专利名称：一种酿酒酵母真菌及其在普洱茶生产中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种酿酒酵母真菌及其在普洱茶生产中的应用，属生物技术领域。
背景技术：
众所周知，酵母菌属(Saccharomyces meyen em.Reess)。酿酒酵母在工业上有广泛的用途。除了酿造啤酒、酒精及其他饮料外，又可发面粉制面包。菌体含有丰富的维生素、蛋白质、多种酶等，可作食用、药用和饲料酵母，又可提取核酸、麦角甾醇、谷胱甘肽、维生素C和凝血质等作为医药和化工的重要原料。
在普洱茶大生产过程中，该菌系能分泌酶类作用于基质。在淀粉酶的作用下，将原料中的直链支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类，如麦芽糖、葡萄糖等，在蛋白酶的作用下，将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸。在果胶酶、糖化酶、纤维素酶的作用下使发酵基质大分子不溶物质转化为可溶解于水的小分子物质，对普洱茶品质的形成带来积极的作用。
在普洱茶研究领域，由于长期缺乏学科的研究，尤其是从微生物的角度来进行普洱茶的研究。而如何通过对云南普洱茶加工中微生物的研究，并从普洱茶加工中筛选有益优势微生物菌株应用到生产中来提升普洱茶的品质尚未见公开的文献报道。
发明内容
本发明的目的是从微生物的角度对进行普洱茶进行研究，为生产企业提供高品质普洱茶有益菌株来源。本发明的另一目的是通过控制有益菌种在普洱茶生产中的比例，为促进云南普洱茶品质稳定和提高发挥作用。
本发明的具有提高普洱茶品质功能的真菌，由生产菌株和辅料经初筛、复筛、天然培养基培养工序后得到，生产菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址北京是海淀区中关村北一条13号，保藏日期2005年5月16日，保藏号CGMCC No.1372。
本发明的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501的形态学特征为经过54h培养的酵母菌从PDA试管中转接到葡萄糖-酵母汁-蛋白胨琼脂培养基上30±2℃培养3d在显微镜下观察，经革兰氏染色细胞呈蓝紫色(G+)，细胞体较大，细胞长1.9-5.7μm，宽为1.90-2.85μm，细胞的形态呈椭圆形、肾形，多数呈一端稍尖，一端稍钝圆，有的一端已出芽，有的一端刚有芽尖。细胞的生殖方式为多边芽殖，出芽率为25％。
本发明的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501的培养特征固体培养特征菌落呈乳白色，表面光滑，致密，蜡质明胶状，边缘是全缘，菌落呈丘状隆起，有面粉发酵的味道。
液体培养特征液体有酸味，培养液清澈透明，在液体的表面没有濮、膜或岛的形成，在管底部有少量沉淀物，较紧结。
本发明经公知的纯化、天然培养基培养等传统工序后得到。
本发明的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501真菌有提高普洱茶品质的作用，可应用于普洱茶的生产工艺中。
本发明的优点在于将酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501按一定的比例用于普洱茶的大生产过程中，其普洱茶中的茶多糖含量为2-4％、茶褐素含量为10-12％，普洱茶的品质有明显的提高，并缩短了加工时间，对普洱茶品质的稳定和提高发挥重要作用。
具体实施例方式实施例1PSac0501菌种的纯化从采集到的茶样中，通过公知的平板分离(培养基用酿酒酵母分离纯化培养基)得到酿酒酵母菌株。酿酒酵母纯化培养基为葡萄糖20g、蛋白胨10g、酵母汁5g、琼脂20g、蒸馏水1000ml、不调ph值、8磅灭菌20min。
方法(1)将固体培养基熔化，冷却至45℃，注入无菌培养皿中，每皿约15～20毫升，稍微摇转，静置，使成平板备用。
(2)取要分离的茶样2g，在火焰旁加到装有98ml无菌水的研钵中研碎，此时得到的是10-2的菌悬液。
(3)稀释按十倍稀释法把菌悬液稀释至10-8，十倍法是指下一管的菌悬液要比上一管的稀十倍。
(4)接种事先准备好的平板9套，分别标号为10-6、10-7、10-8，每个稀释度写三套平皿，以便比较。在每个已标号的平皿中注入1ml相应的菌悬液，用涂布棒涂均匀，放入25～28℃培养24小时观察。
(5)培养2～5天后，挑取单个菌落，并移植于斜面上培养，待形成子实器官后检查是否只有一种菌而且这种菌是否符合酿酒酵母的特征。
(6)最后把选出的菌种接种到天然培养基上(葡萄糖30g、麸皮10g、玉米粉50g、蛋白胨10g、酵母膏1.0g、加蒸馏水至1000，不调ph)。放到28±2℃恒温箱中早晚摇动培养5～7天后，在无菌超作台上用无菌滤纸过滤，无菌收获滤纸上的菌丝和酿酒酵母的孢子，放到28±2℃恒温箱中干燥即可用于接种发酵试验。
实施例2PSac0501菌种的生产应用将毛茶按传统的方法进行湿热，随后在毛茶中接种重量比为0.1-0.8％的PSac0501菌种让其发酵，当堆温升高到25℃左右时，PSac0501菌种开始进行代谢，并且随着堆温进一步的升高，分泌出大量的酶类。这些酶对茶叶中的内含成分进行氧化、水解。其中茶多酚的降解速度加快，儿茶素、寡糖、水浸出物的变化显著，氨基酸变化极显著，多酚类物质的氧化、缩合、转化、儿茶素部分转化为TF，TF又可进一步转化为TR、TB，而这些变化对普洱茶的品质形成都发挥了重要的作用。经过接种生产的普洱茶具有香气独特，滋味醇和回甘，汤色红浓明亮，叶底棕褐油润的品质特征。
经接种PSac0501菌种后生产的普洱茶，其品质有明显的提高，普洱茶中的茶多糖含量为2-4％、茶褐素含量为10-12％。
权利要求
1.一种酿酒酵母真菌，由生产菌株纯化培养及天然培养基培养后得到，其特征在于生产菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501，保藏日期2005年5月16日，保藏号CGMCC No.1372。
2.权利1所说的真菌，其特征在于该真菌有提高普洱茶品质的作用，可应用于普洱茶的生产工艺中。
全文摘要
本发明涉及一种酿酒酵母真菌及其在普洱茶生产中的应用，属生物技术领域。本发明的酿酒酵母真菌，由酿酒酵母纯化培养和天然培养基培养工序后得到，其生产菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501，保藏日期2005年5月16日，保藏号CGMCC No.1372。本发明的真菌有提高普洱茶品质的作用，可应用于普洱茶的生产工艺中。本发明的优点在于将PSac0501菌株按一定的比例用于普洱茶的大生产过程中，其普洱茶中的茶多糖含量为2－4％、茶褐素含量为10－12％，普洱茶的品质有明显的提高，并缩短了加工时间，对普洱茶品质的稳定和提高发挥重要作用。
文档编号A23F3/06GK1752205SQ200510010940
公开日2006年3月29日 申请日期2005年7月28日 优先权日2005年7月28日
发明者周红杰, 龚加顺, 秘鸣, 赵龙飞 申请人:秘鸣