本发明涉及一种活性肽的制备方法，尤其涉及一种海藻活性肽的制备方法。
背景技术：
海洋生态环境的特殊性，造就了海洋生物能产生与陆生动植物次生代谢产物相比独特的天然产物。近几年，有关海藻生物活性肽的研究极为活跃，尽管海藻生物活性肽的研究历史较短，但因其独特的生物活性作用，而成为活性肽领域的研究热点之一。我国对海藻活性肽研究开发起步较晚，基础和应用研究都很薄弱，目前仍处于起步阶段，至目前为止，真正实现工业化生产的海藻多肽产品未见有报道，厂家仍关注于海藻多糖等常见海藻粗提物的生产。
技术实现要素：
本发明的目的在于，提供一种海藻活性肽的制备方法，该制备方法无需添加脱盐、真空浓缩等工艺，简化了生产工艺，降低了生产成本，纳滤分离的滤渣、滤液可作为原料用于海藻肥的生产，资源利用率高。
本发明的技术方案：一种海藻活性肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
①按照（2～5）︰1的蛋白酶和食品级海藻酸钠比例进行催化水解，加入1～2倍量的纯净水，调节混合物ph值至3～4，温度保持在50～75℃后，维持压力0.8mpa水解2～3小时，然后对该水解液进行失活、脱色以及过滤处理，得到海藻多肽提取液；
②将上述海藻多肽提取液通过分子量为1200da和500da的纳滤膜进行纯化和浓缩，得浓缩液；
③将上述浓缩液经过超高温瞬时灭菌，放入高压罐中，加压至3kgf/cm2，并保持10～20min，使其压力均匀，然后在0～3秒突然使压力降至okgf/cm2；
④灭菌后，通过真空干燥得到海藻活性肽粉末。
前述的一种海藻活性肽的制备方法，所述蛋白酶包括植物蛋白酶和动物蛋白酶，蛋白酶以植物蛋白酶和动物蛋白酶以1︰（1.2～1.5）的比例混合而成。
前述的一种海藻活性肽的制备方法，所述植物蛋白酶为枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述动物蛋白酶为胰蛋白酶和胃蛋白酶。
前述的一种海藻活性肽的制备方法，所述步骤①中，按照5︰1的蛋白酶和食品级海藻酸钠比例进行催化水解，加入1.2倍量的纯净水，调节混合物ph值至4，温度保持在75℃后，维持压力0.8mpa水解3小时。
与现有技术相比，本发明以植物活性肽酶解工艺为基础，以海藻粗提物食品级海藻酸钠原料，采用多酶复合耦合水解工艺，使得海藻多肽平均分子量在800da左右，解决了传统植物活性肽酶解工艺分子量不均匀的问题。
本发明采用分子量1200da和500da的组合纳滤技术分离纯化海藻多肽，截留分子量在500～1200da海藻多肽，简化了生产工艺，无需采用传统脱盐工艺以及真空浓缩工艺，降低生产成本。
具体实施方式
下面实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。
实施例1：
一种海藻活性肽的制备方法，包括以下步骤：
①按照5︰1的蛋白酶和食品级海藻酸钠比例进行催化水解，加入1.2倍量的纯净水，调节混合物ph值至4，温度保持在75℃后，维持压力0.8mpa水解3小时，然后对该水解液进行失活、脱色以及过滤处理，得到海藻多肽提取液；
②将上述海藻多肽提取液通过分子量为1200da和500da的纳滤膜进行纯化和浓缩，得浓缩液；
③将上述浓缩液经过超高温瞬时灭菌，放入高压罐中，加压至3kgf/cm2，并保持10min，使其压力均匀，然后在3秒突然使压力降至okgf/cm2；
④灭菌后，通过真空干燥得到海藻活性肽粉末。
所述蛋白酶包括植物蛋白酶和动物蛋白酶，蛋白酶以植物蛋白酶和动物蛋白酶以1︰1.2的比例混合而成。
所述植物蛋白酶为枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述动物蛋白酶为胰蛋白酶和胃蛋白酶。
实施例2：
一种海藻活性肽的制备方法，包括以下步骤：
①按照2︰1的蛋白酶和食品级海藻酸钠比例进行催化水解，加入1倍量的纯净水，调节混合物ph值至3，温度保持在50℃后，维持压力0.8mpa水解2小时，然后对该水解液进行失活、脱色以及过滤处理，得到海藻多肽提取液；
②将上述海藻多肽提取液通过分子量为1200da和500da的纳滤膜进行纯化和浓缩，得浓缩液；
③将上述浓缩液经过超高温瞬时灭菌，放入高压罐中，加压至3kgf/cm2，并保持20min，使其压力均匀，然后在2秒突然使压力降至okgf/cm2；
④灭菌后，通过真空干燥得到海藻活性肽粉末。
所述蛋白酶包括植物蛋白酶和动物蛋白酶，蛋白酶以植物蛋白酶和动物蛋白酶以1︰1.5的比例混合而成。
所述植物蛋白酶为枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述动物蛋白酶为胰蛋白酶和胃蛋白酶。
实施例3：
一种海藻活性肽的制备方法，包括以下步骤：
①按照3︰1的蛋白酶和食品级海藻酸钠比例进行催化水解，加入2倍量的纯净水，调节混合物ph值至3，温度保持在75℃后，维持压力0.8mpa水解3小时，然后对该水解液进行失活、脱色以及过滤处理，得到海藻多肽提取液；
②将上述海藻多肽提取液通过分子量为1200da和500da的纳滤膜进行纯化和浓缩，得浓缩液；
③将上述浓缩液经过超高温瞬时灭菌，放入高压罐中，加压至3kgf/cm2，并保持15min，使其压力均匀，然后在2秒突然使压力降至okgf/cm2；
④灭菌后，通过真空干燥得到海藻活性肽粉末。
所述蛋白酶包括植物蛋白酶和动物蛋白酶，蛋白酶以植物蛋白酶和动物蛋白酶以1︰1.3的比例混合而成。
所述植物蛋白酶为枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述动物蛋白酶为胰蛋白酶和胃蛋白酶。
实施例4：
一种海藻活性肽的制备方法，包括以下步骤：
①按照4︰1的蛋白酶和食品级海藻酸钠比例进行催化水解，加入1.5倍量的纯净水，调节混合物ph值至4，温度保持在70℃后，维持压力0.8mpa水解2.5小时，然后对该水解液进行失活、脱色以及过滤处理，得到海藻多肽提取液；
②将上述海藻多肽提取液通过分子量为1200da和500da的纳滤膜进行纯化和浓缩，得浓缩液；
③将上述浓缩液经过超高温瞬时灭菌，放入高压罐中，加压至3kgf/cm2，并保持15min，使其压力均匀，然后在3秒突然使压力降至okgf/cm2；
④灭菌后，通过真空干燥得到海藻活性肽粉末。
所述蛋白酶包括植物蛋白酶和动物蛋白酶，蛋白酶以植物蛋白酶和动物蛋白酶以1︰1.4的比例混合而成。
所述植物蛋白酶为枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述动物蛋白酶为胰蛋白酶和胃蛋白酶。
本发明有如下创新：
1、采用复合酶耦合催化水解，通过对酶加量、ph值、水解温度和水解时间关键工艺参数的控制，多肽分子量分布集中；
2、采用纳滤膜两步法过滤，脱盐、浓缩一步完成，无需脱盐和真空浓缩工艺，简化了生产工艺，降低成本；
3、纳滤残渣以及滤液可作为海藻肥原料，用于生产海藻肥，资源利用率高；
4、产品分子量在500～1200da左右（平均分子量800da），易于人体吸收。