专利名称：：水解ii型胶原蛋白的制备工艺的制作方法
技术领域：
：本发明属于胶原蛋白的制备工艺，具体的涉及低灰质的水解II型胶原蛋白的制备工艺。
背景技术：
：关节软骨主要是由复合型粘多糖(GAG)、II型胶原蛋白(CollagenII)和水构成。其机理是在软骨细胞的作用下，由复合型粘多糖(GAG)和II型胶原蛋白(CollagenII)形成网架结构的大分子长链带负电荷的蛋白多糖聚合体(PG)，吸引II型胶原蛋白以三维螺旋结构的形式，缠绕于蛋白多糖聚合体(PG)而逐渐成为软骨组织。关节软骨能吸收滑液并发生膨胀，由于关节活动的挤压作用，关节软骨才能得到不断地更新，从而使关节软骨具有很好的弹性和生命力。关节腔内滑膜组织的主要功能是分泌滑液。而滑液是关节软骨生存的物质基础，是由复合型粘多糖(GAG)和II型胶原蛋白(CollagenII)在滑膜细胞的作用下形成。关节腔是含复合型粘多糖(GAG)和II型胶原蛋白(CollagenII)最丰富的地方，可以说是复合型粘多糖(GAG)和II型胶原蛋白(CollagenII)的"储存库"。由于机体各器官的紧密联系，构成一个大的循环系统，如果其它组织缺乏复合型粘多糖(GAG)和II型胶原蛋白(CollagenII)，机体的平衡作用将会使关节腔内的复合型粘多糖(GAG)和II型胶原蛋白(CollagenII)的浓度降低，从而导致关节软骨退化，继发各种关节疾病。类风湿关节炎(RA)是一种常见的以关节组织慢性炎症性病变为主要表现的自身免疫性疾病。在多数人群中，类风关的患病率为0.31.5%。骨关节炎是因为骨的有机质缺乏而导致的主要病症之一，亦称退行性关节炎。形成原因主要是人体随着年龄增长，机体器官功能退化，生成复合型粘多糖(GAG)和II型胶原蛋白(CollagenII)的能力不足，造成关节组织有机质缺乏，导致关节软骨硬化而失去弹性，硬化的软骨因相互摩擦而损伤，损伤脱落的碎片落入关节腔内引发炎症，从而引起关节疼痛和运动障碍。近年来，国外对口服可溶性II型胶原蛋白治疗实验性动物关节炎模型和人的类风湿关节炎的研究非常活跃，提出此疗法具有方便、无毒及抗原特异性等优点，可以与其他产品同时使用。口服鸡源和牛源II型胶原蛋白能明显减轻患鼠关节肿胀度，降低类风湿性关节炎、佐剂性关节炎的发病率。它的市场应用面将是所有类风湿病人。因此该品的市场潜力非常大。因此，如果对产品进行良好的市场开发，将会产生巨大的经济效益。目前市场上的II胶原蛋白主要是由软骨经蒸煮后直接研磨而成，产品分子量大，软骨中的营养成分未完全释放出来，产品不水溶，且颜色较深，人体不容易吸收。与这些产品根本上不同的是水解II型胶原蛋白采用动物的新鲜软骨水解后形成的，原材料中II型胶原蛋白、粘多糖、透明质酸等各种有效成分的比例保持纯天然不变，而分子量变小，使架构内的营养成分完全游离出来，易于人体消化吸收，有效提高了原料的利用率。同时，由于原材料采用健康动物的新鲜软骨，是天然食品营养补充剂，对产品的安全性也给与了保障。试验数据表明，通过口服即可被吸收的水解II型胶原蛋白，对肌肤、对各类关节疾患有明显的功效，缓解因年龄增长引起的胶原蛋白流失而产生的皮肤和关节问题，有效帮助皮肤3保养，提升骨关节健康改善由于关节炎引起的骨关节疼痛和肿胀。
发明内容本发明提供了一种低灰质的水解II型胶原蛋白的制备工艺，该制备工艺采用复合酶水解技术将不溶性的胶原蛋白变为水溶性的胶原蛋白，使产品的分子量变小，有效提高了产品的吸收率。其制备过程中不添加任何增加溶液灰分的无机酸、碱类物质，该制备工艺方法步骤简单、操作和控制容易、成本低廉。本发明所采用的技术方案如下—种水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述制备工艺包括如下步骤采用洁净的畜禽软骨为原料，加入到水中进行蒸煮；将蒸煮后的畜禽软骨溶液中加入生物复合酶进行水解；过滤水解后的畜禽软骨溶液，得到水解II型胶原蛋白澄清溶液。具体的讲，所述畜禽软骨包括健康畜禽鸡、牛、猪、鸭、羊的软骨。所述生物复合酶为由木瓜酶、中性酶、菠萝酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、风味酶中的两种或两种以上组成的复合酶。所述复合酶中每种酶的加入量为软骨总量的0.4%1.0%，所述水为纯化水或者去离子水。—种水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述制备工艺具体步骤为采用洁净的畜禽软骨为原料，将畜禽软骨进行粉碎，然后加入到水中于10012(TC进行蒸煮至完全软化；将蒸煮后的畜禽软骨溶液降温至生物酶水解温度，并加入生物复合酶进行水解；对水解后的溶液进行灭酶处理；过滤该溶液至澄清，并进行浓縮和喷雾干燥，得到水解II型胶原蛋白粉。具体的讲，所述生物复合酶为由木瓜酶、中性酶、菠萝酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、风味酶中的两种或两种以上组成的复合酶。所述水解包括将蒸煮后的畜禽软骨溶液降温至507(TC，采用生物复合酶水解25小时，所述复合酶中的每种酶加入量为畜禽软骨重量的0.41%，所述水为纯化水或者去离子水。所述灭酶处理包括加入活性碳，升温至90IO(TC，保持2030分钟进行灭酶。所述制备工艺具体包括采用板框过滤机过滤或离心机离心过滤灭酶后的溶液至澄清；然后用浓縮器浓縮至浓度为原液的23倍；最后用喷雾干燥机喷出水解II胶原蛋白多肽粉。所述该制备工业得到的水解II型胶原蛋白粉中，II胶原蛋白含量为6070%，粘多糖含量为20%30%，透明质酸含量为812%，脂肪《2%;灰分《10%，pH5.06.5。该水解II型胶原蛋白的制备工艺以健康、新鲜的畜禽动物软骨为原料，通过蒸煮后进行生物复合酶水解，将胶原蛋白水解成小分子多肽，并能释放出软骨中的硫酸软骨素、透明质酸等物质；整个制备工艺中无须加入任何增加溶液灰分的无机酸、碱类物质，最后得到的水解II型胶原蛋白纯度高、其成分更易为人体所吸收。本发明的有益效果在于，该水解II型胶原蛋白的制备工艺采用复合酶水解技术将不溶性的胶原蛋白变为水溶性的胶原蛋白，使产品的分子量变小，有效提高了产品的吸收率。其制备过程中不添加任何增加溶液灰分的无机酸、碱类物质，该制备工艺方法步骤简单、操作和控制容易、成本低廉。下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步的阐述。图1是本发明具体实施方式的步骤方框图；图2是根据本发明实施例1得到的水解II型胶原蛋白的GPC凝胶色谱图。实施例1如图1所示，首先以健康的鸡胸软骨为原料制备水解II型胶原蛋白为例，依次进行如下工艺步骤操作步骤1软骨清洗选用健康的鸡胸软骨，用温水清洗，去除表面杂质；步骤2:粉碎将清洗后的软骨粉碎成大米粒大小的块体；具体实施例方式步骤3:蒸煮将粉碎后的软骨500g投入500g纯化水的反应釜中，于10012(TC温度下蒸煮20分钟，至鸡胸软骨一碰即烂；步骤4:复合生物酶水解将蒸煮后的软骨溶液降至6(TC，加入木瓜酶3g，风味酶2g，同时打开搅拌浆进行慢速搅拌，保持6(TC恒温水解4小时，水解后溶液里面的软骨小块完全变成溶液，并释放出软骨中的多糖等物质；步骤5:加入5g活性炭，升温至90IO(TC并保持20分钟，进行灭酶处理；步骤6:过滤用板框过滤机直接过滤或用高速离心机离心至溶液澄清；步骤7:浓縮用双效浓縮器浓縮至原液浓度的2倍；步骤8:喷雾干燥用喷雾干燥机喷出水解II型胶原蛋白粉末。将上述制备工艺得到的水解II型胶原蛋白粉末进行检测，其中II胶原蛋白含量>60%，粘多糖含量为>20%，透明质酸含量>8%，pH为5.06.5，其各组分更易为人体吸收。其所含有的氨基酸及其它组分测定结果如下表1。表1水解II型胶原蛋白的氨基酸及其它组分测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>凝胶色谱图如图2所示。实施例2以健康的牛、羊、鸭的软骨为原料按如下步骤制备水解II型胶原蛋白步骤1软骨清洗选用健康和新鲜的牛、羊和鸭的软骨，用温水清洗，去除表面杂质；步骤2:粉碎将清洗后的软骨粉碎成大米粒大小的块体；步骤3:蒸煮将粉碎后的软骨1000g投入1200g纯化水的反应釜中，于100ll(TC温度下蒸煮30分钟，至软骨蒸煮软化未变色为止；步骤4:复合生物酶水解将蒸煮后的软骨溶液降至50°C，加入菠萝酶、胰蛋白酶各10g、胃蛋白酶4g，同时打开搅拌浆进行搅拌，保持50°C恒温水解3小时，水解后溶液里面的软骨小块完全变成溶液，并释放出软骨中的多糖等物质；步骤5:加入10g活性炭，升温至9(TC并保持30分钟，进行灭酶处理；步骤6:过滤用高速离心机离心至溶液澄清；步骤7:浓縮用双效浓縮器浓縮至原液浓度的3倍；步骤8:喷雾干燥用喷雾干燥机喷出水解II型胶原蛋白粉末。将上述制备工艺得到的水解II型胶原蛋白粉末进行检测，其中II胶原蛋白含量>60%，粘多糖含量为>20%，透明质酸含量>8%，pH为5.06.5，其各组分更易为人体吸收。实施例3以健康的猪软骨为原料按如下步骤制备水解II型胶原蛋白步骤1软骨清洗选用健康和新鲜的猪软骨，用温水清洗，去除表面杂质；步骤2:粉碎将清洗后的软骨粉碎成大米粒大小的块体；步骤3:蒸煮将粉碎后的软骨800g投入1200g纯化水的反应釜中，于10012(TC温度下蒸煮30分钟，至软骨蒸煮软化未变色为止；步骤4:复合生物酶水解将蒸煮后的软骨溶液降至65t:，加入木瓜酶4个、风味酶6个，同时打开搅拌浆进行搅拌，保持65t:恒温水解3小时，水解后溶液里面的软骨小块完全变成溶液，并释放出软骨中的多糖等物质；步骤5:加入10g活性炭，升温至9(TC并保持30分钟，进行灭酶处理；步骤6:过滤用高速离心机离心至溶液澄清；步骤7:浓縮用双效浓縮器浓縮至原液浓度的2倍；步骤8:喷雾干燥用喷雾干燥机喷出水解II型胶原蛋白粉末。将上述制备工艺得到的水解II型胶原蛋白粉末进行检测，其中II胶原蛋白含量>60%，粘多糖含量为>20%，透明质酸含量>8%，pH为5.06.5，其各组分更易为人体吸收。权利要求一种水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述制备工艺包括如下步骤采用洁净的畜禽软骨为原料，加入到水中进行蒸煮；将蒸煮后的畜禽软骨溶液中加入生物复合酶进行水解；过滤水解后的畜禽软骨溶液，得到水解II型胶原蛋白澄清溶液。2.根据权利要求1所述的水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述畜禽软骨包括健康畜禽鸡、牛、猪、鸭、羊的软骨。3.根据权利要求1所述的水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述生物复合酶为由木瓜酶、中性酶、菠萝酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、风味酶中的两种或两种以上组成的复合酶。4.根据权利要求3所述的水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述复合酶中每种酶的加入量为软骨总量的0.4%1.0%，所述水为纯化水或者去离子水。5.—种水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述制备工艺具体步骤为采用洁净的畜禽软骨为原料，将畜禽软骨进行粉碎，然后加入到水中于10012(TC进行蒸煮至完全软化；将蒸煮后的畜禽软骨溶液降温至生物酶水解温度，并加入生物复合酶进行水解；对水解后的溶液进行灭酶处理；过滤该溶液至澄清，并进行浓縮和喷雾干燥，得到水解II型胶原蛋白粉。6.根据权利要求5所述的水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述生物复合酶为由木瓜酶、中性酶、菠萝酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、风味酶中的两种或两种以上组成的复合酶。7.根据权利要求6所述的水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述水解包括将蒸煮后的畜禽软骨溶液降温至507(TC，采用生物复合酶水解25小时，所述复合酶中的每种酶加入量为畜禽软骨重量的0.41%，所述水为纯化水或者去离子水。8.根据权利要求5所述的水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述灭酶处理包括加入活性碳，升温至90IO(TC，保持2030分钟进行灭酶。9.根据权利要求5所述的水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述制备工艺具体包括采用板框过滤机过滤或离心机离心过滤灭酶后的溶液至澄清；然后用浓縮器浓縮至浓度为原液的23倍；最后用喷雾干燥机喷出水解II胶原蛋白多肽粉。10.根据权利要求5所述的水解II型胶原蛋白的制备工艺，其特征在于所述该制备工业得到的水解II型胶原蛋白粉中，II胶原蛋白含量为6070%，粘多糖含量为20%30%，透明质酸含量为812%，脂肪《2%;灰分《10%，pH5.06.5。全文摘要一种水解II型胶原蛋白的制备工艺，包括如下步骤采用洁净的畜禽软骨为原料，加入到水中进行蒸煮；将蒸煮后的畜禽软骨溶液中加入生物复合酶进行水解；过滤水解后的畜禽软骨溶液，得到水解II型胶原蛋白澄清溶液。该水解II型胶原蛋白的制备工艺采用复合酶水解技术将不溶性的胶原蛋白变为水溶性的胶原蛋白，使产品的分子量变小，有效提高了产品的吸收率。其制备过程中不添加任何增加溶液灰分的无机酸、碱类物质，该制备工艺方法步骤简单、操作和控制容易、成本低廉。文档编号C12P21/06GK101781672SQ20091025011公开日2010年7月21日申请日期2010年4月13日优先权日2010年4月13日发明者左红梅,朱大开,董彦博,蒋国昌申请人:北京华达杰瑞生物技术有限公司