营养流失少、易被人体吸收的石斛复合超微粉的制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种营养流失少、易被人体吸收的石斛复合超微粉的制备方法，其组分包括：石斛、灵芝、西洋参、人参花、枸杞，各组分的重量配比为：石斛2份、灵芝0.8?1.2份、西洋参1.5?3份、人参花0.5?1.5份、枸杞4?6份。制备方法包括：鲜品处理、冷冻处理、干燥处理、超低温超微粉碎。本发明所采用的石斛、灵芝、西洋参、人参花和枸杞中含有丰富的营养物质，通过最优比例混合，在功效上有协同作用，满足了人们的营养补充需求，降低了服用保健品的成本，避免了因服用多种保健品引起的不良反应，本发明采用低温破壁粉碎的方法可促进活性成分被吸收性能，克服了传统中药保健品加工程序繁琐，加工过程营养物质流失、不易被人体吸收等缺点。
【专利说明】
营养流失少、易被人体吸收的石斛复合超微粉的制备方法
技术领域
[0001 ]本发明涉及超微粉的制备，具体为一种石斛复合超微粉及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是兰科石斛属植物，是一种 名贵的中药材，具有悠久的应用历史，被列为九大仙草之首，是药中黄金。现代医学研究表 明：铁皮石斛中所含有的石斛多糖，生物碱，菲类化合物等具有较高的医疗保健作用，能够 提尚机体免疫力。
[0003] 灵芝，又称灵芝草、神芝，是多孔菌科植物赤芝或紫芝的全株，其中紫灵芝的药用 效果最好。灵芝作为拥有数千年药用历史的中国传统珍贵药材，具有较高的药用价值，经过 数十年的药理学研究可知，灵芝具有提高免疫力，调节血糖、控制血压、保肝护肝、辅助治疗 肿瘤及改善睡眠等多种功效。
[0004] 西洋参又称花旗参或广东人参，是五加科植物，人参的一种，具有悠久的药用历 史。医学研究结果表明，西洋参中的皂甙可调节中枢神经，服用西洋参可以保护心血管系 统，提高抗肿瘤活性，促进血液循环及改善血糖等多种功效，是养生佳品。
[0005] 人参花，又名"神草花"，是人参含苞待放的蓓蕾，自然烘晒而成。人参花长至四年 才开始开花，每棵人参花每年仅开一朵小花，每60公斤人参仅能采得一两参花，弥足珍贵， 素有"绿色黄金"之称。其味苦中带甜、清爽可口、解渴、解毒、善于生津又不耗气，其中含有 二十种皂甙活性物质，十七种氨基酸、十一种微量元素、三种抗癌活性物质硒及粗蛋白，在 提神、降压、降糖、降血脂、抗癌、调理肠胃功能、缓解更年期综合症等诸多方面均有功效，被 权威机构认定为"免疫标间的万能养生品"。
[0006] 枸杞是一种传统的中药，在中国也有较悠久的药用历史，古中医用其治疗虚劳精 亏，内热消渴，血虚萎黄等，现代医学研究表明枸杞具有增强非特异性免疫的作用，具有一 定的降血糖作用。
[0007] 目前有关石斛与其他具有保健价值的中药材复合保健品有很多，如申请号： 201210588767.1将铁皮石斛、枸杞、西洋参、罗汉果通过浸提的方法将有效成分分别提取， 得多提取粉末后将其混合均匀制成制剂，申请号201010510089.8将石斛、西洋参、虫草分别 粉碎制成匀浆后浓缩得到浸膏然后按一定的比例混合，最后制成各种片剂、胶囊及冲剂等， 这些方法所得保健品，不仅制备工艺繁琐，而且营养物质流失严重，未能保留全部的营养物 质。超微粉碎技术是目前应用较多的一种中药加工方法，将中药进行破壁超微粉碎可促进 小肠吸收，提高营养价值利用率，本发明利用这一技术，首次将石斛、灵芝、西洋参、人参花、 枸杞等调制在一起制成复合超微粉，起到协同作用。
【发明内容】
[0008] 本发明所要解决的技术问题是提供一种石斛复合超微粉及其制备方法，制备方法 加工方便、营养流失少，制得的石斛复合超微粉功效好，易被人体吸收，营养补充全面。
[0009] 为解决上述技术问题，本发明提供了一种石斛复合超微粉，其组分包括:石斛、灵 芝、西洋参、人参花、枸杞;各组分的重量配比为:石斛2份、灵芝0.8-1.2份、西洋参1.5-3份、 人参花0.5-1.5份、枸杞4-6份。
[0010] 所述石斛复合超微粉的制备方法如下： (1) 鲜品处理：将新鲜石斛茎条、灵芝、西洋参、人参花、枸杞洗净，晾干，将石斛切成 0.5-lcm的长段，灵芝、西洋参切成薄片，其中各原料的重量配比为:石斛2份、灵芝0.8-1.2 份、西洋参1.5-3份、人参花0.5-1.5份、枸杞4-6份； (2) 冷冻处理:将切好的石斛、灵芝、西洋参、人参花和枸杞放入5-10L液氮内速冻10-15min，将其冷冻成晶体； (3) 干燥处理:将冷冻后石斛、灵芝、西洋参、人参花、枸杞混合物放入真空干燥器内进 行抽真空干燥处理8-10小时； (4) 超低温超微粉碎:将干燥的石斛混合物放入超微振动磨中进行破壁粉碎，使用液氮 作为研磨介质，控制温度在_20°C以下，将粉碎的超微粉过筛，通过800目筛网进行筛分，不 能通过的粉体再次转回超微振动磨，在相同条件下再次粉碎直至全部通过筛网，即得到石 斛复合超微粉。
[0011] 本发明的技术效果:本发明所采用的石斛、灵芝、西洋参、人参花和枸杞中含有丰 富的营养物质，通过最优比例混合，在功效上有协同作用，满足了人们的营养补充需求，降 低了服用保健品的成本，避免了因服用多种保健品引起的不良反应;另外，采用液氮速冻真 空冷冻干燥的方法避免了低温冷冻和高温干燥造成的营养成分流失，使用液氮作为研磨介 质，控制温度在-20°C以下，避免活性有效成分因粉碎产生高温失活，同时本发明采用低温 破壁粉碎的方法可促进活性成分被吸收性能，克服了传统中药保健品加工程序繁琐，加工 过程营养物质流失、不易被人体吸收等缺点。
【具体实施方式】 [0012] 实施例1 本实施例的石斛复合超微粉的制备方法如下： (1) 取材:称取鲜石斛200g、灵芝100g、西洋参200g、人参花100g、枸杞400g; (2) 鲜品处理：将新鲜石斛茎条、灵芝、西洋参、人参花、枸杞洗净，晾干，将石斛切成 0 · 5cm的长段，灵芝、西洋参切成薄片； (3 )冷冻处理:将切好的石斛、灵芝、西洋参、人参花和枸杞放入8L液氮内速冻12min，将 其冷冻成晶体； (4)干燥处理:将冷冻后石斛、灵芝、西洋参、人参花、枸杞混合物放入真空干燥器内进 行抽真空干燥处理8小时； (5 )超低温超微粉碎:将干燥的石斛混合物放入超微振动磨中进行破壁粉碎，使用液氮 作为研磨介质，控制温度在_20°C;将粉碎的超微粉过筛，通过800目筛网进行筛分，不能通 过的粉体再次转回超微振动磨，在相同条件下再次粉碎直至全部通过筛网，即得到石斛复 合超微粉。
[0013] 实施例2 本实施例的石斛复合超微粉的制备方法如下： (I)取材:称取鲜石斛200g、灵芝100g、西洋参200g、人参花100g、枸杞600g; (2 )鲜品处理:将新鲜石斛茎条、灵芝、西洋参、人参花、枸杞洗净，晾干，将石斛切成I cm 的长段，灵芝、西洋参切成薄片； (3) 冷冻处理:将切好的石斛、灵芝、西洋参、人参花和枸杞放入IOL液氮内速冻lOmin， 将其冷冻成晶体； (4) 干燥处理:将冷冻后石斛、灵芝、西洋参、人参花和枸杞混合物放入真空干燥器内进 行抽真空干燥处理10小时； (5 )超低温超微粉碎:将干燥的石斛混合物放入超微振动磨中进行破壁粉碎，使用液氮 作为研磨介质，控制温度在_30°C;将粉碎的超微粉过筛，通过800目筛网进行筛分，不能通 过的粉体再次转回超微振动磨，在相同条件下再次粉碎直至全部通过筛网，即得到石斛复 合超微粉。
[0014] 实施例3 本实施例的石斛复合超微粉的制备方法如下： (1)取材:称取鲜石斛200g、灵芝120g、西洋参250g、人参花100g、枸杞500g; (2 )鲜品处理:将新鲜石斛茎条、灵芝、西洋参、人参花、枸杞洗净，晾干，将石斛切成I cm 的长段，灵芝、西洋参切成薄片； (3 )冷冻处理:将切好的石斛、灵芝、西洋参、人参花和枸杞放入5L液氮内速冻15min，将 其冷冻成晶体； (4)干燥处理:将冷冻后石斛、灵芝、西洋参、人参花和枸杞混合物放入真空干燥器内进 行抽真空干燥处理10小时； (5 )超低温超微粉碎:将干燥的石斛混合物放入超微振动磨中进行破壁粉碎，使用液氮 作为研磨介质，控制温度在_35°C;将粉碎的超微粉过筛，通过800目筛网进行筛分，不能通 过的粉体再次转回超微振动磨，在相同条件下再次粉碎直至全部通过筛网，即得到石斛复 合超微粉。
[0015] 本发明的石斛复合超微粉中人参皂甙的检测:本发明中的石斛复合超微粉采用人 参花与铁皮石斛相配伍，代替传统常用的人参和西洋参，其原因在于与人参相比，人参花为 补阴中药，与石斛具有相辅相成的功效，与传统补阴的西洋参相比，人参花具有绿色黄金之 美称，含有多种皂甙化合物，其皂甙含量最高。采用专利申请号为201010510089.8中所用测 定人参皂甙的方法测定人参花中人参皂苷的含量，测得干人参花中人参皂苷的含量为 12.8%，同专利申请号为201010510089.8中测定的西洋参中人参皂苷含量比较，明显高于西 洋参中人参皂苷的含量。
[0016] 本发明的石斛复合超微粉具有提高免疫力功能，其实验方法及数据如下： 1、剂量:本发明中铁皮石斛复合超微粉人体推荐剂量为9g/天，在实验检测中检测剂量 设置低、中、高三个剂量，即〇. 5g/kg，1.0 g/kg、3. Og/kg，分别相当于人体剂量的5、10、30倍。 对各实验组小鼠经口服用本发明样品30天，另设置空白对照。
[0017] 2、试验方法 1)将200只小鼠按重量随机分为五个组，每组40只。一组用于NK细胞活性检测和淋转实 验，二组用于DTH、脾指数和胸腺指数实验，三组进行溶血空斑和溶血素实验，四组进行碳廓 清实验，五组进行吞噬实验。
[0018] 2)喂养并称重:按剂量设计连续喂养小鼠 30天，每周称重一次，计算实验过程中小 鼠体重变化。
[0019] 3)脏器/体重比值(胸腺指数、脾指数)测定:小鼠连续服用30天，颈椎脱白处处死， 取胸腺、脾脏称重，分别计算胸腺指数和脾指数。
[0020] 4)细胞免疫功能测定 a) ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验:小鼠连续给样30天后，颈椎脱白处死，取脾脏， 制成脾淋巴细胞悬液，调整细胞浓度为3*106个/ml，将细胞悬浮液分两孔加入24孔培养板 中，每孔lml，一孔加75μ1(：οηΑ液（相当于7.5狀/1111)，另一孔作为对照，置5%⑶ 2,37°C培养 72h，培养结束前4h，每孔加入MTT(5mg/ml )50μ1/孔，继续培养4h，培养结束后，每孔加入1ml 酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解后，以570nm波长进行比色，记录实验结果并进 行统计。
[0021] b) DTH测定及胸腺指数、脾指数的测定:致敏:小鼠连续给养30天后，将小鼠腹部 去毛，范围约3*3cm，将1%DNFB的溶液IOyl均匀涂抹于小鼠右耳进行攻击。24h后称重，颈椎 脱臼处死，用打孔器取下直径8mm的左右耳片，称重并计算肿胀度。再取胸腺、脾脏称重，分 别计算胸腺指数、脾指数。
[0022] 5)体液免疫功能测定 a)抗体产生检测试验:动物连续给养样品30天后，将脱纤维绵羊红细胞免疫5天后，动 物颈椎脱白处死，取脾脏，制成脾细胞悬浮液，调整细胞浓度为5*106个/ml。将表层培养基 (I g琼脂糖加双蒸水至100mL)加热溶解后，放入45 °C水浴保温，与等量pH7.2-7.4、2倍浓度 的Hanks液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加50μ 1110%SRBC，20μ 1中温育1.5h，然后 各排比做倍比稀释，每孔加 WSRBClOOyl震荡后37°C放置3h，当血球对照出现沉落后观察结 果。
[0023] 6)单核一巨噬细胞功能测定实验 a)小鼠碳廓清实验:小鼠连续给予样品30天后，在尾部静脉注射1:3稀释的印度墨汁， 待墨汁注入，立即计时。注入墨汁后2-10min后，分别从眼静脉取血20μ1，并将其加到 2ml0.1%碳酸钠溶液中，用分光光度计在600nm处测定OD值，以碳酸钠溶液作空白对照。根据 动物体重、肝重和脾重计算吞噬指数。
[0024] b)小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验:动物连续给养样品30天后，每鼠腹腔注 射20%鸡红细胞悬浮液lml，间隔30min，颈椎脱白处死，固定于鼠板上，剪开腹部皮肤，注射 生理盐水2ml，转动鼠板lmin，吸出腹腔洗液Iml，分滴于2片玻片上，37°C孵箱湿孵30min，用 生理盐水漂洗晾干，用油镜镜检，计算吞噬百分率(％)和吞噬指数。
[0025] 7)NK细胞活性测定：小鼠连续给养样品30天后，动物颈椎脱臼处死，取脾脏，制成 脾脏悬浮液(效应细胞），取传代后24Hyac-l细胞加入RPMI1640完全培养液，调整细胞浓度 为4* 105个/ml (靶细胞），取靶细胞和效应细胞各100μ 1 (效靶比50:1 )，加入U型96孔板，靶细 胞自然释放孔加靶细胞和培养液各1〇〇μ1，最大释放孔加靶细胞和1%NP40各100μΙ，上述各 项均设三个重复组，于37°C、5%C0 2培养箱中培养4h，每孔吸取上清液100μ1置平底96孔板 中，同时加入LDH基质液100μ 1，反应30min，每孔加入lmol/1的HCL30U1终止，用酶标仪在 490nm处测定OD值。
[0026] 4、结果 实验过程中小鼠体重观察的结果如表1所示。
免疫五组吞噬实验结果如表6所示。
[0032] 表6吞实验结果
5、结论:在本实验条件下，细胞免疫功能阳性，体液免疫功能阳性、NK细胞活性阳、单 核-巨噬细胞功能阳性，根据《保健食品检验与评价技术规范》中"增强免疫功能"的结果判 定，认为小鼠经口服用本发明产品30天后，具有增强免疫力功能。
[0033]显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的 实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其 它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而这些属于本发 明的精神所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。
【主权项】
1. 一种石斛复合超微粉的制备方法，其特征在于步骤如下： (1)取材:称取鲜石斛200g、灵芝120g、西洋参250g、人参花100g、枸杞500g; (2 )鲜品处理:将新鲜石斛茎条、灵芝、西洋参、人参花、枸杞洗净，晾干，将石斛切成1 cm 的长段，灵芝、西洋参切成薄片； (3 )冷冻处理:将切好的石斛、灵芝、西洋参、人参花和枸杞放入5L液氮内速冻15min，将 其冷冻成晶体； (4) 干燥处理：将冷冻后石斛、灵芝、西洋参、人参花、枸杞混合物放入真空干燥器内进 行抽真空干燥处理10小时； (5) 超低温超微粉碎:将干燥的石斛混合物放入超微振动磨中进行破壁粉碎，使用液氮 作为研磨介质，控制温度在_35°C;将粉碎的超微粉过筛，通过800目筛网进行筛分，不能通 过的粉体再次转回超微振动磨，在相同条件下再次粉碎直至全部通过筛网，即得到石斛复 合超微粉。
【文档编号】A23L33/00GK106072610SQ201610439666
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2014年3月12日
【发明人】不公告发明人
【申请人】充梦霞