本发明涉及一种抗疲劳保健品及其制备方法，具体来说是涉及一种含有人参的抗疲劳保健品组方及其制备方法。
背景技术：
疲劳作为一种生理现象，是指“机体的生理过程，不能将其机能保持在一特定水平或者各器官不能维持其预定的运动强度”。疲劳是一个涉及许多生理化因素的综合性生理过程，是人体脑力或体力活动到一定阶段时必然出现的一种生理现象，它标志着机体原有工作能力的暂时下降，又可能是机体发展到伤病状态的先兆。人体感到疲劳，虽然不像癌症、心脏病，来势迅猛，直接而迅速地造成死亡，但它作为一种危害现代人健康的隐形杀手，已严重影响了人们的工作和生活，大大增加了亚健康人群数量。
随着社会的进步、生活节奏及工作强度的不断加快和加大，“疲劳”和“过劳”日益受到重视。疲劳发生后如果得不到及时的缓解，将会逐渐积累，最终导致过劳，出现慢性疲劳综合症。疲劳综合症可出现：不易消除的疲惫、厌倦、烦躁、注意力不集中、不明原因的心慌意乱、头晕、头痛、便秘或腹泻、皮肤出现色斑、厌食、腹胀、性能力下降、高血压、高血脂、脂肪肝等。在美国已有14%的成年男性和29%的妇女有着慢性疲劳综合症；日本工作人口中有30%以上遭受此症袭击，其中有40%的人不能正常工作和学习。我国亦有越来越多的人群经受此症的困扰，如从事科研、IT行业人士及记者、演艺人员、市场营销者，国家中高层公务员，企业中高层管理者等。
目前市场上缓解体力疲劳的产品大致可以分为以下几类：第一是补充能量；第二是补充人体必需的维生素和微量元素；第三是通过提高机体器官的功能，特别是循环系统的功能，加速体内代谢物质的清除、排除，来达到缓解体力疲劳的目的。据SFDA官网查询，目前国家食品药品监督管理总局批准缓解体力疲劳保健食品951个，其中国产保健食品927个，进口保健食品24个。此类保健品常用原料有：人参、西洋参、刺五加、当归、黄芪、红景天、枸杞、葛根、灵芝等中药，以及二十八醇、牛磺酸、鱼鳃胶、麦芽油、咖啡因、牡蛎提取物等。
技术实现要素：
本发明保健品以人参、刺五加、杜仲叶为原料，人参大补元气，复脉固脱，补脾益肺；刺五加益气健脾，补肾安神；杜仲叶补肝肾、强筋骨。三味原料共同配合，使得人体肝脾肾三脏得补，提高机体器官的功能，从而达到缓解体力疲劳的功效。
本品所选原料人参、刺五加、杜仲叶均收载于“卫法监发［2002］51号”附件2“可用于保健食品的物品名单”中，原料安全。且本品是以中医理论为基础，以期在缓解体力疲劳方面发挥应有的保健功效。保健功能明确，无配伍禁忌。
在筛选本品配方中，我们从原料合法性、保健功能、可行性等几个方面进行了考察，最后筛选出本配方。
人参自古以来就是保健珍品，已有数千年的药用和保健历史。刺五加从古至今即被视为具有添精补髓及抗衰老作用的良药，可益气健脾，补肾安神。杜仲叶具有补肝肾、强筋骨之功效。
配方中人参大补元气，复脉固脱，补脾益肺为君；刺五加益气健脾，补肾安神；杜仲叶补肝肾，强筋骨，共为臣。综上，上述原料配合使用，全方健脾补气，补肾安神，养肝益血，使得人体肝脾肾三脏得补，共同配合缓解体力疲劳。
本发明所述的含有人参的保健食品，其特征在于所述饮料各主料的重量份如下：刺五加800-1200份、杜仲叶500-700份、人参100-300份。
优选的，本发明保健食品各主料的重量份如下：刺五加800份、杜仲叶700份、人参100份。
优选的，本发明保健食品主料的重量份也可为：刺五加1200份、杜仲叶500份、人参300份。
优选的，本发明保健食品主料的重量份也可为：刺五加1000份、杜仲叶667份、人参217份。
优选的，本发明保健食品主料的重量份也可为：刺五加1080份、杜仲叶658份、人参228份。
本发明所述的保健食品，还包括制剂所需要的辅料，辅料为淀粉，所用的淀粉为玉米淀粉或红薯淀粉。辅料所占的份数50-70份，优选的，淀粉可以为50份，59份，66份或70份。
本发明所述的保健食品的制剂剂型可以为胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂或膏剂。
本发明所述的保健食品，其胶囊剂的制备方法包括以下步骤：
a、原料预处理：人参粉碎，过筛，人参粉碎粉备用；
b、提取：按配方量称取刺五加和杜仲叶，加入8-12倍量的水提取1-2次，提取液过滤，每次1-2小时，合并水提液，备用；
c、浓缩：将步骤b所得的水提液浓缩，浓缩液备用；
d、干燥：将步骤c所得的浓缩液干燥，干膏备用；
e、粉碎：将步骤d所得的干膏粉碎过筛，备用；
f、混合：将步骤a所得的人参粉碎粉灭菌，加入步骤e所得的粉碎粉及淀粉，混合均匀，得混合粉备用；
g、制粒：将步骤e所得的混合粉制粒，颗粒备用；
h、将步骤g所得的颗粒充填胶囊、包装、检验即得。
优选的胶囊剂的制备方法包括以下步骤：
a、原料预处理：人参粉碎，过80目筛，辐照，人参粉碎灭菌粉备用；
b、提取：按配方量称取刺五加和杜仲叶，水提取2次，第一次12倍量，第二次10倍量，每次提取1小时，过滤，水提液备用；
c、浓缩：将步骤b所得的水提液在温度60-80度，真空度为0.04-0.10Mpa条件下浓缩至60度热测相对密度为1.10-1.20的浓缩液备用；
d、干燥：将步骤c所得的浓缩液真空干燥，温度为60-80度，真空度为0.04-0.10Mpa，得到干膏备用；
e、粉碎：将步骤d所得的干膏粉碎过80目筛，备用；
f、混合：将步骤a所得的人参粉碎灭菌粉，加入步骤e所得的粉碎粉及淀粉，混合均匀，得混合粉备用；
g、制粒：将步骤e所得的混合粉干法制粒，得颗粒备用；
h、将步骤g所得的颗粒充填胶囊、包装、检验即得。
优选的，颗粒剂的制备方法如下：
a、原料预处理：人参粉碎，过80目筛，辐照，人参粉碎灭菌粉备用；
b、提取：按配方量称取刺五加和杜仲叶，水提取2次，第一次12倍量，第二次10倍量，每次提取1小时，过滤，水提液备用；
c、浓缩：将步骤b所得的水提液在温度60-80度，真空度为0.04-0.10Mpa条件下浓缩至60度热测相对密度为1.10-1.20的浓缩液备用；
d、干燥：将步骤c所得的浓缩液真空干燥，温度为60-80度，真空度为0.04-0.10Mpa，得到干膏备用；
e、粉碎：将步骤d所得的干膏粉碎过80目筛，备用；
f、混合：将步骤a所得的人参粉碎灭菌粉，加入步骤e所得的粉碎粉及淀粉，混合均匀，得混合粉备用；
g、制粒：将步骤e所得的混合粉干法制粒，整粒，包装、检验即得。
本产品工艺采用常规的胶囊剂生产工艺：①人参→粉碎→灭菌；②刺五加、杜仲叶→水提、过滤→水提液浓缩、干燥、粉碎；③人参粉、干膏粉、玉米淀粉→混合→制粒→整粒→总混→充填→抛光→挑选→包装→检验入库。
工艺参数确定
1、人参粉碎
取净选、干燥后的人参三份，每份重1000g，粉碎，过80目筛（因人参为贵重药材，粉碎装胶囊大部分为过80目筛），收集细粉，称重，计算出粉率。由试验结果可知，人参平行粉碎3次，出粉率均在97%以上，平均出粉率为97.3%。
2、人参粉灭菌工艺研究
因本品中人参为直接打粉，需对人参粉进行灭菌。本品采用60Co辐照进行灭菌。考察不同辐照剂量对人参粉微生物限度及总皂苷含量的影响，结果显示，60Co辐照剂量在0~5kGy范围内，总皂苷的含量无明显变化，但细菌、霉菌及酵母菌的数量，随着辐照剂量的增加而逐渐的减少，当辐照剂量达4kGy时，微生物各项指标均符合要求，因此，确定混合粉60Co辐照剂量为4kGy。
3、提取
（1）吸水率的考察
按配方比例称取刺五加、杜仲叶饮片，加10倍量水，浸泡至完全浸透，浸泡液过滤，测量体积，计算吸水率。实验结果显示，刺五加、杜仲叶饮片吸水率为1.91ml/g，约为2倍药材重量的吸水量，提示在后续提取时，第一次应多加2倍溶媒。
（2）正交试验设计
配方中刺五加、杜仲叶饮片，加水煎煮，提取液过滤、浓缩、干燥，对其提取工艺采取正交设计法以提取液中总皂苷含量为指标进行考察。
以总皂苷的含量为考察指标，直观分析表明，三个因素的影响顺序为A（提取次数）＞B（提取时间）＞C（溶媒用量），直观分析的最佳工艺条件为， 10倍量水回流提取3次，每次2小时。方差分析表明， B、C因素没有显著性影响，A因素有显著性影响。B因素中，随着提取时间的增加，总皂苷的含量无显著性变化；C因素中不同倍量的提取溶媒，总皂苷的含量无显著性变化；A因素中，提取次数为1次和2次时提取液中总皂苷含量的差异较大，而提取次数为2次和3次时提取液中总皂苷含量的差异已明显减小。因此确定优选工艺条件。
综合考虑后期实际生产及生产成本因素，提取次数选择2次，提取时间选取1小时更为适宜。因此确定刺五加、杜仲叶提取工艺为加热回流提取2次，每次1小时，第一次加12倍量水，第二次加10倍量水。
4浓缩工艺参数确定
按确定的提取工艺进行提取，提取液分别在60℃、70℃、80℃下进行减压浓缩，浓缩至相对密度为1.10~1.20（60℃）时取出，测定总皂苷含量并计算转移率。由结果可知，浓缩温度在60~80℃范围内，浓缩液中总皂苷转移率均很高，因此将浓缩温度选定为60~80℃。
浓缩工艺参数如下：浓缩方式：减压浓缩；浓缩温度：60~80℃；真空度：0.04~0.08 MPa；浓缩液相对密度：1.10~1.20（60℃测）。
5干燥工艺参数确定
取浓缩液于60℃、70℃、80℃下进行真空干燥，测定干膏粉中总皂苷含量并计算转移率。由结果可知，浓缩温度在60~80℃范围内，干膏粉中总皂苷转移率均很高，因此确定干燥温度为60~80℃。
干燥参数确定如下：干燥方式：真空干燥；干燥温度：60~80；真空度：0.04~0.10 MPa。
6干膏粉碎
将制备好的干膏置粉碎机内进行粉碎。筛网目数：80目。
7制粒工艺研究
常用的制粒方式有湿法制粒和干法制粒，湿法制粒工序较复杂，物料加入黏合剂后需再烘干，生产周期长。干法制粒制粒过程则无需添加黏合剂，省略了混合制软材、干燥等过程，缩短了工艺路线和生产周期，节约了成本。因此本产品采用干法制粒技术。
为改善制粒效果，考虑加入玉米淀粉作为淀粉。取混合粉5份，分别加入玉米淀粉量为10%、13%、15%、17%、20%，混合均匀后，分别于0.0~0.1mm压轮间隙参数下进行制粒，根据制粒效果来确定最终的玉米淀粉加入量，由实验结果可知，当玉米淀粉加入量至17%时，混合粉制粒效果最好。
8混合时间考察
取人参粉、干膏粉、玉米淀粉，置混合机内，于混合时间15、25、35分钟时分别取样，每个时间点于混合机不同位置平行取样5份，分别测定样品中总皂苷含量，并计算RSD值，根据测定结果来确定最佳的混合时间，由实验结果可知，三个不同时间点取样，每个时间段平行的5份样品中总皂苷含量差别不大，综合考虑生产成本因素，确定混合时间为15分钟。
9压轮间距工艺参数的考察
取制备好的混合粉，平行三份，考察干法制粒压轮间距工艺参数，结果
结果表明，压轮间距控制在0.0~0.1mm时制粒效果好。将压轮间距为0.0~0.1mm范围内所制得的颗粒过1.5mm的锥形筛网整粒，用固定漏斗法测定颗粒的堆密度及休止角，干法制粒所得颗粒，堆密度为0.6751，休止角为37.11°，符合生产流动性的需求，可直接充填胶囊。
干法制粒工艺参数确定如下：玉米淀粉加入量：17%；物料混合时间：15min；压轮间距：0.0~0.1mm，整粒筛网目数：1.5mm。
10产品形态与剂型选择的科学性、合理性、可行性及依据产品形态与剂型的选择主要根据原料的性质、功效作用、服用期的长短及服用者的状况而定。本产品的剂型选择为胶囊剂，其理由如下：
（1）本品所用原料在经过粉碎，提取，浓缩，干燥，混合，制粒等一系列工艺后，得到流动性，堆密度均适合的颗粒，适合采用工业化自动设备装填胶囊。
（2）胶囊剂是目前临床应用最广泛的剂型之一，其制备工艺简单、外表整洁、美观，具有剂量准确、应用方便、质量稳定、生产机械化、自动化程度高的优点。
（3）胶囊剂整洁、美观，可以掩盖药物的不良气味。本品有的原料直接打粉，有的原料以水提取、浓缩、干燥，因此，内容物会有本品特有的气味，且粉末颜色不太美观，装成胶囊后，不仅可以掩盖原料本身一些气味，整体看起来整洁、美观，提高了服用顺应性。
本发明保健食品安全无毒，且具有抗疲劳的保健效果，为了验证本发明保健食品的上述效果，发明人将通过实施例4制得的成品，送福建疾控中心进行检验，检验结果及判定意见:
检验结果及判定意见:
1、急性毒性试验:该样品急性毒性试验结果为LD50> 20g/kg BW (相当于成人日推荐量的444倍) ，根据急性毒性分级属于无毒级。
2 、Ames试验:该样品Ames试验结果为阴性。
3 、骨髓细胞微核试验:该样品小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性。
4 、小鼠精子畸形试验:该样品小鼠精于畸形试验结果为阴性。
检验报告：急性毒性试验
一、材料:
1 、样品: 本发明保健食品内容物，成人日推荐量为2.7g，相当于0.045g/kg BW (成人体重以60kg计) 。
2 、动物:选用上海斯莱克实验动物有限责任公司提供的清洁级健康ICR小鼠，许可证号: SCXK (沪) 2012-0002。
3 、饲料:用于土海普路腾生物科技有限公司，许可证号:沪饲证(2014) 04001。
4 、饲养环境:福建省疾病预防控制中心SPF级动物实验室，许可证号SYXK (闽) 2012-0008。
5 、检测仪器:电子天平。
二、实验方法:
选取18-22g健康ICR小鼠20只，雌雄各半。试验前小鼠隔夜禁食16小时，不禁水。称取本发明保健食品内容物20g加蒸馏水至40mL搅拌均匀，以经口灌胃方式间隔4h给予2次，灌胃容量为0.02mL/g BW，试验剂量为20g/kg BW。灌胃后，连续观察14天，观察并记录动物中毒的表现和死亡情况。
三、结果:
试验期间动物未见异常;观察期结束后存活动物进行大体解剖，动物未见异常。结果见表1 。
四、结论
该样品急性毒性试验结果为LD50>20g/kg BW (相当于成人日推荐量的444倍) ，根据急性毒性分级属无毒级。
检验项目：Ames试验
一、材料：
1、样品：本发明保健食品内容物。
2 、阳性物2，4，7-TNFone 、NaN3、MMC 、2-AF 、1，8- 二羟基蒽醌。
3 、溶剂:蒸馏水， 0.103MPa20min灭菌。
4 、检测仪器: BSC-1360IIA2生物安全柜、SHP-250生化培养箱、DK-S28电热恒温水温箱、电子天平、SS-325 型自动高压灭菌器、自动菌落计数仪。
二、实验方法:
采用经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门氏组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100和TA102 四株菌株进行试验。采用多氯联苯诱导的大鼠肝匀浆作为体外代谢活化系统。称取本发明保健食品内容物5.0g加溶剂至100mL做为高剂量受试物，量取高剂量20mL加溶剂至100 mL搅拌均匀做为次高剂量受试物，以下三个剂量如此类推配制，由高到低配成5000 、1000 、200 、40 、8ug/皿5个浓度，经0.055MPa20min 灭菌，同时设自发回变组、溶剂对照组和阳性对照组，每个剂量设3个平皿。在顶层琼脂中加入0.1 mL 测试菌株增菌液、0.1mL受试物溶液和0.5mLS-9混合液(当需要代谢活化时) ，混匀后倒入底层培养基平板上，在37℃培养48小时，计数每皿回变菌落数，试验重复一次。如果样品的回变菌落数是溶剂对照组回变菌落数2倍以上，并具有剂量反应关系则定为试验结果阳性。
结果:
由表2、3可见，该样品各剂量组的回变菌落数均未超过溶剂对照组回变菌落数的2倍。
四、结论:
该样品的Ames 试验结果为阴性。
检验项目: 骨髓细胞微核试验
一、材料:
1、样品: 本发明保健食品内容物，成人日推荐量为2.7g，相当于0.045g/kg BW (成人体重以60kg计) 。
2、动物:购自上海斯莱克实验动物有限责任公司生产的清洁级健康ICR小鼠，许可证号: SCXK (沪) 2012-0002 。
3、饲料:上海普路腾生物科技有限公司，许可证号:沪饲证(2014) 04001。
4、饲养环境:福建省疾病预防控制中心SPF级动物实验室，许可证号: SYXK (闽) 2012-0008。
5、阳性对照物:环磷酰胺(40mg/kgBW)。
6 、溶剂对照物:蒸馏水。
7 、检测仪器: OlympusCH显微镜、电子天平。
二、实验方法:
采用间隔24小时两次经口灌胃进行试验，选取体重25-30g健康小鼠50只，雌雄各半，各性别小鼠按体重随机分成5组，每组5只，试验设3个剂量组为2.5，5.0，10.Og/kg BW，相当于成人推荐量的55、111、222倍;另设溶剂对照组、阳性对照组。分别称取本发明保健食品内容物2.5、5.0、10.Og各加蒸馏水至20mL配成3个浓度，各组动物分别按0.02mL/gBW间隔24h灌胃给予不同浓度的受试物及对照物2 次，末次灌胃6小时后脱颈椎处死动物，取胸骨骨髓用小牛血清稀释涂片，经甲醇固定,Giemsa染色。在光学显做镜下观察，每只动物计数1000个嗜多染红细胞，微核发生率以含微核PCE千分率计，按x2检验进行统计分析。同时计数200个PCE,求出PCE/NCE值。
三、结果:
由表4可见，该样品各剂量组PCE/NCE未少于溶剂对照组的20% ，提示骨髓红细胞系统的增殖并无明显抑制，对嗜多染红细胞微核的观察无明显影响。阳性对照组微核发生率明显高于溶剂对照组，差异有统计学意义(P<O.O1) ,而样品各剂量组与溶剂对照组比较差异无统计学意义(p>0.05),说明该样品未表现出使小鼠骨髓PCE微核率上升的致突变效应。
四、结论：
该样品小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性。
检验项目: 小鼠精子畸形试验
一、材料:
1 、样品: 本发明保健品内容物，成人日推荐量为2.7g，相当于0.045g/kg BW (成人体重以60kg计)。
2 、动物:购自上海斯莱克实验动物有限责任公司生产的清洁级健康ICR小鼠，许可证号: SCXK (沪) 2012-0002。
3 、饲料:上海普路腾生物科技有限公司，许可证号:沪饲证(2014) 04001。
4 、饲养环境，福建省疾病预防控制中心S PF 级动物实验室，许可证号: SYXK (闽) 2012-0008.
5 、阳性对照物：环磷酰胺( 40 mg/kg BW ) 。
6 、溶剂对照物:蒸馏水。
7 、检测仪器: Olympus CH 显微镜、电子天平。
二、实验方法:
选用体重25-30g性成熟雄性小鼠25只，按体重随机分成5组，每组5只，试验设3个剂量组为2.5、5.0、10.0g/kg BW ,相当于成人推荐量的55、111 、222 倍，另设溶剂对照组、阳性对照组。分别称取本发明保健食品内容物2.5 、5.0 、10.0g各加蒸馏水至20mL 配成3个浓度、各组动物分别按0.02 mL/g BW 灌胃给予不同浓度的受试物及对照物，连续5天。于首次灌胃后35天，处死动物，取双侧附睾尾按标准程序制片、染色，显微镜下每只动物观察1000个完整精子，记录各类畸形椅子数，计算精子畸变发生率，按x2检验进行统计分析。
三、结果:
由表5可见，该样品各剂量组与溶剂对照组比较，差异无统计学意义(P> 0. 05)，阳性对照组与溶剂对照组比较，差异有统计学意义(P<0.01)。样品对小鼠精子畸形发生率未产生明显改变，提示该样品对小鼠精子不产生畸变作用。
四、结论：该样品小鼠精子畸形试验结果为阴性。
检验项目:30天喂养试验
本发明保健品各剂量组给予大鼠喂养30天,试验期间,各组动物生长活动正常，各剂量组大鼠各周体重、进食量、食物利用率及实验结束时体重、体重增重、总进食量、总食物利用率、脏体比与对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。雄性高剂量组红细胞计数;雌性低剂量组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血糖、总胆固醇与对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05 )，但均在本实验室正常值范围内，本实验室认为无生物学意义。其余各剂量组大鼠的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酣、血糖、总胆固醇、甘油三醋、总蛋白、白蛋白测定值、血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数和白细胞分类与对照组相比差异均无统计学意义( P> 0.05 )。对受检脏器作组织病理学检查，未见特异性病变。
1 材料及方法
1.1 样品:本发明保健食品内容物，委托方提供胶囊内容物供试。成人日推荐量为2.7g,相当于0.045g/kg BW (成人体重以60kg计)。临用前称取样品90g加蒸馏水至200mL搅拌均匀，作为高剂量组受试物;量取高剂量组受试物按1/2倍比递减稀释配成中、低剂量组受试物，搅拌均匀，供试。
1.2 实验动物:选用上海斯莱克实验动物有限责任公司提供的清洁级SD大鼠80 只，雌雄各半，体重72-83g。许可证号: SCXK (沪) 2012-0002。
1.3饲养环境:福建省疾病预防控制中心SPF级动物实验室，许可证号: SYXK (闽) 2012-0008 。
1.4 饲料:饲料购自上海普路腾生物科技有限公司，许可证号: 沪饲证(2014) 04001。
1.5 仪器: 日立7060C全自动生化分析仪、SHANDON EXCELSIOR 生物细胞自动脱水机、BM-Vl生物组织冷冻包埋机、SHANDON Finesse325 石腊切片机、CS-IV 摊片烤片机、电热鼓风干燥箱、OLYMPUS BX-51 显微镜、CELLDUN3700雅培血球分析仪、全自动染色机、电子天平。
1.6 试验方法:各性别动物按体重随机分成4组，每组各10只。试验按受试物人日推荐量的25、50 和100倍，设3 个剂量组为1. 12 、2.2 5 、4.50g/kg BW ，另设蒸馏水为空白对照组。因样品味苦，以经口灌胃方式给予，每日按10mL/kg体重经口灌胃给予不同浓度受试物及对照物一次。试验期间动物单笼喂养，自由进食饮水，每天观察动物形态，记录饲料洒漏量，每周记录一次体重和2次食物摄入量。喂养30天禁食过夜后动物称重，采血作血常规及生化指标测定，取出肝、肾、牌、睾丸称重，并对肝、肾、脾、胃肠、辜九、卵巢作病理学检查。
1.7 观察指标：
1.7.1 动物的一般表现、体重、进食量、食物利用率。
1.7.2 血常规及生化指标:红细胞计数、白细胞计数、白细胞分类、血红蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酣、总胆固醇、甘油三醋、血糖、总蛋白、白蛋白。
1.7.3 病理解剖:脏体比、大体观察及病理组织学检查(肝、脾、肾、胃肠、辜丸和卵巢)。
1.8 实验数据统计方法:实验数据以SPSS软件进行单因素方差分析。经方差齐性检验，方差齐的实验数据采用LSD法进行统计分析，方差不齐的实验数据采用Tambane 法进行统计分析。
2 结果
2.1 一般形态观察:
本发明保健食品内容物3个剂量组的大鼠毛质白、有光泽，外观形态与对照组比较无区别，也无死亡现象。
2.2 动物休重增长与食物利用率:
由表6、7、8可见，实验期间，各剂量组大鼠各周体重、进食量、食物利用率及实验结束时体重、体重增重、总进食量、总食物利用率与对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05) 。
2．3血常规检查结果
由表9可见，雄性高剂量组红细胞计数细胞与对照组相比，差异有统计学意义( P < 0.05 )，但在本实验室正常值范围内，本实验室认为无生物学意义。其余各剂量组的血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数和白细胞分类与对照组比较、差异均无统计学意义(P > 0.05 )。
2.4 血清生化检验结果
由表10可见，雌性低剂量组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血糖、总胆固醇与对照组相比，差异有统计学意义( P < 0.05 )，但均在本实验室正常值范围内，本实验室认为无生物学意义。其余各剂量组大鼠的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐、总胆固醇、甘油三酯、血糖、总蛋白、白蛋白与对照组比较，差异均无统计学意义(P > 0 .05 ) 。
2. 5 对大鼠脏体比的影响:
由表11可见，各剂量组大鼠禁食后体重、脏体比与对照组比较，差异均无统计学意义( P> O. 05 )。
2.6 病理组织学检查
2.6.1 各剂量组动物大体检查未发现明显病变，且生化指标未见异常，因此仅选对照组及高剂量组作组织病理学检查。
2.6.2 结果描述:
肝:正常肝小叶结构存在，肝细胞无明显肿胀及颗粒变性，个别肝细胞胞浆内出现少许细小的脂肪空泡，呈轻度脂肪变，这种脂变肝细胞呈散在小灶分布，范围小。肝细胞无坏死改变。个别肝汇管区见淋巴细胞等炎细胞浸润，无纤维组织增生，胆管未见异常。
胃和十二指肠:粘膜完整，无明显出血、坏死、靡烂、y贵殇及炎细胞浸润，无明显腺体增生萎缩改变。肾: 肾皮髓质结构清楚，个别肾小管轻度肿胀及空泡变性，个别肾间质中有灶性炎细胞浸润，个别肾小管内可见管型。
脾:脾白髓、红髓结构清楚，白髓、红髓无明显扩张或萎缩现象。
睾丸:曲细精管正常，可见各级生精细胞及成熟精子，个别睾丸间质轻度水肿。卵巢:发育正常，可见各级卵泡和成熟黄体。
总之，以上病理学改变仅在个别动物中发生，各组标本病理变化无明显差异，因此认为被检脏器未见与受试物有关的病理学改变(各组标本病理变化详见表12)。
3 小结
本发明保健食品各剂量组给予大鼠喂养30天，试验期间，各组动物生长活动正常，各剂量组大鼠各周体重、进食量、食物利用率及实验结束时体重、体重增重、总进食量、总食物利用率、脏体比与对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。雄性高剂量组红细胞计数; 雌性低剂量组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血糖、总胆固醇与对照组相比，差异有统计学意义(P <0.05)，但均在本实验室正常值范围内，本实验室认为无生物学意义。其余各剂量组大鼠的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐、血糖、总胆固醇、甘油三脂、总蛋白、白蛋白测定值、血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数和白细胞分类与对照组相比差异均无统计学意义( P> 0. 05 ) 。对受检脏器作组织病理学检查，未见特异性病变。
检验项目：缓解体力疲劳功能试验：
结果：经口灌胃给予小鼠不同剂量的本发明保健食品30天后，结果能延长小鼠负重游泳时间;减少小鼠运动后产生的血清尿素含量;减少小鼠血乳酸曲线下面积，且对小鼠体重增长无影响。说明该样品具有缓解体力疲劳作用。
样品名称: 本发明保健食品检验项目: 缓解体力疲劳功能试验
1. 材料和方法:
1.1 样品: 本发明保健食品内容物，每次称取样品5.4g加蒸馏水至80mL搅拌均匀，配成高剂量组受试物；量取20mL高剂量组受试物加蒸馏水至60 mL搅拌均匀，配成中剂量组受试物；量取20mL中剂量组受试物加蒸馏水至40mL搅拌均匀配成低剂量组受试物。
1.2 实验动物:上海斯莱克实验动物有限责任公司提供的清洁级ICR健康雄性小鼠160只，许可证号: SCXK(沪)2012-0002 ，体重18 - 22g。本实验将动物分为四组( 1 组进行负重游泳实验、2 组进行血清尿素实验、3组进行肝糖原实验、4组进行血乳酸实验) ，每组40只动物。
1.3剂量选择:该样品成人日推荐量为2.7g ，即0.045 g/kg BW (成人体重以60 kg计)，按推荐用量的5倍、10倍、3 0倍设三个剂量组: 0.225 g/kg B W 、0 .450 g/kg BW 和1.35 g/kg BW ，另设蒸馏水为溶剂对照组。
1.4 饲养环境:福建省疾控中心SPF 级动物实验室，许可证号: SYXK (闽) 2012-0008 。
1.5 饲料:购于上海普路腾生物科技有限公司，许可证号:沪饲证(2014) 04001 。
1.6 给药途径:动物每日称重，并按2.0 mL/100g体重经口灌胃给予蒸馏水、低、中、高剂量组受试物，连续30天。
1.7 仪器与试剂:游泳箱(50 x 50 x 40 cm) 、电子天平、铅皮，UI800紫外可见分光光度计，日立7060型全自动生化分析仪， BECKMAN model TJ-6 离心机。尿素试剂，浓硫酸，5 % 的三氯醋酸(TCA) ，葡萄糖标准液0.1 g/dL , 蒽酮试剂。
1.8 实验数据统计方法:实验数据以SPSS 软件进行单因素方差分析。经方差齐性检验、方差齐的实验数据采用LSD法进行统计分析、对方差不齐或非正态的实验数据先进行变量转换再进行统计。
1.9 实验方法:
1.9.1 负重游泳试验:
1.9.2 血清尿素测定:
末次给受试物30min后，在温度30℃的水箱中不负重游泳90 min、休息60min后拔眼球采全血约0.5 mL。置4℃冰箱约3 h 、血凝固后2000 rpm 离心15 min ，取上层血清用全自动生化分析仪测定。
1.9.3 肝糖原测定:
末次给受试物30min后，处死动物、取肝脏经生理盐水漂洗后，用滤纸吸干，精确称取肝脏100 mg ，加入8mL TCA 液，每管匀浆1min ，将匀浆液倒入离心管，以3000 rpm 离心15 min ，将上清液转移至另一试管内，取1mL上清液放入10mL 离心管中，每管加入95 %的乙醇4mL，充分混匀至两液体问不留有界面。塞子塞上于室温下竖立放置过夜，沉淀完全后，3000 rpm 离心15 min ，去上清液后倒置10 min ，用2mL蒸馏水溶解糖原，用蒽酮法在620 nm波长比色测定肝糖原。
1.9.4 血乳酸测定:
末次给药30 min 后，眼静脉采血20 uL，立即放入水温30℃水中游泳，每隔1 min 放入一只，游泳10 min 后立即取出、擦干水分，各采血20μL，安静20 min 后再采血20μL 将每次所采的血放入120μL 的溶血剂中振荡，振荡均匀后，测定各血乳酸值。
2 结果
2.1 该样品对小鼠负重游泳时间的影响:
由表13可见，该样品可延长中、高剂量组小鼠负重游泳时间，与对照组比较，差异均有统计学意义(P<0.05 )。
2.2该样品对小鼠运动后血清尿素的影响
由表14可见，该样品可减少中、高剂量组小鼠运动后产生的血清尿素的含量，与对照组比较，差异均有统计学意义( P<0 .05 ) 。
2 .3该样品对小鼠肝糖原的影响:
由表15可见，该样品各剂量组小鼠的肝糖原含量与对照组比较，差异均无统计学意义(p> 0.05 ) 。
2.4该样品对小鼠三个时间点血乳酸曲线下面积的影响:
由表16可见，该样品可减少中剂量组小鼠血乳酸曲线下面积，与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05 )。
2.5 该样品对小鼠体重的影响:
该样品各组小鼠的初始体重经方差分析差异均无统计学意义(p>0.05)，即小鼠的初始体重在各组间较为均衡，实验结束时，各组小鼠的末重经统计，差异均无统计学意义(p> 0.05)，即该样品对小鼠的体重增长无影响。结果见表17、18 、19 、20。
3 小结
经口灌胃给予小鼠不同剂量的本发明保健食品30天后，结果能延长小鼠负重游泳时间;减少小鼠运动后产生的血清尿素含量;减少小鼠血乳酸曲线下面积，且对小鼠体重增长无影响。说明该样品具有缓解体力疲劳作用。
随着现代社会的飞速发展，社会的竞争力越来越大，同时由于电脑的普及以及紧张的学习工作等，使人们受到各种有意或无意的信息刺激，受到各种有形或无形的精神压力，承受着各种大运动量的运动或劳动，导致人们经常处于疲劳甚至过度疲劳状态。据资料统计表明，我国目前有半数以上的人处于慢性疲劳综合症的状态，在城市人口中约占70%。随着人们保健意识的提高，适当服用一些保健类食品，以防治疾病和保持健康已逐渐成为世界各国民众的重要手段，与此同时，具有缓解体力疲劳作用的保健食品必然有很大的市场空间。
本发明保健品具有缓解体力疲劳的保健功能，该功能产品社会需求者多，需求量大，产品投放市场为需求者提供一种供选择、可信任、质量有保证的保健食品，产品的发展前景看好。
保健食品的社会效益和经济效益十分显著。有资料显示，保健食品的应用大大降低了医疗费用的支出，而降低的这些医疗费用，远远高于保健食品的投入费用。第三次国家卫生服务调查分析报告，估算中国人因健康引起的直接和间接经济损失仅2003年就高达8000亿，占当年GDP的7%左右。发达国家的消费比例更高，美国的医疗卫生费用占GDP的12%，德国的医疗卫生费用占GDP的10%。医疗费用负担过重已成为一个世界性的问题。有鉴于此，专家建议应由临床医学转向预防医学即生命的保健和健康的维护，适当食用保健品有利于健康的维护。据国务院地区经济研究所2002年的一项调查报告，科学食用保健食品可减少医疗费用5亿元。有专家认为，如果预防医学措施做得好，疾病可减少一半，寿命可延长10年，医药消费支出也会大大减少。疲劳是日常生活中一个常见问题。随着经济的发展，生活节奏的加快，慢性疲劳综合症的发病率正在逐渐增加。本发明缓解体力疲劳保健品，不仅可以使更多的人免除疲劳带来的不良影响，更有助于国家医药消费支出的降低。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步详细描述，以助于理解本发明的内容。
实施例1
原辅料配比为：刺五加800g、杜仲叶700g、人参100g、玉米淀粉70g
制备方法为：
a、原料预处理：人参粉碎，过80目筛，辐照灭菌，备用；
b、按配方量称取刺五加和杜仲叶，水提取2次，第一次12倍量，第二次10倍量，每次提取1小时，过滤，备用；
c、将步骤b所得的水提液在温度60度，真空度为0.04 Mpa，条件下浓缩至60度热测相对密度为1.10-1.20的浓缩液备用；
d、干燥：将步骤c所得的浓缩液真空干燥，温度为60度，真空度为0.04Mpa，得到干膏备用；
e、粉碎：将步骤d所得的干膏粉碎过80目筛，备用；
f、混合：将步骤a所得的人参粉碎灭菌粉，加入步骤e所得的粉碎粉及玉米淀粉，混合均匀，得混合粉备用；
g、制粒：将步骤e所得的混合粉干法制粒，颗粒备用；
h、充填胶囊、包装、检验即得。
实施例2
原辅料配比为：
刺五加1200g、杜仲叶500g、人参300g、玉米淀粉50g。
制备方法为：
a、原料预处理：人参粉碎，过80目筛，辐照，备用；
b、提取：按配方量称取刺五加和杜仲叶，水提取2次，第一次8倍量，第二次10倍量，每次提取2小时，过滤，备用；
c、浓缩：将步骤b所得的水提液在温度60度，真空度为0.10Mpa条件下浓缩至60度热测相对密度为1.10-1.20的浓缩液备用；
d、干燥：将步骤c所得的浓缩液真空干燥，温度为80度，真空度为0.10Mpa，得到干膏备用；
e、粉碎：将步骤d所得的干膏粉碎过80目筛，备用；
f、混合：将步骤a所得的人参粉碎灭菌粉，加入步骤e所得的粉碎粉及玉米淀粉，混合均匀，得混合粉备用；
g、制粒：将步骤e所得的混合粉干法制粒，颗粒备用；
h、充填胶囊、包装、检验即得。
实施例3
原辅料配比为：
刺五加1000g、杜仲叶667g、人参217g、玉米淀粉66g。
制备方法为：
a、原料预处理：人参粉碎，过80目筛，辐照灭菌，备用；
b、按配方量称取刺五加和杜仲叶，水提取2次，第一次12倍量，第二次10倍量，每次提取1小时，过滤，备用；
c、将步骤b所得的水提液在温度60度，真空度为0.04 Mpa，条件下浓缩至60度热测相对密度为1.10-1.20的浓缩液备用；
d、干燥：将步骤c所得的浓缩液真空干燥，温度为60度，真空度为0.04Mpa，得到干膏备用；
e、粉碎：将步骤d所得的干膏粉碎过80目筛，备用；
f、混合：将步骤a所得的人参粉碎灭菌粉，加入步骤e所得的粉碎粉及玉米淀粉，混合均匀，得混合粉备用；
g、制粒：将步骤e所得的混合粉干法制粒，颗粒备用；
h、充填胶囊、包装、检验即得。
实施例4
原辅料配比为：
刺五加1080g、杜仲叶658g、人参228g、玉米淀粉59g。
制备方法为：
a、原料预处理：人参粉碎，过80目筛，辐照灭菌，备用；
b、按配方量称取刺五加和杜仲叶，水提取2次，第一次10倍量，第二次10倍量，第一次提取2小时，第二次提取1小时，过滤，备用；
c、将步骤b所得的水提液在温度60度，真空度为0.04 Mpa，条件下浓缩至60度热测相对密度为1.10-1.20的浓缩液备用；
d、干燥：将步骤c所得的浓缩液真空干燥，温度为60度，真空度为0.04Mpa，得到干膏备用；
e、粉碎：将步骤d所得的干膏粉碎过80目筛，备用；
f、混合：将步骤a所得的人参粉碎灭菌粉，加入步骤e所得的粉碎粉及玉米淀粉，混合均匀，得混合粉备用；
g、制粒：将步骤e所得的混合粉干法制粒，颗粒备用；
h、充填胶囊、包装、检验即得。
实施例5
原辅料配比为：
刺五加1000g、杜仲叶600g、人参200g、红薯淀粉50g。
制备方法为：
a、原料预处理：人参粉碎，过80目筛，辐照灭菌，备用；
b、按配方量称取刺五加和杜仲叶，水提取2次，第一次10倍量，第二次10倍量，第一次提取2小时，第二次提取1小时，过滤，备用；
c、将步骤b所得的水提液在温度60度，真空度为0.04 Mpa，条件下浓缩至60度热测相对密度为1.10-1.20的浓缩液备用；
d、干燥：将步骤c所得的浓缩液真空干燥，温度为60度，真空度为0.04Mpa，得到干膏备用；
e、粉碎：将步骤d所得的干膏粉碎过80目筛，备用；
f、混合：将步骤a所得的人参粉碎灭菌粉，加入步骤e所得的粉碎粉及玉米淀粉，混合均匀，得混合粉备用；
g、制粒：将步骤e所得的混合粉干法制粒，整粒，包装，即得颗粒剂。
实施例6
原辅料配比为：
刺五加1010g、杜仲叶620g、人参215g、红薯淀粉35g。
按常规方法制成颗粒剂即得。