一种杜氏盐藻海水高密度培养基及培养方法
【专利摘要】本发明涉及一种杜氏盐藻海水高密度培养基，其特征在于：在培养基中加入硼砂，所述硼砂的浓度为0.03-0.2g/L。本发明通过实验证实：在硼砂添加量为0.06g/L时，类胡萝卜素的积累量高达304.4mg/L，而硼砂添加量为0g/L时，盐藻积累的类胡萝卜素的积累量只有93.3mg/L，由此证明添加硼砂对盐藻积累类胡萝卜素有明显的促进作用。
【专利说明】一种杜氏盐藻海水高密度培养基及培养方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及藻类植物的培养方法，特别是涉及一种杜氏盐藻海水高密度培养基及 培养方法。
【背景技术】
[0002] 杜氏盐藻，又称盐藻，是一种无细胞壁、有鞭毛的单细胞藻类，并且是最能耐受高 盐的真核生物之一。盐藻在中国有很长的培养历史，其具有生长速度快、有益代谢产物积累 量大等特点。盐藻在胁迫环境中（高温、高盐和/或高光）可积累大量的β-胡萝卜素，最 多高达藻细胞干重的14%，是自然界中β-胡萝卜素含量最高的生物之一。研究表明，类胡 萝卜素不仅是维生素 A的前体和食品加工业的天然色素,还能防治癌症、肿瘤和心血管疾 病以及老年痴呆和白内障等与年龄有关的退化性疾病；以海水为培养基进行培养时，还可 以大量积累蛋白质，含量高达细胞干重的50-60%，其中，包括人类必需的氨基酸在内的18 种氨基酸，是一种优良的蛋白饲料和人类食品加工原料；此外，盐藻在胁迫环境中还可积累 大量的甘油，含量高达80%。天然甘油是优质的化妆品原料，同时也是化工、轻工和医药工 业的重要原料。现代药理学研究表明，盐藻和类胡萝卜素还具有潜在的免疫调节、抗肿瘤、 抗动脉粥样硬化以及预防脂肪肝等多种药理活性。基于类胡萝卜素所具有的潜在药用价 值，使其具有了更高的商业价值。目前，盐藻的大量和高密度培养已经引起了研究人员的极 大关注。
[0003] 目前，已经知道的是影响盐藻生长的因素相当复杂，可能包括溶解氧量、碳源、矿 质营养源、光照和温度等，并且盐藻在生长过程中不断分泌胞外多糖，从而使培养液的粘度 较大，影响营养物质的吸收利用，虽然很多研究人员在促进盐藻生长方面做了很多工作，但 是目前很少有培养基在盐藻高密生长、类胡萝卜素积累和杂菌污染等方面同时得到非常显 著的效果。
[0004] 根据检索，发现有以下几篇专利文献与本发明相关，具体公开内容如下：
[0005] 1、专利（200610113359. 5) "盐藻的培养方法"，该方法提供了一种盐藻的培养方 法，其特点是将盐藻在接种了芽孢杆菌的培养基中进行培养，为盐藻的液体培养提供了一 种新的方法和途径。但是该方法并没有很好地考虑盐藻培养基对芽孢杆菌生长的影响和芽 孢杆菌对盐藻品质的影响。
[0006] 2、专利（200610113360. 8) "盐藻的一种培养方法"，该方法提供了一种培养盐藻的 方法，其特点将盐藻培养过程分成两类：一、无纤毛虫污染，二、受到纤毛虫污染，分别添加 青蒿的水提取物和/或乙醇提取物，或添加青蒿的乙醇提取物，有效解决了开放式养殖盐 藻中纤毛虫污染问题。但是该方法增加了操作的复杂性，增加了处理青蒿的成本。
[0007] 3、专利（201210479686. 8) "盐藻培养基、半连续培养方式及藻液中原生动物杀灭 方法"，该方法提供了一种盐藻半连续培养方式及藻液中原生动物污染的消除方法，其特点 是利用塑料薄膜悬浮培养代替传统的开放水泥池培养盐藻，并在培养基中加入（NH 4)2CO3, 来杀死藻液中的尖鼻虫、游仆虫、纤毛虫、变形虫等原生动物。但是该方法没有充分考虑外 加 NH4+对盐藻生长的影响，很多研究表明NH4+对盐藻是有一定杀伤作用的，尤其是在受到长 期作用的情况下，盐藻的生长出现明显的不良反应。
[0008] 目前文献报道的培养方法多是采用f/2培养基或Modified Johnson' s培养基，或 是在此基础上进行略微的优化，没有很好地解决盐藻生长速度慢、易受杂菌污染和害虫侵 害、成本1?等缺点。
【发明内容】
[0009] 本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种杜氏盐藻海水高密度培养 基及培养方法，本方法具有成本低廉，操作简单的特点，能显著提高盐藻生长速率、生物量 和类胡萝卜素的积累量，还能抑制开放培养中杂菌、纤毛虫、卤虫和变形虫的繁殖，保证盐 藻的质量和产量。
[0010] 本发明实现目的的技术方案如下：
[0011] 一种杜氏盐藻海水高密度培养基，在培养基中加入硼砂。
[0012] 而且，所述硼砂的浓度为0· 03-0. 2g/L。
[0013] 而且，所述培养基的成分为：
[0014]
【权利要求】
1. 一种杜氏盐藻海水高密度培养基，其特征在于：在培养基中加入硼砂。
2. 根据权利要求1所述的杜氏盐藻海水高密度培养基，其特征在于：所述硼砂的浓度 为 0·03-0. 2g/L。
3. 根据权利要求1或2所述的杜氏盐藻海水高密度培养基，其特征在于：所述培养基 的成分为：
4. 根据权利要求3所述的杜氏盐藻海水高密度培养基，其特征在于：所述铁盐母液的 成分及含量为：Na2EDTA · 2H20 0· 209g/L ;FeCl3 · 6H20 0· 244g/L。
5. -种杜氏盐藻海水高密度培养基的培养方法，其特征在于：培养基为：
培养的条件为25-35°C，光照强度为3000?90000Lux，光照时间为16h/天， 培养方法为：种子罐静置培养，定期震荡2-3次/天；生产培养为鼓泡与螺旋桨推动培 养，鼓泡通气量为l_2L/min，螺旋桨速度150-300cm/min。
6. 根据权利要求5所述的杜氏盐藻海水高密度培养基的培养方法，其特征在于：培养 采用补充营养的方法，步骤为：根据盐藻的生长速率间断补充营养物质，其中NO 3' PO43' NaHCO3 的补加量分别为 0· 2-0. 35mg/106 个、0· 8-1. 2mg/106 个、0· 6-1. Og/L/ 天。
【文档编号】C12R1/89GK104388316SQ201410679681
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2014年11月24日 优先权日:2014年11月24日
【发明者】吕和鑫, 崔相敢, 贾士儒, 夏锋 申请人:天津科技大学