专利名称：一种竹荪多糖的制备方法
技术领域：
本发明涉及生物化工领域，提供了一种制备高纯度的竹荪系列多糖的方法。
竹荪多糖具有明显的抗肿瘤活性及消炎作用，已引起人们越来越多的关注。目前其它真菌多糖的分离制备已有许多研究报道，主要是利用其改善和刺激人体免疫系统，对肿瘤细胞具有抑制作用。国内外已制成肌肉及静脉注射针剂用于临床肿瘤癌症的治疗，如利用香菇加工过程中的下角料和等外品为原料，或采用工业发酵生产的香菇菌丝体为原料，分离、提取并制成香菇多糖注射针剂。而竹荪多糖对鼠腹腔癌增殖的抑制率达70％，对肉瘤180的抑制率达60％，显示了较高的抗癌活性，已引起了医学界重视。但由于竹荪多糖制备原料—竹荪子实体的价格较高，目前尚无关于纯竹荪多糖产品制备方法的报导。
本发明的目的是提供一种制备高纯度竹荪多糖的方法，利用该方法所制备的竹荪多糖可制成含纯竹荪多糖的各种有价值的生物制品。
本发明的竹荪多糖的制备方法是利用竹荪菌，特别可以利用竹荪加工中产生的下角料(包括菌盖、菌托)或采用深层发酵技术生产的竹荪营养菌丝体为原料，采用柱层析等生化提取分离手段而得到高纯度的竹荪多糖。具体地说将竹荪菌原料经预处理后，进行热水抽提，抽提工序在80～100℃下进行1～10小时，抽提过程可重复2～5次，合并抽提液经过滤或离心分离除去沉淀物，对上清液进行浓缩后进行醇析，醇析可用乙醇，处理5～30小时，醇析液过滤后回收乙醇，经浓缩后可再用于醇析，收集沉淀物用水透析1～3日，再醇析得分离出沉淀，依次用无水乙醇，丙酮和乙醚洗涤即可得到粗多糖。为得到高纯多糖，可将粗多糖用水溶解后上柱层析分离，采用DEAE-纤维素柱，如DE-52型或B4O72-型，并分别用蒸馏水或去离子水及硼砂溶液洗脱，收集浓缩层析分离物的含糖部分，再经醇析，真空干燥即可得到高纯竹荪多糖。上述醇析，过滤或离心分离，回收醇，透析和真空干燥各工序的操作可按常规技术进行，由高纯竹荪多糖可制得各种制品。
下面通过实例对本发明的技术给予进一步地说明。
实例1取竹荪下角料(包括菌盖、菌托)及菌丝体干品200g，热水抽提三次，合并抽提液，过滤后浓缩到200ml，加入三倍95％乙醇沉淀低温过夜，过滤收集沉淀，回收乙醇，浓缩后再醇析，合并沉淀物对自来水透析2天，再醇析沉淀，依次用无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤后可得60克粗多糖。溶解到一定体积后上柱，DEAE-纤维素(B4O72-型)柱层析分离，分别用二次蒸馏水、收集含糖部分，经浓缩、醇析、真空干燥，得竹荪多糖白色纯品28克。经配制、灭菌可制成竹荪纯多糖的注射针剂。
由上述实例，本发明提供了一种可供生产中采用的制备竹荪多糖技术，特别是可以制备高纯度竹荪多糖，可用于制备竹荪多糖的注射针剂。
权利要求
1.一种采用生化提取技术制备竹荪多糖的方法，其特征是包括竹荪菌的预处理，热水抽提，醇析，透析和洗涤工序，其中热水抽提工序是在80～100℃下用水进行浸泡原料1～10小时，抽提过程可反复进行2～5次。
2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于经洗涤后的粗竹荪多糖用柱层析分离法，分离柱用DEAE-纤维素柱，收集多糖部分得到高纯度竹荪多糖。
3.按照权利要求1，2所述的方法，其特征在于竹荪菌原料利用竹荪的菌盖、菌托、竹荪加工的下角料。
4.按照权利要求1，2所述的方法，其特征在于竹荪菌原料用深层发酵技术生产的竹荪营养菌丝体。
全文摘要
一种竹荪多糖的制备方法是利用竹荪的菌盖、菌托和竹荪加工的下角料或深层发酵技术生产的竹荪营养菌丝体为原料，经预处理，热水抽提，醇析，透析和洗涤等主要工序制成粗多糖，其中热水抽提工序是在80～100℃下用水进行浸泡原料1～10小时，抽提过程可反复进行2～5次，为得到高纯度产品可将粗多糖制成溶液用DEAE-纤维素柱进行层析分离，收集含多糖部分即可得到高纯竹荪多糖，该多糖可用来制备竹荪纯多糖的注射针剂。
文档编号C12P19/04GK1165148SQ96115300
公开日1997年11月19日 申请日期1996年5月10日 优先权日1996年5月10日
发明者杜昱光, 赵国良, 卜宗式, 林炳承, 白雪芳, 马小军 申请人:中国科学院大连化学物理研究所