，做好标记分类存放。将果肉吃掉，保留种子，得到杂交种子，洗净阴暗，避光干燥存放。

7、后续工作

嫁接后形成多种长期共存，互相授粉，产生较多杂交组合。保存的种子等第二年春天层积播种，出苗结果后，采用常规实生育苗程序，对丰产优质有希望的优系，确定进入复选阶段的，采用现有SSR或AFLP等分子方法鉴定其父本并做好记录，进入下一步育种程序。