一种合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片及其制备方法与流程

本发明涉及保健食品加工技术领域，特别涉及一种合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片及其制备方法。

背景技术：

合浦珠母贝pinctadafucatamartensii(dunker)，又名马氏珠母贝，是我国南方海水珍珠养殖的主要品种，分布在广东、广西及海南沿海地区。

合浦珠母贝除了富含优质蛋白质和多种矿物质之外，当中的糖胺聚糖也尤为引人关注。糖胺聚糖(glycosaminoglycans，gags)，也称氨基多糖或酸性粘多糖，是由重复的二糖单位构成的长链多糖，存在于多数海洋动物的组织中，且结构和性质与已知的陆生植物多糖不同，已被报道具有增强免疫功能、抗凝血、降血糖、抗肿瘤等多种作用。据文献报道，糖胺聚糖可刺激机体的各种免疫活性细胞(树突状细胞、b淋巴细胞)的成熟、分化和繁殖，增加巨噬细胞非特异性细胞毒，诱导il-1、il-2、tnf-α、ifn-γ、il-8等细胞因子的产生和细胞因子受体的表达，促进抗原递呈、抗体形成，活化补体系统的经典途径及变更途径等作用。合浦珠母贝糖胺聚糖是一种天然来源的具有免疫调节功能的生物活性多糖，主要由d-氨基葡萄糖、d-氨基葡萄糖醛酸、葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖、岩藻糖等单糖构成。

珠农采珠后，每年所余的加工副产物珍珠贝肉约达3500-4000吨，大多为新鲜或粗加工后食用，以鲜品销售为主，价格低廉(约5-10元/kg)，在广东雷州市及徐闻县、广西北海市、海南等地造成资源的巨大浪费，深加工率较低，保藏期短，易腐败变质，导致珍珠贝肉的开发利用受到限制。

如103039792a专利申请公开了“一种用于增强免疫的珠母贝糖胺聚糖软胶囊及其制备方法”，其工艺为将珠母贝全脏器匀浆酶解、离心醇沉、洗涤干燥得糖胺聚糖，并加入辅料制成软胶囊。但是，上述方法的缺陷在于：珍珠贝肉未经软化处理，影响后续酶解的效果，经实验验证，制得的粗糖胺聚糖纯度仅为30％-45％，纯度过低会影响制得品的免疫增强效果。

咀嚼片是指于口腔中咀嚼或吮服使片溶化后吞服的片剂，服用方便，可吞服、咀嚼含吮或用水分散后服用。片剂经嚼碎后表面积增大，可促进药物在体内的溶解和吸收，即使在缺水状态下也可以保证按时服用，尤其适合老人、小孩、吞服困难及胃肠功能差的人群，可以减少胃肠道的负担。

技术实现要素：

本发明的第一个目的提供一种合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片，能有助于维持正常免疫功能，并解决合浦珠母贝贝肉高值化利用率较低的问题。

本发明的第二个目的是提供上述合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片的制备方法。

解决本发明第一个目的所采用的技术方案是：

一种合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片，以重量百分比计包括以下组分：

解决本发明第二个目的所采用的技术方案是：

一种合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片的制备方法，包括以下步骤：

1)取合浦珠母贝肉组织匀浆后加水浸提，调节ph，加入中性蛋白酶和胰蛋白酶复合酶解，灭酶后离心取上清液，醇沉过滤并洗涤沉淀后，得粗糖胺聚糖；

2)取步骤1)的粗糖胺聚糖，经离子交换柱层析后透析浓缩、冷冻干燥得合浦珠母贝糖胺聚糖；

3)将合浦珠母贝糖胺聚糖与微晶纤维素、甘露醇、乳糖按比例混合搅拌均匀，再喷洒10％羟丙基甲基纤维素溶液制软材、造粒，干燥、整粒后加入硬脂酸镁压片，灭菌包装后得合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片成品。

优选的，步骤1)中加水浸提的料液比为1:2，在磁力搅拌器作用下45-55℃恒温水浴4-6h，用0.1mol/l的氢氧化钠调节溶液的ph至7.0-7.6。

优选的，步骤1)中复合酶解是以每克合浦珠母贝贝肉加入10-15mg中性蛋白酶和胰蛋白酶组合水解，其中中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为7:8，在磁力搅拌器作用下45-55℃水浴4h，结束后在100℃水浴中灭活蛋白酶10min，冷却至室温，8000-12000rpm离心15-20min，收集上清液，得到合浦珠母贝糖胺聚糖母液。

优选的，步骤1)中醇沉过滤并洗涤沉淀是取上清液加无水乙醇至终浓度75％，4℃下沉淀8-12h，再以10000-12000rpm离心15-20min，沉淀用无水乙醇-丙酮交替洗涤4-5次，在0.030～0.035kpa，-50～-55℃冷冻真空干燥12-36h得到粗糖胺聚糖。

优选的，步骤2)中离子交换柱层析是采用deae-52阴离子交换柱对粗糖胺聚糖进行纯化，上样量10ml，流速1ml/min，每管收集10ml，流动相分别为纯水、0.5mol/mlnaac、1.5mol/mlnacl，用截留分子量8kd-14kd的透析袋透析24h，在0.030～0.035kpa，-50～-55℃冷冻真空干燥12-36h得到合浦珠母贝糖胺聚糖。

优选的，步骤3)中制软材、造粒是将按比例混匀后的原料过100目筛，向混合原料按4.5ml/10g缓慢喷洒10％的羟丙基甲基纤维素水溶液，同时不断搅拌均匀，制成软材，过16目筛，使软材变成颗粒。

优选的，步骤3)中干燥是将制成的湿颗粒于60-70℃条件下烘干至水分含量低于5％以下。

优选的，步骤3)中整粒压片是将干燥后颗粒状固体原料粉碎，过80目筛，加入质量分数1％-2％的硬脂酸镁，用单冲压片机压片。

优选的，步骤3)中灭菌包装是采用紫外线杀菌机进行紫外杀菌，用食品级阻湿包装袋按20片每小袋的规格包装，再将小袋包装按照一定数量包装成大包装。

本发明的有益效果是：

1)在进行酶解处理之前，先对原料进行热水浸提，以达到节省酶解时间、节约酶用量、更好脱除成品中杂蛋白的目的，酶解前的热水浸提使物料体积膨胀，使原料中蛋白质的原始结构部分发生变化、变性。

2)运用生物酶解加工技术处理合浦珠母贝贝肉，简化了粗制品提取步骤，并加入阴离子交换柱层析纯化糖胺聚糖，使制得品纯度达85％以上，保证了成品维持机体正常的免疫功能的效果，是一种既能保持糖胺聚糖原有生物活性，又能最大限度提高糖胺聚糖提取率的新工艺。另外，提取过程中的残渣可依据以往的技术发明制备相应的多肽产品等。

3)本发明制备的合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片片型为双平面圆形，形状完整，表面光滑，色泽呈白色、均匀一致，无糊口感，具有良好的感官品质，无毒副作用，有助于维持机体正常的免疫功能，制成咀嚼片形式，方便食用。制备方法简单易行，适合工业化生产，为合浦珠母贝贝肉的高值化应用提供了技术创新，对促进珍珠养殖业和加工业的发展有重要意义，具有较好的市场前景。

4)本发明的合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片有明显的保健功效，作用温和且无毒副作用，有助于维持人机体正常的免疫功能，具有广阔的市场前景，有利于解决合浦珠母贝高值化利用的问题，提高低值珍珠贝肉的附加值，避免资源浪费，同时解决贝肉丢弃引起的环境污染问题，促进我省珍珠养殖及加工产业的持续健康发展，对环境和资源具有重要的意义。

附图说明

图1为本发明合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对脾脏的保护作用的柱状图；

图2为本发明合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对外周血白细胞的作用的柱状图；

图3为本发明合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对骨髓细胞的作用的柱状图；

图4为本发明合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对脾淋巴细胞增殖能力的作用的柱状图；

图5为本发明合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对脾nk细胞活性的作用的柱状图；

图6为本发明合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对腹腔巨噬细胞吞噬能力的作用的柱状图；

图7为本发明合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对血清il-2水平的作用的柱状图。

具体实施方式

下面以附图和实施例对本发明作进一步说明，以使本领域技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。

实施例1

一种有助于维持正常免疫功能的合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片，该咀嚼片片重为201.3mg±2.9mg，包含合浦珠母贝糖胺聚糖25％、羟丙基甲基纤维素4.5％、甘露醇20％、微晶纤维素40％、硬脂酸镁1.5％，余量为乳糖。

一种合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

1)取合浦珠母贝肉组织2590g，匀浆后以料液比为1:2加水浸提，在磁力搅拌器作用下55℃恒温水浴4h，用0.1mol/l的氢氧化钠调节溶液的ph至7.2，以每克合浦珠母贝贝肉加入12mg中性蛋白酶和胰蛋白酶组合水解(中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为7:8)，在磁力搅拌器作用下55℃水浴4h。结束后在100℃水浴中灭活蛋白酶10min，冷却至室温，12000rpm离心15min，收集上清液，得到合浦珠母贝糖胺聚糖母液，取上清液加无水乙醇至终浓度75％，4℃下沉淀8-12h，再以12000rpm离心15min，沉淀用无水乙醇-丙酮交替洗涤4次，在0.034kpa，-51℃冷冻真空干燥24h得到粗糖胺聚糖32.12g，粗品得率为1.24％；

2)取步骤1)的粗糖胺聚糖，采用deae-52阴离子交换柱对粗糖胺聚糖进行纯化，上样量10ml，流速1ml/min，每管收集10ml，流动相分别为纯水、0.5mol/mlnaac、1.5mol/mlnacl，用截留分子量14kd的透析袋透析24h，在0.032kpa，-51℃冷冻真空干燥30h得到合浦珠母贝糖胺聚糖12.46g，精制品得率为0.481％；

3)将合浦珠母贝糖胺聚糖与微晶纤维素、甘露醇、乳糖按上述比例混合搅拌均匀后过100目筛，向混合原料按4.5ml/10g缓慢喷洒质量浓度10％的羟丙基甲基纤维素水溶液，同时不断搅拌均匀，制成软硬适中的软材，过16目筛，使软材变成颗粒，将制成的湿颗粒摊放在搪瓷盘中，于65℃条件下烘干至水分含量低于5％以下，用粉碎机粉碎，过80目筛，加入质量分数1.5％的硬脂酸镁，用单冲压片机压片，采用tr-zw-1001紫外线杀菌机进行紫外杀菌，用食品级阻湿包装袋按20片每小袋的规格包装，再将小袋包装按照一定数量包装成大包装，共制得合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片220片，片重为201.3mg±2.9mg，每片含合浦珠母贝糖胺聚糖0.05g。

按照gb16740-2014食品安全国家标准保健食品的规定，所得成品质量指标如表1所示，均符合要求。

表1合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片质量指标检测

为了验证上述实施例中制得的合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对免疫功能的调节作用及其安全性，通过构建免疫功能抑制小鼠模型和经口急性毒性大鼠模型，观察上述实施例中制得产品对免疫器官、免疫细胞和细胞因子等方面的影响和经口急性毒性试验。

根据前期糖胺聚糖活性评价试验结果和成人-小鼠剂量换算公式，合浦珠母贝糖胺聚糖的小鼠起效剂量为0.25mg/d，按照公式换算为成人起效剂量100mg/d，相当于两片咀嚼片的糖胺聚糖含量。

选用实施例1中制得的合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片，采用常规实验方法构建免疫功能抑制balb/c近交系小鼠模型(spf级，雌雄各半，体重16-18g)，将60只balb/c小鼠随机分为6个试验组，分别设置糖胺聚糖咀嚼片低剂量(0.125mg/d)、中剂量(0.25mg/d)、高剂量(0.5mg/d)三个组别，以香菇多糖片(0.25mg/d)作为阳性对照组，灌胃受试样品共21天，观察实例1中制得产品对免疫器官、免疫细胞和细胞因子等方面的影响。

试验数据结果如下：

1)合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对脾脏的保护作用

如图1所示，与正常对照组相比，环磷酰胺对小鼠脾脏造成严重损伤，引起脾脏等免疫器官的重量减轻，说明模型构建成功(p<0.01)。与模型组相比，香菇多糖片、合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片中剂量组(0.25mg/d)和高剂量组(0.5mg/d)均对小鼠脾脏损伤有改善作用(p<0.01)，说明香菇多糖片和合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对环磷酰胺导致的脾脏萎缩均具有明显的改善效果。糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)呈现量效关系(p<0.05)，但与正常组相比，各组均未恢复到正常对照组水平(p<0.05)。

图1注：^*p<0.05and^**p<0.01vs.正常组，^#p<0.05and^##p<0.01vs.模型组(n＝10)

2)合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对外周血白细胞的作用

如图2所示，与正常组相比，环磷酰胺严重降低了小鼠外周血白细胞水平，说明模型构建成功(p<0.01)。与模型组相比，香菇多糖片、合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)均对小鼠外周血白细胞水平的下降有改善作用(p<0.05)，说明其能使外周血白细胞水平恢复，表明香菇多糖片、合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对于白细胞的减少起到保护作用。合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)呈现量效关系(p<0.05)，但与正常组相比，各组均未恢复到正常对照组水平(p<0.01)。

图2注：^*p<0.05and^**p<0.01vs.正常组，^#p<0.05and^##p<0.01vs.模型组(n＝10)

3)合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对骨髓细胞的作用

如图3所示，与正常组相比，环磷酰胺对小鼠骨髓细胞造成严重损伤，说明模型构建成功(p<0.01)。与模型组相比，香菇多糖片、合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)均对小鼠骨髓细胞损伤有改善作用(p<0.05)。合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)呈现量效关系(p<0.05)，且与正常组相比，中剂量组(0.25mg/d)和高剂量组(0.5mg/d)已恢复到正常组水平(p>0.05)。

图3注：^*p<0.05and^**p<0.01vs.正常组，^#p<0.05and^##p<0.01vs.模型组(n＝10)

4)合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对脾淋巴细胞增殖能力的作用

如图4所示，与正常组相比，环磷酰胺对小鼠脾淋巴细胞增殖能力造成严重损伤，说明模型构建成功(p<0.01)。与模型组相比，香菇多糖片、合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)均对小鼠脾淋巴细胞增殖能力的降低有改善作用(p<0.05)。合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)呈现量效关系(p<0.05)，但与正常组相比，各组均未恢复到正常对照组水平(p<0.01)。

图4注：^*p<0.05and^**p<0.01vs.正常组，^#p<0.05and^##p<0.01vs.模型组(n＝10)

5)合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对脾nk细胞杀伤活性的作用

如图5所示，与正常组相比，环磷酰胺对小鼠脾nk细胞杀伤活性造成严重损伤，说明模型构建成功(p<0.01)。与模型组相比，香菇多糖片、合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)均对小鼠脾nk细胞杀伤活性的降低有改善作用(p<0.01)。合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)组呈现量效关系(p<0.05)，且与正常组相比，高剂量组(0.5mg/d)已恢复到正常组水平(p>0.05)。

图5注：^*p<0.05and^**p<0.01vs.正常组，^#p<0.05and^##p<0.01vs.模型组(n＝10)

6)合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对腹腔巨噬细胞吞噬能力的作用

如图6所示，与正常组相比，环磷酰胺对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力造成严重损伤，说明模型构建成功(p<0.01)。与模型组相比，香菇多糖片、合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)均对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的降低有改善作用(p<0.05)。合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)呈现量效关系(p<0.05)，但与正常组相比，各组均未恢复到正常对照组水平(p<0.05)。

图6注：^*p<0.05and^**p<0.01vs.正常组，^#p<0.05and^##p<0.01vs.模型组(n＝10)

7)合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对血清il-2水平的作用

如图7所示，与正常组相比，环磷酰胺对小鼠血清il-2水平造成严重损伤，说明模型构建成功(p<0.01)。与模型组相比，香菇多糖片、合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)均对小鼠血清il-2水平的降低有改善作用(p<0.01)。合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片低剂量组(0.125mg/d)、中剂量组(0.25mg/d)、高剂量组(0.5mg/d)呈现量效关系(p<0.05)，但与正常组相比，各组均未恢复到正常对照组水平(p<0.01)。

图7注：^*p<0.05and^**p<0.01vs.正常组，^#p<0.05and^##p<0.01vs.模型组(n＝10)

8)结论

经过灌胃受试样品三周后，合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对环磷酰胺引起的免疫抑制呈现剂量依赖性的正相关作用，中剂量(0.25mg/d)为起效剂量(按照体表面积折算为人的起效剂量为100mg/d)，具体表现为：加速脾脏指数、外周血白细胞数和骨髓细胞数的恢复，增强脾淋巴细胞增殖和转化能力、脾nk细胞杀伤活性和腹腔巨噬细胞吞噬能力，升高血清il-2水平，同时还能较好地改善小鼠的生活质量。与香菇多糖片相比，合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片的免疫调节作用相当，起效平缓，对多个指标均有改善作用，可适用于亚健康人群机体免疫力的提高。

经口急性毒性试验是指一次或24h内多次染毒的试验，主要测定受试物的半数致死量或浓度，并观察试验动物的中毒表现。该试验中，合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片组、溶剂对照组各20只sd大鼠在给予受试物过程及14d观察期内，大鼠表现行为、活动状况、呼吸、姿势等均未见异常，无大鼠死亡。动物解剖后，肉眼观察大鼠的心脏、肝脏、脾、胃、肠、肾及生殖腺等脏器外形、颜色、大小与比例，均未见任何异常，大鼠脏器未发生病变。大鼠体质量正常增长，合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片组的大鼠体质量在各测定时间点与溶剂对照组比较均无显著性差异(p>0.05)，如表2所示。因此，在该试验条件下，合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片对sd大鼠经口最大耐受剂量(mtd)高于15g/kg，毒性分级为无毒。

表2sd大鼠经口急性毒性试验体重结果

实施例2

一种有助于维持正常免疫功能的合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片，该咀嚼片片重为200.8mg±3.4mg，包含合浦珠母贝糖胺聚糖20％、羟丙基甲基纤维素4.0％、甘露醇20％、微晶纤维素45％、硬脂酸镁2％，乳糖9％。

一种合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

1)取合浦珠母贝肉组织1890g，匀浆后以料液比为1:2加水浸提，在磁力搅拌器作用下55℃恒温水浴5h，用0.1mol/l的氢氧化钠调节溶液的ph至7.6，以每克合浦珠母贝贝肉加入11mg中性蛋白酶和胰蛋白酶组合水解(中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为7:8)，在磁力搅拌器作用下55℃水浴4h。结束后在100℃水浴中灭活蛋白酶10min，冷却至室温，12000rpm离心20min，收集上清液，得到合浦珠母贝糖胺聚糖母液，取上清液加无水乙醇至终浓度75％，4℃下沉淀8-12h，再以12000rpm离心15min，沉淀用无水乙醇-丙酮交替洗涤4次，在0.032kpa，-54℃冷冻真空干燥18h得到粗糖胺聚糖19.09g，粗品得率为1.01％；

2)取步骤1)的粗糖胺聚糖，采用deae-52阴离子交换柱对粗糖胺聚糖进行纯化，上样量10ml，流速1ml/min，每管收集10ml，流动相分别为纯水、0.5mol/mlnaac、1.5mol/mlnacl，用截留分子量8kd的透析袋透析24h，浓缩后在0.032kpa，-54℃冷冻真空干燥18h得到合浦珠母贝糖胺聚糖10.04g，精制品得率为0.531％；

3)将合浦珠母贝糖胺聚糖与微晶纤维素、甘露醇、乳糖按上述比例混合搅拌均匀后过100目筛，向混合原料按4.0ml/10g缓慢喷洒质量浓度10％的羟丙基甲基纤维素水溶液，同时不断搅拌均匀，制成软硬适中的软材，过16目筛，使软材变成颗粒，将制成的湿颗粒摊放在搪瓷盘中，于60℃条件下烘干至水分含量低于5％以下，用粉碎机粉碎，过80目筛，加入质量分数2％的硬脂酸镁，用单冲压片机压片，采用tr-zw-1001紫外线杀菌机进行紫外杀菌，用食品级阻湿包装袋按20片每小袋的规格包装，再将小袋包装按照一定数量包装成大包装，共制得合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片210片，片重为200.8mg±3.4mg，每片含合浦珠母贝糖胺聚糖0.04g。

按照gb16740-2014食品安全国家标准保健食品的规定，所得成品质量指标如表3所示，均符合要求。

表3合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片质量指标检测

实施例3

一种有助于维持正常免疫功能的合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片，该咀嚼片片重为199.3mg±2.1mg，包含合浦珠母贝糖胺聚糖15％、羟丙基甲基纤维素4.5％、甘露醇25％、微晶纤维素50％、硬脂酸镁1.5％，乳糖4％。

一种合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

1)取合浦珠母贝肉组织990g，匀浆后以料液比为1:2加水浸提，在磁力搅拌器作用下55℃恒温水浴6h，用0.1mol/l的氢氧化钠调节溶液的ph至7.2，以每克合浦珠母贝贝肉加入15mg中性蛋白酶和胰蛋白酶组合水解(中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为7:8)，在磁力搅拌器作用下55℃水浴4h。结束后在100℃水浴中灭活蛋白酶10min，冷却至室温，12000rpm离心15min，收集上清液，得到合浦珠母贝糖胺聚糖母液，取上清液加无水乙醇至终浓度75％，4℃下沉淀8-12h，再以12000rpm离心15min，沉淀用无水乙醇-丙酮交替洗涤5次，在0.034kpa，-54℃冷冻真空干燥12h得到粗糖胺聚糖9.03g，粗品得率为0.912％；

2)取步骤1)的粗糖胺聚糖，采用deae-52阴离子交换柱对粗糖胺聚糖进行纯化，上样量10ml，流速1ml/min，每管收集10ml，流动相分别为纯水、0.5mol/mlnaac、1.5mol/mlnacl，用截留分子量8kd的透析袋透析24h，在0.032kpa，-52℃冷冻真空干燥18h得到合浦珠母贝糖胺聚糖4.92g，精制品得率为0.497％；

3)将合浦珠母贝糖胺聚糖与微晶纤维素、甘露醇、乳糖按重上述比例混合搅拌均匀后过100目筛，向混合原料按4.5ml/10g缓慢喷洒质量浓度10％的羟丙基甲基纤维素水溶液，同时不断搅拌均匀，制成软硬适中的软材，过16目筛，使软材变成颗粒，将制成的湿颗粒摊放在搪瓷盘中，于70℃条件下烘干至水分含量低于5％以下，用粉碎机粉碎，过80目筛，加入质量分数1.5％的硬脂酸镁，用单冲压片机压片，采用tr-zw-1001紫外线杀菌机进行紫外杀菌，用食品级阻湿包装袋按20片每小袋的规格包装，再将小袋包装按照一定数量包装成大包装，共制得合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片120片，片重为199.3mg±2.1mg，每片含合浦珠母贝糖胺聚糖0.03g。

按照gb16740-2014食品安全国家标准保健食品的规定，所得成品质量指标如表4所示，均符合要求。

表4合浦珠母贝糖胺聚糖咀嚼片质量指标检测

以本发明的上述实施例并不是对本发明保护范围的限定，本发明的实施方式不限于此，凡此种种根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，对本发明上述结构做出的其它多种形式的修改、替换或变更，均应落在本发明的保护范围之内。