一种复配农用杀虫杀菌组合物及其应用
【专利摘要】本发明公开了一种复配农用杀虫杀菌组合物及其应用。该复配农用杀虫和杀菌组合物包含绿僵菌、小檗碱、载体和助剂，其中绿僵菌、小檗碱、载体和助剂的重量比为：2?20∶3?20∶30?70∶20?60；所述绿僵菌为绿僵菌分生孢子，所述小檗碱为含小檗碱的单体或混合物。绿僵菌和小檗碱复配用于农业杀虫、杀菌，可用于在防治作物虫害和病害，减少单独使用的人工费用，节约水电，环境友好，可扩大生物农药的杀虫、杀菌谱、减少用药次数。本发明不含任何化学农药成分，在环境中易于降解，对人、畜、环境安全，病原菌对其不易产生抗药性；同时具有稳定、高效、低成本的优点。
【专利说明】
一种复配农用杀虫杀菌组合物及其应用
技术领域
[0001]本发明涉及一种复配农用杀虫杀菌组合物及其应用，属于农药技术领域。
【背景技术】
[0002]绿僵菌(Metarhizium spp.)是一类重要的昆虫病原真菌，以其为主要生物活性成 分的制剂具有无残留、易生产、持效期长、致病力强、应用效果好、对非靶标生物安全等优 点，具有广阔的应用前景。对多种农林害虫具有寄生致死作用，作为一类生防微生物越来越 受到人们的关注。自20世纪60年代以来，已有50多种制剂产品被研制出来并获得注册登记。 但绿僵菌杀虫剂具有防治单一、杀虫速度较慢和成本相对较高等缺点，在应用上受到一定 限制。
[0003]小檗碱主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中药中，此类中药资源丰富。小檗碱市场 价格低廉，决定了其作为农用杀菌剂的成本优势。作为传统抗菌药物，小檗碱对多种革兰阳 性及阴性细菌有效，临床主要用于治疗肠炎。研究证明小檗碱还具明显的抗癌、治疗糖尿 病、抗高血压、治疗心律失常等新功能，堪称老药新用的典范。小檗碱属低毒级(3级），对作 物灰霉病、白粉病、褐腐病、晚疫病等具有很好的防效。
[0004]为提尚真菌杀虫剂的杀虫速度、降低成本，提尚杀菌药的杀菌效率，如果杀菌、杀 虫剂混合应用可大大节省人力、物力，减少农药的使用次数，但是化学杀菌剂环境相容性 差，如多菌灵、代森锰锌和甲基硫菌灵对绿僵菌的毒害作用强，与绿僵菌农药相容性较差， 影响绿僵菌农药的杀虫效果。
[0005] 发明人发现广谱性杀菌剂小檗碱与绿僵菌有很好的相容性，小檗碱对绿僵菌对孢 子萌发无影响，对菌丝生长速度和产孢量的抑制率无影响，且二者复配，同时添加增效剂多 糖、皂角粉、植物蛋白、壳聚糖，绿僵菌、小檗碱的杀虫、杀菌效果均明显提高，产生协同作 用，绿僵菌的杀虫速度和效率提高，同时小檗碱杀菌防治效果增加。
[0006] 基于以上现有技术，由"北京市教育委员会市属高校创新能力提升计划项目"资助 完成本发明。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是提供一种复配农用杀虫杀菌组合物，该组合物中有效成分之间具 有显著协同作用，防治效果好。
[0008] 本发明的另一目的在于提供所述复配农用杀虫杀菌组合物在防治作物虫害和病 害中的应用。
[0009] 为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
[0010] -种复配农用杀虫杀菌组合物，该组合物包含绿僵菌、小檗碱、载体和助剂，其中 绿僵菌、小檗碱、载体和助剂的重量比为:2-20:3-20:30-70:20-60。
[0011] 所述绿僵菌为绿僵菌分生孢子，其含量为20-500亿孢子/克，所述小檗碱为含小檗 碱的单体或混合物。
[0012] 所述绿僵菌和小檗碱的总含量为5%-30%。
[00?3]所述载体为膨润土、娃藻土、陶土、凹凸棒土、高岭土、活性白土、泥煤、白炭黑中的 一种或几种。
[0014] 所述助剂包括增效剂和分散剂。所述增效剂为多糖、皂角粉、植物蛋白、壳聚糖中 的一种或几种。所述分散剂包括皂角粉、S0PA230、S0PA235、S0PA270、十二烷基苯磺酸钠、拉 开粉、润湿渗透剂T、吐温60、亚甲基双萘磺酸钠(ΝΝ0)、甲基萘磺酸钠甲醛缩合物(MF)、木质 素磺酸钠(钙）、木质素磺酸钠(钙）、烷基酚聚氧乙烯基磷酸酯、PVA、PEG、三聚磷酸钠、洗衣 粉、油酸钠、聚乙烯醇中的一种或几种。
[0015] 所述复配农用杀虫杀菌组合物的制备方法为:精确称取绿僵菌高孢粉原药，首先 用载体吸附，混合均匀后，加入小檗碱、助剂，混合均匀，经粉碎至粒径在50nm以下，过300目 振动筛，既得。
[0016] 本发明还提供所述复配农用杀虫杀菌组合物在防治作物虫害和病害中的应用，所 述虫害包括蚜虫、介壳虫、白粉虱、小菜蛾等，病害包括灰霉病、白粉病、褐腐病、晚疫病等。 [00 17]本发明的优点在于：
[0018] 本发明绿僵菌与小檗碱的复配，添加增效剂，具有显著协同作用，防治效果好，可 以扩大生物农药的杀虫、杀菌谱;提高持效期、减少农药的使用次数;节省人力、物力。
[0019] 本发明绿僵菌与小檗碱的复配可提高生防微生物的作用效果，既能杀虫又能杀 菌，获得预期的经济效益和生态效益。
[0020] 本发明不含任何化学农药成分，在环境中易于降解，对人、畜、环境安全，病原菌对 其不易产生抗药性;同时具有稳定、高效、低成本的优点。
【具体实施方式】
[0021 ]以下通过具体实施例对本发明做进一步说明。
[0022] 实施例1
[0023] 绿僵菌MB J6菌株，由北京化工大学生命学院分离，在TOAY培养基(PDA中添加0.5 % 酵母浸膏）上培养，菌种保存于4°C。孢子粉:将菌种接到试管斜面上，在25°C培养箱中培养 7d;再转接到PDAY平板上，25°C培养2周，待产孢成熟后收集备用。以小檗碱浓度3.6yg/mL为 a，绿僵菌用20mL无菌水洗孢子，设其浓度为b(10万孢子/mL)。根据等效线法按表1配制成培 养基，各组接5mm灰霉病菌饼。空白对照仅接种直径5mm灰霉病菌饼，不添加小檗碱和绿僵 菌。培养96小时观察绿僵菌菌落直径和对灰霉病菌菌落抑制率，每组重复3次。结果表明，小 檗碱对绿僵菌孢子萌发、菌丝生长及产孢无影响，二者具有很好的相容性，即使在小檗碱 1000倍推荐浓度下，对绿僵菌孢子萌发无影响，对菌丝生长速度和产孢量的抑制率无影响， 说明二者复配的可行性。文献曾报道化学农药、植物生长调节剂和除草剂，如多菌灵、代森 锰锌、甲基硫菌灵、三唑酮、啶虫脒、吡虫啉、矮壮素、毒死蜱、乐果、高效氯氟氰菊酯、阿维菌 素、敌百虫、波尔多液、哒螨灵、甲霜灵、氟乐灵、溴氰菊酯、氰戊菊酯对绿僵菌有不同程度的 毒害作用，能抑制绿僵菌孢子萌发、菌丝生长及产孢(张英财，农/向群，张泽华，王广君。18 种化学农药与绿僵菌相容性研究。中国生物防治学报，2012，28(2): 186-191。）。
[0024]表1小檗碱与绿僵菌的复配结果
[0025]
[0026] 实施例2
[0027] 13% (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂的制备 [0028] 各原料的重量配比如下：
[0029]
[0030] ~各原料按重量配比称量，绿僵菌l〇〇g、小檗^30g、甘草多糖30g、膨润土620g、拉开1 粉100g、十二烷基苯磺酸钠120g。上述杀菌剂可湿性粉剂的制备过程为:精确称取绿僵菌， 将称好的绿僵菌用载体膨润土吸附，混合均匀，再将称取的小檗碱、甘草多糖、十二烷基苯 磺酸钠、拉开粉加入，混合均匀，经超微粉碎机粉碎30分钟，过300目筛，得13% (绿僵菌+小 檗碱)可湿性粉剂。
[0031] 实施例3
[0032] 20% (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂的制备
[0033] 各原料的重量配比如下：
[0034]
[0035] 各原料按重量配比称量，绿僵菌100g、小檗碱100g、大黄多糖100g、木质素磺酸钠 110g、十二烷基苯磺酸钠 100g、膨润土490g。上述杀菌剂可湿性粉剂的制备过程为:精确称 取绿僵菌，将称好的绿僵菌用载体凹凸棒土吸附，混合均匀，再将称取的小檗碱、大黄多糖、 十二烷基苯磺酸钙、木质素黄酸钙加入，混合均匀，经超微粉碎机粉碎30分钟，过300目筛， 得20 % (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂。
[0036] 实施例4
[0037] 8% (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂的制备
[0038] 各原料的重量配比如下：
[0039]
[0040]各原料按重量配比称量，绿僵菌50g、小檗碱30g、黄芪多糖80g、三聚磷酸钠 100g、 皂角粉50g、十二烷基苯磺酸钠 100g、高岭土590g。上述杀菌剂可湿性粉剂的制备过程为:精 确称取绿僵菌，将称好的绿僵菌用载体高岭土吸附，混合均匀，再将称取的小檗碱、皂角粉、 黄芪多糖、十二烷基苯磺酸钠、三聚磷酸钠加入，混合均匀，经超微粉碎机粉碎30分钟，过 300目筛，得8 % (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂。
[0041 ] 实施例5
[0042] 7% (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂的制备
[0043] 各原料的重量配比如下：
[0044]
[0045] 各原料按重量配比称量，绿僵菌40g、小檗碱30g、海藻多糖80g、NN0 80g、皂角粉 20g、十二烷基苯磺酸钙150g、白炭黑600g。上述杀菌剂可湿性粉剂的制备过程为:精确称取 绿僵菌，将称好的绿僵菌用载体白炭黑吸附，混合均匀，再将称取的小檗碱、皂角粉、海藻多 糖、十二烷基苯磺酸钙、ΝΝ0加入，混合均匀，经超微粉碎机粉碎30分钟，过300目筛，得7 % (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂。
[0046] 实施例6
[0047] 25% (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂的制备
[0048] 各原料的重量配比如下：
[0049]
[0050] 各原料按重量配比称量，绿僵菌150g、小檗碱100g、壳聚糖120g、NN0 150g、十二烷 基苯磺酸钙130g、白炭黑350g。上述杀菌剂可湿性粉剂的制备过程为:精确称取绿僵菌，将 称好的绿僵菌用载体白炭黑吸附，混合均匀，再将称取的小檗碱、壳聚糖、十二烷基苯磺酸 钙、ΝΝ0加入，混合均匀，经超微粉碎机粉碎30分钟，过300目筛，得25% (绿僵菌+小檗碱)可 湿性粉剂。
[0051 ] 实施例7
[0052] 15% (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂的制备
[0053] 各原料的重量配比如下
[0054]
[0055] 各原料按重量配比称量，绿僵菌100g、小檗碱50g、甘草多糖120g、S0PA23070g、十 二烷基苯磺酸钙150g、膨润土 510g。上述杀菌剂可湿性粉剂的制备过程为：精确称取绿僵 菌，将称好的绿僵菌用载体膨润土吸附，混合均匀，再将称取的小檗碱、甘草多糖、十二烷基 苯磺酸钙、S0PA230加入，混合均匀，经超微粉碎机粉碎30分钟，过300目筛，得15 % (绿僵菌+ 小檗碱)可湿性粉剂。
[0056] 实施例8
[0057] 实施例5中制备的7% (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂对番茄灰霉病菌和蚜虫的田间 药效试验
[0058]为明确绿僵菌+小檗碱对番茄灰霉病、蚜虫的田间药效情况，在河北石家庄灵寿大 棚对该药剂进行了防治番茄灰霉病的田间小区药效试验。试验用背负式喷雾器，小区试验 为随机排列，重复3次，每小区面积0.3亩，品种为魁冠二号番茄。供试药剂稀释4个浓度，进 行叶面常量喷雾（即叶面上出现一层水膜为宜），5月12日第一次喷药，间隔10天第二次喷 药。以40%嘧霉胺可湿性粉剂1000倍液为对照药剂进行叶面常量喷雾防治灰霉病，啶虫脒 1500倍为对照药剂进行叶面常量喷雾防治蚜虫，并设清水空白对照。根据空白对照发病情 况分级调查。灰霉病采用如下分级方法：
[0059] 0级:无病；
[0060] 1级:病斑面积占整片叶面积的5 %以下；
[00611 3级:病斑面积占整片叶面积的6%~15% ;
[0062] 5级:病斑面积占整片叶面积的16~25% ;
[0063] 7级:病斑面积占整片叶面积的26~50% ;
[0064] 9级:病斑面积占整片叶面积的50%以上；
[0065] 根据调查数据，计算各处理的病情指数和防治效果。病情指数按公式（1)计算，计 算结果保留小数点后两位。
[0066]
[0067]式中，X表示病情指数;Ni表示各级病叶数;i表示相对级数值;N表示调查总叶。 [0068]防治效果按公式(2)计算。
[0069] P = l〇〇X(CK_PT)/CK (2)
[0070] 式中，P表示防治效果（％ ) ;CK表示空白对照病情指数;PT表示药剂处理病情指数。
[0071] 蚜虫调查方法:药前调查虫口基数。喷药后ld、3d分别调查残虫量（以对角线5点取 样，每点6株，距顶端30cm处调查残虫量），计算虫口减退率与防效。
[0072]表2 7% (绿僵菌+小檗碱)对番茄灰霉病的田间药效试验结果
[0073]
[0074]
[0075] 由表2可知，7 % (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂稀释500倍时，防效为83.93 %，7 %小 檗碱可湿性粉剂500倍防效为75.91 %，明显低于7% (绿僵菌+小檗碱）可湿性粉剂，对照 40%嘧霉胺可湿性粉剂1000倍液的防治效果为77.87%，绿僵菌与小檗碱复配的其他稀释 浓度防效均高于单独使用小檗碱的防效。综合结果，7% (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂防治 番茄灰霉病效果好，绿僵菌与小檗碱复配对于灰霉病的防治起到协同作用。
[0076]表3 7% (绿僵菌+小檗碱)对番茄蚜虫的田间药效试验结果
[0077]
[0078]由表3可知，7% (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂稀释500倍时，防效在75%以上，7% 小檗碱可湿性粉剂稀释500倍防效为70.95%。综合结果，7% (绿僵菌+小檗碱)可湿性粉剂 稀释的任何一个浓度与7%小檗碱可湿性粉剂比较防治效果均高，说明绿僵菌与小檗碱复 配对于蚜虫的防治达到协同作用。
【主权项】
1. 一种复配农用杀虫杀菌组合物，其特征在于：该组合物包含绿僵菌、小檗碱、载体和 助剂，其中绿僵菌、小檗碱、载体和助剂的重量比为:2-20:3-20:30-70:20-60。2. 根据权利要求1所述的复配农用杀虫杀菌组合物，其特征在于:所述绿僵菌为绿僵菌 分生孢子，其含量为20-500亿孢子/克，所述小檗碱为含小檗碱的单体或混合物。3. 根据权利要求1所述的复配农用杀虫杀菌组合物，其特征在于:所述绿僵菌和小檗碱 的总含量为5 %-30 %。4. 根据权利要求1所述的复配农用杀虫杀菌组合物，其特征在于:所述载体为膨润土、 硅藻土、陶土、凹凸棒土、高岭土、活性白土、泥煤、白炭黑中的一种或几种。5. 根据权利要求1所述的复配农用杀虫杀菌组合物，其特征在于:所述助剂包括增效剂 和分散剂。6. 根据权利要求5所述的复配农用杀虫杀菌组合物，其特征在于:所述增效剂为多糖、 皂角粉、植物蛋白、壳聚糖中的一种或几种。7. 根据权利要求5所述的复配农用杀虫杀菌组合物，其特征在于:所述分散剂包括皂角 粉、30?4230、30?4235、30?4270、十二烷基苯磺酸钠、拉开粉、润湿渗透剂1\吐温60、顺0、]\^、 木质素磺酸钠(钙）、木质素磺酸钠(钙）、烷基酚聚氧乙烯基磷酸酯、PVA、PEG、三聚磷酸钠、 洗衣粉、油酸钠、聚乙烯醇中的一种或几种。8. 权利要求1所述的复配农用杀虫杀菌组合物的制备方法，其特征在于:绿僵菌高孢粉 原药，首先用载体吸附，混合均匀，加入小檗碱、助剂，混合均匀，经粉碎至粒径在50nm以下， 过300目振动筛，既得。9. 权利要求1所述的复配农用杀虫杀菌组合物在防治作物虫害和病害中的应用，其特 征在于:所述虫害为虫牙虫、介壳虫、白粉虱、小菜蛾中的一种或多种，病害为灰霉病、白粉病、 褐腐病、晚疫病中的一种或多种。
【文档编号】A01N63/04GK106070338SQ201610459355
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月22日
【发明人】葛喜珍, 薛科科, 李映, 田平芳, 张元
【申请人】北京联合大学