一种利用螺旋藻养殖液养殖杜氏盐藻的方法
【专利摘要】一种利用螺旋藻养殖液残液养殖杜氏盐藻的方法，属于生物【技术领域】，该方法包括以下步骤：（1）配制杜氏盐藻培养液、（2）将藻种池内加入杜氏盐藻培养液，然后放入杜氏盐藻藻种进行扩大培养至对数生长期、（3）把对数期生长的藻液按一定比例的接种量接入到生长池、（4）把生长池中培养成熟的杜氏盐藻藻液，经藻液除沙和离心机分离，将分离出培养液和藻糊进行收集，培养液用于步骤（1）杜氏盐藻培养液的配制，藻糊用于后期的加工；利用养殖螺旋藻养殖液残液养殖杜氏盐藻，有利于营养成分的累积，在短期内获得大量藻细胞数；增加了产品的产量和附加值，工艺简单能耗低；缩短了杜氏盐藻养殖时间，养殖条件易于控制，生产成本低，产品附加值高。
【专利说明】一种利用螺旋藻养殖液养殖杜氏盐藻的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物【技术领域】，具体涉及杜氏盐藻的养殖方法。【背景技术】
[0002]杜氏盐藻(Dunaliellasalina)隶属绿藻门(Chlorophy ta)、团藻目(Volvocales)、多毛藻科(Poly-blepharidaceae)、杜氏藻属(Dunaliella, Teodoresco),是一种能在高盐环境中生长的无细胞壁的单细胞绿藻。
[0003]杜氏盐藻是单细胞的浮游植物，其藻体为卵圆形、椭圆形或梨形，长18-28 μ m，宽
9.5 —14 μ m，运动时体形有变化，在不同的盐度、光照、温度等环境下其形态变化较大。这是因为杜氏藻没有纤维质的细胞壁，外形随环境变化而改变，蛋白核及淀粉粒也随环境不同而有变化的缘故。杜氏藻细胞前段一般呈凹陷状，在凹陷处有两条等长的鞭毛，鞭毛比细胞长约1/3 ;藻体内有一杯状色素体，色素体内的色素主要是叶绿素和类胡萝卜素(以β_胡萝卜素为主)。
[0004]杜氏藻在生长期间以无性繁殖为主，藻体在运动中纵裂为二，各形成一个新体。分裂旺盛时，显微镜下常可见到4一8个新个体同时形成。分裂期藻体较小，常呈绿色；成熟后个体结合成合子，合子呈球形，比藻体大，有光滑的薄壁，每一合子进行减数分裂，最终产生16个游动孢子。
[0005]杜氏盐藻含有丰富的油脂、胡萝卜素、蛋白质、多糖等，同时含较高的Ca、P、Zn等矿物质，还含有包括人类必需氨基酸在内的18种氨基酸，累积的甘油为干重的40%-50%。在适当的条件下，体内合成的胡萝卜素可达细胞干重的10%上。
[0006]杜氏盐藻在食品、医药保健以及化工和养殖业中具有独特经济价值。这种藻类在澳大利亚、美国和以色列等国家已经实现了工业化生产。其产业化所涉及方面主要是β -胡萝卜素类保健品、化妆品、营养补充剂和藻粉等。
[0007]检索中国专利，发现有关杜氏盐藻的专利寥寥无几，现有:
[0008]—、专利号为93106062.1,发明名称为“养殖盐藻生产β _胡萝卜素模式的建立”，该方法是:根据盐藻生长模式和β_胡萝卜素累积模式所需的环境条件，改变养殖过程中的环境因子以达目的。其中包括:光照强度30000勒克斯左右、盐度由150~180%。升高到240%。、温度由24~28°C升高到30°C以上、N浓度由lmmol/L下降到0.5~lmmol/L、P浓度由0.3mmol/L下降到0.lmmol/L。该方法操作简单，对设备和技术要求不高，方便调控，但只考虑了杜氏盐藻的生长和胡萝卜素的累积，没有考虑碘的累积，生产出的盐藻粉功能不多，附加值不高。
[0009]二、专利号为201110314357.3，发明名称为“杜氏盐藻累积有机碘的养殖方法”，该方法是:通过改变杜氏盐藻的养殖条件以达到促进其生长、增加β_胡萝卜素和有机碘的累积量的效果。其中包括:第一阶段养殖:盐度由150%。~180%。降到30%。~40%。、光照强度 10000 勒克斯左右、添加了 KN03600mg/L、KH2P0460mg/L、NaHC03500mg/L ;第二阶段养殖:控制养殖池温度在30~40°C、盐度控制在110%。~120%。、光照强度200001x~400001x、添加了 NaHC03500mg/L，K1030.4~0.6g/L ;本发明缩短了杜氏盐藻养殖时间，养殖条件易于控制，生产成本低，产品附加值高。
[0010]上述专利的内容，只是为了提高有机典或β-胡萝卜素的含量积累，增加杜氏盐藻的附加值，只是根据盐藻生长模式和β-胡萝卜素和有机典累积模式所需的环境条件，改变养殖过程中的环境因子以达目的养殖方法，没有全方位地考虑杜氏盐藻的营养成分的均衡积累，没有考虑藻类养殖所需原材料循环利用的问题。
【发明内容】
[0011]本发明的目的在于克服现有技术中不足之处，提供一种在基本环境因子改变不大的情况下，利用螺旋藻养殖液养殖杜氏盐藻的方法，可以全面保证杜氏盐藻的营养成分的积累。
[0012]为了实现本发明的目的，我们将采用如下技术方案予以实施:
[0013]一种利用螺旋藻养殖液残液养殖杜氏盐藻的方法，其特征在于:该方法包括以下步骤:
[0014](I)配制杜氏盐藻培养液；
[0015](2)将藻种池内加入杜氏盐藻培养液，然后放入杜氏盐藻藻种进行扩大培养至对数生长期，控制藻种池的温度20~35°C、盐度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培养4~6天；
[0016](3)把对数期 生长的藻液按10wt%~20wt%的接种量接入到生长池，控制生长池的温度20~35°C、盐度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培养6~8天；
[0017](4)把生长池中培养成熟的杜氏盐藻藻液，经藻液除沙和离心机分离，将分离出培养液和藻糊进行收集，培养液用于步骤(1)杜氏盐藻培养液的配制，藻糊用于后期的加工。
[0018]所述的螺旋藻养殖液残液所含的盐分种类和浓度分别:氯化钠I~3g/L、碳酸钠9~20g/L、小苏打0.1~2g/L、磷酸二氢钾0.01~0.05g/L、硝酸钠0.5~lg/L、硫酸亚铁0.001 ~0.005g/L、氯化钙 0.05 ~0.25g/L、氯化钾 0.05 ~0.25g/L、硫酸镁 0.3 ~0.6g/L、氯化镁0.8~1.8g/L，螺旋藻养殖液残液的PH值为10~14。
[0019]所述的步骤(1)中的杜氏盐藻培养液是利用PH值为10~14、碳酸钠含量为9~20g/L的螺旋藻养殖液残液加浓度为20%的盐酸5.000~8.000g/L配制而成。
[0020]所述的盐酸优选含量为6.558g/L。
[0021]经步骤(1)配制完成后，杜氏盐藻培养液中的氯化钠的浓度为12~36%。
[0022]经步骤(1)配制完成后，所述的杜氏盐藻培养液中盐分的种类和浓度如下:小苏打0.1~0.5g/L，磷酸二氢钾0.01~0.05g/L,硝酸钠0.8~1.2g/L，硫酸亚铁0.001~0.005g/L,氯化钙0.05~0.25g/L，氯化钾0.05~0.25g/L，硫酸镁0.3~0.6g/L，氯化镁0.8 ~1.8g/L。
[0023]所述的步骤(2)或步骤(3)所用的杜氏盐藻培养液中的小苏打、磷酸二氢钾、硝酸钠、硫酸亚铁、氯化钙、氯化钾、硫酸镁和氯化镁的浓度分别为0.3g/L、0.03g/L、lg/L、
0.002g/L、0.15g/L、0.18g/L、0.45g/L、l.2g/L。
[0024]有益效果
[0025]本发明采用的养殖方式:利用养殖螺旋藻养殖液的残液，利用常规培养条件下，采用有利于盐藻生长的环境因素，使其有利于所有营养成分的累积，在短期内获得大量藻细胞数；
[0026]本发明的方法增加了产品的产量和附加值，工艺简单能耗低，每次养殖的藻种均由藻种池扩大培养后进行生产，既确保了工艺的优越性，也保证了藻种的品质，同时不影响生产的正常进行；
[0027]本发明缩短了杜氏盐藻养殖时间，养殖条件易于控制，生产成本低，产品附加值高。在整个养殖过程中添加的物质符合国家规定，产品安全可靠，可应用于食品和医药行业。
【专利附图】
【附图说明】
[0028]图1为本发明的工艺流程图。
【具体实施方式】
[0029]结合附图，对本发明做进一步地说明:
[0030]如图1所示，本发明所述的一种利用螺旋藻养殖液养殖杜氏盐藻的方法，该方法包括以下步骤:
[0031](I)配制杜氏盐藻培养液；该培养液是由螺旋藻养殖液残液加浓度为20%的盐酸配制而成，该残液含有氯化钠、碳酸钠、小苏打、磷酸二氢钾、硝酸钠、硫酸亚铁、氯化钙、氯化钾、硫酸镁、氯化镁，各组分的浓度分别为:氯化钠I~3g/L、碳酸钠9~20g/L、小苏打0.1 ~2g/L、磷酸二氢钾 0.01 ~0.05g/L、硝酸钠 0.5 ~lg/L、硫酸亚铁 0.001 — 0.005g/L、氯化钙0.05~0.25g/L、氯化钾0.05~0.25g/L、硫酸镁0.3~0.6g/L、氯化镁0.8~1.8g/L ;当螺旋藻养殖液残液中的PH值在9~14、碳酸钠含量在9~20g/L时，加盐酸5.000~·8.000g/L,优选添加6.558g/L,加入盐酸后配制成杜氏盐藻培养液,杜氏盐藻培养液的盐度为12~36%，所述的杜氏盐藻培养液中盐分的种类和浓度如下:小苏打0.1~0.5g/L，磷酸二氢钾0.01~0.05g/L,硝酸钠0.8~1.2g/L，硫酸亚铁0.001 — 0.005g/L,氯化钙0.05~
0.25g/L，氯化钾 0.05 ~0.25g/L，硫酸镁 0.3 ~0.6g/L，氯化镁 0.8 ~1.8g/L ；
[0032]杜氏盐藻培养液含有小苏打、磷酸二氢钾、硝酸钠、硫酸亚铁、氯化钙、氯化钾、七水硫酸镁和氯化镁，各组分的优选浓度分别为:小苏打0.3g/L、磷酸二氢钾0.03g/L、硝酸钠lg/L、硫酸亚铁0.002g/L、氯化钙0.15g/L、氯化钾0.18g/L、硫酸镁0.45g/L、氯化镁
1.2g/L。
[0033](2)将藻种池内加入杜氏盐藻培养液，然后放入杜氏盐藻藻种进行扩大培养至对数生长期，控制藻种池的温度20~35°C、盐度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培养4~6天；
[0034](3)把对数期生长的藻液按10wt%~20wt%的接种量接入到生长池，控制生长池的温度20~35°C、盐度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培养6~8天；
[0035](4)把生长池中培养成熟的杜氏盐藻藻液，经藻液除沙和离心机分离，将分离出培养液和藻糊进行收集，培养液用于步骤(1)杜氏盐藻培养液的配制，藻糊用于后期的加工。
【权利要求】
1.一种利用螺旋藻养殖液残液养殖杜氏盐藻的方法，其特征在于:该方法包括以下步骤: (1)配制杜氏盐藻培养液； (2)将藻种池内加入杜氏盐藻培养液，然后放入杜氏盐藻藻种进行扩大培养至对数生长期，控制藻种池的温度20~35°C、盐度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培养4~6天； (3)把对数期生长的藻液按10wt%~20wt%的接种量接入到生长池，控制生长池的温度20~35°C、盐度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培养6~8天； (4 )把生长池中培养成熟的杜氏盐藻藻液，经藻液除沙和离心机分离，将分离出培养液和藻糊进行收集，培养液用于步骤(1)杜氏盐藻培养液的配制，藻糊用于后期的加工。
2.根据权利要求1所述的一种利用螺旋藻养殖液残液养殖杜氏盐藻的方法，其特征在于:所述的螺旋藻养殖液残液所含的盐分种类和浓度分别:氯化钠I~3g/L、碳酸钠9~20g/L、小苏打0.1~2g/L、磷酸二氢钾0.01~0.05g/L、硝酸钠0.5~lg/L、硫酸亚铁0.001 ~0.005g/L、氯化钙 0.05 ~0.25g/L、氯化钾 0.05 ~0.25g/L、硫酸镁 0.3 ~0.6g/L、氯化镁0.8~1.8g/L，螺旋藻养殖液残液的PH值为9~14。
3.根据权利要求1所述的一种利用螺旋藻养殖液养殖杜氏盐藻的方法，其特征在于:所述的步骤(1)中的杜氏盐藻培养液是利用PH值为10~14、碳酸钠含量为9~20g/L的螺旋藻养殖液残液加浓度为20%的盐酸5.000~8.000g/L配制而成。`
4.根据权利要求3所述的一种利用螺旋藻养殖液养殖杜氏盐藻的方法，其特征在于:所述的盐酸优选含量为6.558g/L。
5.根据权利要求3所述的一种利用螺旋藻养殖液养殖杜氏盐藻的方法,其特征在于:经步骤(1)配制完成后，杜氏盐藻培养液中的氯化钠的浓度为12~36%。
6.根据权利要求3所述的一种利用螺旋藻养殖液养殖杜氏盐藻的方法,其特征在于:经步骤(1)配制完成后，所述的杜氏盐藻培养液中盐分的种类和浓度如下:小苏打0.1~0.5g/L，磷酸二氢钾0.01~0.05g/L,硝酸钠0.8~1.2g/L，硫酸亚铁0.001~0.005g/L,氯化钙0.05~0.25g/L，氯化钾0.05~0.25g/L，硫酸镁0.3~0.6g/L，氯化镁0.8~1.8g/L0
7.根据权利要求1所述的一种利用螺旋藻养殖液养殖杜氏盐藻的方法，其特征在于:所述的步骤(2)或步骤(3)所用的杜氏盐藻培养液中的小苏打、磷酸二氢钾、硝酸钠、硫酸亚铁、氯化钙、氯化钾、硫酸镁和氯化镁的浓度分别为0.3g/L、0.03g/L、lg/L、0.002g/L、`0.15g/L、0.18g/L、0.45g/L、l.2g/L。
【文档编号】C12N1/12GK103627639SQ201310653022
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2013年12月6日 优先权日:2013年12月6日
【发明者】张德荣, 张玉慧, 杨喜红 申请人:张德荣