一种蔬菜用有机肥料及其制备方法

文档序号:488824阅读:461来源:国知局
一种蔬菜用有机肥料及其制备方法
【专利摘要】一种蔬菜用有机肥料的制备方法,包含以下步骤:(1)以质量份数计,将质量含量为5-8%的棕榈树精华溶液200份、质量含量为5-8%的竹子精华溶液290份、竹子干细胞50份混合后,加水并发酵7-8天;(2)再次混合质量含量为5-8%的莫兰或印茄精华溶液100份以及莫兰或印茄干细胞30份,加水并发酵7-9天;(3)将质量含量为5-8%的布袋莲或浮萍精华溶液180份以及布袋莲或浮萍干细胞30份加入步骤(2)得到的混合物中,加水并发酵8-9天;(4)将质量含量为5-8%的攀藤寄生植物精华100份以及攀藤寄生植物干细胞20份加入步骤(3)得到的混合物中,加水并发酵6-8天;(5)将步骤(4)制得的发酵产物经15000转/分的离心分离机旋转分离两小时,随后30-35℃下发酵6-8天。
【专利说明】一种蔬菜用有机肥料及其制备方法

【技术领域】
:
[0001]本发明属于生物肥料【技术领域】,具体涉及一种蔬菜用有机肥料及其制备方法。

【背景技术】
[0002]肥料大体可以分为两大类,即无机肥和有机肥两大类。其中无机肥,就是我们平常所称的化肥,具有养分含量高、元素单一、肥效快、清洁卫生、施用方便等优点,但是长期施用化肥,在增产的同时,也带来了很多副作用:
[0003]1)从化肥原料开采到加工生产,不可避免地将一些重金属元素或有毒物质带入化月巴,施用后被作物吸收,危害人体健康;同时无论是酸性土壤、微酸性土壤还是石灰性土壤,长期施用化肥会造成土壤中重金属元素富集,被作物吸收,对人体造成危害。
[0004]2) 土壤微生物是个体小而能量大的活体,它们既是土壤有机质转化的执行者,又是植物营养元素的活性库,具有转化有机质、分解矿物和降解有毒物质的作用。中科院南京土壤研究所的试验表明,施用不同的肥料对微生物的活性有很大影响,土壤微生物数量、活性大小的顺序为:有机肥配施无机肥>单施有机肥>单施无机肥。目前,中国施用的化肥以氮肥为主,而磷肥、钾肥和有机肥的施用量低,降低土壤微生物的数量和活性。同时使土壤营养失调,加剧土壤中磷、钾耗竭,导致N03-N累积。N03-N本身无毒,但若未被作物充分同化可使其含量迅速增加,摄入人体后被微生物还原为N02-,使血液的载氧能力下降,诱发高铁血红蛋白血症,严重时可使人窒息死亡。同时,N03-N还可以在体内转变成强致癌物质亚硝胺,诱发各种消化系统癌变,危害人体健康。在保护地栽培条件下,即使是以施用有机肥为主的100cm 土层中N03-N累积量也在240?740kg/hm2。
[0005]3)长期施用化肥会加速土壤酸化。一方面与氮肥在土壤中的硝化作用产生硝酸盐的过程相关;铵先转变成亚硝酸盐,亚硝酸盐再转变成硝酸盐,形成H+,导致土壤酸化。另一方面,一些生理酸性肥料,比如磷酸钙、硫酸铵、氯化铵在植物吸收肥料中的养分离子后,使得土壤中H+增多,许多耕地土壤的酸化和生理性肥料长期施用有关。在作物选择吸收造成土壤逐渐变酸的同时,大气中的NH3、N2可经过氧化与水解作用转化成HN03降落到土壤中引起土壤酸化。但化肥施用促进土壤酸化现象在酸性土壤中最为严重,土壤酸化后可加速Ca、Mg从耕作层淋溶,从而降低盐基饱和度和土壤肥力。
[0006]蔬菜是人们普遍食用的大众化蔬菜,日常消费量大,但是近年来由于肥料的使用不当以及农药的过度使用,关于蔬菜安全隐患的问题时有发生,给人们的健康与环境带来很大的伤害。为此专利公布号为CN103524250A的中国专利公开了一种绿色蔬菜专用肥料,由下列重量份的原料制成:污泥200-230、秸杆120-140、红薯粉110-130、统糠100-120、糠醛渣70-90、糖蜜20-24、蓖麻根粉30-35、硝酸铵35-40、氯化钾16-19、硫酸锰3_5、硫酸亚铁3-4、碘化钾1-2、硼砂4-5、乙二胺四乙酸二钠1-2、EM菌剂6_9、土壤调理剂10-15、水适量。实际应用中发现,上述绿色蔬菜专用肥料与其他常用肥料一样,均需直接施用在土壤中,肥料成分只有少部分能被蔬菜吸收,大量肥料会从土壤中流失,利用率低,增大了实际生产和使用成本,其次,上述绿色蔬菜专用肥料对蔬菜表面病虫害防治效果非常有限,仍然需要使用一定量的农药来进行配合使用,人们在食用蔬菜时仍存在较高的风险,此外,该绿色蔬菜专用肥料种使用了硝酸铵、硫酸锰、碘化钾等化学品,仍然会对土壤造成污染和破坏,在蔬菜生产中,该绿色蔬菜专用肥料仍不满足现有蔬菜生产的需求。


【发明内容】

[0007]针对现有技术存在的上述问题,本发明提供了一种蔬菜用有机肥料及其制备方法。
[0008]为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
[0009]一种蔬菜用有机肥料的制备方法,包含以下步骤:
[0010](1)以质量份数计,将质量含量为5-8%的棕榈树精华溶液200份、质量含量为5-8%的竹子精华溶液290份、竹子干细胞50份混合后,加入适量蒸馏水并搅拌均匀,35-40°C下发酵7-8天;
[0011](2)在步骤(1)得到发酵混合物中再次混合质量含量为5-8%的莫兰或印茄精华溶液100份以及莫兰或印茄干细胞30份,加入适量蒸馏水并搅拌均匀,35-45°C下发酵7-9天;
[0012](3)将质量含量为5-8 %的布袋莲或浮萍精华溶液180份以及布袋莲或浮萍干细胞30份加入步骤(2)得到的混合物中,再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀,35-40°C下发酵8-9 天;
[0013](4)将质量含量为5-8%的攀藤寄生植物精华100份以及攀藤寄生植物干细胞20份加入步骤(3)得到的混合物中,再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀,30-35°C下发酵6-8天;
[0014](5)将步骤(4)制得的发酵产物经15000转/分的离心分离机旋转分离两小时,随后30-35°C下发酵6-8天,产物即所述蔬菜用有机肥料。
[0015]进一步地,所述竹子干细胞的提取方法包括如下步骤:
[0016](1)提取竹子干细胞:选择生长状况良好的竹子的树干、枝干,用无菌蒸馏水冲洗10分钟,洗净后,将竹子的树干、枝干首先切割成长度10-20厘米的小块,然后将整理后的竹子原料放入在搅拌设备中粉碎成细末;
[0017](2)将步骤(1)中粉碎制得的竹子细末原料,放入多个盛有固态培养基的培养器皿中,在受控暗室内培养,培养温度25±1度;
[0018](3)形成层细胞的诱导:在整个培养过程中保持25±1摄氏度的恒温,培养器皿外空间湿度保持在86±1左右,培养20-30天后,竹子内部组织的细胞系增量放大,形成层细胞系与韧皮组织分离,细胞系组织有大量的液泡存在,并且接触后易碎;
[0019](4)将步骤(3)中形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中,在暗室中,用旋转摇床,以100rpm、25±l度下培养,培养时间设定为20天,使液态培养基中的干细胞充分生长,在生长期内始终保持极高的活力;
[0020](5)竹子干细胞的提取:首先,将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时,再进行经旋转式真空蒸发器,间接加热80度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之1时取出,在放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,30小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用。
[0021]进一步地,所述莫兰或印茄干细胞的提取方法包括如下步骤:
[0022](1)提取莫兰或印茄树木枝干的干细胞:选择生长状况良好的莫兰或印茄的树干,用无菌蒸馏水冲洗10分钟,洗净后,将其切割成边长小于20厘米的方块,然后将所述方块放入在搅拌设备中粉碎成细末;
[0023](2)将步骤(1)中粉碎制得的树干细末原料,放入多个盛有固态培养基的培养器皿中,在受控暗室内培养,培养温度25±1度;
[0024](3)形成层细胞的诱导:在整个培养过程中保持35±1度的恒温,培养器皿外空间湿度保持在90±1左右,培养15-25天后,树干内部组织的细胞系增量放大,形成层细胞系与韧皮组织分离,细胞系组织有大量的液泡存在,并且接触后易碎;
[0025](4)将形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中,在暗室中,用旋转摇床,以100rpm、35±l度下培养,培养时间设定为16天,使液态培养基中的干细胞充分生长,在生长期内始终保持极闻的活力;
[0026](5)莫兰或印茄干细胞的提取:首先,将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时,再进行经旋转式真空蒸发器,间接加热80度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之1时取出,再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,25-30小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用。
[0027]进一步地,所述固态培养基成分的组成为:硝酸钾1010mg/L,硫酸镁120mg/L,硫酸猛9.5mg/L,硫酸锌2mg/L,氯化|丐113mg/L,硫酸铜0.023mg/L,碘化钾0.72mg/L,磷酸二氢钠130mg/L,氯化钴0.023mg/L,硼酸3.lmg/L,钥酸钠0.24mg/L,乙二胺四乙酸铁钠盐 37mg/L ;肌醇 452mg/L,盐酸噻胺(VB 1)2lmg/L,吡哆醇(VB6) 1.9mg/L,尼克酸 1.9mg/L, L-抗坏血酸110mg/L,朽1檬酸114mg/L ;光氨酸170mg/L,酪蛋白水解物510mg/L ;鹿糖30.100mg/L ;2,4-D2.5mg/L,赤霉素 0.6mg/L ;琼脂 39.000mg/L ;活性碳 3000mg/L ;磁化水 1升。
[0028]进一步地,所述液态培养基成分的组成:硝酸钾1010mg/L,硫酸镁120mg/L,硫酸猛9.5mg/L,硫酸锌2mg/L,氯化?丐113mg/L,硫酸铜0.023mg/L,碘化钾0.72mg/L,磷酸二氢钠130mg/L,氯化钴0.023mg/L,硼酸3mg/L,钥酸钠0.24mg/L,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L,肌醇 200mg/L,盐酸噻胺(VB1) 2lmg/L,吡哆醇(VB6) 1.9mg/L,尼克酸 1.9mg/L, L-抗坏血酸110mg/L,梓檬酸148mg/L,2,4-D2.5mg/L,赤霉素0.lmg/L,天冬氨酸134mg/L,精氨酸180mg/L,脯氨酸 118mg/L,甘氨酸 60mg/L,色氨酸 80mg/L,鹿糖 21.000mg/L,麦饭石 2000mg/L,锗石2000mg/L,磁化水1升。
[0029]进一步地,布袋莲或浮萍干细胞的提取方法包括如下步骤:
[0030](1)将布袋莲或浮萍用无菌水冲洗10分钟,洗净;
[0031](2)制备固态培养基:硝酸钾2500mg/L,硫酸镁122mg/L,硫酸锰llmg/L,硫酸锌2.5mg/L,硫酸铜0.025mg/L,硫酸胺135mg/L ;氯化钙112mg/L,碘化钾0.7mg/L,氯化钴0.025mg/L,磷酸二氢钠 132mg/L,硼酸 2.6mg/L,钥酸钠 0.23mg/L,烟酸 2.0mg/L,吡哆醇
2.lmg/L, L-抗坏血酸 53mg/L,梓檬酸 78mg/L, L-天冬氨酸 140mg/L, L-精氨酸 180mg/L,甘氨酸75mg/L,脯氨酸120mg/L ;a_萘乙酸2.2mg ;鹿糖10.200mg/L ;活性炭500mg/ ;琼脂3800mg/L ;磁化水 0.7 升;
[0032](3)形成层分离培养:将水生植物用小刀切碎后放进固态培养基中,在受控暗室内培养15天,培养温度25土1°C ;随后将形成层细胞系用接种铲轻轻将其移入另一同样培养基培养器皿内,在放大培养20天,最后将其放大培养的细胞系群体移入液态培养基中,在暗室内用摇床旋转培养,在160rpm、25±l°C环境中培养,培养时间设定为20天;
[0033]所述液态培养基的成分为:硫酸钾995mg/L,磷酸氢钾160mg/L,硫酸镁185mg/L,硫酸锌9mg/L,硫酸猛22mg/L,硫酸铜0.25mg/L,氯化|丐7Omg/L,硝酸|丐480mg/L,钥酸钠0.26mg/L,硼酸6.5mg/L,硝酸胺420mg/L,乙二胺四乙酸铁钠盐38mg/L,肌醇230mg/L,硫胺素22mg/L,烟酸2mg/L,批卩多醇2.5mg/L, L-抗坏血酸65mg/L,朽1檬酸72mg/L, L-天冬氨酸140mg/L, L-精氨酸180mg/L,甘氨酸80mg/L,脯氨酸120mg/L, a-萘乙酸2.2mg/L ;鹿糖31000mg/L ;麦饭石颗粒60000mg/L,锗石颗粒60000mg/L,硒矿石颗粒主90000mg/L ;磁化水0.7升;
[0034](4)布袋莲或浮萍干细胞的分离:将液态培养基用lum过滤器过滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌2-3小时,在进行经旋转式真空蒸发器,间接加热60度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之1时取出,再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,20-22小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用。
[0035]进一步地,攀藤寄生植物干细胞的提取方法包括如下步骤:
[0036](1)将攀藤寄生植物用无菌蒸馏水冲洗15分钟,洗净;
[0037](2)固态培养基的制备:
[0038]固态培养基原料为:硝酸钾2510mg,硫酸胺136mg,硫酸镁123mg,硫酸锰10mg,硫酸锌2.5mg,硫酸铜0.026mg,氯化|丐114mg,碘化钾0.7mg,氯化钴0.026mg,磷酸二氢钠131mg,硼酸2.8mg,钥酸钠0.26mg,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg ;肌醇210mg,硫胺素21mg,烟酸2.2mg,批卩多醇2.2mg, L-抗坏血酸52mg,朽1檬酸74mg ;L-天冬氨酸135mg, L-精氨酸176mg,甘氨酸76mg,脯氨酸116mg, α -萘乙酸2.2mg,鹿糖10.lOOmg,活性炭200mg,琼脂
3.lOOmg,磁化水 0.63 升;
[0039]所述固态培养基的制备过程:将无机盐类各养分分别用20mL磁化水稀释,将维生素类合并放入50mL无菌磁化水中稀释,将氨基酸类合并放入50mL无菌磁化水中稀释,将生长素放入10mL无菌磁化水中稀释;然后将稀释后的无机盐类分别注入烧瓶磁化水中,边注入边搅拌,在将糖类、固化剂、活性炭放入,全部溶解后,封口,进行高压灭菌30分钟,降温取出后,在将稀释的维生素和氨基酸溶液、生长素溶液分别放入搅匀后,冷凝;
[0040](3)形成层分离培养:将攀藤寄生植物的主干或叶子用刀切成l-2cm长的小段,移入固态培养基中,在受控的暗室内避光培养28天,培养温度25±1°C ;培养28天后,将形成层细胞群体用接种勺或接种铲轻轻将其移入另一同样培养基器皿内在放大培养23天;
[0041](4)将其放大培养的细胞系群体移入液态培养基中,在暗室中,用旋转摇床以100rpm,25±l°C培养,培养时间为20天;
[0042]其中,液态培养基的组成为:硫酸镁181mg,硫酸锰23mg,硫酸锌8.9mg,硫酸铜0.23mg,硝酸I丐473mg,硝酸胺400mg,氯化I丐60mg,碘化钾995mg,钥酸钠0.24mg,硼酸6mg,磷酸氢钠170mg,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg,肌醇210mg,硫胺素21mg,烟酸2.2mg,卩比卩多醇2.2mg, L-抗坏血酸60mg,梓檬酸75mg ;L-天冬氨酸135mg, L-精氨酸178mg,甘氨酸75mg,脯氨酸116mg, α -萘乙酸2mg,鹿糖30.lOOmg,麦饭石颗粒50000mg,锗石50000mg,磁化水1升;
[0043](5)攀藤寄生植物干细胞的提取:将液态培养基用1.5um过滤器过滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌2小时,再进行经旋转式真空蒸发器,间接加热65度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之1时取出,再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,20小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用。
[0044]进一步地,所述棕榈树精华溶液是通过将棕榈树的种子在650-680°C的温度下蒸2-2.5个小时,然后用15000转/分的粉碎机粉碎,随后注入蒸馏水并发酵10-20天,然后经渣液分离器分离,随后经lum过滤器过滤,滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%蒸发完成,最终制得的溶液;所述布袋莲或浮萍精华溶液是通过将布袋莲或浮萍用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵12-15天,然后经lum过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%制得的溶液;所述攀藤寄生植物精华溶液是通过将攀藤寄生植物用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵15-18天,然后经lum过滤器过滤,滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%制得的溶液;所述竹子精华溶液是通过将竹子的枝干和叶子燃烧后,注入蒸馏水并发酵14-16天,经lum过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%制得的溶液;所述莫兰、印茄精华溶液是通过将莫兰、印茄枝干用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵10-15天,然后经lum过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%制得的溶液。
[0045]本发明还涉及一种蔬菜用有机肥料,该蔬菜用有机肥料由所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法制备而成。
[0046]本发明还涉及一种蔬菜用有机肥料的使用方法,其中将所述制得的蔬菜用有机肥料按照体积比例1: 10-30加入水分稀释后,由机器或人工喷洒在蔬菜的叶子和枝干上。
[0047]本发明的蔬菜用有机肥料及其制备方法的技术效果是:
[0048]1.降低农业成本,价格在市面各类蔬菜肥料中存在优势,食用简便,蔬菜吸收利用率闻;
[0049]2.蔬菜产量增加30%以上,不需要使用其他农药或杀虫剂;
[0050]3.绿色环保,符合有机食品,绿色食品的发展理念。
[0051]4.对土壤有改良和保护作用。
[0052]5.改善植物亚健康状态,使不健康的变健康,并延长植物的寿命。

【具体实施方式】
:
[0053]本发明中的蔬菜用有机肥料制作方法主要包括以下几个步骤:
[0054](1)将质量含量为5-8%的棕榈树精华溶液200份、质量含量为5_8%的竹子精华溶液290份、竹子干细胞50份混合后,然后加入适量蒸馏水并搅拌均匀,35-40 V下发酵7-8天。
[0055](2)在步骤(1)得到发酵混合物中再次混合质量含量为5-8%的热带雨林树木如莫兰、印茄精华溶液100份以及热带雨林树木如莫兰、印茄干细胞30份,加入适量蒸馏水并搅拌均匀,35-45 °C下发酵7-9天。
[0056](3)将质量含量为5-8%的水生植物如布袋莲或浮萍精华180份以及水生植物如布袋莲或浮萍干细胞30份加入步骤(2)得到的混合物中,再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀,35-40°C下发酵8-9天。
[0057](4)将质量含量为5-8%的攀藤寄生植物精华100份以及攀藤寄生植物干细胞20份加入步骤(3)得到的混合物中,再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀,30-35°C下发酵6-8天。
[0058](5)将步骤(4)制得的发酵产物经15000转/分的离心分离机旋转分离两小时,随后30-35°C下发酵6-8天,最终产物即本发明的蔬菜用有机肥料。
[0059]其中,竹子干细胞的提取方法为:
[0060](1)提取竹子干细胞:首先,选择收集生长状况良好的竹子的树干、枝干或竹叶,用无菌蒸馏水冲洗10分钟,洗净后,将竹子的树干或枝干首先切割成长度10-20厘米的小块,然后将整理后的竹子原料放入在搅拌设备中粉碎成细末。
[0061](2)将步骤(1)中粉碎制得的竹子细末原料,放入多个盛有固态培养基的培养器皿中,在受控暗室内培养,培养温度25±1度。
[0062]其中,固态培养基成分的组成为:
[0063]硝酸钾1010mg/L,硫酸镁120mg/L,硫酸猛9.5mg/L,硫酸锌2mg/L,氯化隹丐113mg/L,硫酸铜 0.023mg/L,碘化钾 0.72mg/L,磷酸二氢钠 130mg/L,氯化钴 0.023mg/L,硼酸3.lmg/L,钥酸钠0.24mg/L,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L ;肌醇452mg/L,盐酸噻胺(VB1) 21mg/L,卩比卩多醇(VB6) 1.9mg/L,尼克酸 1.9mg/L, L-抗坏血酸 110mg/L,梓檬酸 114mg/L ;光氨酸170mg/L,酪蛋白水解物51 Omg/L ;鹿糖30.100mg/L ;2,4-D2.5mg/L,赤霉素0.6mg/L ;琼脂 39.000mg/L ;活性碳 3000mg/L ;磁化水 1 升。
[0064](3)形成层细胞的诱导:在初始培养的4-5天内,可直观的观察到来自形成层细胞系的出现,并在14天后,通过去分化形成的无定形愈伤组织已开始从从内皮上下组织构成的形成层中被诱导。在整个培养过程中必须保持25±1度的恒温,培养器皿外空间湿度保持在86±1左右。培养20-30天后,竹子内部组织的细胞系增量放大,形成层细胞系与韧皮组织分离,细胞系组织有大量的液泡存在,并且接触后易碎。
[0065](4)将形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中,在暗室中,用旋转摇床,以100rpm、25±l度下培养,培养时间设定为20天,使液态培养基中的干细胞充分生长,在生长期内始终保持极闻的活力。
[0066]通过在液态培养基中培养20天后,可以看到悬浮液培养时细胞系超过94%的细胞是以单细胞形式存在,而细胞系的形态特征存在大量的液泡,处在未分化状态,竹子干细胞已经充分分裂生长。通过观察发现,在液态培养基中使用小分子磁化活性水、添加了具有内含几十种天然微量元素的麦饭石含有锗元素的矿石对竹子干细胞的分裂和生长极为有效,小分子活性水能增强细胞活力,麦饭石、锗石中固含几十种天然的微量元素,经液流不间断的冲击而冲刷下来溶于培养液中,使培养后期的细胞系细胞群得到天然、安全和足够利用的微量元素的补充。
[0067]其中,液态培养基成分的组成:
[0068]硝酸钾1010mg/L,硫酸镁120mg/L,硫酸猛9.5mg/L,硫酸锌2mg/L,氯化|丐113mg/L,硫酸铜0.023mg/L,碘化钾0.72mg/L,磷酸二氢钠130mg/L,氯化钴0.023mg/L,硼酸3mg/L,钥酸钠0.24mg/L,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L,肌醇200mg/L,盐酸噻胺(VB1) 2lmg/L,吡口多醇(VB6) 1.9mg/L,尼克酸 1.9mg/L, L-抗坏血酸 110mg/L,梓檬酸 148mg/L, 2,4-D2.5mg/L,赤霉素0.lmg/L,天冬氨酸134mg/L,精氨酸180mg/L,脯氨酸118mg/L,甘氨酸60mg/L,色氨酸80mg/L,鹿糖21.000mg/L,麦饭石2000mg/L,锗石2000mg/L,磁化水1升。
[0069](5)竹子干细胞的提取:
[0070]首先,将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤,然后将过滤后的全部细胞、乙醇混合液经另一容器内快速搅拌3小时,在进行经旋转式真空蒸发器,间接加热80度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之一时取出,在放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,30小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用,即成为制作完成的竹子干细胞原料。
[0071]之所以采用植物干细胞来制作有机肥料,是因为植物干细胞是由多种植物及有机物营养,源经独特工艺超强发酵和长期熟化而成的,无毒、无害、无污染的活性微生物有机液体,不含任何化学物质,不含改造基因物质。含有效活菌富有益微生物菌群,活性有机物质及多种微量元素。而且竹子干细胞具有抗病、重生的功效,利于作物生长。
[0072]热带雨林树木如莫兰、印茄干细胞的提取方法:
[0073](1)提取树木枝干的干细胞:首先,选择收集生长状况良好的热带雨林树木的树干,用无菌蒸馏水冲洗10分钟,洗净后,将其数目切割成变长小于20厘米的方块,然后将所述方块放入在搅拌设备中粉碎成细末。
[0074](2)将步骤(1)中粉碎制得的树干细末原料,放入多个盛有固态培养基的培养器皿中,在受控暗室内培养,培养温度25±1度。
[0075]其中,为了节约成本,简化工艺,固态培养基采用竹子干细胞提取过程中同样的培养基。
[0076](3)形成层细胞的诱导:在初始培养的3-5天内,可观察到来自形成层细胞系的出现,并在15天后,通过去分化形成的无定形愈伤组织已开始从从内皮上下组织构成的形成层中被诱导。在整个培养过程中必须保持35±1度的恒温,培养器皿外空间湿度保持在90±1左右。培养15-25天后,树干内部组织的细胞系增量放大,形成层细胞系与韧皮组织分离,细胞系组织有大量的液泡存在,并且接触后易碎。
[0077](4)将形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中,在暗室中,用旋转摇床,以100rpm、35±l度下培养,培养时间设定为16天,使液态培养基中的干细胞充分生长,在生长期内始终保持极闻的活力。
[0078]通过在液态培养基中培养16天后,可以看到悬浮液培养时细胞系超过91 %的细胞是以单细胞形式存在,而细胞系的形态特征存在大量的液泡,处在未分化状态,树干干细胞已经充分分裂生长。
[0079]其中,液态培养基成分同样适用竹子干细胞培养中使用的液态培养基。
[0080](5)热带雨林树木干细胞的提取:
[0081]首先,将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时,在进行经旋转式真空蒸发器,间接加热80度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之一时取出,再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,25-30小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用,即成为制作完成的热带雨林树干干细胞原料。
[0082]热带雨林干细胞具有增加免疫力和自然抵抗力的功效。
[0083]水生植物如布袋莲或浮萍干细胞的提取方法:
[0084](1)将水生植物用无菌水冲洗10分钟,洗净。
[0085](2)制备固态培养基:硝酸钾2500mg/L,硫酸镁122mg/L,硫酸锰llmg/L,硫酸锌2.5mg/L,硫酸铜0.025mg/L,硫酸胺135mg/L。氯化?丐112mg/L,碘化钾0.7mg/L,氯化钴0.025mg/L,磷酸二氢钠 132mg/L,硼酸 2.6mg/L,钥酸钠 0.23mg/L,烟酸 2.0mg/L,吡哆醇
2.lmg/L, L-抗坏血酸53mg/L,梓檬酸78mg/L, L-天冬氨酸140mg/L, L-精氨酸180mg/L,甘氨酸75mg/L,脯氨酸120mg/L。a_萘乙酸2.2mg。鹿糖10.200mg/L。活性炭500mg/L。琼脂3800mg/L。磁化水0.7升。
[0086](3)形成层分离培养:
[0087]将水生植物用小刀切碎后放进固态培养基中,在受控暗室内培养15天,培养温度25 ± 1 °C,随后将形成层细胞系用接种铲轻轻将其移入另一同样培养基培养器皿内,在放大培养20天,最后将其放大培养的细胞系群体移入液态培养基中,在暗室内用摇床旋转培养,在160rpm、25±l°C环境中培养,培养时间设定为20天。
[0088]所述液态培养基的成分为:硫酸钾995mg/L,磷酸氢钾160mg/L,硫酸镁185mg/L,硫酸锌9mg/L,硫酸猛22mg/L,硫酸铜0.25mg/L,氯化|丐7Omg/L,硝酸|丐480mg/L,钥酸钠0.26mg/L,硼酸6.5mg/L,硝酸胺420mg/L,乙二胺四乙酸铁钠盐38mg/L,肌醇230mg/L,硫胺素22mg/L,烟酸2mg/L,批卩多醇2.5mg/L, L-抗坏血酸65mg/L,朽1檬酸72mg/L, L-天冬氨酸140mg/L, L-精氨酸180mg/L,甘氨酸80mg/L,脯氨酸120mg/L, a-萘乙酸2.2mg/L。鹿糖31000mg/Lo麦饭石颗粒60000mg/L,锗石颗粒60000mg/L,硒矿石颗粒主90000mg/L。磁化水0.7升。
[0089](4)水生植物干细胞的分离:将液态培养基用lum过滤器过滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌2-3小时,在进行经旋转式真空蒸发器,间接加热60度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之一时取出,再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,20-22小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用,即成为制作完成的水生植物干细胞原料。
[0090]水生植物干细胞可促进植物的快速生长。
[0091]攀藤寄生植物干细胞的提取方法:
[0092](1)将攀藤寄生植物用无菌蒸馏水冲洗10分钟,洗净。
[0093](2)固态培养基的制备:
[0094]固态培养基原料为:硝酸钾2510mg,硫酸胺136mg,硫酸镁123mg,硫酸锰10mg,硫酸锌2.5mg,硫酸铜0.026mg,氯化|丐114mg,碘化钾0.7mg,氯化钴0.026mg,磷酸二氢钠131mg,硼酸2.8mg,钥酸钠0.26mg,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg。肌醇210mg,硫胺素21mg,烟酸2.2mg,批卩多醇2.2mg, L-抗坏血酸52mg,朽1檬酸74mg。L-天冬氨酸135mg, L-精氨酸176mg,甘氨酸76mg,脯氨酸116mg, α -萘乙酸2.2mg,鹿糖10.lOOmg,活性炭200mg,琼脂
3.100mg,磁化水 0.63 升。
[0095]固态培养基的制备过程:将无机盐类各养分分别用20mL磁化水稀释,将维生素类合并放入50mL无菌磁化水中稀释,将氨基酸类合并放入50mL无菌磁化水中稀释,将生长素放入10mL无菌磁化水中稀释。然后将稀释后的无机盐类分别注入烧瓶磁化水中,边注入边搅拌,在将糖类、固化剂、活性炭放入,全部溶解后,封口,进行高压灭菌30分钟,降温取出后,在将稀释的维生素和氨基酸溶液、生长素溶液分别放入搅匀后,冷凝。
[0096](3)形成层分离培养:将攀藤寄生植物的主干或叶子用刀切成l-2cm长的小段,移入固态培养基中,在受控的暗室内避光培养28天,培养温度25± 1°C。培养28天后,将形成层细胞群体用接种勺或接种铲轻轻将其移入另一同样培养基器皿内在放大培养23天。
[0097](4)将其放大培养的细胞系群体移入液态培养基中,在暗室中,用旋转摇床以100rpm,25±l°C培养,传代时间为20天。
[0098]其中,液态培养基的组成为:硫酸镁181mg,硫酸锰23mg,硫酸锌8.9mg,硫酸铜0.23mg,硝酸I丐473mg,硝酸胺400mg,氯化I丐60mg,碘化钾995mg,钥酸钠0.24mg,硼酸6mg,磷酸氢钠170mg,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg,肌醇210mg,硫胺素21mg,烟酸2.2mg,卩比卩多醇2.2mg, L-抗坏血酸60mg,梓檬酸75mg。L-天冬氨酸135mg, L-精氨酸178mg,甘氨酸75mg,脯氨酸116mg, α -萘乙酸2mg,鹿糖30.lOOmg,麦饭石颗粒50000mg,锗石50000mg,磁化水1升°
[0099](5)攀藤寄生植物干细胞的提取:将液态培养基用1.5um过滤器过滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌2小时,在进行经旋转式真空蒸发器,间接加热65度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之一时取出,再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,20小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用,即成为制作完成的攀藤寄生植物干细胞原料。
[0100]藤寄生植物干细胞具有强生和快速成长的作用效果。
[0101]竹子精华溶液的制备方法:
[0102]将竹子的主干和叶子燃烧后,注入蒸馏水并发酵14-16天,发酵温度控制在35-45°C,然后用渣液分离器分离,随后经lum过滤器过滤,滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%蒸发完成,即为竹子精华溶液。
[0103]热带雨林树木如莫兰、印茄精华溶液的制备方法:
[0104]将热带雨林树木如莫兰、印茄切割成变长小于20厘米的方块,随后用15000转/分的粉碎机将其粉碎,随后注入蒸馏水并发酵10-15天,发酵温度控制在40-45°C,然后经渣液分离器分离,随后经lum过滤器过滤,滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%蒸发完成,即为热带雨林树木精华溶液。
[0105]水生植物如布袋莲或浮萍精华溶液的制备方法:
[0106]将布袋莲或浮萍用15000转/分的粉碎机将其粉碎,随后注入蒸馏水并发酵12-15天,发酵温度控制在26-33°C,然后经渣液分离器分离,随后经lum过滤器过滤,滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%蒸发完成,即为水生植物精华溶液。
[0107]攀藤寄生植物精华溶液的制备方法:
[0108]将攀藤寄生植物用15000转/分的粉碎机将其粉碎,随后注入蒸馏水并发酵15-18天,发酵温度控制在30-35°C,然后经渣液分离器分离,随后经lum过滤器过滤,滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%蒸发完成,即为攀藤寄生植物精华溶液。
[0109]掠桐树精华的制备:
[0110]选择颗粒饱满、质量良好的棕榈树的种子,然后将棕榈树的种子在65-70°C的温度下蒸2-2.5个小时,然后用15000转/分的粉碎机粉碎,随后注入蒸馏水并发酵10-20天,发酵温度控制在35-40°C,然后经渣液分离器分离,随后经lum过滤器过滤,滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%蒸发完成,即为棕榈树精华溶液。
[0111]本发明的蔬菜用有机肥料在使用过程中,使用前先摇匀产品,使用雨水或河水,因为无氯,如用自来水,隔一天后使用。
[0112]随后根据体积比例1: 10-30加入水分来稀释该蔬菜用有机肥料,然后由机器或人工喷洒在蔬菜的叶子和枝干上。
[0113]经实际应用发现,使用本发明的蔬菜用有机肥料后,明显改善植物长势,根系生长旺盛,增强树茎刚强性,抵抗倒伏,增强作物抗旱、抗寒性能,而且有益微生物菌群在植物根系形成优势菌群,使病原微生物难以繁殖,明显减轻纹枯病、瘟病等病害发生。使用本发明的蔬菜用有机肥料后植物果实饱满,明显提高结实率,增加有效穗数,显著增加农作物的产量30%左右。而且使用本发明的蔬菜用有机肥料,避免了普通肥料对土壤的污染,利于土壤的恢复和绿色蔬菜的生产。
[0114]最后说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
【权利要求】
1.一种蔬菜用有机肥料的制备方法,其特征在于,包含以下步骤: (1)以质量份数计,将质量含量为5-8%的棕榈树精华溶液200份、质量含量为5-8%的竹子精华溶液290份、竹子干细胞50份混合后,加入适量蒸馏水并搅拌均匀,35-40°C下发酵7-8天; (2)在步骤(I)得到发酵混合物中再次混合质量含量为5-8%的莫兰或印茄精华溶液100份以及莫兰或印茄干细胞30份,加入适量蒸馏水并搅拌均匀,35-45°C下发酵7-9天; (3)将质量含量为5-8%的布袋莲或浮萍精华溶液180份以及布袋莲或浮萍干细胞30份加入步骤(2)得到的混合物中,再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀,35-40°C下发酵8-9天; (4)将质量含量为5-8%的攀藤寄生植物精华100份以及攀藤寄生植物干细胞20份加入步骤(3)得到的混合物中,再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀,30-35°C下发酵6-8天; (5)将步骤(4)制得的发酵产物经15000转/分的离心分离机旋转分离两小时,随后30-35°C下发酵6-8天,产物即所述蔬菜用有机肥料。
2.如权利要求1所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法,其特征在于:所述竹子干细胞的提取方法包括如下步骤: (1)提取竹子干细胞:选择生长状况良好的竹子的树干、枝干,用无菌蒸馏水冲洗10分钟,洗净后,将竹子的树干、枝干首先切割成长度10-20厘米的小块,然后将整理后的竹子原料放入在搅拌设备中粉碎成细末; (2)将步骤(I)中粉碎制得的竹子细末原料,放入多个盛有固态培养基的培养器皿中,在受控暗室内培养,培养温度25±1度; (3)形成层细胞的诱导:在整个培养过程中保持25±I摄氏度的恒温,培养器皿外空间湿度保持在86± I左右,培养20-30天后,竹子内部组织的细胞系增量放大,形成层细胞系与韧皮组织分离,细胞系组织有大量的液泡存在,并且接触后易碎; (4)将步骤(3)中形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中,在暗室中,用旋转摇床,以100rpm、25±l度下培养,培养时间设定为20天,使液态培养基中的干细胞充分生长,在生长期内始终保持极闻的活力; (5)竹子干细胞的提取:首先,将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时,再进行经旋转式真空蒸发器,间接加热80度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之I时取出,在放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,30小时后,在含水分小于3 %以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用。
3.如权利要求1所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法,其特征在于:所述莫兰或印茄干细胞的提取方法包括如下步骤: (1)提取莫兰或印茄树木枝干的干细胞:选择生长状况良好的莫兰或印茄的树干,用无菌蒸馏水冲洗10分钟,洗净后,将其切割成边长小于20厘米的方块,然后将所述方块放入在搅拌设备中粉碎成细末; (2)将步骤(I)中粉碎制得的树干细末原料,放入多个盛有固态培养基的培养器皿中,在受控暗室内培养,培养温度25±1度; (3)形成层细胞的诱导:在整个培养过程中保持35±I度的恒温,培养器皿外空间湿度保持在90±1左右,培养15-25天后,树干内部组织的细胞系增量放大,形成层细胞系与韧皮组织分离,细胞系组织有大量的液泡存在,并且接触后易碎; (4)将形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中,在暗室中,用旋转摇床,以100rpm、35±l度下培养,培养时间设定为16天,使液态培养基中的干细胞充分生长,在生长期内始终保持极高的活力; (5)莫兰或印茄干细胞的提取:首先,将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时,再进行经旋转式真空蒸发器,间接加热80度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之1时取出,再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,25-30小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用。
4.如权利要求2或3所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法,其特征在于:所述固态培养基成分的组成为:硝酸钾1010mg/L,硫酸镁120mg/L,硫酸锰9.5mg/L,硫酸锌2mg/L,氯化钙113mg/L,硫酸铜0.023mg/L,碘化钾0.72mg/L,磷酸二氢钠130mg/L,氯化钴0.023mg/L,硼酸3.lmg/L,钥酸钠0.24mg/L,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L ;肌醇452mg/L,盐酸噻胺(VB1) 21mg/L,卩比卩多醇(VB6) 1.9mg/L,尼克酸1.9mg/L, L-抗坏血酸110mg/L,梓檬酸114mg/L ;光氨酸 170mg/L,酪蛋白水解物 510mg/L ;鹿糖 30.100mg/L ;2,4~?2.5mg/L,赤霉素0.6mg/L ;琼脂39.000mg/L ;活性碳3000mg/L ;磁化水1升。
5.如权利要求2或3所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法,其特征在于:所述液态培养基成分的组成:硝酸钾1010mg/L,硫酸镁120mg/L,硫酸锰9.5mg/L,硫酸锌2mg/L,氯化钙113mg/L,硫酸铜0.023mg/L,碘化钾0.72mg/L,磷酸二氢钠130mg/L,氯化钴0.023mg/L,硼酸3mg/L,钥酸钠0.24mg/L,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L,肌醇200mg/L,盐酸噻胺(VB1) 21mg/L,卩比卩多醇(VB6) 1.9mg/L,尼克酸 1.9mg/L, L-抗坏血酸 110mg/L,朽1 檬酸 148mg/L,2,4-D2.5mg/L,赤霉素 0.lmg/L,天冬氨酸 134mg/L,精氨酸 180mg/L,脯氨酸 118mg/L,甘氨酸60mg/L,色氨酸80mg/L,鹿糖21.000mg/L,麦饭石2000mg/L,锗石2000mg/L,磁化水1升。
6.如权利要求1所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法,其特征在于:布袋莲或浮萍干细胞的提取方法包括如下步骤: (1)将布袋莲或浮萍用无菌水冲洗10分钟,洗净; (2)制备固态培养基:硝酸钾2500mg/L,硫酸镁122mg/L,硫酸锰1lmg/L,硫酸锌2.5mg/L,硫酸铜0.025mg/L,硫酸胺135mg/L ;氯化隹丐112mg/L,碘化钾0.7mg/L,氯化钴0.025mg/L,磷酸二氢钠 132mg/L,硼酸 2.6mg/L,钥酸钠 0.23mg/L,烟酸 2.0mg/L,吡哆醇2.lmg/L, L-抗坏血酸 53mg/L,梓檬酸 78mg/L, L-天冬氨酸 140mg/L, L-精氨酸 180mg/L,甘氨酸75mg/L,脯氨酸120mg/L ;a_萘乙酸2.2mg ;鹿糖10.200mg/L ;活性炭500mg/ ;琼脂3800mg/L ;磁化水 0.7 升; (3)形成层分离培养:将水生植物用小刀切碎后放进固态培养基中,在受控暗室内培养15天,培养温度25土1°C ;随后将形成层细胞系用接种铲轻轻将其移入另一同样培养基培养器皿内,在放大培养20天,最后将其放大培养的细胞系群体移入液态培养基中,在暗室内用摇床旋转培养,在160rpm、25±l°C环境中培养,培养时间设定为20天; 所述液态培养基的成分为:硫酸钾995mg/L,磷酸氢钾160mg/L,硫酸镁185mg/L,硫酸锌9mg/L,硫酸猛22mg/L,硫酸铜0.25mg/L,氯化|丐70mg/L,硝酸|丐480mg/L,钥酸钠0.26mg/L,硼酸6.5mg/L,硝酸胺420mg/L,乙二胺四乙酸铁钠盐38mg/L,肌醇230mg/L,硫胺素22mg/L,烟酸2mg/L,批卩多醇2.5mg/L, L-抗坏血酸65mg/L,朽1檬酸72mg/L, L-天冬氨酸140mg/L, L-精氨酸180mg/L,甘氨酸80mg/L,脯氨酸120mg/L, a-萘乙酸2.2mg/L ;鹿糖31000mg/L ;麦饭石颗粒60000mg/L,锗石颗粒60000mg/L,硒矿石颗粒主90000mg/L ;磁化水0.7升; (4)布袋莲或浮萍干细胞的分离:将液态培养基用Ium过滤器过滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌2-3小时,在进行经旋转式真空蒸发器,间接加热60度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之I时取出,再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,20-22小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用。
7.如权利要求1所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法,其特征在于:攀藤寄生植物干细胞的提取方法包括如下步骤: (1)将攀藤寄生植物用无菌蒸馏水冲洗15分钟,洗净; (2)固态培养基的制备: 固态培养基原料为:硝酸钾2510mg,硫酸胺136mg,硫酸镁123mg,硫酸锰10mg,硫酸锌2.5mg,硫酸铜0.026mg,氯化I丐114mg,碘化钾0.7mg,氯化钴0.026mg,磷酸二氢钠131mg,硼酸2.8mg,钥酸钠0.26mg,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg ;肌醇210mg,硫胺素21mg,烟酸2.2mg,批口多醇2.2mg, L-抗坏血酸52mg,朽1檬酸74mg ;L-天冬氨酸135mg, L-精氨酸176mg,甘氨酸 76mg,脯氨酸 116mg, α -萘乙酸 2.2mg,鹿糖 10.lOOmg,活性炭 200mg,琼脂 3.1OOmg, Wl化水0.63升; 所述固态培养基的制备过程:将无机盐类各养分分别用20mL磁化水稀释,将维生素类合并放入50mL无菌磁化水中稀释,将氨基酸类合并放入50mL无菌磁化水中稀释,将生长素放入1mL无菌磁化水中稀释;然后将稀释后的无机盐类分别注入烧瓶磁化水中,边注入边搅拌,在将糖类、固化剂、活性炭放入,全部溶解后,封口,进行高压灭菌30分钟,降温取出后,在将稀释的维生素和氨基酸溶液、生长素溶液分别放入搅匀后,冷凝; (3)形成层分离培养:将攀藤寄生植物的主干或叶子用刀切成l-2cm长的小段,移入固态培养基中,在受控的暗室内避光培养28天,培养温度25±1°C ;培养28天后,将形成层细胞群体用接种勺或接种铲轻轻将其移入另一同样培养基器皿内在放大培养23天; (4)将其放大培养的细胞系群体移入液态培养基中,在暗室中,用旋转摇床以lOOrpm,25±1°C培养,培养时间为20天; 其中,液态培养基的组成为:硫酸镁181mg,硫酸锰23mg,硫酸锌8.9mg,硫酸铜0.23mg,硝酸韩473mg,硝酸胺400mg,氯化韩60mg,碘化钾995mg,钥酸钠0.24mg,硼酸6mg,磷酸氢钠170mg,乙二胺四乙酸铁钠盐37mg,肌醇210mg,硫胺素21mg,烟酸2.2mg,卩比卩多醇2.2mg,L-抗坏血酸60mg,梓檬酸75mg ;L-天冬氨酸135mg, L-精氨酸178mg,甘氨酸75mg,脯氨酸116mg, α -萘乙酸2mg,鹿糖30.1OOmg,麦饭石颗粒50000mg,锗石50000mg,磁化水I升; (5)攀藤寄生植物干细胞的提取:将液态培养基用1.5um过滤器过滤,然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌2小时,再进行经旋转式真空蒸发器,间接加热65度进行旋转吸空蒸发,浓缩至小于原体液5分之I时取出,再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥,20小时后,在含水分小于3%以下时取出,粉碎100目,装袋收藏备用。
8.如权利要求1所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法,其特征在于:所述棕榈树精华溶液是通过将棕榈树的种子在650-680°C的温度下蒸2-2.5个小时,然后用15000转/分的粉碎机粉碎,随后注入蒸馏水并发酵10-20天,然后经渣液分离器分离,随后经Ium过滤器过滤,滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%蒸发完成,最终制得的溶液;所述布袋莲或浮萍精华溶液是通过将布袋莲或浮萍用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵12-15天,然后经Ium过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%制得的溶液;所述攀藤寄生植物精华溶液是通过将攀藤寄生植物用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵15-18天,然后经Ium过滤器过滤,滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%制得的溶液;所述竹子精华溶液是通过将竹子的枝干和叶子燃烧后,注入蒸馏水并发酵14-16天,经Ium过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%制得的溶液;所述莫兰、印茄精华溶液是通过将莫兰、印茄枝干用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵10-15天,然后经Ium过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发,浓缩至矿物质含量为5-8%制得的溶液。
9.一种蔬菜用有机肥料,其特征在于:该蔬菜用有机肥料由权利要求1-8任一所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法制备而成。
10.一种蔬菜用有机肥料的使用方法,其特征在于:将权利要求9中制得的蔬菜用有机肥料按照体积比例1: 10-30加入水分稀释后,由机器或人工喷洒在蔬菜的叶子和枝干上。
【文档编号】C12N5/04GK104230403SQ201410505136
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年9月28日 优先权日:2014年9月28日
【发明者】唐蘋, 邱明全 申请人:深圳前海万物生生物科技控股有限公司
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