一种液体接种制备柠檬酸大麸曲的方法
【专利摘要】本发明涉及一种液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其制备方法的步骤为：⑴将黑曲霉接种于PDA斜面培养基上活化，在35-37度温度下培养5-7天，得到黑曲霉斜面菌种；⑵将步骤⑴培养好的黑曲霉斜面菌种接种于液体种子培养基，在35-38度温度下培养24-48小时，转速150-300转/分，得到黑曲霉液体种子；⑶将步骤⑵培养好的黑曲霉液体种子接入麸曲培养基中，接种量为0.3-2wt%，36-38度翻动培养4-6天，制得大麸曲；⑷将步骤⑶制得的大麸曲转入发酵罐培养。本发明可以省略柠檬酸发酵过程中逐级放大的繁琐工艺，缩短发酵周期，节约了人力成本和设备成本，降低了用摇瓶麸曲接种中的染菌问题，进一步优化了柠檬酸的发酵工艺，促进了柠檬酸的生产，本方法可提高柠檬酸产率5-10%。
【专利说明】一种液体接种制备柠檬酸大麸曲的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于柠檬酸的工业化生产【技术领域】，尤其是一种液体接种制备柠檬酸大麸曲的方法。
【背景技术】
[0002]柠檬酸是一种非常重要的有机酸，广泛应用于食品工业、制药、日用化工等工业部门。近年来，柠檬酸的世界总产量急剧上升，我国柠檬酸产量达80多万吨，出口 60多万吨，出口创汇5亿多美元，产量及出口量居世界第一，目前已成为世界上最大的柠檬酸生产和出口的国家。目前，黑曲霉利用糖类发酵生成柠檬酸是重要的生物合成途径。优良的菌种对于柠檬酸发酵起着决定性的作用，中国柠檬酸发酵达到了相当高的水平，但是现有的主要问题是:我国柠檬酸行业制备黑曲霉麸曲还是采用传统工艺，即一批发酵的种子需要制备很多三角瓶麸曲，再经过一级种子和二级种子的逐级放大，最终进入发酵罐进行发酵。三角瓶麸曲是由斜面直接接种，制备过程劳动量大，且在接种前需要进行抽查，检验其发酵能力，工艺繁琐，无法形成标准化生产。且麸曲染菌几率高，无法形成标准化生产等问题。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种由液体接种制作柠檬酸大麸曲的生产工艺，这种大麸曲能直接投入发酵罐中进行发酵，简化了发酵工艺，降低生产劳动量，与传统工艺相比，产酸率持平或略有提高，同时也节约了成本。
[0004]本发明解决其技术问题是通过以下技术方案实现的:
[0005]一种液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其特征在于:其制备方法的步骤为:
[0006]⑴.将黑曲霉接种于PDA斜面培养基上活化，在35-37度温度下培养5_7天，得到黑曲霉斜面囷种；
[0007]⑵.将步骤⑴培养好的黑曲霉斜面菌种接种于液体种子培养基，在35-38度温度下培养24-48小时，转速150-300转/分，得到黑曲霉液体种子；
[0008](3).将步骤⑵培养好的黑曲霉液体种子接入麸曲培养基中，接种量为0.3-2wt%,36-38度翻动培养4-6天，制得大麸曲；
[0009](4).将步骤⑶制得的大麸曲转入发酵罐培养。
[0010]所述的液体种子培养基的制备方法为:将经高温淀粉酶水解后的10_12wt%玉米淀粉，豆柏粉0.2-lwt%，硫酸铵0.5-2wt%，搅拌均匀后，灭菌，得到液体种子培养基。
[0011]所述的麸曲培养基的制备方法为:将麸皮过筛后取筛上麸皮，按麸皮:水的重量比1:1-2的比例加水，搅拌均匀至无聚团，灭菌，制得麸曲培养基。
[0012]本发明的优点和有益效果为:
[0013]本发明通过制作大麸曲，不仅可以省略柠檬酸发酵过程中逐级放大的繁琐工艺，缩短发酵周期，节约了人力成本和设备成本，降低了用摇瓶麸曲接种中的染菌问题，进一步优化了柠檬酸的发酵工艺，促进了柠檬酸的生产，本方法可提高柠檬酸产率5-10%。【具体实施方式】
[0014]下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。
[0015]一种液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其制备方法的步骤为:
[0016](I).将黑曲霉接种于PDA斜面培养基上活化，在35-37度温度下培养5-7天，得到黑曲霉斜面菌种。
[0017]⑵.将步骤⑴培养好的黑曲霉斜面菌种接种于液体种子培养基，在35-38度温度下培养24-48小时，转速150-300转/分，得到黑曲霉液体种子。液体种子培养基的制备方法为:将经高温淀粉酶水解后的10-12%wt%玉米淀粉，豆柏粉0.2-lwt%，硫酸铵0.5-2wt%,搅拌均匀后，灭菌，得到液体种子培养基。
[0018](3).将步骤⑵培养好的黑曲霉液体种子接入麸曲培养基中，接种量为0.3-2wt%,36-38度翻动培养4-6天，制得大麸曲。麸曲培养基的制备方法为:将麸皮过筛后取筛上麸皮，按麸皮:水的重量比1:1-2的比例加水，搅拌均匀至无聚团，灭菌，制得麸曲培养基。
[0019](4).将步骤⑶制得的大麸曲转入发酵罐培养。
[0020]采用本发明液体接种制备柠檬酸大麸曲的方法与传统柠檬酸生产工艺进行试验对比。
[0021]传统柠檬酸生产工艺
[0022]工艺路线:
[0023]菌种斜面一三角瓶麸曲一一级种子罐培养一发酵罐发酵
[0024]发酵72小时后，取出测其产酸(原料糖浓度为12%)
[0025]
【权利要求】
1.一种液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其特征在于:其制备方法的步骤为: ⑴.将黑曲霉接种于PDA斜面培养基上活化，在35-37度温度下培养5-7天，得到黑曲霉斜面囷种； ⑵.将步骤⑴培养好的黑曲霉斜面菌种接种于液体种子培养基，在35-38度温度下培养24-48小时，转速150-300转/分，得到黑曲霉液体种子； ⑶.将步骤⑵培养好的黑曲霉液体种子接入麸曲培养基中，接种量为0.3-2wt%, 36-38度翻动培养4-6天，制得大麸曲； (4).将步骤⑶制得的大麸曲转入发酵罐培养。
2.根据权利要求1所述的液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其特征在于:所述的液体种子培养基的制备方法为:将经高温淀粉酶水解后的10-12被％玉米淀粉，豆柏粉0.2-lwt%，硫酸铵0.5-2wt%，搅拌均匀后，灭菌，得到液体种子培养基。
3.根据权利要求1所述的液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其特征在于:所述的麸曲培养基的制备方法为:将麸皮过筛后取筛上麸皮，按麸皮:水的重量比1:1-2的比例加水，搅拌均匀至无聚团 ，灭菌，制得麸曲培养基。
【文档编号】C12P7/48GK103667372SQ201310582508
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2013年11月19日 优先权日:2013年11月19日
【发明者】孙武岳, 韩慧, 魏呐, 赵琼, 张英筠 申请人:天津市工业微生物研究所