技术领域：
本发明涉及一种抗植物病毒的大型真菌制剂及其制备方法，特别是适用于防控植物病毒病。
背景技术：
：植物病毒病广泛发生于粮油、蔬菜、果树等多种作物上，危害相当普遍，造成的损失非常严重，并且其防治比较困难，可称得上是植物病害中的顽症，日益受到重视。大型真菌次生代谢产物中蕴藏着极为丰富的抗病毒天然活性物质，是开发抗植物病毒抑制剂的重要资源。由于天然抗植物病毒物质的作用特点与化学农药有很大不同，只有了解其作用特点并掌握正确的使用方法，才能更好地发挥其对病毒病的防治作用。90％以上的植物病毒属RNA病毒，因此从机理上筛选RNA合成抑制剂或蛋白合成抑制剂将是一种有的放矢的研究方法。我们认为从大型真菌天然次生代谢产物中引入现已发现的天然化合物活性母体上去一定能研发出新型、高效、低毒、低残留的环境友好的抗植物病毒抑制剂。目前，植物病毒病的防治主要是化学药物喷洒防治法，它虽然对病毒病的发生发展起到了一定防控作用，但同时又带来了农药在蔬菜、果品上的残留、对土壤、大气、水源等环境的污染等弊端。特别是蔬菜、果品对农药的使用要求较高，有毒、残留期长的药物已禁止使用。大型真菌次生代谢产物病毒制剂是一种新的生物农药，具有无毒、不污染环境、无残留、保护人畜安全等特点。并且生产过程中无“三废”排放，生产的原材料可再生。具有用药量少、药的持效期长、成本低廉等优点。技术实现要素：本发明的目的是提供一种低成本、高活性的抗植物病毒的大型真菌制剂及其制备和应用方法，以有效控制植物病毒病的危害。该制剂可以钝化植物病毒、抑制其繁殖并具有诱导植物对病毒产生抗性的作用，2-3次用药可有效控制植物病毒的危害。真菌多糖(Polysaccharides,PS)是广泛存在于自然界中的一类大分子物质,也是生命必需的成分之一。大量研究表明,许多多糖对各种病毒如艾滋病毒(HIV-1),单纯疱疹病毒,巨细胞病毒,流感病毒,囊状胃炎病毒,劳斯肉瘤病毒,乌肉瘤病毒等有抑制作用；β-葡聚糖被誉为杀灭病毒细胞的激光制导炸弹，主要存在于真菌细胞壁中，其特殊的三重超微螺旋结构具有独特的靶向性特点，能锁定休眠期、耐药性的“残存病毒细胞”，从而"同步"减毒增效，极大限度的保障实际应用效果；糖蛋白（glycoprotein）是一个比较常见的保护细胞免受外来有害分子入侵的分子泵，它位于细胞膜上，不停的“搜查”着外来的疏水分子，就如同一个守护细胞的“保安”。本发明就是通过提取彩绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体中真菌糖蛋白、多糖、β-葡聚糖等抗病毒成分，辅以适当的溶剂而研制出的一种大型真菌抗病毒制剂。其技术解决方案如下：一种抗植物病毒的大型真菌制剂，由彩绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体的复合提取物与溶剂配制而成。所说的溶剂，为有机溶剂75%乙醇。上述抗植物病毒的大型真菌制剂及制备方法，按如下方法制备而成：是将彩绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体按重量比1：1混合，加工碎成颗粒，过20筛目，把25kg颗粒放入中药多功能提取设备的提取釜中进行萃取，加入75升75%乙醇，在82－86℃的温度蒸煮2.0小时后，再浓缩1小时，即成彩绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体复合提取物浓缩膏及结晶体；再加入75%乙醇溶剂，充分溶解，制成饱和液，装瓶密封即可。本发明的有益效果：本发明抗植物病毒制剂对各类植物病毒病均具有很好的防控作用。不仅防控效果好，而且不污染环境，成本低廉、制备工艺简单，极大地减少了劳动量，安全、直接、环保、高效。本发明抗植物病毒制剂可用于粮油、蔬菜、果树等多种作物病毒病的预防和防治，通过早期用药可以预防病毒病的发生、对已发生的病毒病可抑制其进一步的发生、传播、蔓延，达到遏制病毒病危害的目的，为植物病毒病的综合治理提供了技术保障。附图说明图1所示是本发明制备方法具体工艺流程图。具体实施方式下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细描述：实施例1本发明制备方法具体工艺流程为：其制备方法如下：（1）将彩绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体按重量比1:1，加工粉碎成颗粒，过20筛目把25kg颗粒装入中药提取釜中进行萃取；（2）加入75%乙醇75升，82℃温度蒸煮2.0小时后，再浓缩1小时，浓缩成浓缩膏及结晶体，即绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体复合提取物；（3）取提取物再加入溶剂75%乙醇，边加边搅拌直至充分溶解配制成饱和液即为抗病毒制剂成品。（4）分别灌装：将抗病毒制剂500ml装入塑料瓶中密封待用。本实施例产品主要成分重量百分比为：云芝多糖6.6%云芝糖蛋白1.76%桑黄多糖6.59%β-葡聚糖1.64%壳聚糖0.63%75%乙醇82.78％。实施例2本发明制备方法具体工艺流程为：其制备方法如下：（1）将彩绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体按重量比1:1，加工粉碎成颗粒，过20筛目把25kg颗粒装入中药提取釜中进行萃取；（2）加入75%乙醇75升，84℃温度蒸煮2.0小时后，再浓缩1小时，浓缩成浓缩膏及结晶体，即绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体复合提取物；（3）取提取物再加入溶剂75%乙醇，边加边搅拌直至充分溶解配制成饱和液即为抗病毒制剂成品。（4）分别灌装：将抗病毒制剂500ml装入塑料瓶中密封待用。本实施例产品主要成分重量百分比为：云芝多糖7.2%云芝糖蛋白2.1%桑黄多糖6.72%β-葡聚糖1.76%壳聚糖0.81%75%乙醇81.41％。实施例3本发明制备方法具体工艺流程为：其制备方法如下：（1）将彩绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体按重量比1:1，加工粉碎成颗粒，过20筛目把25kg颗粒装入中药提取釜中进行萃取；（2）加入75%乙醇75升，86℃温度蒸煮2.0小时后，再浓缩1小时，浓缩成浓缩膏及结晶体，即绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体复合提取物；（3）取提取物再加入溶剂75%乙醇，边加边搅拌直至充分溶解配制成饱和液即为抗病毒制剂成品。（4）分别灌装：将抗病毒制剂500ml装入塑料瓶中密封待用。本实施例产品主要成分重量百分比为：云芝多糖6.9%云芝糖蛋白1.92%桑黄多糖6.61%β-葡聚糖1.69%壳聚糖0.76%75%乙醇82.12％。实施例4本发明制备方法具体工艺流程为：其制备方法如下：（1）将彩绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体按重量比1:1，加工粉碎成颗粒，过20筛目把25kg颗粒装入中药提取釜中进行萃取；（2）加入75%乙醇75升，82-86℃温度蒸煮2.0小时后，再浓缩1小时，浓缩成浓缩膏及结晶体，即绒革盖菌子实体、桑黄菌子实体复合提取物；（3）取提取物再加入溶剂75%乙醇，边加边搅拌直至充分溶解配制成饱和液即为抗病毒制剂成品。（4）分别灌装：将抗病毒制剂500ml装入塑料瓶中密封待用。本实施例产品主要成分重量百分比为：云芝多糖6.6-7.2%云芝糖蛋白1.76-2.1%桑黄多糖6.59-6.72%β-葡聚糖1.64-1.76%壳聚糖0.63-0.81%75%乙醇81.41－82.78％。本发明抗病毒制剂的应用技术，步骤以下：⑴在各类植物幼苗期，病毒病发生以前，均匀喷洒50ug/ml的本大型真菌抗病毒制剂，预防各类病毒病的发生。⑵在各类植物病毒病发生期均匀喷洒100ug/ml的本大型真菌抗病毒制剂，治疗各类病毒病发生、传播、蔓延。本制剂的使用效果如下：一、田间预防效果试验2015年5月9号在在泰安市岱岳区房村镇进行预防试验。当番茄苗第一片真叶出现（破心），喷施药剂，每个处理喷施番茄苗100株。以后间隔5天喷一次，连喷三次。药剂处理为大型真菌抗病毒制剂（实施例1所得产品）100ug/ml、大型真菌抗病毒制剂50ug/ml、大型真菌抗病毒制剂25ug/ml、20%病毒Ａ（北方齐齐哈尔化工厂生产）50ug/ml、清水对照等共5个处理，每个处理3次重复，随机排列。药剂喷施完毕后，接种病毒。病毒的制备方法是：采感染病毒病的番茄鲜叶，按鲜病叶：缓冲液=1:3的重量体积比加缓冲液，缓冲液种类为PBS，缓冲液的酸碱度pH7。然后用石英砂将混合体碾磨成匀浆后纱布过滤，摩擦接种。接种10天后调查病情。计算病情指数及预防效果。结果见表一。表一：大型真菌抗病毒制剂对番茄病毒病的预防效果药剂用量（ug/ml）病情指数预防效果（%）大型真菌抗病毒制剂1008.9292.16大型真菌抗病毒制剂5015.2687.62大型真菌抗病毒制剂2530.8662.7120%病毒Ａ5018.8979.17清水对照-68.67-注：病毒病分级标准：0级：无病症；1级：叶片明显呈花叶或黄化，有疮斑；3级：叶片凹凸不平，变小且畸形；5级：植株形成丛枝，大量落花落蕾；7级：整个植株矮化、果小质劣，果实花脸。病情指数=∑（各级病株数x相对级数值）/（调查总株数x最高病级数）x100预防效果=（CK0病指数-药剂处理后病指数）/CK0病指数x100式中：CK0—对照区用药前；CK1—对照区用药后；CL0—处理区用药前；CL1—处理区用药后。由表一可以看出，大型真菌抗病毒制剂使用浓度100ug/ml、50ug/ml均具有较好的预防效果，平均预防效果分别为：92.16%、87.62%，均高于对照20%病毒Ａ50ug/ml79.17%的预防效果；大型真菌抗病毒制剂使用浓度25ug/ml的预防效果相对较差。综合分析，大型真菌抗病毒制剂使用浓度100ug/ml、50ug/ml均具有较好的预防效果，但比较成本以50ug/ml的使用浓度抗病毒效果好，较经济。二、田间治疗效果试验当番茄苗第一花序现蕾，接种病毒。病毒制备和接种方法同田间预防效果试验。接种48h后喷施药剂。药剂处理和喷施方法同田间预防效果试验。每次喷药前和第三次喷药5天后调查病情。结果见表二。病情分级标准，病情指数计算方法，符号代表含义同田间预防效果试验。相对防效=[1-（CK0病指数xCL1病指数）/（CK1病指数xCL0病指数）]x100表二：大型真菌抗病毒制剂对番茄病毒病的治疗效果由表二可以看出，大型真菌抗病毒制剂通过三次用药治疗均取得了一定的效果。以使用浓度100ug/ml具有较好的治疗效果，平均治疗效果为：78.12%，显著高于使用浓度50ug/ml，平均治疗效果为52.17%、使用浓度25ug/ml，平均治疗效果为17.67%及对照20%病毒Ａ50ug/ml，平均治疗效果为51.89%的治疗效果。综合分析，大型真菌抗病毒制剂使用浓度100ug/ml具有较好的治疗效果。当前第1页1 2 3