专利名称：从杜氏盐藻合成谷胱甘肽的制作方法
一、谷胱甘肽(Glatathione，缩写为GSH)是由谷氨酸，半胱氨酸甘氨酸通过肽键缩合而成的三肽化合物，化学名为r-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸。它是由Hopkins于1921年最先发现的，于1930年最终测定其化学结构，接着Rudingen等人通过化学途径合成了GSH，此后美国、日本国用发酵及基因工程法大大降低了成本，目前用发酵法和基因工程法合成GSH，仍数日本国协和发酵、味之素株式会社领先世界先进水平。
由于谷胱甘肽是一种非常特殊的氨基酸衍生物，又是含有硫氢基的三太，在生物体内有着重要的作用，所以GSH在临床上有许多用途(1)GSH作为解毒剂，可用于丙烯腈、氟化物、一氧化碳、重金属及有机溶剂等中毒治疗。(2)GSH作为抗氧化剂，可保护细胞膜，使之免遭氧化性破坏，防止红细胞溶血及促进高铁血红蛋白的还原。(3)GSH对放射线、放射性药物或者由于肿瘤药物所引起的白细胞减少等症状能起到保护作用。(4)GSH能够纠正乙酰胆碱、胆碱酯酶的不平衡，起到抗过敏作用。(5)GSH对缺氧血症、恶心以及肝脏疾病所引起的不适具有缓解作用。(6)GSH可防止皮肤老化及色素沉着，减少黑色素的形成，改善皮肤抗氧化能力并使皮肤产生光泽。(7)GSH还具有治疗眼角膜病的效果。(8)GSH尚能改善性功能。最近并发现GSH也可能具有抑制艾滋病病毒之功效。随着对谷胱甘肽研究的不断深入，谷胱甘肽在临床及医药领域内将会有更多的用谷胱甘肽在食品加工工业中也有着广泛的应用。发达国家如日本等国将谷胱甘肽作为生物活性添加剂并积极开发作为保健食品。谷胱甘肽用在食品加工业主要有以下几个方面1.面制品加工把谷胱甘肽加入面制品中能起还原作用，并且还起到强化氨基酸的作用。
2.奶品及婴儿食品加工在奶制品如酸奶及儿童食品中加入谷胱甘肽起到抗氧化的作用，能增强婴儿食品及奶制品的营养价值。
3.鱼类及罐头加工谷胱甘肽具有抗氧化作用。在鱼类加工时加入它，可以抑制核酸分解，强化食品的风味；在水果罐头加工过程中加入谷胱甘肽，可以防止水果褐变，保持食品的诱人色泽，从而提高了产品的质量。
4.肉制品及干酷等食品加工在此类食品的加工过程中也可加入谷胱甘肽，其作用是抗氧化，强化食品风味。
谷胱甘肽作为食品添加剂优于其它防腐、抗氧化添加剂，对人体有益。所以，随着我国食品加工业的不断发展，谷胱甘肽也将在我国食品加工业中得到广泛应用。
随着GSH生物合成技术的日臻完善，GSH的价格越来越被世界人民可接受，从2000年的4000美元/kg，到2001年2800美元/kg。直至目前进口价格及在1000美元/kg左右。国内生化试剂级(纯度98％)的10万元人民币/kg。国内对GSH尚处于研制的初级阶段，国内使用的GSH完全依赖进口，而这样高昂的价格阻碍了广大人民群众的应用，本发明基于上述的理由，填补国内空白，造福广大的人民群众作为出发点，一改传统的发酵法和基因工程法，充分利用自然海域、阳光、气温等因素，使用杜氏盐藻(Du’sSaline Algae)，加入对人体有益而无害的细胞刺激生长剂，从而对日本国山冈到保等人的发明(公开特许公报平2-234(1990年))作了重大改进，并制定了全新的实施方案，不仅大幅度降低了GSH的成本，而且有效地提高了GSH的产品质量，现将利用杜氏盐藻养殖合成GSH的各种条件的实施例综述如下传统的利用杜氏盐藻养殖生物合成GSH法，常用Se和As这种重金属虽能刺激单细胞增殖，但毒性极大且易造成提取了GSH后的残留绿藻的深加工，深层次利用受到了限制。
实施例1在250ml锥型瓶中加入海水200ml，Na2CO32mg、NaHPO4，H2O4mg、从土壤中的提取液10ml，加入0.5ml杜氏盐藻，用20W日光灯24小时照射，边通气边搅拌，同时加入20mgFeSO4·H2O，20-24℃，PH＝8，培养6天，将得到的培养液离心分离，将湿藻体用0.6M高氯酸钠(NaClO4)溶液对藻体抽提。将抽提液经732阳离子交换树脂吸附后，再用0.1％三氯醋酸溶液进行洗脱，得到24.5mgGSH，收率约为2.45％。
实施例2在250ml锥形瓶中加入海水200ml、NaCO32mg、Na2HPO4、12H2O4mg、土壤提取液10ml，操作同实施例1，加入30mg ZnSO4，温度、PH均同实施例1，得到产量为25.5mgGSH，收率约2.48％。
权利要求
1.本发明用养殖杜氏盐藻生产谷胱甘肽，为了提高GSH的收率，以FeSO4和ZnSO4刺激单细胞杜氏盐藻的快速增殖，6天养殖结果GSH的收率为≥2.45％。
2.根据权利要求1所述FeSO4和ZnSO4添加量为0.1‰-1‰。
全文摘要
本发明重大改进是用无毒的硫酸亚铁(FeSO
文档编号C12N1/12GK1611595SQ200310101660
公开日2005年5月4日 申请日期2003年10月28日 优先权日2003年10月28日
发明者丁庆 申请人:丁庆