本发明属于中药材种植技术领域，尤其涉及一种促进秦艽种子萌发的方法。
背景技术：
秦艽为龙胆科龙胆属多年生草本植物，生长于海拔2000～4950m的亚高山草旬及灌丛。其以根入药，性微寒，味辛、苦；归胃经、肝经、胆经；有袪风湿、舒筋络、清虚热等功效，主治风湿痹痛、筋脉拘挛、骨节酸痛、日晡潮热、小儿疳积发热等症，在我国已有两千多年的药用历史。由于长期以来过多强调秦艽的开发利用，使市场需求量快速增加，导致过度采挖，致使野生资源日趋减少，被列为国家三级重点保护植物。为了缓解其濒危程度，保护秦艽野生资源，人工种植逐渐受到人们关注。秦艽繁殖方法有种子繁殖和分株繁殖，种子繁殖的植株生长繁茂，根茎粗大，是目前最常用方法；但其种子小、寿命短、产量低，且有后熟作用。此外，不论采用春播还是秋播，在播种过程中都存在发芽率低、发芽不整齐等情况，严重制约着秦艽的规范化种植和生产。组培技术已被广泛应用于作物种植技术领域中，但秦艽在组织培养中，由于种子种皮厚且坚硬，按照常规的方法培养无菌苗，萌发率及其低下，限制了利用基因工程手段对秦艽进行改良育种等方面的研究。因此，为了秦艽的大规模栽培和规范化生产以及利用秦艽种子进行组织培养及遗传操作，研究如何缩短秦艽种子发芽时间、提高种子发芽率及种子抗性成为了本领域亟待解决的技术问题。
近年为解决发芽问题，生产上通常采用药剂处理、温差处理、物理处理等方法。试验表明，药剂方法中用赤霉素(刘丽莎、姬可平，秦艽种子发芽特性的研究[J].中草药，2002，3(33)：269～271)、NaCl、KNO3(滕红梅、曹晓燕，王喆之，不同培养条件及预处理对秦艽种子萌发的影响[J].种子，2008，11：87～91)等处理、物理方法中用频率为40kHz超声处理15分钟(滕红梅、曹晓燕，王喆之.不同培养条件及预处理对秦艽种子萌发的影响[J].种子，2008，11：87～91)、温差方法中用20℃的热水浸泡处理(张西玲、王岚，刘丽莎，麻花秦艽种子发芽特性的研究[J].中药材，2004，3(27)：160～161)等具有促进秦艽种子萌发的作用。但是这些方法仍不能解决缩短种子发芽时间及提高抗性方面的问题。为此，专利CN 103250488 A公开了一种促进秦艽种子萌发的方法，披露了“先将植物种子浸泡在含有赤霉素和硫酸亚铁的水溶液中，得到处理后植物种子；再将所述处理后的植物种子播种，实现促进植物种子萌发和/或提高植物种子萌发耐受性；所述含有赤霉素和硫酸亚铁的水溶液中赤霉素和硫酸亚铁的质量比为1：5～200”。其通过赤霉素处理种子可有效的打破种子的休眠，促进萌发，帮助种子通过萌发的初始阶段，诱发种子活力；同时利用一定浓度的微量元素浸种处理以活化种子体内的酶系统，促进种子储藏物质的分解，加速种子萌发的过程。该方法能使种子萌发在发芽率、发芽势、发芽指数有显著提高，且在5和35℃萌发条件下与常规种子在发芽率、发芽势、发芽指数上存在差异；体现在种子发芽快，出苗整齐，对低温和高温的抗性显著增强，具有良好的市场应用前景。众所周知，种子发芽率与诸多因素相关，并非只与种皮坚硬有关，因此，通过上述方法能够潜在提升发芽率，促进发芽，但仍然难以满足需求。
技术实现要素：
本发明的目的在于：提供一种促进秦艽种子萌发的方法，采用“低温-沼液-酒精”联合处理手段，解决秦艽种子萌发率低、耐候性差、萌发缓慢的问题。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种促进秦艽种子萌发的方法，其特征在于：包括如下步骤：
1)种子选取：8月20至25日，采集半成熟秦艽种子，置于通风透气处，在25～30℃条件下，干燥至含水量低于15％，其中，种子要求籽粒饱满、无虫，表皮光滑、无虫蛀；
2)低温处理：在育苗室内，将干燥的种子与湿沙土按照1:8～10的比例混合后，摊放在预制的苗床上，再用木屑与马粪的混合物覆盖，覆盖厚度10～20cm，控制育苗室温度12～18℃，进行低温处理，时间为3～7天；
3)沼液处理：低温处理结束后，取出并分离秦艽种子，放入无菌沼液中，常温处理18～36小时；
4)经沼液处理后，采用75％酒精溶液进行消毒，然后自来水冲洗2～3次。
进一步，所述的无菌沼液中还加入赤霉素，并充分搅拌混合，赤霉素加入量为0.01mg/L沼液。
进一步，所述的无菌沼液中还加入FeSO4溶液，加入量为0.1ml/L沼液。
进一步，所述的无菌沼液pH值控制为6.4～7.2。
进一步，所述的木屑与马粪的混合物中，木屑重量比例为65～78％。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
1)本发明在播种前对种子进行“低温处理-沼液浸泡-酒精消毒”综合处理，尤其是在低温处理时，将种子与湿沙土混合后，摊放在预制的苗床上，再用木屑与马粪的混合物覆盖，控制育苗室温度12～18℃，进行低温处理，相比传统低温处理技术，该方法采用木屑与马粪的混合物覆盖，透气性更好，不会产生堆积热，确保种子内外温度稳定，且更接近环境温度；然后采用常温沼液浸泡处理，易形成稳定的温差，进而达到促进秦艽种子萌发的目的。此外，本发明选用半成熟种子，种皮硬度相对较低且水分流动性大，营养分布不均衡，采用低温处理时，可降低水分的流动性，进而使营养组分缓慢移动至均衡，进而提高种子的质量，对提高萌发率有利。
2)本发明在利用沼液浸泡处理时，加入赤霉素与FeSO4溶液，霉素是植物界广泛存在的植物激素，用其处理种子可有效的打破种子的休眠，促进萌发，帮助种子通过萌发的初始阶段，诱发种子活力；对于大多数需光种子来说，外源赤霉素可以代替红外诱导种子的暗萌发；硫酸亚铁常用作微肥对种子进行施加，铁作为微量元素的一种在植物体内含量很少，但却是植物生长不可缺少的。一定浓度的微量元素浸种处理，可以活化种子体内的酶系统，促进种子储藏物质的分解，加速种子萌发的过程。因此，采用本发明的方法，使种子萌发在发芽率、发芽势、发芽指数有显著提高。
3)本发明采用赤霉素-FeSO4沼液溶液处理种子，相比传统技术中的赤霉素-FeSO4水溶液，其含有丰富的营养成分，且浑浊有相应黏度，不仅为种子萌发提供养分，更易将赤霉素-FeSO4“束缚”于种子表面，形成一层促萌发营养膜，提高种子对赤霉素和Fe2+的吸收，提高赤霉素与Fe2+的利用率，促进秦艽种子萌发效果更好。
4)本发明操作简单，成本低廉，可以广泛使用。经过本方法处理后的种子发芽快，出苗整齐，对低温和高温的抗性显著增强，具有良好的市场应用前景。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步说明，以便于同领域技术人员的理解。
实施例1
一种促进秦艽种子萌发的方法，包括如下步骤：
1)种子选取：8月20至25日，采集半成熟秦艽种子，置于通风透气处，在25～30℃条件下，干燥至含水量低于15％，其中，种子要求籽粒饱满、无虫，表皮光滑、无虫蛀；
2)低温处理：在育苗室内，将干燥的种子与湿沙土按照1:8～10的比例混合后，摊放在预制的苗床上，再用木屑与马粪的混合物覆盖，覆盖厚度10～20cm，控制育苗室温度12～18℃，进行低温处理，时间为3～7天，所述的木屑与马粪的混合物中，木屑重量比例为65～78％；
3)沼液处理：低温处理结束后，取出并分离秦艽种子，放入无菌沼液中，常温处理18～36小时，其中，沼液pH值控制为6.4～7.2；
4)经沼液处理后，采用75％酒精溶液进行消毒，然后自来水冲洗2～3次。
实施例2
一种促进秦艽种子萌发的方法，包括如下步骤：
1)种子选取：8月20至25日，采集半成熟秦艽种子，置于通风透气处，在25～30℃条件下，干燥至含水量低于15％，其中，种子要求籽粒饱满、无虫，表皮光滑、无虫蛀；
2)低温处理：在育苗室内，将干燥的种子与湿沙土按照1:8～10的比例混合后，摊放在预制的苗床上，再用木屑与马粪的混合物覆盖，覆盖厚度10～20cm，控制育苗室温度12～18℃，进行低温处理，时间为3～7天，所述的木屑与马粪的混合物中，木屑重量比例为65～78％；
3)沼液处理：低温处理结束后，取出并分离秦艽种子，放入无菌沼液中，常温处理18～36小时，其中，沼液pH值控制为6.4～7.2；
4)经沼液处理后，采用75％酒精溶液进行消毒，然后自来水冲洗2～3次，然后采用常规方法下播，并记录萌发率。
实施例2
一种促进秦艽种子萌发的方法，包括如下步骤：
1)种子选取：8月20至25日，采集半成熟秦艽种子，置于通风透气处，在25～30℃条件下，干燥至含水量低于15％，其中，种子要求籽粒饱满、无虫，表皮光滑、无虫蛀；
2)低温处理：在育苗室内，将干燥的种子与湿沙土按照1:8～10的比例混合后，摊放在预制的苗床上，再用木屑与马粪的混合物覆盖，覆盖厚度10～20cm，控制育苗室温度12～18℃，进行低温处理，时间为3～7天，所述的木屑与马粪的混合物中，木屑重量比例为65～78％；
3)沼液处理：低温处理结束后，取出并分离秦艽种子，放入无菌沼液中，向无菌沼液中加入赤霉素，充分搅拌混合后，赤霉素加入量为0.01mg/L沼液，在常温下，浸泡处理18～36小时，其中，沼液pH值控制为6.4～7.2；
4)经沼液处理后，采用75％酒精溶液进行消毒，然后自来水冲洗2～3次，然后采用常规方法下播，并记录萌发率。
实施例3
一种促进秦艽种子萌发的方法，包括如下步骤：
1)种子选取：8月20至25日，采集半成熟秦艽种子，置于通风透气处，在25～30℃条件下，干燥至含水量低于15％，其中，种子要求籽粒饱满、无虫，表皮光滑、无虫蛀；
2)低温处理：在育苗室内，将干燥的种子与湿沙土按照1:8～10的比例混合后，摊放在预制的苗床上，再用木屑与马粪的混合物覆盖，覆盖厚度10～20cm，控制育苗室温度12～18℃，进行低温处理，时间为3～7天，所述的木屑与马粪的混合物中，木屑重量比例为65～78％；
3)沼液处理：低温处理结束后，取出并分离秦艽种子，放入无菌沼液中，向无菌沼液中加入FeSO4溶液，加入量为0.1ml/L沼液，在常温下，浸泡处理18～36小时，其中，沼液pH值控制为6.4～7.2；
4)经沼液处理后，采用75％酒精溶液进行消毒，然后自来水冲洗2～3次，然后采用常规方法下播，并记录萌发率。
实施例4
一种促进秦艽种子萌发的方法，包括如下步骤：
1)种子选取：8月20至25日，采集半成熟秦艽种子，置于通风透气处，在25～30℃条件下，干燥至含水量低于15％，其中，种子要求籽粒饱满、无虫，表皮光滑、无虫蛀；
2)低温处理：在育苗室内，将干燥的种子与湿沙土按照1:8～10的比例混合后，摊放在预制的苗床上，再用木屑与马粪的混合物覆盖，覆盖厚度10～20cm，控制育苗室温度12～18℃，进行低温处理，时间为3～7天，所述的木屑与马粪的混合物中，木屑重量比例为65～78％；
3)沼液处理：低温处理结束后，取出并分离秦艽种子，放入无菌沼液中，向无菌沼液中加入赤霉素，充分搅拌混合后，赤霉素加入量为0.01mg/L沼液；然后加入FeSO4溶液，加入量为0.1ml/L沼液，在常温下，浸泡处理18～36小时，其中，沼液pH值控制为6.4～7.2；
4)经沼液处理后，采用75％酒精溶液进行消毒，然后自来水冲洗2～3次，然后采用常规方法下播，并记录萌发率。
在上述实施例中，种子下播后10天左右即可开始发芽，具体见下表1。
表1-不同处理对萌发率的影响
从上表1可知，通过本发明技术方案处理秦艽种子，萌发时间均控制在11天左右，尤其是加入赤霉素及FeSO4溶液后，其萌发时间提前至9天，相比现有10天的萌发时间提早1天；此外，通过本发明处理后，其萌发率从60％左右提高至81％以上，尤其在加入赤霉素及FeSO4溶液后，萌发率高达89.5％。