专利名称：织物和家居护理产品的制作方法
技术领域：
本发明涉及包含冷水蛋白酶的织物和家居护理产品，以及制造和使用此类织物和家居护理产品的方法。
背景技术：
洗涤剂制造商将蛋白酶掺入他们的产品中，以提供对污溃(例如血迹)的良好清洁。然而，考虑到可持续性和消费者降低洗涤温度的趋势，要实现消费者可接受的有益效果被证明越来越困难，依然存在改进这些衣物洗涤剂组合物的清洁和新鲜度特征的需求。发明人已发现，向织物和家居护理产品，例如包含调色剂、清洁聚合物和/或香料胶囊的衣物洗涤剂组合物中，附加地掺入某些冷水蛋白酶，改进了白度、白色感和/或新鮮度。发明概述本发明涉及包含ー种或多种冷水蛋白酶的织物和家居护理产品，以及用于制造和使用此类产品的方法。此类组合物提供改善的清洁和新鮮度。此类冷水蛋白酶可通过对亲本酶的ー个或多个氨基酸的取代、插入和/或删除，而来源于亲本酶，所述亲本酶包括BPN，枯草杆菌蛋白酶和来源于迟缓芽孢杆菌的枯草杆菌蛋白酶。附图简述图I提供了 pHPLT-BPN' _v3的质粒图谱。图2 提供了 pHPLT-BPN' _v3+S78N 的质粒图谱。图3 提供了 pHPLT-BPN' partial opt 的质粒图谱。图4提供了 pHPLT-BPN' _v36的质粒图谱。图5提供了成熟的參考枯草杆菌蛋白酶的比对，所述蛋白酶包括BPN' (SEQ IDNO 2)和GG36(SEQ ID NO :755)。本文所述的每种蛋白酶变体的每ー氨基酸位点，包括每种冷水蛋白酶变体，均基于如图5中所示的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)枯草杆菌蛋白酶BPN' (SEQ ID NO :2)的氨基酸序列中对应的氨基酸位点的编号，如通过将所述蛋白酶变体的氨基酸序列与解淀粉芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶BPN'的氨基酸序列进行比对所确定的而被编号。因此，除非另外指明，取代位点均以与BPN'的关系给出。图6 提供了 pHPLT-GG36 的图谱。图7提供了 pRA68的图谱。图8提供了 pRA96的图谱。图9提供了 pAC-FNAre的图谱。
图10是方法的示意图或靶向ISD库的构建。图11 提供了 pAC-FNAlO 的图谱。图12 提供了 pHPLT-FNA 的图谱。
发明详述如本文所用，“织物和家居产品”是指一般g在以其被销售时的形式被使用或消费，用于在织物和家居护理领域中处理织物、硬质表面和任何其他表面的产品或装置，包括空气处理(包括空气清新剂和香味递送体系)，汽车护理，盘碟洗涤，织物处理(包括柔化和/或新鮮化)，衣物去污，衣物洗涤和漂洗添加剂和/或护理，包括地板和抽水马桶清洁剂在内的硬质表面清洁和/或处理，以及用于消费者或机构用途的其他清洁。如本文所用，术语“清洁和/或处理组合物”是织物和家居护理产品的子集，除非另外指明，其包括织物和家庭护理产品。此类产品包括但不限于用于在织物和家居护理领域中处理织物、硬质表面和任何其他表面的产品，包括包括空气清新剂和香味递送体系在内的空气处理，汽车护理，盘碟洗涤，织物处理(包括柔化和/或新鮮化)，衣物去污，衣物洗涤和漂洗添加剂和/或护理，包括地板 和抽水马桶清洁剂在内的硬质表面清洁和/或处理，以及用于消费者或机构用途的其他清洁颗粒状或粉末状的通用型或“重垢型”洗涤剂，尤其是清洁剂；液体、凝胶或糊状的通用型洗涤剂，尤其是所谓的重垢型液体类型；液体精细织物洗涤剂；手洗盘碟洗涤剂或轻垢洗碗剂，尤其是那些高度起泡型；机洗盘碟洗涤剂，包括用于家庭和机构用途的各种片状、颗粒状、液体和辅助漂洗类型；汽车或地毯香波，包括抽水马桶清洁剂在内的浴室清洁剂；以及清洁助剂，例如漂白添加剂和“去污棒”或预处理型，负载基质的产品如添加的烘干机用香水纸。如本文所用，术语“织物和/或硬质表面清洁和/或处理组合物”是清洁和处理组合物的子集，除非另外指明，其包括颗粒状或粉末状通用型或“重垢型”洗涤剂，尤其是清洁洗涤剂；液体、凝胶或糊剂状的通用型洗涤剂，尤其是所谓的重垢型液体类型；液体精细织物洗涤剂；手洗盘碟洗涤剂或轻垢型盘碟洗涤剂，尤其是高起泡类型的那些；机洗盘碟洗涤剂，包括各种用于家庭和机构用途的片剂、颗粒、液体和辅助漂洗类型；液体清洁和消毒齐U，汽车或地毯香波，包括抽水马桶清洁剂在内的浴室清洁剂；可为液体、固体和/或烘干机用香水纸形式的织物调理产品(包括软化和/或清新化)；以及清洁助剂，如漂白添加剂和“去污棒”或预处理型，负载基质的产品如添加的烘干机用香水纸。可应用的所有此类产品可为标准品、浓缩的或者甚至高度浓缩的形式，甚至到此类产品可在某个方面为非水性的程度。如本文所用，当用于权利要求中吋，冠词如“ー个”和“ー种”被理解为是指ー种或多种受权利要求书保护的或所述的物质。如本文所用，术语“包括”和“包含”是非限制性的。如本文所用，术语“固体”包括颗粒、粉末、棒状和片剂产品形式。如本文所用，术语“流体”包括液体、凝胶、糊剂和气体产品形式。本文所用术语“部位”包括织物、衣服和/或硬质表面。除非另外指明，所有组分或组合物含量均是关于该组分或组合物的活性物质部分，不包括可能存在于这些组分或组合物的市售来源中的杂质，例如残余溶剂或副产物。除非另外指明，所有百分比和比率均按重量计算。除非另外指明，所有百分比和比率均基于总组合物计算。应当理解，在整个说明书中给出的每ー最大数值限度均包括每ー较低数值限度，就像这样的较低数值限度在本文中明确地写出一祥。在本说明书全文中给出的每ー最小数值限度将包括每ー较高数值限度，如同该较高数值限度在本文中被明确表示。在本说明书全文中给出的姆ー数值范围将包括包含于该较宽数值范围内的姆ー较窄数值范围，如同该较窄数值范围在本文中被明确表示。
包含ー种或多种蛋白_的织物和家居产品公开了包含蛋白酶和ー种或多种辅助成分的组合物，并且所述组合物为织物和家居护理产品，所述蛋白酶选自由下列组成的组a)冷水蛋白酶，所述冷水蛋白酶在pH 8和60° F下，在与具有SEQ ID NO :4的酶比较时，对于BMI具有大于I、至少I. I、至少I. 2、至少I. 3、至少I. 4、至少I. 5、至少I. 6、至少I. 7、至少I. 8、至少I. 9、至少2、I至约10、I至约8或甚至I至约5的性能指数，所述性能指数如测试方法2和/或测试方法3所定义；b)冷水蛋白酶，所述冷水蛋白酶在pH 8和60° F下，在与具有SEQ ID NO :6的酶比较时，对于BMI具有至少I、至少I. I、至少I. 2、至少I. 3、至少I. 4、至少I. 5、至少I. 6、至少I. 7、至少I. 8、至少I. 9、至少2、I至约10、I至约8或甚至I至约5的性能指数，所述性能指数如测试方法2和/或测试方法3所定义；c)冷水蛋白酶，所述冷水蛋白酶选自由下列组成的组⑴亲本蛋白酶的变体，所述亲本蛋白酶与SEQ ID NO :4具有至少60 %、或 80 %、或 85 %、或 90 %、或 95 %、或 96 %、或 97 %、或 98 %、或 99 %、或甚至 100 %的同一性，所述变体包含选自下列各组的突变中的一组突变P210S，P210S-N218A,S063T-S078N-S101A-S183T-T244N, N061A-S078N-S224A, S053G-S078N-P129T-Q185T,S063T-S078N-S101A, S078N-PI29T, S063T - S078N-S I 0 I A-S I 83T 和S063T-S078N-S101A-T244I ；(ii)亲本蛋白酶的变体，所述亲本蛋白酶与SEQ ID NO :2具有至少60 %、或80 %、或85 %、或90 %、或95 %、或96 %、或97 %、或98 %、或99 %、或甚至100 %的同一性，所述变体包含选自下列各组的突变中的一组突变G097A-I111V-M124V-Y217Q，G097A-III1V-Y167A-Y217Q, S024G-N025G-N061P-G097A-S101N-G128S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-G097A-S101N-G128A-V203Y-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-N061P-G097A-S 101N-G128S-V203Y-Y217Q, V068A-A092G-Y217Q， N061P-G097A-S101N-G128A-P210S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-G097A-S101N-G128A-P210S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-G097A-S101N-G128S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-S078N-G097A-SlOlN-II11V-G128S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-N061P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-S038G-S053G-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-S053G-N061P-S078N-G128A-Y217Q, N025G-S053G-N061P-S078N-S101N-G128A-Y217Q, N025G-S053G-T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-S053G-T055P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-T055P-N061P-S078N-S101N-G128A-Y217Q, N061P-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-N061P-G097A-G128A-Y217Q, S024G-N025G-N061P-G097A-S 101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N06IP-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-S078N-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-N061P-G128A-Y217Q, S024G-N025G-T055P-G097A-G128A-Y217Q, S024G-N025G-T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q,S024G-S053G-N061P-G097A-G128A-Y217Q, S024G-S053G-N061P-S078N-G097A-G128A-Y2权利要求
1. 一种组合物，所述组合物包含蛋白酶和一种或多种辅助成分，并且所述组合物为织物和家居护理产品，所述蛋白酶选自由下列组成的组 a)冷水蛋白酶，所述冷水蛋白酶在pH8和60° F下，在与具有SEQ ID NO :4的酶比较时，对于BMI具有大于I、至少I. I、至少I. 2、至少I. 3、至少I. 4、至少I. 5、至少I. 6、至少I. 7、至少I. 8、至少I. 9、至少2、1至10、1至8或甚至I至5的性能指数，所述性能指数如测试方法2和/或测试方法3所定义； b)冷水蛋白酶，所述冷水蛋白酶在pH8和60° F下，在与具有SEQ ID NO :6的酶比较时，对于BMI具有至少I、至少I. I、至少I. 2、至少I. 3、至少I. 4、至少I. 5、至少I. 6、至少I. 7、至少I. 8、至少I. 9、至少2、1至10、1至8或甚至I至5的性能指数，所述性能指数如测试方法2和/或测试方法3所定义； c)冷水蛋白酶，所述冷水蛋白酶选自由下列组成的组 (i)亲本蛋白酶的变体，所述亲本蛋白酶与SEQID NO :4具有至少60 %、或80 %、或 85 %、或 90 %、或 95 %、或 96 %、或 97 %、或 98 %、或 99 %、或甚至 100 %的同一性，所述变体包含选自下列各组的突变中的一组突变P210S，P210S-N218A,S063L-S078N-S101A-S183T-T244N, N061A-S078N-S224A, S053G-S078N-P129T-Q185T,S063T-S078N-S101A, S078N-P129T, S063T-S078N-S I 0 I A-S I 83T 和S063T-S078N-S101A-T244I ； (ii)亲本蛋白酶的变体，所述亲本蛋白酶与SEQID NO :2具有至少60%、或80%、或85%、或90%、或95%、或96%、或97%、或98%、或99%、或甚至100%的同一性，所述变体包含选自下列各组的突变中的一组突变G097A-1111V-M124V-Y217Q, G097A-1111V-Y167A-Y217Q, S024G-N025G-N061P-G097A-S101N-G128S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-G097A-S101N-G128A-V203Y-Y217Q, SO.24G-N025G-S053G-T055P-N061P-G097A-S101N-G128S-V203Y-Y217Q, V068A-A092G-Y217Q,N061P-G097A-S101N-G128A-P210S Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-G097A-S101N-G128A-P210S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-G097A-S101N-G128S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-S078N-G097A-S101N-I111V-G128S-Y2170, S024G-N025G-S053G-T055P-N061P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-G097A-SI0IN-Gl28A-Y2I7Q, N025G-S038G-S053G-N06IP-S078N-G097A-S101N-G128A-Y2I7Q, N025G-S053G-N061P-S078N-G128A-Y217Q, N025G-S0.53G-N061P-S078N-S10IN-GI28A-Y2I7Q, N025G-S053G-T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-S053G-T055P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-T0.55P-N061P-S078N-S101N-G128A-Y217Q, N061P-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-N061P-G097A-G128A-Y217Q, S024G-N025G-N061P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-S078N-S101N-G1.28A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-N061P-G128A-Y217Q, S024G-N025G-T055P-G097A-G128A-Y217Q, S024G-N025G-T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y2.17Q, S024G-S053G-N061P-G097A-G128A-Y2I7Q, S024G-S053G-N061P-S078N-G097A-G128A-Y217Q, S024G-S053G-T055P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-S053G-T055P-N061P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-S053G-T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, SO24G-S053G-T055P-N061P-S101N-G128A-Y217Q, S024G-T055P-N061P-G097A-GI28A-Y2I7Q,S053G-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S053G-N061P-G097A-S101N-G128A-Y217Q-S249N, S053G-N061P-S078N-G097A-G128A-Y217Q, S053G-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S053G-T055P-G097A-SIOlN-Gl28A-Y217Q, S053G-T055P-N061P-S101N-G128A-Y217Q, S053G-T055P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, T055P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-N061P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-1055P-N061P-S078N-S101N-G128A-Y217Q, T055P-N061P-S078N-G128A-Y217Q 和 S24G-S53G-S78N-S101N-G128A-Y217Q ；(iii)亲本蛋白酶的变体，所述亲本蛋白酶与SEQ ID NO :2具有至少60%、或80%、或85%、或90%、或95%、或96%、或97%、或98%、或99%、或甚至100%的同一性，所述变体包含下列突变中的三个、四个、五个或六个X24G/R，X53G，X78N, X101N, X128A/S和X217L/Q ;所述变体任选地包含选自下列各组的突变中的至少一组突变A116V,G160S,I111L,1115V,N109S,NI17M,P005G,Q059V,T164S,Y262M,A0015Q, A015S,A098E, A098N, A098S, A098T, A098V, A098Y, A114S, A114T, A116G, A116L, A116S, A116T,A116W, A133G, A133H, A133T, A133V, A137G, A137I, A137L, A137S, A137T, A138S, A216E,A216F, A216V, D099S, D181E, F261A, F261Q, G024F, G024I, G024Q, G024Y, G097S, G160T,G211L, G211V, H017F, H017W, H039V, H226A, I031V, I111V, I268V, K170R, K265R, L016Q,L016T, L135M, L209T, L209V, L233M, L257T, L257V, L267A, L267V, N025A, N025I, N025Q,N025R, N025T, N025V, N101I, N101Q, N101S, N109A, N109G, N109H, N109L, N109M, N109Q,N109T, N117Q, N184A, N184L, N184T, N184W, N212G, N212L, N212V, N243P, N252G, N252M,1005T, P014S, P040G, P040L, P040Q, P129A, P129S, P172G, P172S, P194Q, P210A, P210S,Q185F, Q185G, Q185I, Q185M, Q185N, Q185S, Q275H, R186K, S009A, S009G, S009H, S009M,S018T, S130T, S132N, S145K, S159T, S161I, S161K, S161N, S161T, S162I, S162M, S162Y,S163G, S182F, S182G, S182V, S182W, S183F, S183L, S183M, S183T, S183V, S183W, S224A,S236T, S249V, T022A, T022G, T022Q, T022V, T208V, T242S, T253N, T253S, T254A, T254S,T255L, T255S, T255V, V004A, V004P, V004W, V084C, V139C, V165M, V203F, Y021K, Y021N,Y021T, Y021V, Y167F, Y171F, Y214F, Y262F, Y262T, A088T-L257G, A116T-A128S，N061S-N109G-A128S-N243V-S260P, S009T-N109G-A128S-K141R-N243V, S009T-S018T-Y021N-N109G-A128S-K141R, S162G-K256R， A088T-N243V, G024E-A116T， K043Y, N076D-A116T,N218S-S248N, S033T-N243V, S033T-S063G， S248N-L257G， A001E-S249A, A088T-A116T，A088T-A128S, A088T-G131H， A088T-N109G， A088T-S248N， A088T-S249A， A116T-N243V,A116T-T158S, A128S, A128S-K256R， A128S-L257G， A128S-N243V, A128S-S248N，A128S-T158S, G024E-A088T， G024E-A128S， G024E-G131H， G024E-K256R， G024E-L257G，G024E-N218S, G024F-N243V, G024E-S162G， G024E-S249A， G024E-T158S， G131H, G131H-K256R, G131H-S249A， K043Y-A088T， K043Y-A116T， K256R, N07⑶-K256R， N109G,N109G-A116T, N109G-A128S, N109G-A128S-N243V-K256R, N109G-A128S-N243V-S248A, N109G-G131H, N109G-K256R, N109G-L257G， N109G-N218S, N109G-N243V, N109G-S248N，N218S-L257G, N243V, N243V-K256R, N243V-L257G, N243V-S248N, N243V-S249A,
2.如权利要求I所述的组合物，其中所述冷水蛋白酶在pH 8和60° F下，在与具有SEQ ID NO :4的酶比较时，对于BMI具有大于I、至I. I、至少I. 2、至少I. 3、至少I. 4、至少I. 5、至少I. 6、至少I. 7、至少I. 8、至少I. 9、至少2、至少I至10、至少I至8或甚至至少I至5的性能指数，所述性能指数如测试方法2或测试方法3所定义，或者所述冷水蛋白酶在pH 8和60。F下，在与具有SEQ IDNO :6的酶比较时，对于BMI具有至少I、至少I. I、至少I. 2、至少I. 3、至少I. 4、至少I. 5、至少I. 6、至少I. 7、至少I. 8、至少I. 9、至少2、1. 0至10、I.0至8或甚至I. 0至5的性能指数，所述性能指数如测试方法2或测试方法3所定义，并且所述冷水蛋白酶选自由下 列组成的组 a)具有SEQID NO :4的亲本蛋白酶的变体，所述变体包含选自下列各组的突变中的一组突变P210S，P210S-N218A, S063T-S078N-S101A-S183T-T244N，N061A-S078N-S224A,S053G-S078N-P129T-Q185T, S063T-S078N-S101A, S078N-P129T,S063T-S078N-S101A-S183T和 S063T-S078N-S101A-T244I ； b)具有SEQID NO :2的亲本蛋白酶的变体，所述变体包含选自下列各组的突变中的一组突变G097A-I111V-M124V-Y217Q，G097A-1111V-Y167A-Y217Q, S024G-N025G-N061P-G097A-S101N-G128S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-G097A-S101N-G128A-V203Y-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-N061P-G097A-S101N-G128S-V203Y-Y217Q, V068A-A092G-Y217Q,N061P-G097A-S101N-G128A-P210S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-G097A-S101N-G128A-P210S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-G097A-S101N-G128S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-S078N-G097A-S101N-I111V-G128S-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-N06IP-G097A-S101N-G128A-Y2I7Q, N025G-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-S038G-S053G-N06IP-S078N-G097A-S101N-G128A-Y2I7Q, N025G-S053G-N061P-S078N-G128A-Y217Q, N025G-S053G-N061P-S078N-S10IN-GI28A-Y2I7Q, N025G-S053G-T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-S053G-T055P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, N025G-T055P-N061P-S078N-S10IN-Gl28A-Y2I70， N061P-S101N-G128A-Y2I70, S024G-N025G-N061P-G097A-G128A-Y217Q, S024G-N025G-N061P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-N061P-S078N-S10IN-Gl28A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-G097A-S101N-G128A-Y2170, S024G-N025G-S053G-T055P-N061P-G128A-Y217Q, SO24G-N025G-T055P-G097A-G128A-Y217Q, S024G-N025G-T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-S053 G-N061P-G097A-G128A-Y217Q, S024G-S053G-N061P-S078N-G097A-G128A-Y2170, S024G-S053G-T055P-G097A-SIO1N-G128A-Y2I7Q, S024G-S053G-T055P-N061P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-S053G-T055P-N061P-S078N-G097A-S 101N-G128A-Y217Q, S024G-S053G-T055P-N061P-S101N-G128A-Y217Q, S024G-T055P-N061P-G097A-G128A-Y217Q,S053G-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S053G-N061P-G097A-S101N-G128A-Y2170-S249N, S053G-N061P-S078N-G097A-G128A-Y217Q, S053G-S078N-G097A-S 101N-G128A-Y217Q，S053G-T055P-G097A-SIOlN-Gl28A-Y217Q, S053G-T055P-N061P-S101N-G128A-Y217Q, S053G-T055P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, T055P-G097A-S101N-G128A-Y217Q，T055P-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-N061P-S078N-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-N025G-S053G-T055P-N061P-G097A-S101N-G128A-Y217Q, S024G-T055P-N061P-S078N-S101N-G128A-Y217Q, T055P-N061P-S078N-G128A-Y217Q 和 S24G-S53G-S78N-S101N-G128A-Y2170 ； c)具有SEQ ID NO :6的亲本蛋白酶的变体，所述变体包含选自下列各组的突变中的一组突变A116V, G160S, I111L, I115V, N109S, N117M, P005G, Q059V, T164S, Y262M, A015Q,A015S, A098E, A098N, A098S, A098T, A098V, A098Y, A114S, A114T, A116G, A116L, A116S,A116T, A116W, A133G, A133H, A133T, A133V, A137G, A137I, A137L, A137S, A137T, A138S,A216E, A216F, A216V, D099S, D181E, F261A, F261Q, G024F, G024I, G024Q, G024Y, G097S,G160T, G211L, G211V, H017F, H017W, H039V, H226A, I031V, I111V, I268V, K170R, K265R,L016Q, L016T, L135M, L209T, L209V, L233M, L257T, L257V, L267A, L267V, N025A, N025I,N025Q, N025R, N025T, N025V, N101I, N101Q, N101S, N109A, N109G, N109H, N109L, N109M,N109Q, N109T, N117Q, N184A, N184L, N184T, N184W, N212G, N212L, N212V, N243P, N252G,N252M, P005T, P014S, P040G, P040L, P040Q, P129A, P129S, P172G, P172S, P194Q, P210A,P210S, Q185F, Q185G, Q185I, Q185M, Q185N, Q185S, Q275H, R186K, S009A, S009G, S009H,S009M, S018T, S130T, S132N, S145K, S159T, S161I, S161K, S161N, S161T, S162I, S162M,S162Y, S163G, S182F, S182G, S182V, S182W, S183F, S183L, S183M, S183T, S183V, S183W,S224A, S236T, S249V, T022A, T022G, T022Q, T022V, T208V, T242S, T253N, T253S, T254A,T254S, T255L, T255S, T255V, V004A, V004P, V004W, V084C, V139C, V165M, V203F, Y021K,Y021N, Y021T, Y021V, Y167F, Y171, Y214F, Y262F, Y262T, A088T-L257G， A116T-A128S，N061S-N109G-A128S-N243V-S260P, S009T-N109G-A128S-K141R-N243V, S009T-S018T-Y021N-N109G-A128S-K141R, S162G-K256R， A088T-N243V, G024E-A116T， K043Y, N076D-A116T,N218S-S248N, S033T-N243V, S033T-S063G， S248N-L257G， A001E-S249A， A088T-A116T，A088T-A128S, A088T-G131H， A088T-N109G， A088T-S248N， A088T-S249A， A116T-N243V,A116T-T158S, A128S, A128S-K256R， A128S-L257G， A128S-N243V, A128S-S248N，A128S-T158S, G024E-A088T， G024E-A128S， G024E-G131H， G024E-K256R， G024E-L257G，G024E-N218S, G024E-N243V, G024E-S162G， G024E-S249A， G024E-T158S， G131H,
3.如权利要求I所述的组合物，其中所述蛋白酶为具有SEQID NO :6的亲本蛋白酶的变体，所述变体包含下列各组氨基酸取代中的ー组或多组A088T+N109G+A116T+G131H+N24.3V+L257G,
4.如权利要求I所述的组合物，其中所述冷水蛋白酶为亲本蛋白酶的变体，所述冷水蛋白酶包含总计三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、10个、11个、12个、13个、14个或.15个选自下列组(a)和组(b)的突变，其中至少ー个突变选自组(a);
5.如权利要求I所述的组合物，其中亲本蛋白酶具有SEQID NO :2，所述亲本蛋白酶的所述变体包含总计三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、10个、11个、12个、13个、14个或15个选自下列组(a)和组(b)的突变，其中至 少ー个突变选自组(a): (a)A1E/T, S9/T, P14L, A15L, L16C, H17T, S18L/T, Q19K, G20A, Y21N/T, T22L, G23E, S33T,K43Y, N76D, G102A, N19A/S/G, A137V, K141R, T158S, G169A, S204E, P210S, N218S, N243P/V,S248N/A, S249A, K256R, L257G, S260P，和 N269D ;和(b)S24G/R/E,N25G, P40A/E, P52L, S53G, T55P, F58G, Q59S, N61E/P/G/S, N62Q/R/S,S63G/H, V68A, S78N, P86S, S87D/G, A88T/V, S89Y, A92G, L96T, G97A, G100N/Q/T, S101N,Q103E/H, Y104N, W106F, I111V, A114G, I115V, A116N/T, N117S, N118G, N123A/G/Q/V, M124I/V, S125A, L126A, G128A/S, P129E/Q/S/V, S130G, G131S/H, S132N, A133V, A134T, A144K,S145D, S159K, S161P, S162G/K, Y167A, P194L, V203Y, Q206D/E, K213L, Y217Q/L/D, V227T,A232T, P239R/V, N240K, T242R, K265N, L267V 和 Q275E。
6.如权利要求I所述的组合物，其中亲本蛋白酶的所述变体相对于BPN'野生型具有-1、0或+1的总净电荷。
7.如任ー项前述权利要求所述的组合物，所述组合物包含辅助成分，所述辅助成分选自由下列组成的组表面活性剤、助洗剤、螯合剂、染料转移抑制剂、分散剂、ー种或多种附加的酶、酶稳定剂、催化材料、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预制的过酸、聚合物分散齐U、粘土移除/杭再沉积剂、增白剂、抑泡剂、染料、香料、香料递送体系、结构弹性化剂、织物软化剂、载体、水溶助长剂、加工助剂、溶剂、颜料以及它们的混合物。
8.如任ー项前述权利要求所述的组合物，所述组合物包含第二非免疫等价蛋白酶，所述蛋白酶为枯草杆菌蛋白酶(EC 3. 4.21.62)型的蛋白酶，所述枯草杆菌蛋白酶(EC3. 4. 21. 62)型的蛋白酶为冷水GG36变体蛋白酶。
9.一种组合物，所述组合物包含冷水蛋白酶和选自由下列组成的组的材料包含香料
10.如权利要求9所述的组合物，其中具有SEQID NO :2的蛋白酶的所述变体在包括位点 24、25、40、52、53、55、58、59、61、62、63、68、78、86、87、88、89、92、96、97、100、101、103、104、106、I11、I14、I15、I16、I17、I18、123、124、125、126、128、129、130、131、132、133、134、144、145、159、161、162、167、194、203、206、213、217、227、232、239、240、242、265、267 和 275的位点的组中包含三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、10个、11个、12个、13个、14个或15个突变。
11.如权利要求9所述的组合物，其中具有SEQID NO 2的蛋白酶的所述变体包含总计三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、10个、11个、12个、13个、14个或15个选自下列组(a)和组(b)的突变(a)带电突变，所述带电突变选自由下列组成的组N61E，A144K，P129E，P239R，P40E，Q103E, Q206E, Q275E, S145D, S159K, S162K, S24R, S63H, S87D 和 T242R ;和 (b)中性突变，所述中性突变选自由下列组成的组A114G,A116N, A133V，A134T，A232T, A88V, A92G, F58G, G100T, G128A, G131S, G97A, I111V, I115V, K213L, K265N, L126A,L267V, L96T, M124V, N117S, N118G, N123G, N240K, N25G, N61P, N62Q, N62R, N62S, P129Q,P129V, P194L, P239V, P52L, P86S, Q59S, S101N, S125A, S130G, S132N, S161P, S24G, S53G,S78N, S87G, S89Y, T55P, V203Y, V227T, V68A, W106F, Y104N, Y167A，和 Y217Q。
12.如权利要求9所述的组合物，其中具有SEQID NO 2的蛋白酶的所述变体包含一个或多个突变，并且相对于BPN'野生型具有-1、0或+1的总净电荷。
13.如权利要求9-12中的任一项所述的组合物，所述组合物包含辅助成分，所述辅助成分选自由下列组成的组表面活性剤、助洗剤、螯合剂、染料转移抑制剂、分散剂、ー种或 多种附加的酶、酶稳定剂、催化材料、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预制的过酸、聚合物分散剂、粘土移除/抗再沉积剂、增白剂、抑泡剂、染料、香料、香料递送体系、结构弹性化齐U、织物软化剂、载体、水溶助长剂、加工助剂、溶剤、颜料以及它们的混合物，优选地所述附加的酶选自由下列组成的组半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、纤维ニ糖脱氢酶、木葡聚糖酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶酸裂合酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂氧合酶、木素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、地衣多糖酶、葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、淀粉酶、或它们的混合物。
14.如权利要求9-12中的任一项所述的组合物，所述组合物包含第三非免疫等价蛋白酶，所述蛋白酶为枯草杆菌蛋白酶(EC 3. 4.21.62)型的蛋白酶，所述枯草杆菌蛋白酶(EC.3.4. 21. 62)型的蛋白酶为冷水GG36变体蛋白酶。
15.一种处理和/或清洁表面或织物的方法，所述方法包括下列步骤任选地洗涤和/或冲洗所述表面或织物，使所述表面或织物与如权利要求1-14中的任一项所述的组合物接触，然后任选地洗涤和/或冲洗所述表面或织物。
全文摘要
本发明涉及包含一种或多种冷水蛋白酶的织物和家居护理产品，以及用于制造和使用此类产品的方法。此类组合物提供改善的清洁和新鲜度。此类冷水蛋白酶可通过对一个或多个亲本酶的氨基酸的取代、插入和/或删除而来源于亲本酶，所述亲本酶包括BPN′枯草杆菌蛋白酶和来源于迟缓芽孢杆菌的枯草杆菌蛋白酶。
文档编号C12N9/52GK102652175SQ201080055885
公开日2012年8月29日 申请日期2010年12月9日 优先权日2009年12月9日
发明者丹尼尔·托雷斯-帕兹米诺, 亚历山大·皮萨奇克, 亚舒阿·罗伊·巴斯勒, 戴维·A·埃斯特尔, 格伦·斯蒂文·沃德, 维克多·尤里耶维奇·阿列克谢耶夫, 艾罗卡兰·J·保洛斯, 菲利普·弗兰克·苏特, 詹姆斯·T·小基利斯, 路易·古斯塔沃·卡斯考-佩雷拉 申请人:宝洁公司