专利名称：预防与猪环状病毒-2相关的心肌炎、流产和宫内感染的制作方法
技术领域：
本发明涉及预防和/或治疗PCV-2引起的心肌炎、和/或流产和/或宫内感染、以及病理学后遗症(包括但不限于断奶后多系统萎缩综合征)的方法和/或组合物；并且尤其涉及制备这些组合物的方法和制备这些组合物或实施这些方法的试剂盒。
背景技术：
猪环状病毒-2(PCV1)是最近确认的一贯与世界几个地方的猪群断奶后多系统萎缩综合征(post-weaning multisystemic wastingsyndrome, PMWS)有关的病因(Allan 等，1998 ；Ellis等，1998)。从几个国家的受染猪身上获得的PCV-2分离株实际上在遗传上是一致的，但与20世纪70年代最初作为猪肾细胞系(PK/15)的非致细胞病变污染物而鉴定的PCV(CCL33，PCV-1)明显不同(Meehan等，1998 ；Tischer等，1974)。患有天然获得的或实验诱导的PCV-2感染的猪表现出进行性的体重降低、呼吸急促、呼吸困难和黄疸(Allan 等，1998 ；Allan 等，1999 ；Elllis 等，1998 ；Ellis 等，1999)。直接与 PCV-2 抗原有关的宏观病理学研究结果包括淋巴结病、间质性肺炎、肝炎和肾炎(Allan等，1998 ；Allan等，1999 ； Elllis 等，1998 ;Ellis 等，1999)。也参见 TO-A-9918214、TO-A-00 01409、TO-A-99 29717 和TO-A-99 298710在此之前，并没有将PCV-2直接地与流产或胎猪的损伤联系起来。因此，迄今还没有人想解决有关PCV-2引起的心肌炎、和/或流产和/或宫内感染的问题。发明目的和概述令人惊奇的是我们发现PCV-2是导致心肌炎、流产和宫内感染、以及断奶后多系统萎缩综合征的原因。关于定义，正如本文或本文引用或参考的文献中所公开的，PCV-2免疫原旨在包括减毒活PCV-2或灭活PCV-2、或通过体外表达或通过提取获得的PCV-2亚单位、或能够通过化学合成或体外重组表达获得的含有至少一个目的表位的片段、以及包含并体内表达 PCV-2基因组的序列或片段或表位的重组载体。类似的定义也适用于本文公开的其它猪病原体的免疫原。关于定义，免疫原性组合物引起-局部的或系统的-免疫原性应答(immunogenic response) 0疫苗组合物引起局部的或系统的保护性应答。术语“免疫原性组合物”包括“疫苗组合物”(因为前一术语可以是保护性组合物)。因此，本发明的一个目的可以是提供预防和/或治疗PCV-2引起的心肌炎、和/或流产和/或宫内感染、以及断奶后多系统萎缩综合征和/或病理学后遗症(包括但不限于断奶后多系统萎缩综合征)的方法和/或组合物；并提供配制这些组合物(该组合物还可以包括猪细小病毒(PPV)免疫原)的方法和PCV-2免疫原在这些组合物的配制中的用途。另一目的是PCV-2免疫原在制备用于预防和/或治疗PCV-2引起的心肌炎、和/ 或流产和/或宫内感染的组合物中的用途。本发明的另一目的是分离和表征标识为1103(1103/1P.2)和1121(1121/1P. 1) 的新PCV-2毒株，以及它们在制备免疫原、以及用于诊断的抗原和抗体中的用途，该用途与 PCV-2引起的心肌炎、和/或流产和/或宫内感染、以及断奶后多系统萎缩综合征和/或相关的病理学后遗症有关。本发明还提供了在繁殖前；和/或配种前、和/或妊娠(或怀孕)期间；和/或围生期或产仔前；和/或在一生中反复地，采用含有(至少一种)PCV-2免疫原的组合物(该组合物还可以包括猪细小病毒的免疫原)接种雌猪(例如母猪(sow)、小母猪(gilt))的方法，以便预防与PCV-2相关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染、以及与PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症；或，以便引起抵抗PCV-2的免疫原性或保护性应答并籍此预防与猪环状病毒-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和/或心肌炎和/或流产和/或宫内感染和/或其它与PCV-2相关的病理学后遗症。有利地，在配种前至少接种一次。而且有利地，随后在妊娠期间，例如大约妊娠中期(妊娠约6-8周时)和/或妊娠末期(妊娠约11-13周时)进行一次接种。因此，有利的方案是在配种前接种一次然后在妊娠期间作一次加强接种。其后，可以在每次配种前和 /或妊娠期间约妊娠中期(妊娠约6-8周时)和/或妊娠末期(妊娠约11-13周时)，再次接种。优选地，可以仅在妊娠期间再次接种。在另一优选实施方案中，小猪，例如来自接种过(例如按此处所讨论的方式接种) 的雌猪的小猪，在出生后的第头几周中接受接种，例如在出生后第一和/或二和/或三和/ 或四和/或五周时接种。更优选地，小猪在出生后的第一周内或出生后的第三周内(例如在断奶期)接受第一次接种。甚至更有利的是，然后(第一次接种后)二( 至四(4)周后给予这些小猪加强接种。因此，仔猪和雌猪(例如母猪、小母猪)均可以施用本发明组合物和/或可以是本发明方法的实施对象。因此，本发明包括含有PCV-2毒株1103和/或1121来源的免疫原、用于预防或治疗与猪环状病毒-2相关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染、以及PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症的免疫原性或疫苗组合物。本发明还包括PCV-2免疫原在配制用于预防或治疗猪环状病毒-2相关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染、以及PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症的免疫原性或疫苗组合物中的用途。再有，本发明还包括用于预防和/或治疗PCV-2引起的心肌炎和/或流产和/或宫内感染和/或断奶后多系统萎缩综合征、含有药学上或兽医学上可接受载体和/或赋形药(vehicle)和/或赋形剂(excipient)和/或佐剂、及PCV-2免疫原的免疫原性或疫苗组合物。此外，组合物还可以包括来自至少一种其它猪病原体的至少一种免疫原，例如猪繁殖和呼吸综合征(Porcine Reproductive andRespiratory Syndrome, PRRS)、猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumoniae)、大叶性月市炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumon iae)、大肠杆菌(E. coli)、支气管炎博德特氏菌(Bordetella bronchis印tica)、多杀巴斯德氏菌(Pasteurellamultocida)、猪红斑丹毒丝菌(Erysipelothrix rhusiopathiae) >|[χ 狂犬病病毒(Pseudorabies)、猪霍乱病毒(Hog cholera)、猪流感病毒(Swine Influenza)、 和猪细小病毒(Porcine Parvovirus) (PPV)。因此，基于载体的组合物可以包括来自至少一种其它猪病原体的至少一种免疫原，例如表达来自该病原体的序列的载体，其中载体也可以是表达PCV-2免疫原的载体。表达PCV-2序列的载体可以包含PCV-2的序列或片段；并且本发明包括这些核酸分子、含有它们的载体、含有这些核酸分子或载体的组合物、来自这些核酸分子的表达产物、含有这些表达产物的组合物、针对这些核酸分子的探针或引物、和制备和使用前述任一个或所有的方法。载体可以包含DNA载体质粒、细菌如大肠杆菌、病毒如杆状病毒、疱疹病毒(包括猪疱疹病毒，包含奥耶斯基病病毒(Aujeszky ’ s diseasevirus))、腺病毒(包括猪腺病毒)、痘病毒(包括痘苗病毒、禽痘病毒、金丝雀痘病毒、浣熊痘病毒和猪痘病毒)等。基于载体的组合物可以包含如下载体，所述载体含有并表达选自PCV-2的0RF1-13的0RF、例如选自ORF 4、7、10和13的0RF、优选ORF 4和/或13，有利地所述PCV-2是本文确定的PCV-2 毒株之任一种、尤其是毒株1103和/或1121。而且，组合物中的免疫原(PCV-2和/或来自其它猪病原体的免疫原)可以通过重组方式产生。质粒这个词旨在包括以含有待表达的PCV序列的多核苷酸序列形式存在的任何 DNA转录单位。有利地，质粒包括对于其表达(例如体内表达)必需的元件。超螺旋的或其它形式的环状质粒形式是有利的；线性形式也包括在本发明的范围之内。质粒免疫原性或疫苗组合物可以通过基因枪、借助无针头注射器(needleless injector)通过皮内途径、通过皮下或肌内途径、或通过粘膜途径、或通过允许实现体内表达以及有利地实现免疫原性或保护性应答的任何其它手段，进行给药。应注意，还可以任选地从感染或转染的细胞中分离和/或纯化本发明载体或重组体产生的表达产物；以便，例如，制备给猪施用的组合物；然而，在某些情况下，不从细胞中分离和/或纯化表达产物可能是有利的；例如当细胞或其部分可以增强该多肽的免疫原性作用时。而且，蛋白质分离和/或纯化的技术是已知的，而且无需过多实验即能够在本发明的实施中用于纯化和/或分离重组体或载体的表达产物、和/或PCV-2的亚单位和/或其它猪病原体；一般地，这些技术可以包括利用目的蛋白质在变化的盐浓度下的溶解度进行的沉淀、采用有机溶剂、聚合物和其它物质进行的沉淀、亲和沉淀和选择性变性；柱层析， 包括高效液相层析(HPLC)、离子交换层析、亲和层析、免疫亲和层析或染料-配体层析；免疫沉淀、凝胶过滤、电泳方法、超过滤和等电聚焦，尤其是它们的组合。本发明还设想了预防和/治疗猪环状病毒-2 (PCV-2)引起的心肌炎和/或流产和 /或宫内感染和/或与PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和/或其它病理学后遗症的方法，该方法包括通过给猪施用前述或本文公开的组合物在猪身上诱导对抗PCV-2的免疫原性或保护性应答。因此，本发明包括预防和/或治疗猪环状病毒-2(PCV_2)引起的心肌炎和/或流产和/或宫内感染和/或与PCV-2有关的断奶后多系统萎缩综合征和/或其它病理学后遗症的方法，该方法包括通过给猪施用如下组合物在猪身上诱导对抗PCV-2的免疫原性或保护性应答，所述组合物包含药学上或兽医学上可接受载体或赋形剂或赋形药(优选地还包含佐剂)和含有PCV-2免疫原的活性剂。该方法可以用于预防PCV-2引起的心肌炎和/或流产和/或宫内感染，包括施用包含药学上或兽医学上可接受载体和PCV-2免疫原的组合物。PCV-2免疫原可以是活的减毒全PCV-2或灭活PCV-2。该方法可以涉及是亚单位免疫原性或疫苗组合物的组合物。该方法可以涉及此外还包括来自至少一种其它猪病原体的至少一种免疫原(包括表达该免疫原或表位的载体)的组合物；例如，该至少一种其它猪病原体可以选自PRRS、猪肺炎支原体、大叶性肺炎放线杆菌、大肠杆菌、假狂犬病病毒、猪霍乱病毒、支气管炎博德特氏菌、多杀巴斯德氏菌、猪红斑丹毒丝菌、猪流感病毒、和PPV、以及它们的组合。该方法可以涉及载体，该载体是DNA载体质粒、细菌如大肠杆菌、病毒如杆状病毒、 疱疹病毒(包括奥耶斯基病病毒)、腺病毒(包括猪腺病毒)、痘病毒(包括痘苗病毒、禽痘病毒、金丝雀痘病毒和猪痘病毒)等。该方法可以涉及基于载体的组合物，该组合物此外还包括来自至少一种其它猪病原体的至少一个序列、片段或表位，或表达该序列、片段或表位的载体，其中该载体也可以是表达PCV-2序列、片段或表位的载体。该方法可以涉及如下载体，该载体含有并表达选自ORF 1-13的0RF，例如选自ORF 4,7,10和13的ORF ；优选ORF 4和/或13。该方法还可以涉及基于免疫原的组合物，其中一或多个免疫原是通过重组方式产生的。在此方法中，优选地按上述方式接种雌猪和/或小猪。在另一实施方案中，本发明涉及制备上述或本文所公开任一种组合物的方法，包括将药学上或兽医学上可接受载体和可能的佐剂，与PCV-2免疫原混合。该方法还可以包括采用含有编码PCV-2免疫原的DNA并表达该免疫原的重组载体转染或感染细胞或宿主； 以及任选地包括从该细胞纯化和/或分离该免疫原。类似地，该方法可以包括从PCV-2分离和/或纯化PCV-2免疫原、或从样品中分离PCV-2。本发明还提供用于制备上述或本文所公开任一种组合物、或实施上述或本文所公开任一种方法的试剂盒，其包含置于第一容器中的药学上或兽医学上可接受载体或赋形药或赋形剂和置于第二容器中的含有PCV-2免疫原的活性剂，其中任选地可以将该第一和第二容器包装在一起，并且任选地该试剂盒可以包括有关该组合物成分的混合和/或该组合物的施用方式的说明书。在再一实施方案中，本发明涉及给雄性和/或雌性猪施用上述或本文所公开任一种组合物；以便预防PCV-2的传播、和预防或治疗或控制与猪环状病毒-2相关的心肌炎和 /或流产和/或宫内感染、以及与PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症。施用优选按上述方式进行。术语“包含”在本公开中可以指“包括”或可以具有美国专利法中术语“包含”所通常被赋予的意义。通过以下公开，本发明的其它方面得到了描述或是明显的(并且属于本发明范围内)。发明详述猪环状病毒-2(PCV_2)是与猪群中断奶后多系统萎缩综合征(PMWS)有关的病因。 正如实施例1和2中所显示的，PCV-2相关疾病的可能范围由于垂直传播得以扩大并与繁殖失败相关。具体地，实施例1显示，从来自经历后期流产和死产的农场的一窝流产小猪中分离出PCV-2。在一头出现PCV-2抗原的广泛免疫组织化学染色的小猪中，有严重的弥散性心肌炎。并且在多头胎猪的肝、肺和肾中也有不同数量的PCV-2抗原。与胎猪损伤和猪的流产有关的其它因素，包括猪细小病毒、猪繁殖呼吸综合征病毒、脑心肌炎病毒和肠道病毒， 的存在没能得到证实。更具体地，实施例2显示，四年内从30个高度健康猪群获得的、并在流产或繁殖失败的常规病案中测试过的组织，在两个涉及几头出现弥散性心肌炎、心脏肥大和慢性被动充血迹象的死产小猪和不能存活新生猪的提交物中为PCV-2阳性。这两个阳性提交物来自同一农场，但发生在两个不同的时间。通过免疫组织化学和病毒的分离证实了染病小猪的心脏和其它组织中存在PCV-2。1999年之前在出现地方性感染的区域的繁殖失败病案中没有检测到猪环状病毒，这支持了繁殖性疾病是PCV-2感染的新临床表现，而且还提示性交和垂直模式的传递负责病毒在猪群中的传播。因此，给猪，例如雌猪(如母猪或小母猪)接种包括至少一种PCV-2免疫原(例如来自至少一个选自病毒株 Impl008、ImplOlO、Imp999、ImplOll-48285, ImplOll-48121、 1003和1121的病毒株)的组合物(尤其是，该组合物还可以包括来自至少一种其它猪病原体(例如至少一种猪细小病毒)的至少一种免疫原，其中当采用载体时，载体可以共同表达 PCV-2免疫原和至少一种其它猪病毒体的至少一种免疫原(例如PPV的免疫原)，尤其是当按上述的免疫进度进行接种时，可以预防与PCV-2相关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染、以及与PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症。因此，本发明涉及采用PCV-2免疫原预防与PCV-2相关的心肌炎和/或流产和/ 或宫内感染、以及与PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症的方法和组合物。尤其是，对于采用PCV-2免疫原预防与PCV-2相关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染、以及与PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症的方法和组合物，来自1103株和/或1121株的免疫原是有用的。本发明还涉及任何已知PCV-2株或来自它们的免疫原在配制如下免疫原性或疫苗组合物中的用途，所述组合物被用于预防或治疗与PCV-2有关的心肌炎和/或流产和/ 或宫内感染、以及与PCV-2有关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症(这些病毒株包括病毒株 Impl008、ImplOlO、Imp999、ImplOll-48285, ImplOll-48121、1103 和 1121)，尤其是当该组合物旨在被施用给小猪例如来自经过接种的雌猪的小猪，更具体地施用给雌猪，尤其是怀孕雌猪或将要接受配种的雌猪时；更特别地是根据以上定义的接种方案进行施用时。更具体地，该用途是配制如下组合物，该组合物旨在预防或治疗与PCV-2有关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染，尤其是当该组合物旨在施用给小猪例如来自经过接种的雌猪的小猪，更特别地施用给雌猪，尤其是怀孕雌猪或将要接受配种的雌猪时；更特别地是根据以上定义的接种方案进行施用时。所述来自至少一种其它猪病原体的至少一种免疫原可以是在已知猪疫苗或免疫原性组合物中使用的、或在WO 98/03658中描述的那些。在本发明中使用的组合物可以根据兽医或制药领域的技术人员熟知的标准技术来制备。这些组合物可由兽医领域的技术人员在考虑了如猪的年龄、性别、体重、身体状况和具体治疗方案以及给药途径这些因素之后，按其熟知的剂量和技术给药。这些组合物可单独给药，或可以与本发明的其它组合物(例如含有PCV-2免疫原的其它组合物)或与其它预防或治疗性组合物(例如其它猪免疫原性或疫苗组合物)共同给药或顺序给药。由此， 本发明还提供多价或“鸡尾酒式”或联合的组合物和使用它们的方法。在这一方面，请参考涉及狂犬病毒组合物和联合组合物及其使用的美国专利5，843，456。本发明的组合物可以用于肠胃外或粘膜给药，优选通过皮内或肌内途径给药。具体地，对于皮内途径，可以采用无针头注射器进行注射。当采用粘膜给药时，可以使用口、鼻或眼途径。在这些组合物中，可以将免疫原与适合的载体、稀释剂、或赋形剂如无菌水、生理盐水、葡萄糖等，和/或优选地与佐剂混合。这些组合物也可被冻干或冷冻。这些组合物根据给药途径和预期的制品可以含有辅助物质如PH缓冲剂、佐剂、防腐剂、用于粘膜途径的聚合物赋形剂等。可参考标准文献如“REMINGTON，SPHARMACEUTICAL SCICNCE”第 17 版，1985，来制备适当的制品，而无需过多实验。合适的剂量也可以以本文和本文引用的文献作为基础。佐剂是增强针对免疫原的免疫应答的物质。佐剂可以包括氢氧化铝和磷酸铝、皂角苷如QuilA、油包水型乳剂、水包油型乳剂、水包油包水型(water-in-oil-in-water)乳剂。乳剂可以基于尤其是轻液体石蜡油(欧洲药典类型)；类异戊二烯油如角鲨烷或角鲨烯；链烯，尤其是异丁烯或癸烯，低聚化产生的油；含有直链烷基的酸或醇的酯，更具体地是植物油、油酸乙酯、丙二醇二(辛酸酯/癸酸酯)、甘油基三(辛酸酯/癸酸酯)或丙二醇二油酸脂；分枝脂肪酸或醇的酯，尤其是异硬脂酸酯。油与乳化剂联合使用以形成乳剂。 优选地，乳化剂是非离子表面活性剂，尤其是山梨聚糖、二缩甘露醇(例如脱水甘露醇油酸酯)、甘油、聚甘油、丙二醇和油酸、异硬脂酸、蓖麻油酸或羟基硬脂酸的酯(任选地该酯可以乙氧基化)，和聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物，尤其是Pluronic 产品、特别是L121。 见Hunter等，有关佐剂的理论和实际应用(The Theory andPractical Application of Adjuvants) (Stewart-Tull, D. E. S.编)，John Wiley and Sons，NY，第 51-94 页(1995)和 Todd 等，疫苗(Vaccine) 15 :564-570 (1997)。例如，可以使用“疫苗设计，亚单位和佐剂方法”(Vaccine Design, The Subunit and Adjuvant Approach) ,M. Powell 禾口 Μ· Newman 编，Plenum Press, 1995,第 147 页上描述的SPT乳剂，和同一本书第183页上描述的MF59乳剂。例如，含有佐剂的疫苗可以按以下方式制备借助乳化涡轮混合器，将67% ν/ν含有免疫原的水相在2，3%W/v脱水甘露醇油酸酯、2，6%W/vllE0(环氧乙烷)乙氧基化的油酸和28，1% ν/ν轻液体石蜡油(欧洲药典类型)中乳化。制备乳剂的另一种方法是将5% w/v角鲨烷、2. 5% w/v Pluronic L12U0. 2% w/v 20 EO乙氧基化的油酸和脱水山梨糖醇的酯、92. 3% ν/ν含有免疫原的水相混合，然后使之通过一个高压勻浆器来乳化。尤其是，还可以与合成聚合物(例如乳酸和乙醇酸的同聚物和共聚物，它们已经被用于制备包被免疫原的微球，见Eldridge等，Mol. Immunol. 28 :观7_四4(1993)，例如生物可降解微球)、与细胞因子如IL-2和IL-12(见例如美国专利5，334，379)和GMCSF， 有利的是猪的GMCSF(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子；一般参见美国专利4，999，291和 5，461，663，也参见 Clark 等，科学(Science) 1987,230 :1229 ；Grant 等，药物(Drugs), 1992,53 :516)，一起配制。某些佐剂可以和免疫原和/或表位一起在体内表达；例如细胞因子、GMCSF(见例如，有关编码和表达猪GM-CSF的质粒的文献Inumaru和Takamatsu， Immunol. Cell. Biol.，1995，73 :474-76)。佐剂的再一实例是选自丙烯酸或甲基丙烯酸聚合物和顺丁烯二酸酐与链烯基衍生物的共聚物的化合物。有利的佐剂化合物是交联的丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物，尤其与糖或多元醇的多聚链烯基醚交联。这些化合物称为术语carbomer (Phameuropa第8卷第二期，1996年6月)。本领域技术人员也可参考美国专利号四09462，该专利描述了与多羟基化合物交联的这类丙烯酸聚合物，该多羟基化合物含有至少3个羟基，优选不超过8个羟基、其中至少3个羟基的氢原子被具有至少2个碳原子的不饱和脂肪族基团所取代。优选基团是那些含有2-4个碳原子的基团，如乙烯基、烯丙基和其它烯键式不饱和基团。这些不饱和基团本身可以含有其它取代基，如甲基。以名称Carbopol (BF Goodrich，俄亥俄州， 美国)出售的产品特别适合。它们与烯丙基蔗糖或烯丙基季戊四醇交联。其中可以提及的有Carbopol 974P、934P和971P。在顺丁烯二酸酐和链烯基衍生物的共聚物中，优选顺
丁烯二酸酐和乙烯的线性或交联的共聚物EMA (Monsanto)，例如与二乙烯基醚交联的共聚物。可参考文献 J. Fields 等，自然(Nature)，186 =778-780,1960. 6. 4。从其结构来看，丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物和共聚物EMA 优选由下式的基本
单位形成
权利要求
1.PCV-2免疫原在配制疫苗组合物中的用途，该疫苗组合物含有药学可接受载体、赋形剂或赋形药，用于预防或治疗猪的与PCV-2相关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染。
2.根据权利要求1的用途，其特征在于该免疫原是减毒活PCV-2、或灭活PCV-2、或 PCV-2亚单位或其片段、或含有并体内表达PCV-2序列、片段或表位的重组载体。
3.根据权利要求1或2的用途，其特征在于该PCV-2株是Imp999、ImplOlO、 ImplOll-48121 或 ImplOll-48285。
4.根据权利要求1或2的用途，其特征在于该PCV-2株是1103或1121株。
5.根据权利要求1-4之任一项的用途，其特征在于该免疫原与佐剂一起进行配制。
6.保藏在ECACC、编号为V00012710的1103株培养物。
7.保藏在ECACC、编号为V00012709的1121株培养物。
8.含有药学可接受载体、赋形剂或赋形药及PCV-2免疫原的疫苗组合物，其特征在于该PCV-2免疫原是1103株或1121株的免疫原。
9.根据权利要求8的疫苗组合物，其特征在于该PCV-2免疫原是减毒活PCV-2、或灭活 PCV-2、或PCV-2亚单位或其片段、或含有并体内表达PCV-2序列、片段或表位的重组载体。
10.包含SEQ ID NO 6 的 DNA 片段。
11.包含SEQ ID NO 7 的 DNA 片段。
12.PCV-2免疫原在配制疫苗组合物中的用途，所述疫苗组合物含有药学可接受载体、 赋形剂或赋形药，用于预防或治疗猪的与PCV-2相关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染和/或与PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症，其中该疫苗组合物旨在给雌猪施用，并在配种前接种至少一次，优选地随后在妊娠期间、优选在妊娠约6-8周时接种一次，和/或在妊娠末期、优选在妊娠约11-13周时接种一次。
13.为了预防或治疗猪的与PCV-2相关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染和/或与 PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症给猪接种的方法，其中给雌猪施用含有药学可接受载体、赋形剂或赋形药及PCV-2免疫原的疫苗组合物，并在配种前接种至少一次，优选地随后在妊娠期间、优选在妊娠约6-8周时接种一次，和/或在妊娠末期、 优选在妊娠约11-13周时接种一次。
14.PCV-2免疫原在配制疫苗组合物中的用途，所述疫苗组合物含有药学可接受载体、 赋形剂或赋形药，用于预防或治疗猪的与PCV-2相关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染和/或与PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症，其中旨在于小猪出生后第一周内或出生后第三周内给小猪施用该疫苗组合物，优选地随后在2-4周后给予一次加强。
15.为了预防或治疗猪的与PCV-2相关的心肌炎和/或流产和/或宫内感染和/或与PCV-2相关的断奶后多系统萎缩综合征和其它病理学后遗症给猪接种的方法，其中在小猪出生后第一周内或出生后第三周内给小猪施用含有药学可接受载体、赋形剂或赋形药及 PCV-2免疫原的疫苗组合物，优选地随后在2-4周后给予一次加强。
全文摘要
本发明描述了含有来自猪环状病毒(2)的外源DNA的重组痘病毒，例如禽痘病毒。也描述了含有该重组痘病毒的免疫组合物，该免疫组合物被用于在施用了该免疫组合物的宿主动物体内诱导免疫应答。还描述了通过将本发明的免疫组合物给予需要治疗或对猪环状病毒(2)的感染敏感的动物，来治疗或预防猪环状病毒(2)引起的疾病的方法。
文档编号C12N15/09GK102416173SQ20091025232
公开日2012年4月18日 申请日期2000年8月28日 优先权日1999年8月31日
发明者B·米翰, C·E·查雷勒, D·海尼斯, E·克拉克, F·麦克奈利, G·E·查普伊斯, G·M·艾伦, G·S·克拉考卡, J·A·埃里斯, J·哈丁, J-C·F·奥东奈特, L·哈萨德 申请人:梅瑞尔公司, 萨斯喀彻温大学, 贝尔法斯特皇后大学