专利名称：硅胶膜处理方法
技术领域：
本发明涉及提取纯化DNA的方法技术领域，特别是硅胶膜处理方法。
背景技术：
DNA是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此DNA的提取也应是分子生物学实验技术中的最重要、最基本的操作，如不能有效的完成DNA提取方面的工作，将会影响后续整个实验的结果，甚至导致实验失败。
DNA提取的原则是
1、根据不同研究需要，保证结构的相应完整性；
2、尽量排除其它大分子成分的污染(蛋白质、多糖及RNA等)；
3、保证提取样品中不含对酶有抑制作用的有机溶剂及高浓度的金属离子。
硅胶膜技术是目前流行的DNA纯化方法中的关键技术。如今分子、细胞生物学科研和商业应用对于DNA样品的快速纯化的需求越来越多，硅胶膜纯化DNA技术能够达到较高的纯度，与简化操作，因此具有很高的应用前景。
硅胶膜由硅胶颗粒和纸浆采用成膜技术压制而成，可用于DNA，RNA的吸附，是制作DNA纯化柱的推荐材料。硅胶膜柱纯化DNA的原理为DNA或RNA在高盐低PH的条件下， 能吸附到膜表面，在低盐和高PH的条件下，DNA或RNA可以被洗脱下来。但是直接使用硅胶膜方法用于核酸分离存在硅胶膜不稳定、不均一及与核酸结合能力下降等缺点。发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种提高硅胶膜DNA吸附性能、降低产物杂质、提高提取效率的硅胶膜处理方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现硅胶膜处理方法，它包括以下步骤
S1、将硅胶膜与处理液接触，使处理液完全浸透硅胶膜；
S2、将浸透完全的硅胶膜置于62 67°C烘箱中，完全烘干硅胶膜上的水分，即得处理后的硅胶膜；
所述的处理液为Na2CO3溶液或NaHCO3溶液，且Na2CO3溶液或NaHCO3溶液的浓度为 5mM 饱和浓度。
所述的步骤SI的具体操作为将硅胶膜完全浸泡在处理液中；所述的步骤S2的具体操作为待娃胶膜完全浸泡后取出娃胶膜，将娃胶膜置于62 67°C烘箱中，完全烘干娃胶膜上的水分。
所述的步骤SI的具体操作为将处理液滴加到装填于纯化柱中的硅胶膜上，直到纯化柱内的硅胶膜完全浸透；所述的S2的具体操作为将处理好的纯化柱放置于62 67V 烘箱中，完全烘干纯化柱内硅胶膜上的水分。
本发明具有以下优点经处理后的硅胶膜对DNA高特异性吸附，核酸提取产量和回收得率均有较大程度的提高，且使 得硅胶膜具有良好的均一性和稳定性，提高了其生物利用度，更有效的发挥其核酸提取功能。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所述
实施例1:
硅胶膜处理方法，它包括以下步骤
首先配置处理液，分别配置浓度分别为5mM、IOmM和饱和浓度的Na2CO3溶液；
S1、将IOcmX IOcm的硅胶膜分别完全浸泡在上述三种浓度的Na2CO3溶液中；
S2、待完全浸泡后取出硅胶膜，置于65°C烘箱中完全烘干硅胶膜上的水分，即得三种经不同浓度Na2CO3溶液处理后的硅胶膜。
将上述三种处理后的硅胶膜分别以20层，7. 2mm直径填装在2. Oml核酸纯化柱中， 搭配Foregene试剂盒检测处理后对核酸提取得率的影响。
测试结果表明，在5mM和IOmM的Na2CO3溶液中处理过的硅胶膜，对于核酸提取的得率或回收率有5 10%左右的提高，饱和浓度的Na2CO3溶液处理的硅胶膜对于核酸提取的得率或回收率有15 20%的提高。而核酸的0D230/280更接近2. O ；0D260/280更接近1.80。
实施例2
硅胶膜处理方法，它包括以下步骤
首先配置处理液，分别配置浓度分别为5mM、IOmM和饱和浓度的NaHCO3溶液；
S1、将IOcmX IOcm的硅胶膜分别完全浸泡在上述三种浓度的NaHCO3溶液中；
S2、待完全浸泡后取出硅胶膜，置于62°C烘箱中完全烘干硅胶膜上的水分，即得三种经不同浓度NaHCO3溶液处理后的硅胶膜。
将上述三种处理后的硅胶膜分别以20层，7. 2mm直径填装在2. Oml核酸纯化柱中， 搭配Foregene试剂盒检测处理后对核酸提取得率的影响。
测试结果表明，在5mM和IOmM的NaHCO3溶液中处理过的硅胶膜，对于核酸提取的得率或回收率有10 15%左右的提高，饱和浓度的NaHCO3溶液处理的硅胶膜对于核酸提取的得率或回收率有20 30%的提高。而核酸的0D230/280更接近2. O ；0D260/280更接近1. 80。
结合实施例1和实施例2可知，Na2CO3溶液和NaHCO3溶液在5mM 饱和浓度的浓度范围内均能较大程度上提升硅胶膜对核酸的吸附能力；相同条件下，NaHCO3溶液的处理效果比Na2CO3溶液更为明显。
实施例3
硅胶膜处理方法，它包括以下步骤
首先配置处理液，分别配置浓度分别为5mM、IOmM和饱和浓度的NaHCO3溶液，以及浓度分别为5mM、IOmM和饱和浓度的NaHCO3溶液；然后准备6个装填有20层，7. 2mm直径的硅胶膜的纯化柱。
S1、使用配制好的浓度为5mM、IOmM和饱和浓度的Na2CO3溶液和NaHCO3溶液分别滴加到纯化柱的硅胶膜上，直到硅胶膜完全浸透为止；
S2、将处理好的纯化柱放置于67°C烘箱中，直到完全烘干硅胶膜上的水分，即得六种经不同浓度的Na2CO3溶液和NaHCO3溶液处理后的硅胶膜。
将分别装填有上述处理后的硅胶膜的纯化柱搭配Foregene试剂盒检测处理后对核酸提取得率的影响。
测试结果表明，经5mM和IOmM浓度的NaHCO3溶液处理的硅胶膜，对于核酸提取的得率或回收率有10 15%左右的提高，经饱和浓度的NaHCO3溶液处理的硅胶膜对于核酸提取的得率或回收率有20 30%的提高；而核酸的0D230/280更接近2. O ；0D260/280更接近1.80。经5mM和IOmM浓度的Na2CO3溶液处理过的硅胶膜，对于核酸提取的得率或回收率有 5 10%左右的提高，经饱和浓度的Na2CO3溶液处理的硅胶膜对于核酸提取的得率或回收率有15 20%的提高；而核酸的0D230/280更接近2. O ；0D260/280更接近1. 80。表明，核酸纯化柱预先填装好硅胶膜再用NaHCO3溶液或Na2CO3溶液进行处理，同样能达到提高核酸产量和提升纯化核酸质量的能力。
下面结合试验对本发明作进一步描述
首先配制O. 1M、0. 2M、0. 4M、0. 8M、IM的NaHCO3溶液对制备好的核酸纯化柱进行处理，其处理方式按下使用微量移液器取相应的NaHCO3溶液滴加到纯化柱硅胶膜中间位置， 之后放置于65°C的烘箱进行干燥处理。
NaHCO3的用量及干燥时间见下表
权利要求
1.硅胶膜处理方法，其特征在于它包括以下步骤51、将硅胶膜与处理液接触，使处理液完全浸透硅胶膜；52、将浸透完全的硅胶膜置于62 67°C烘箱中，完全烘干硅胶膜上的水分，即得处理后的娃胶膜；所述的处理液为Na2CO3溶液或NaHCO3溶液，且Na2CO3溶液或NaHCO3溶液的浓度为 5mM 饱和浓度。
2.根据权利要求1所述的硅胶膜处理方法，其特征在于所述的步骤SI的具体操作为将硅胶膜完全浸泡在处理液中；所述的步骤S2的具体操作为待硅胶膜完全浸泡后取出硅胶膜，将娃胶膜置于62 67°C烘箱中，完全烘干娃胶膜上的水分。
3.根据权利要求1所述的硅胶膜处理方法，其特征在于所述的步骤SI的具体操作为将处理液滴加到装填于纯化柱中的硅胶膜上，直到纯化柱内的硅胶膜完全浸透；所述的S2 的具体操作为将处理好的纯化柱放置于62 67°C烘箱中，完全烘干纯化柱内硅胶膜上的水分。
全文摘要
本发明公开了硅胶膜处理方法，它包括以下步骤S1、将硅胶膜与处理液接触，使处理液完全浸透硅胶膜；S2、将浸透完全的硅胶膜置于62～67℃烘箱中，完全烘干硅胶膜上的水分，即得处理后的硅胶膜；所述的处理液为Na2CO3溶液或NaHCO3溶液，且Na2CO3溶液或NaHCO3溶液的浓度为5mM～饱和浓度。本发明的有益效果是经处理后的硅胶膜对DNA高特异性吸附，核酸提取产量和回收得率均有较大程度的提高，且使得硅胶膜具有良好的均一性和稳定性，提高了其生物利用度，更有效的发挥其核酸提取功能。
文档编号C12N15/10GK102994494SQ20121047956
公开日2013年3月27日 申请日期2012年11月22日 优先权日2012年11月22日
发明者邹利平, 赵梓亦 申请人:成都福际生物技术有限公司