专利名称：多用性活性酶制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及农业、林业、畜牧业上使用的一种多用性活性酶制剂(本制剂在各地取名有多用性活性酶制剂;植物增效酶制剂;玫烟色拟青霉制剂;绿宝酶等，其代号有“808”和系列产品“808-1”)，它可以提高粮、棉、油、果林、牧草、花卉等多种绿色阔叶植物的产量和质量，还可以作为鸡、鸭、猪和牛的饲料添加剂，提高其产肉或蛋、奶和毛的数量。本发明还有一个重要的目的，是为农、林业提供一种兼治农、林害虫的生物杀虫制剂。
当前，农、林、牧业方面已有多种植物保护措施。五十年代至今，形成的以化学农药为主及若干生物、物理的防治手段，防治了农作物病虫害，发展了生产。但长期使用化学农药，造成环境中农药残留不断增加，生态失调，人们引以为戒。而其它植物保护措施覆盖面不大。再者，七十年代后，人们开拓了某些化学物质对植物的促生和催熟作用，如现行的叶面宝、多效好、喷施宝、多效唑及金邦素等等，种类繁多。虽然它们在农业上起到了增产作用，但仍未解决其残留毒性的问题，又因其有效期短须多次使用，经济效益不甚高，而且不能兼治农田虫害。本发明针对上述存在的问题，创造了一种纯属生物制品的制剂，即用微生物手段合成广谱的生物体所需要的酶制剂，主要表现在(1)用途广，它可作为多种农、林作物的生长调节剂，并能兼治农、林的若干害虫，同时也可作为畜牧业的饲料添加剂;(2)经济效益高，有效期长，一茬(或一年)作物仅用一次，增产的幅度可在15至20%以上;(3)对环境食品无污染和残留。
发明目的本发明的目的在于用微生物手段保护植物，改善农田生态环境质地，提高农产品的产量和质量。
本
发明内容
本发明的内容(1)提高农、林业产品的产量和质量，本制剂纯属生物制品，它可促进绿色阔叶植物的光合作用，提高植物叶片的光合作用效率，起到促进生长，提高其产量和质量的作用。可提高水稻、小麦、玉米、薏米(药用)、小米、高梁、谷子、甘蔗、甜菜、棉花、苎麻、油菜、大豆(包括各种豆类)、梨、苹果、桃、李、枣、荔枝、龙眼、葡萄、瓜类、大白菜、牧草、茶叶等作物的产量15至20%以上;(2)本制剂又属于一种昆虫病原真菌的微生物杀虫剂，在日均温度17至25℃;相对湿度85%的环境中，可兼治农、林业上若干害虫，起到降低化学农药用量的作用;(3)本制剂富含广谱的酶蛋白和蛋白肽，能促进生物体的各种代谢过程，初步试验证明，它又是饲养业上的一种生物型的饲料添加剂，它可提高鸡、鸭、猪和牛的产肉或蛋、奶、毛的数量，有待进一步探索;(4)本制剂经过国家规定的有关安全性考察，它对环境无毒无残留，对人畜安全，已通过安全性鉴定。
本发明所能解决的问题本发明如能得到广泛的实施，则农、林、牧业上可能解决的问题是(1)在现有的土地面积上提高农、林、牧及家禽、家畜的产量和质量，满足人们日益增长的物质需求;(2)降低食品中化学农药的残留量，造福子孙后代。
本发明的生产和使用方法是通过以下技术方案得以实施的，本制剂的生产和使用方法如下
1、制剂生产方法(1)本制剂产生菌是半知菌类昆虫病原真菌-玫烟色拟青霉北京变种(常规菌株)，在常规条件下扩大繁殖，制成的固体或液体种子。种子形态是该菌的分生孢子或菌丝段。计量单位是亿个/克或亿个/毫升;(2)本制剂发酵培养基是玉米粉(指所有种类的玉米碾磨而成的玉米粉);(3)本制剂发酵条件是，料的温度20至24℃;含水量65至70%;接种量按每克玉米粉配种子0.3亿个的比例接种。实例100公斤玉米粉，加入种子33000亿，加水65至70公斤，搅拌均匀后置入发酵槽内，在20至24℃条件下发酵50至60小时，或当菌量达2×109/克时终止发酵;(4)风干发酵物终止发酵时即风干，并磨成30至40目的细度(呈粉末状)，并加以密封包装备用。说明书附图
是本制剂的生产示意图。
2、制剂使用方法本制剂是一种粉状物，在农作物上使用时，需加水稀释成所需浓度的悬浮液，用压力喷雾器喷洒于农作物的叶部。其使用方法(1)使用部位主要使用于植物的叶背面，禾本科植物苗期使用，则喷洒于植株上即可;(2)使用剂量禾本科植物苗期每亩使用剂量是100至120克，棉花、油菜使用浓度是0.9%;木本植物(如各种果树)使用浓度在0.5至0.7%，均一年使用一次;(3)最佳使用时期使用在作物生长的早期，禾本科植物在种后30至40天，果树则在谢花后20至30天，棉花在种后30至40天，油菜宜在5、6叶时，寒地牧草宜在日均温度15℃以上时用;(4)施用808制剂的效果实例小麦单株小穗增加0.6个;有效小穗增加0.7个;穗粒数增加2、3粒;亩穗数量增加3万穗;千粒重增加2克;亩产量增加88.4公斤。
水稻株高增加3.5厘米;穗长增加1.1厘米;总实粒数增加4%;总粒数增加6%;总实粒重增加2%;千粒重减少0.6克，亩产量390公斤比对照增加76.5公斤。
玉米鲜重增加10%;干重增加36%。
棉花生长中期取样测定结果，棉桃增加36%;棉桃和花的总量增加38%。
柑桔叶长增加1.25厘米;叶宽增加1.12厘米;梢长增加7厘米;单果重增加10.9%;糖量自10.46上升到11.32。
苹果促进苗木的生长，按主杆周长与其生长量之比值，比对照的高度增加3%;梢长增加43%，叶数增加36。糖量增加1.6%。
大豆提高大豆产量15%，并降低其蚜虫和病毒病的危害率。
作为鸡饲料添加剂的初试结果，新鸡产蛋量增加10%;老鸡产蛋量增加20至30%，可替代部分进口鱼粉。
本制剂的生化性质本制剂主要有效成份是酶蛋白，其生化分析结果1、蛋白质分析含蛋白质7至10%，其组成氨基酸有17种。
2、酶及其同工酶分析主要活性酶有两大类(1)广谱呼吸酶类其中的酶活性强和较强的9种醛氧化酶、酸性磷酸酶、酯酶、延胡索酸酶、亮氨肽酶、苹果酸脱氢酶、、苹果酸酶、四唑氧化酶和乳酸脱氢酶;酶活性弱的4种醇脱氢酶、磷酸甘油脱氢酶、羟基丁酸脱氢酶和山梨醇脱氢酶。它们大都和植物的呼吸代谢有关，其中有的就是三羧酸循环酶系中的成员，如苹果酸脱氢酶，它广泛存在于植物的各个组织中。在线粒体上，它能催化苹果酸变为草酰乙酸的反应;在细胞质中，它又能将草酰乙酸还原为苹果酸，因而是糖代谢中的一个重要的酶。其反应式为
同样，延胡索酸酶也是三羧酸酶系中的一员，能使柠檬酸变为苹果酸。乳酸脱氢酶是无氧代谢中的一种酶，它能把丙酮酸变为乳酸;又如酯酶、亮胺肽酶和酸性磷酸酶，这些酶在生物体内广泛存在并参与了各种反应，酯酶还有解毒作用。(2)广谱蛋白酶A、蛋白质和多肽在电泳谱上可见本制剂的蛋白质和多肽各有14条带之多。而多肽类物质在神经活动、免疫调节等生命活动中具有十分重要作用;B、氨基酸种类从氨基酸组成分析得出的结论是组成蛋白质的氨基酸有17种;C、可利用氨基酸种类本制剂产生菌在水洗琼脂平板上能分别利用17种氨基酸形成菌丝体，说明该菌体外可吸收利用的氨基酸种类也是广谱的。从A、B、C三项试验结果说明，本制剂的蛋白质合成和水解酶也都是广谱的。(3)产生菌酶学特性制剂酶活性是依赖于产生菌酶学特性。A、呼吸酶产生菌具有11种呼吸酶，占制剂13种呼吸酶的85%;B、蛋白质和多肽产生菌具有的蛋白质和多肽类达10条带之多。占制剂14条带的75%;C氨基酸总量产生菌氨基酸总量达16.4%，而制剂氨基酸总量为7至10%。A、B、C三点除说明制剂酶蛋白主要依赖于产生菌的生物学特性之外，还取决培养基的生物学特性。
上述试验结果及分析，从分子生物水平揭示了本制剂酶种类广谱性，从而初步阐明在应用实践上呈现多功能的结果。
实现本发明的最好方式808多用性活性酶制剂是由生物合成的，其制剂应用效果取决于产生菌的生物学特性的强度。要保持或增强产生菌的性能必须开展种的研究工作。如果由研究单位供应用于大量生产的种子;生产单位承担大量培养的任务。则1、可以增强或保持种的活性，增强本制剂的应用效果。
2、生产成本下降，生产部门只要提供材料、场地及曲盘培养、自然风干、塑料袋包装等过程的费用。可省去自试管→种子罐或克氏瓶培养的设备费支出。
3、按照这一方式，所有的农林、山区及贫困地区均可引进种子，自行发酵使用，所创造效益则更大。
权利要求
1.一种适用于农、林、牧及饲料业上使用的多用性活性酶制剂，由13种呼吸酶(及其同工酶)组成，其特征在于产生菌玫烟色拟青霉北京变种(SP.808)的生物合成，按产生菌分生孢子0.3亿，玉米粉(指所有种类玉米碾成的玉米粉)1克、水0.7毫升的比例给量，在28至30℃发酵50至60小时，并经风干后得到的生物制剂，用于农作物上具有促进作物生长，兼治作物害虫的长效作用，可提高农产品的产量和质量，而且可降低化学农药的污染与残留量，用于饲养动物，是一种优良的饲料添加剂，可取代部分进口鱼粉。
2.根据权利要求1所述的多用性活性酶制剂，其特征是在于包含呼吸酶(及其同工酶)13种(即酸性磷酸酶、醇脱氢酶、醛氧化酶、酯酶、延胡索酸酶、磷酸甘油脱氢酶、羟基丁酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、苹果酸酶、亮氨肽酶、山梨醇脱氢酶、四唑氧化酶)及蛋白肽14条带，粗蛋白总量10%，其组成氨基酸17种(有天门冬酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸)，作为植物体的微生态调节剂和动物饲料添加剂的活性物质，这些特征与已登记专利的拟青霉其他菌株生理特征完全不同。
3.如权利要求1所述的酶制剂，其制剂特征呈浅粉灰色粉末状物，应用范围广，如粮、棉(包括麻类)、油、果、蔬菜、花卉和茶叶等，此外还可作为鸡、鸭、猪、牛、鱼、虾等的饲料添加剂。
全文摘要
本发明涉及一种多用性活性酶制剂，内含广谱呼吸酶(及其同工酶)13种，其组成氨基酸17种。在农、林业上用于水稻、玉米、小麦、豆类、瓜类、油菜、棉花、果树、牧草、麻等作物，具有促进作物生长，兼治若干害虫的作用，提高作物产量15至20％，在畜牧业上，作鸡、鸭、猪、牛等的饲料添加剂，也具有促进动物生长，提高其肉或蛋、奶的产量和质量的作用，并可代替部分进口鱼粉。本制剂生产工艺简单，生产成本低廉，对于环境无毒无残留，其综合的经济、生态、社会效益较大。
文档编号A23K1/165GK1073419SQ9210481
公开日1993年6月23日 申请日期1992年6月29日 优先权日1992年6月29日
发明者方祺霞 申请人:方祺霞