中，遗传稳定的标准可W为水稻育种领域中常规使用的 确定标准，本发明没有特别要求，例如国家标准GB/T19557. 7中关于一致性和稳定性的判 断标准。
[0021] 其中，步骤（4)中，使用基因定点突变的操作可W通过ZFN系统、TALEN系统 或CRISPR/tas9系统进行。其中，具体的操作方法可W参照本领域已公开的文献进行， 本发明没有特别的要求，例如可W参照CN101333533B、CN104293827A、CN104651392A、 CN104651393A的方法进行。
[0022] 其中，所述目标性状包括好的开花习性、株叶形态、高产、优质、抗病虫及抗倒伏等 性状中的至少一种或多种。具体地，可参照袁隆平主编的《杂交水稻学》等杂交水稻著作中 关于杂交水稻不育系基本特性要求。
[0023] 其中，所述符合育种目标的水稻品系可W为各种能够用于杂交水稻育种的水稻品 系，运些水稻品系可W通过购买或索取得到，可W是本发明的申请日之前或之后能为公众 获得的水稻品系，例如可W包括炳1B、Y58S、广占63S及湘晚釉13号等，但不限于运几个品 种。
[0024] 其中，该方法还可W包括：使用通过本方法育成的带有目标性状的溫敏不育水稻 品系进行杂交水稻组合选育及生产杂交水稻种子。
[0025]W下，通过实施例进一步详细说明本发明。 阳〇26] 实施例1
[0027] 本实施例的育种目标为选育抗稻攝病两系不育系及组合，选择符合该育种目标的 具有开花习性好与配合力强的Y58S和具有开花习性好及抗稻攝病的炳1B分别作第一与第 ^杂义萊本品系。
[0028] 用第一水稻品系Y58S(购自安徽袁粮水稻产业有限公司）与第二水稻品系炳 1B(购自湖南杂交水稻研究中屯、）杂交，得到F1代水稻，将F1代水稻自交，得到F2代水稻， 在F2群体中选择110株株叶形态好的可育单株（F3)，在稻攝病病圃从F3株系中选择抗稻 攝病株系21个，继续自交、系选具有好的株叶形态、开花习性的株系，并在病圃复检稻攝病 抗性，至F8代获得基本稳定的抗稻攝病优良可育株系13C18。参照文献CN104293827A中的 记载，运用CRISPR/tas9系统敲除13C18株系TMS5基因（序列如沈QIDNO. 1所示），通过 分子检测其后代，筛选出不含转基因成分的株叶形态好、抗稻攝病、配合力强的溫敏不育系 炳 1318S。 阳029]将溫敏不育系炳1318S与水稻品系9311等配制成抗稻攝病高产优质新组合炳两 优1311。选育过程参见附图1。
[0030] 实施例2
[0031] 本实施例的育种目标为选育儒低积累、优质、耐逆杂交水稻两系不育系；用具有配 合力好、其组合耐高溫的广占63S作第一水稻品系和具有稻米儒低积累、优质性状的湘晚 釉13号作第二水稻品系。
[0032] 用第一水稻品系（广占63S，具有好的配合力与耐高溫性状，购自合肥丰乐种业股 份有限公司）与第二水稻品系（湘晚釉13号，具有优质与儒低积累性状，购自湖南省水稻 研究所）杂交，得到F1代水稻，将F1代水稻自交，得到F2代水稻，在高溫条件从F2群体中 选择株叶形态好、结实率高的单株85个，后代自交、综合选育，巧获得趋于稳定的优良株系 33个，F6-巧代连续两代种植于儒超标试验田、其稻米送湖南省农业科学院稻米及制品检 测中屯、测定儒含量，筛选出儒低积累株系13C680 ;参照文献CN104293827A中的记载，运用 CRISPR/tas9系统敲除候选株系TMS5基因（序列如SEQIDNO. 1所示），对其后代进行分 子检测，筛选出不含转基因成分的儒低积累、优质、耐高溫的溫敏不育系湘广680S。选育过 程参见附图2。
[0033]W上结合附图详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实 施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可W对本发明的技术方案进行多种简 单变型，运些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0034]另外需要说明的是，在上述【具体实施方式】中所描述的各个具体技术特征，在不矛 盾的情况下，可W通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可 能的组合方式不再另行说明。
[0035] 此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可W进行任意组合，只要其不违背本 发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
【主权项】
1. 一种杂交水稻的育种方法，其特征在于，该方法包括如下步骤： (1) 将第一水稻品系与第二水稻品系进行杂交，得到Fl代水稻； (2) 将所述Fl代水稻进行自交得到F2代水稻，或者将所述Fl代水稻与第三水稻品系 复交得到三交Fl代水稻； (3) 选择所述F2代水稻或者所述三交Fl代水稻中带有目标性状的可育单株水稻进行 一代或多代自交系选；且每一代自交系选均选择带有目标性状的可育单株水稻进行下一代 自交系选；获得遗传稳定的带有目标性状的可育水稻品系； (4) 使用基因定点突变技术，敲除上述遗传稳定的带有目标性状的可育水稻品系中的 温敏核不育基因TMS5,获得带有目标性状但不含转基因成分的温敏核不育水稻品系S; (5) 利用所述温敏核不育水稻品系S通过杂交配组，选育杂交水稻组合； 所述第一水稻品系、所述第二水稻品系和所述第三水稻品系各自为符合育种目标的不 同水稻品系； 所述第一水稻品系和所述第二水稻品系至少其中一个为两系不育系；如果所述第一水 稻品系和所述第二水稻品系都是两系不育系，则所述第一水稻品系和所述第二水稻品系分 别受不同核不育基因控制； 或者，所述第一水稻品系、所述第二水稻品系和所述第三水稻品系中至少一个为两系 不育系，如果所述第一水稻品系、所述第二水稻品系和所述第三水稻品系都为两系不育系， 则所述第一水稻品系、所述第二水稻品系和所述第三水稻品系中至少一个与另外两个分别 受不同核不育基因控制。2. 根据权利要求1所述的育种方法，其中，符合育种目标的不同水稻品系选自由两系 不育系、三系不育系、三系保持系、两系父本、三系恢复系、常规水稻品种和任何来源的水稻 育种中间材料组成的组。3. 根据权利要求1或2所述的育种方法，其中，所述两系不育系为光温敏核不育水稻不 育系。4. 根据权利要求1或2所述的育种方法，其中，所述温敏不育基因TMS5的序列如SEQ IDNO. 1 所示。5. 根据权利要求1或2所述的育种方法，其中，步骤（4)中，使用基因定点突变的操作 通过ZFN系统、TALEN系统或CRISPR/Cas9系统进行。6. 根据权利要求1所述的方法，其中，所述目标性状包括开花习性好、理想株叶形态、 高产、优质、抗病虫、抗倒伏等优良性状中至少一种以上。
【专利摘要】本发明提供了一种杂交水稻的育种方法，该方法包括：(1)将第一水稻品系与第二水稻品系进行杂交，得到F1代水稻；(2)将所述F1代水稻进行自交得到F2代水稻；(3)选择上述F1自交后代中，带有目标性状的可育单株水稻进行自交系选；获得遗传稳定的带有目标性状的可育水稻品系；(4)使用基因定点突变技术，敲除上述遗传稳定的带有目标性状的可育水稻品系中的温敏核不育基因TMS5，获得带有目标性状但不含转基因成分的温敏核不育水稻品系S；(5)利用所述S通过杂交配组，选育杂交水稻组合。本发明的杂交水稻的育种方法优化了两系杂交水稻选育过程，大大提高了育种效果。
【IPC分类】A01H1/02
【公开号】CN105210858
【申请号】CN201510759876
【发明人】赵炳然, 毛毕刚, 韶也, 张丹, 袁定阳, 谭炎宁, 余东
【申请人】湖南杂交水稻研究中心
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年11月9日