专利名称：一种用于utmd介导基因转导的装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及微生物培养器械技术领域，具体涉及ー种基因转染细胞培养装置。
背景技术：
有效的基因转导方法是成功进行基因治疗的ー个重要步骤，其中非侵袭、靶向的基因传输系统在临床上显的尤为重要。目前常见的基因转导方法主要包括病毒载体介导和非病毒载体介导的基因传输。虽然病毒载体介导的基因传输有较高的基因转染率，但出于对该方法安全性的考虑，其临床应用受到了限制。理想的基因转导系统要具有以下几个特点靶向细胞的特异性；抗代谢性降解和/或免疫系统攻击；安全性，副作用最小。目前， 基因转导技术已经取得了进展，但是仍未建立起ー个理想的媒介系统。 超声辐照可使各种类型载体介导的体外培养细胞的目的基因表达增加。超声靶向微泡破坏(UTMD)诱导的声孔作用，能引起短暂的细胞膜通透性増加，可将外源性分子转运入胞内，能有效提高质粒DNA的转染率。利用UTMD增强基因表达的技术具有实用性，特别是对于细胞培养物。将病毒载体或化学载体介导的基因传输方法与UTMD相结合的主要方法是将预先配置的转染复合物与微泡混合液加入含有细胞悬液的细胞培养皿中，置于超声装置中，进行超声辐照。病毒载体或化学载体络合质粒DNA可増加超声辐照期间的质粒稳定性，超声辐照及微泡能显著增强其基因转染率。用于UTMD介导的基因转染细胞培养皿要有良好的密闭性能，转染存储器及微泡混合物存储器要与培养皿单向连同，辐照前按需供给，保证转染环境避免污染。然而，目前临床上还没有出现ー款真正意义上的用于UTMD介导基因转染的细胞培养皿及其附件装置。因此，有必要对现有技术进行改进。
发明内容为解决上述问题，本实用新型的目的是提供一种用于UTMD介导基因转导的装置。本实用新型的目的主要通过以下技术方案实现一种用于UTMD介导基因转导的装置，包括微泡溶液存储室、转染溶液存储室、细胞培养室、和外壳盖，微泡溶液存储室和转染溶液存储室上的顶部壁上设置有加样ロ，加样ロ通过密封盖密封；微泡溶液存储室和转染溶液存储室通过流量控制阀与细胞培养室相连；微泡溶液存储室、转染溶液存储室、细胞培养室呈品字形置于外壳盖内；所述的细胞培养室，包含底壁、侧壁和顶壁，顶壁上设有进水管道，进水管道突出到顶壁外，进水管道内侧设置有单向阀，进水管道外侧上部设置有螺纹，螺纹与密封防护帽相连接，密封防护帽内壁顶端设置有防漏硅胶垫。细胞培养室等分为上、下两部分，通过螺纹及防漏硅胶垫密封连接。进ー步，所述的细胞培养室、微泡溶液存储室和转染溶液存储室为长方体结构。进ー步，所述的细胞培养室、微泡溶液存储室和转染溶液存储室采用无毒聚氯こ烯板材制作。进ー步，所述的细胞培养室外壁中间空心，空心处含有双蒸水。[0009]有益效果本实用新型结构简单、设计合理，使用本培养皿能有效的确保超声辐照在培养皿介质中的传递，促进质粒DNA的胞内传输；本实用新型转染溶液存储室和微泡溶液存储室分别与细胞培养室单向连同，辐照前能保证微泡溶液和转染溶液的按需供给，保证转染环境避免污染。
图I是本实用新型结构剖视图；图2是本实用新型细胞培养室结构示意图；图3是本实用新型外观结构图； 图中1、细胞培养室；2、防漏硅胶垫；3、双蒸水；4、密封防护帽；5、外螺纹；6、进水管道；7、防漏硅胶垫；8、内螺纹；9、单向阀；10、流量控制阀；11、微泡溶液存储室；12、密封盖；13、加样管道；14、转染溶液存储室；15、外壳盖
具体实施方式
以下结合附图I、图2、图3对本实用新型作进ー步说明一种用于UTMD介导基因转导的装置，包括微泡溶液存储室11、转染溶液存储室14、细胞培养室I和外壳盖15，微泡溶液存储室11和转染溶液存储室14上的顶部壁上设置有加样管道13，加样管道13通过密封盖12密封；微泡溶液存储室11和转染溶液存储室14通过流量控制阀10与细胞培养室I单向相连；所述的细胞培养室I，包含底壁、侧壁和顶壁，顶壁上设有进水管道6，进水管道6突出到顶壁外，进水管道6内侧设置有单向阀9，细胞培养液通过单向阀9从细胞培养室I外流入培养室内，在单向阀9的作用下能避免液体的回流。进水管道6外侧上部设置有外螺纹5，密封防护帽4内壁设置有内螺纹8和防漏硅胶垫7，进水管道6和密封防护帽4通过螺纹及防漏硅胶垫密封防护帽密闭连接。细胞培养室I等分为上、下两部分，上部培养室内壁底端设置有内台阶及螺纹，下部培养室外壁顶端设置有外台阶及螺纹，外台阶上安装有一圈防漏硅胶垫2，培养室上、下两部分通过螺纹及防漏硅胶垫2密闭。作为优选的实施方式，细胞培养室I、微泡溶液存储室11和转染溶液存储室14采用无毒聚氯こ烯板材制作。作为优选的实施方式，细胞培养室I、微泡溶液存储室11和转染溶液存储室14为长方体形。作为优选的实施方式，超声处理前，待细胞生长到80% 90%融合吋，将细胞用PBS冲洗后，O. 25%胰酶消化、收集，制备细胞悬液。无FCS培养基2000 μ I/样品，细胞密度为I X IO6个/ml，通过进水管道6加入到细胞培养室I中。作为优选的实施方式，微泡溶液存储室11用于存储微泡，微泡的获得通过购买Bracco公司的SonoVue微泡,使用前溶解于5ml生理盐水,通过倒置或振荡使微泡均勻分布，泡径为2 8 μ m，密度为2X 108 5X 108/ml，浓度5mg/ml。使用前放置于微泡混合物存储器I中。通常在注入上述微泡溶液存储室11前Ih制备微泡溶液，制备后迅速进行实验。[0021]作为优选的实施方式，转染溶液注入上述转染溶液存储室14前，需要预先加入一定比例的质粒溶液。室温下迅速行超声辐照，持续时间以细胞不足以贴壁为宜。超声处理后8h更换含10% FCS的培养基，继续培养。 上述实施方式仅是本实用新型的优选实施方式，并非仅有的实施方式，只要以基本相同的手段到达到本实用新型的效果均在本实用新型的保护范畴之内。
权利要求1.一种用于UTMD介导基因转导的装置，包括微泡溶液存储室(11)、转染溶液存储室(14)、细胞培养室(I)和外壳盖(15)，其特征在于微泡溶液存储室(11)和转染溶液存储室(14)上的顶部壁上设置有加样管道(13)，加样管道(13)通过密封盖(12)密封；微泡溶液存储室(11)和转染溶液存储室(14)通过流量控制阀(10)与细胞培养室(I)单向相连，微泡溶液存储室(11)、转染溶液存储室(14)、细胞培养室(I)呈品字形置于外壳盖内。
2.如权利要求I所述的ー种用于UTMD介导基因转导的装置，其特征在于所述的细胞培养室(I)，包含底壁、侧壁和顶壁，顶壁上设有进水管道出)，进水管道(6)突出到顶壁外，进水管道出)内侧设置有单向阀(9)，进水管道(6)外侧上部设置有外螺纹(5)，密封防护帽(4)内壁设置有内螺纹(8)和防漏硅胶垫(7)，进水管道(6)和密封防护帽(4)通过螺纹及防漏硅胶垫(X)密闭。
3.如权利要求I所述的ー种用于UTMD介导基因转导的装置，其特征在于所述的细胞培养室(I)等分为上、下两部分，上部培养室内壁底端设置有内台阶及螺纹，下部培养室外壁 顶端设置有外台阶及螺纹，外台阶上安装有一圈防漏硅胶垫(2)，培养室上、下两部分通过螺纹及防漏硅胶垫(2)密闭。
4.如权利要求I所述的ー种用于UTMD介导基因转导的装置，其特征在于所述的细胞培养室(I)、微泡溶液存储室(11)和转染溶液存储室(14)采用无毒聚氯こ烯板材制作。
5.如权利要求I所述的ー种用于UTMD介导基因转导的装置，其特征在于所述的细胞培养室(I)、微泡溶液存储室(11)和转染溶液存储室(14)为长方体形。
专利摘要本实用新型涉及一种用于UTMD介导基因转导的装置，包括微泡溶液存储室、转染溶液存储室、细胞培养室和外壳盖，微泡溶液存储室和转染溶液存储室上的顶部壁上设置有加样口，加样口通过密封盖密封；微泡溶液存储室和转染溶液存储室通过流量控制阀与细胞培养室相连；微泡溶液存储室、转染溶液存储室、细胞培养室呈品字形置于外壳盖内。本实用新型结构简单、设计合理、密封性强；使用本装置能有效的确保超声辐照在培养皿介质中的传递，促进化质粒DNA的胞内传输；同时本实用新型内的转染溶液存储室和微泡溶液存储室与细胞培养室单向连同，辐照前能保证微泡溶液和转染溶液的按需供给，保证转染环境避免污染。
文档编号C12M1/00GK202643683SQ201220348770
公开日2013年1月2日 申请日期2012年7月12日 优先权日2012年7月12日
发明者陈智毅, 梁琨, 邱日想, 林雁, 杨凤 申请人:陈智毅