专利名称：包含乳铁蛋白的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及包含EGCG的组合物，涉及其制备方法，并涉及其在预防或治疗宠物牙菌斑(plaque)、牙龈炎、牙周病和口腔恶臭(口臭)以及增强整个生物体的抗氧化能力中的用途。
发明内容
更具体地，本发明在第一个方面提供了一种组合物，例如宠物食品，其中包含表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate，EGCG)和乳铁蛋白(lactoferrin)。
在另一个方面，本发明提供了一种组合物，例如宠物食品，其中包含表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、乳铁蛋白、维生素C、维生素E和类胡萝卜素。
在再一个方面，本发明提供了一种组合物，例如宠物食品，其中包含表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、维生素C、维生素E和类胡萝卜素。
在又一个方面，本发明涉及EGCG和乳铁蛋白的联合物(combination)，或EGCG、乳铁蛋白、维生素C、维生素E和类胡萝卜素的联合物，或EGCG、维生素C、维生素E和类胡萝卜素的联合物在制造宠物食品，特别是针对犬或猫的宠物食品，中的用途，所述的宠物食品用于预防或治疗宠物的牙菌斑、牙龈炎、牙周病和口腔恶臭(口臭)以及增强整个生物体的抗氧化能力；和前述的联合物在预防或治疗宠物的牙菌斑、牙龈炎、牙周病和口腔恶臭(口臭)以及增强整个生物体的抗氧化能力中的用途。
具体实施例方式
宠物的例子包括犬、猫和啮齿动物，例如毛丝鼠(chinchilla)、豚鼠、八齿鼠、小鼠、沙鼠、仓鼠、大鼠、黑脚黄鼠(ferret)和兔类动物，例如兔子。所有年龄的动物都包括在内，例如，成年动物、半成年(medium age)和较老的动物。
EGCG是从绿茶植物Camellia sinensis中得到的一种多酚。其可以以任何形式加入到宠物食品中，包括例如，含有数量不等的EGCG的绿茶提取物和高度富集的EGCG制剂，例如用EP 1,077,211中描述的方法获得的EGCG制剂。在该方法中，从任何绿茶提取物开始，对EGCG进行高度地富集，例如，典型地，用热水或冷水对绿茶叶片进行提取，以形成含有茶儿茶素(tea catechin)和咖啡因的溶液。该绿茶溶液可以进一步地浓缩，至形成浓缩的提取物溶液或干粉。茶提取物粉可以通过商业途径获得，例如从中国贵阳的贵州Highyin生物产品公司(Guizhou HighyinBiological Product Co.)，或者从中国浙江杭州的浙江Zhongke植物技术有限公司(Zhejang Zhongke Plant Technical Co.Ltd.)获得。EGCG适合以大约0.001％至大约3％(w/w)的浓度存在于本发明的组合物中。
乳铁蛋白是一种80kDa的糖蛋白，它由具有两个球状叶(globularlobe)的单肽链组成。就本发明的目的而言，乳铁蛋白这个术语还将包含乳铁蛋白肽(lactoferricin)，乳铁蛋白肽是乳铁蛋白经胃蛋白酶水解后的产物。乳铁蛋白制品可以通过商业途径获得，例如从Tatua Nutritionals(Tatua Cooperative Dairy Company Limited，State Highway 26 TatuanuiPrivate Bag 800，Morrisville，New Zealand)获得，或者也可以遵循技术人员已知的程序从奶中制备或分离出来。乳铁蛋白适合以大约0.002％至3％(w/w)的浓度存在于本发明的组合物中。
术语“维生素C”在此用于一组化合物，包括L-抗坏血酸、L-抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸钙二水合物、L-抗坏血酸单钠盐和L-抗坏血酸磷酸酯，比如L-抗坏血酸单磷酸酯、L-抗坏血酸双磷酸酯和L-抗坏血酸三磷酸酯；它们可以通过商业途径获得，例如从Roche Vitamins AG，Switzerland，商业名称为STAY-C。适合地，维生素C以大约30mg/kg至6000mg/kg的浓度存在于本发明的组合物中，维生素E以大约20IU/kg至大约450IU/kg的浓度存在于本发明的组合物中，类胡萝卜素以大约2mg/kg至大约315mg/kg的浓度存在于本发明的组合物中，浓度基于所述组合物的总重量。
在此使用的术语“维生素E”是对若干生物学上相似的化合物的合称术语，所述的化合物被称为生育酚和三烯生育酚(tocotrienol)，它们共有相同的生物活性并包括dl-α-生育酚、d-α-醋酸生育酚(d-α-tocopherylacetate)和dl-α-醋酸生育酚。维生素E制品可以从Roche Vitamins AG通过商业途径获得，商品名称为ROVIMIXE-50 Adsorbate或ROVIMIXE50 SD。维生素E适合以大约20IU/kg至大约450IU/kg存在于本发明的组合物中。
在此使用的术语“类胡萝卜素”包含胡萝卜素或结构相关的多烯化合物，例如α-胡萝卜素或β-胡萝卜素、8’-阿朴-β-胡萝卜醛(8’-apo-β-carotenal)、8’-阿朴-β-胡萝卜素酸酯(8’-apo-β-carotenoic acid ester)例如其乙酯、角黄素、虾青素、番茄红素、叶黄素、玉米黄质或番红花酸、或上述物质的混合物。为本发明的目的优选的类胡萝卜素为β-胡萝卜素和叶黄素。类胡萝卜素适合以大约2mg/kg至大约315mg/kg的浓度存在于本发明组合物中，浓度基于所述组合物的总重量。
本发明的组合物中含有的EGCG、乳铁蛋白、维生素C、维生素E和类胡萝卜素在此被合称为“发明成分”。
在此使用的术语“组合物”包含所述组分(“发明成分”)的混合物，以及食品和食物，包括用于所述食品和食物的预混合料(premix)，尤其是针对宠物的，其中含有“发明成分”的混合物。
根据本发明的宠物食品可以以任何传统的宠物食品为基础。可利用的宠物食品范围宽广，它们可以被分为三类(a)完全膳食(completediet)、(b)补充膳食(complementary diet)以及(c)点心和零食(treat)。完全膳食可以与水一起进行长期的喂养，它可以作为营养物质的唯一来源，提供动物所有的能量和营养需要以及希望动物达到的生理状态所需的能量和营养需要。补充膳食一般不足以确保所有的营养和能量需求都能达到，除非将其和另外的食物或膳食联合起来进行喂养。点心和零食是开胃食品或者是用于偶尔的喂饲，其被认为是补充产品。然而，还有很多产品可用于构成日常膳食的一部分或对动物的幸福生活发挥作用，例如牙齿咀嚼物(dental chew)。在本发明中，牙齿咀嚼物是尤其适合的。
本发明的宠物食品可以是干性、罐装、半湿润或经烘焙的形式。上述组合物的典型组分，除“发明成分”外，是粗蛋白质、粗脂肪、碳水化合物(无氮浸出物，Nitrogen-free Extraction，NfE)、淀粉、粗纤维(crudefiber)和灰分，进一步地有矿物质、痕量元素、维生素、脂肪酸、蛋白质及氨基酸、胆碱、肉碱、膳食纤维和不同动物物种的平衡膳食所需要的物质。上述食品组合物的基本成分为-粗蛋白质，包括蛋白质和非蛋白质性状的含氮化合物，例如酰胺、胺、游离氨基酸、铵盐、生物碱；-粗脂肪，包括天然脂肪、类脂(磷脂、鞘脂、类固醇)和其它醚溶性化合物；-无氮浸出物(N-free Extraction，NFE)，包括多糖(淀粉、糖原)，可溶性糖(葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖和寡糖)，以及纤维素、半纤维素、木质素及果胶的可溶部分；-粗纤维，包括纤维素、半纤维素、木质素和细胞壁其它组分例如木栓质、角质等的不可溶部分；-灰分，包括矿物质(大量矿物质，例如钙、磷、钠、氯、钾、镁和微量矿物质，即痕量元素，例如铁、铜、锰、锌、碘、硒)以及其它无机物质，例如硅酸盐。
-维生素，包括维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素D、泛酸、烟酸、生物素、叶酸、亚油酸和胆碱。
更多的组分可以例如是omega-6-脂肪酸、omega-3-脂肪酸、L-肉碱、硫酸软骨素、葡糖胺、谷氨酰胺/谷氨酸、精氨酸、牛磺酸和羟脯氨酸。
为犬食品组合物提供所述成分的典型组分，除“发明成分”之外包含例如，鸡肉/牛肉/火鸡、肝脏、碎珍珠麦、玉米粉、兽类脂肪(brutefat)、干燥全蛋、禽蛋白水解产物、植物油、碳酸钙、氯化胆碱、氯化钾、加碘盐、氧化铁、氧化锌、硫酸铜、氧化锰、亚硒酸钠、碘酸钙、维生素原D、维生素B1、烟酸、泛酸钙、盐酸吡哆醇、核黄素、叶酸、生物素、维生素B12。
为猫食品组合物提供所述成分的典型组分，除“发明成分”之外包含牛肉，鸡肉、干燥鸡肝、羊肉、羊肝、猪肉、火鸡肉、火鸡肝、禽肉、鱼肉、禽蛋白水解产物、动物脂肪、植物油、大豆粉、豌豆麸(peabran)、玉米麸、干燥全蛋、玉米粉、玉米粗粉、稻米、大米粉、干甜菜糖蜜、果寡糖(fructooligosaccharide)、可溶性纤维、植物胶、纤维素粉、黏土、面包酵母、加碘氯化钠、硫酸钙、三磷酸钠、磷酸二钙、碳酸钙、氯化钾、氯化胆碱、氧化镁、氧化锌、氧化铁、硫酸铜、硫酸铁、氧化锰、碘酸钙、亚硒酸钠、维生素原D、硫胺素、烟酸、泛酸钙、盐酸吡哆醇、核黄素、叶酸、生物素、维生素B12、牛磺酸、L-肉碱、酪蛋白(caseine)、D-甲硫氨酸。
湿性宠物食品含有大约70％至大约85％之间的水分和大约15％至大约25％之间的干物质。
用于成年犬的典型湿性食品可以包含例如，除“发明成分”之外，最少24％的蛋白质、15％的脂肪、52％的淀粉、0.8％的纤维、3％的亚油酸、0.6％的钙、0.5％的磷、1∶1的Ca∶P比率、0.2％的钾、0.6％的钠、0.09％的氯(chloride)、0.09％的镁、170mg/kg的铁、15mg/kg的铜、70mg/kg的锰、220mg/kg的锌、4mg/kg的碘、0.43mg/kg的硒、74000IU/kg的维生素A、1200IU/kg的维生素D、11mg/kg的维生素B1、6mg/kg的核黄素、30mg/kg的泛酸、20mg/kg的烟酸、4.3mg/kg的吡哆醇、0.9mg/kg的叶酸、0.2μg/kg的维生素B12、2500mg/kg的胆碱(choline)、0.8mg/kg的生物素、2500mg/kg的胆碱(cholin)，所有百分比都基于总的食品组合物的干重。
用于成年猫的典型湿性食品可以包含例如，除“发明成分”之外，最少44％的蛋白质、 25％的脂肪、20％的淀粉、2.5％的纤维、0.8％的钙、0.6％的磷、0.8％的钾、0.3％的钠、0.09％的氯、0.08％的镁、0.25％的牛磺酸、170mg/kg的铁、15mg/kg的铜、70mg/kg的锰、220mg/kg的锌、4mg/kg的碘、0.43mg/kg的硒、74000IU/kg的维生素A、1200IUkg的维生素D、11mg/kg的维生素B1、6mg/kg的核黄素、30mg/kg的泛酸、20mg/kg的烟酸、4.3mg/kg的吡哆醇、0.9mg/kg的叶酸、0.2μg/kg的维生素B12、2500mg/kg的胆碱(choline)、0.8mg/kg的生物素、2500mg/kg的胆碱(cholin)，所有百分比都基于总的食品组合物的干重。
干性宠物食品含有大约6％至大约14％之间的水分和大约86％或更多的干物质。
用于成年犬的典型干性食品可以包含例如，除“发明成分”之外，最少25％的蛋白质、12％的脂肪、41.5％的淀粉、2.5％的纤维、1％的亚油酸、1％的钙、0.8％的磷、1∶1的Ca∶P比率、0.6％的钾、0.35％的钠、0.09％的氯、0.1％的镁、170mg/kg的铁、35mg/kg的铜、70mg/kg的锰、220mg/kg的锌、4mg/kg的碘、0.43mg/kg的硒、15000IU/kg的维生素A、1200IU/kg的维生素D、11mg/kg的维生素B1、6mg/kg的核黄素、30mg/kg的泛酸、20mg/kg的烟酸、4.3mg/kg的吡哆醇、0.9mg/kg的叶酸、0.2μg/kg的维生素B12、2500mg/kg的胆碱、0.8mg/kg的生物素，所有百分比都基于总的食品组合物的干重。
用于成年猫的典型干性食品可以包含例如，除“发明成分”之外，最少32％的蛋白质、15％的脂肪、27.5％的淀粉、11％的膳食纤维、4.5％的纤维、3.4％的亚油酸、0.08％的花生四烯酸、0.15％的牛磺酸、50mg/kg的L-肉碱、omega 6/3＝5，1％的钙、0.8％的磷、至少1∶1的Ca∶P比率、0.6％的钾、0.4％的钠、0.6％的氯化物、0.08％的镁、190mg/kg的铁、30mg/kg的铜、60mg/kg的锰、205mg/kg的锌、2.5mg/kg的碘、0.2mg/kg的硒、25000IU/kg的维生素A、1500IU/kg的维生素D、20mg/kg的维生素B1、40mg/kg的核黄素、56mg/kg的泛酸、153mg/kg的烟酸、14mg/kg的吡哆醇、3.2mg/kg的叶酸、0.2mg/kg的维生素B12、1mg/kg的生物素、3000mg/kg的胆碱，所有百分比都基于总的食品组合物的干重。
针对有牙齿问题的成年犬的典型干性食品，除“发明成分”之外包含鸡肉副产品粗粉、玉米粗粉、发酵米、纤维素粉、大豆加工下脚料(soybean mill run)、动物脂肪(BHA、丙基没食子酸和柠檬酸保藏的)、干燥蛋制品、植物油、天然香料、亚麻仁、用BHT和BHA保藏的牛磺酸、beta-胡萝卜素、矿物质(氯化钾、食盐、硫酸亚铁、氧化锌、硫酸铜、氧化亚锰、碘酸钙、亚硒酸钠)、维生素(氯化胆碱、维生素A补充剂、维生素D3补充剂、维生素E补充剂、烟酸、硫胺素、泛酸钙、盐酸吡哆醇、核黄素、叶酸、生物素、维生素B12补充剂)。
针对有牙齿问题的成年猫的典型干性食品，除“发明成分”之外包含鸡肉副产品粗粉、发酵米、玉米麸粗粉、动物脂肪(用BHA、丙基没食子酸和柠檬酸保藏的)、玉米粗粉、纤维素粉、鸡肝香料、植物油、DL-甲硫氨酸、用BHT和BHA保藏的牛磺酸、β-胡萝卜素、矿物质(氯化钾、碳酸钙、食盐、硫酸钙、硫酸亚铁、氧化锌、硫酸铜、氧化亚锰、碘酸钙、亚硒酸钠)、维生素(氯化胆碱、维生素A补充剂、维生素D3补充剂、烟酸、硫胺素、泛酸钙、核黄素、盐酸吡哆醇、叶酸、生物素、维生素B12补充剂)。
为犬零食组合物例如饼(cake)或饼干提供所述成分的典型组分可以包含植物副产品(小麦粉)、肉及动物副产品(肉粉)、谷物(小麦)、矿物质、油和脂肪(植物和动物脂肪)。
典型的犬零食可以包含例如最少10％的水、24％的蛋白质、6％的脂肪、27.5％的淀粉、6.5％的灰分、2.5％的纤维、1.2％的钙、0.8％的磷和0.25％的钠。
为猫零食组合物例如饼或饼干提供所述成分的典型组分可以包含植物产品、肉及动物副产品、谷物(小麦)、矿物质和植物副产品。
典型的猫零食可以包含例如，除“发明成分”之外，最少12％的水、10％的蛋白质、2.5％的脂肪、6％的灰分、2％的纤维。
本发明的一种优选的宠物食品组合物为零食的形式。
“发明成分”可以被合并到传统的宠物食品例如干性食品中去，例如，通过在彻底混合所述组合物之时将含有一种或多种“发明成分”的水性溶液喷雾到所述的食品组合物上，或通过向所述的面团状混合物(dough)中加入一种或多种“发明成分”。“发明成分”可以同时添加，例如在同一时间甚至作为预混合料添加；或者每次添加一种单独的“发明成分”或作为预混合料而连续地添加。预混合料也可以包括一种或多种最终组合物中的其它组分。
干性食品可以，例如通过螺旋挤压来制备，包括在非常短的一段时间内烹制、成型和切割原料成分(raw ingredients)，使其成为特定的粗磨物(kibble)的形状及大小，同时破坏掉有害的微生物。可以将所述的成分混合进均质可扩展的面团状混合物，在(蒸汽/压力)挤压机中烹制，通过压力和高热下的板对其挤压。烹制之后，所述的粗磨物再进行冷却，然后用涂料(coating)进行喷雾，喷雾是可选的，涂料中可以包括液体脂肪或消化物，消化物包括来自动物组织的液体或粉状的水解物，所述动物例如鸡或兔，所述组织例如肝或肠。然后热空气干燥将总的水分含量降低至10％或更少。
罐装(湿性)食品可以通过例如将原料成分掺合在一起来制备，所述原料成分包括肉及蔬菜、脂肪酸、胶凝剂、肉汁、维生素、矿物质和水。所述的混合物然后在生产线上被装进罐头里，将盖子封上，上述装满了的罐头在大约130℃的温度下被灭菌约50至100分钟。
本发明的宠物食品对预防或治疗宠物牙菌斑、牙龈炎、牙周病和口腔恶臭(口臭)以及增强整个生物体的抗氧化能力是有用的。
本发明提供了本发明的组合物在预防或治疗宠物牙菌斑、牙龈炎、牙周病和口腔恶臭(口臭)以及增强整个生物体的抗氧化能力中的用途。
牙菌斑是柔软的、凝胶状的物质，它由细菌及其代谢副产物、口腔碎屑和唾液组分构成。成熟的牙菌斑不能通过舌头的正常动作或通过嘴的活动来去除。更确切地，来自咀嚼或刷牙的机械磨蚀对去除牙菌斑来说是必要的。
如果未受打扰的话，需氧及兼性厌氧细菌随着牙菌斑的增厚和成熟而增殖。随着时间的推移，唾液中的钙盐沉积在牙菌斑上产生了结石。结石是硬质沉积物，它提供了粗糙的表面，促进了更多牙菌斑的积累，并且当其延伸到牙龈沟(gingival sulcus)时还会促成组织的损坏。当牙菌斑和结石形成于牙齿颈部时就会发生牙龈炎，导致炎症和组织损坏。随着牙龈沟变大成了牙周袋，该区域就提供了允许厌氧细菌增殖的氧气耗尽的环境。当牙周系带被暴露给牙菌斑、细菌和细菌副产物的时候，牙周病就形成了。
在一些动物中，牙龈炎持续存在而并不发展为牙周炎。然而，在大多数情况下，未经治疗的牙龈炎最后会发展成牙周病。牙龈炎和牙周病的临床症候包括口腔恶臭、牙龈敏感及出血、牙齿脱落和进食困难。
口腔恶臭(口臭)在宠物中常有报道，被很多主人认为是一个重要问题。口臭与牙龈炎和牙周炎相关，一种对口臭的解释可能是慢性炎症和组织损坏为嘴里的微生物提供了更多的蛋白质底物，增加了挥发性硫化物(volatile sulfur compound，VSC)的产生。上述化合物，特别是mercaptylsulfide和硫化氢，于呼气时产生呼吸恶臭。
某些厌氧菌种的存在和增殖以及宿主的炎症反应促成了牙周组织的逐步毁坏。随着支持性结缔组织和相邻的骨质被削弱，牙齿变得松动并且可能会脱落。牙周病自身会引起不适及疼痛，而且如果一直未受治疗的话还可能导致菌血症(bacteremia)。
猫的破牙质细胞再吸收性损害(odontoclastic resorptive lesion)也已经被关联于牙龈炎症，还可能关联于牙周病。
鉴于牙周病原中的大多数是释放内毒素(脂多糖类，lipopoly-saccharides，LPS)的革兰氏阴性细菌，因此牙病是宠物患全身性疾病的潜在风险因素，会导致全身性菌血症或LPS攻击(LPS challenge)。
当考虑到慢性牙周病可能具有局部影响以及全身性影响时，保持健康的牙周组织的重要性就更加显著了。影响犬猫牙龈炎和牙周病发展的最重要的因素是牙齿表面未受打扰的牙菌斑的存在和存留。当牙菌斑沉积至牙齿表面后，其可以被饮食以及对补充性咀嚼玩具或食品的咀嚼所提供的磨蚀机械性地减少。抗微生物药剂例如双氯苯双胍己烷(chlorhexidinedigluconate)结合刷牙使用，以及使用化学性的漱口水，对去除牙菌斑积累所形成的变硬的结石是不起作用的。
整个生物体的抗氧化能力反映了所述生物体抵挡氧化胁迫和保护细胞膜及胞质组分免受自由基损害的能力。抗氧化能力越强，其中和自由基和阻止自由基损害的链式效应的能力就越强，因此在保持细胞的完整性和健康中扮演了至关重要的角色。
形成牙菌斑的细菌的数量可以通过对通常被认为是导致牙周炎发病的细菌进行计数来测定，所述细菌例如Streptococcus mutans、Eikenellacorrodens和Porphyromonas gingivalis以及Prevotella ssp、Bacteroidesgingivalis、Bacteroides intermedius、Actinobacillus和Actinobacillus。例如，可以用工具刀(scalar)从犬的上颌骨前臼齿上取得龈下牙菌斑。唾液、舌背(tongue dorsum)粘膜和口腔粘膜可以用棉签获得。每种标本可以立刻被放置于，例如无菌的无氧管中，例如其中含有10ml GAM培养液的无菌的无氧管中，并被贮藏于有70％N2、15％CO2和15％H2的无氧手套箱中。每种样品的稀释悬浮液可以，例如被放置在有7％马血的脑心浸液(Brain Heart Infusion)琼脂上用于总计数，以及放置在有7％马血的Brucella HK琼脂上用于对产黑色素类细菌Porphyromonas属进行计数。可以用Rapid ANA II系统、AIP 20A和API-ZTM系统来开展对代表性菌落的鉴定及细菌计数。对Streptococcus mutans而言，也将会使用脑心浸液。使用的条件将是有氧的。在37℃下培养48小时之后，将使用上述的系统来估计MIC。
牙龈炎(口腔炎症)可以通过测量牙龈指数来确定，这是一种估计齿龈炎症严重性的方法。
为确定变化，尤其是白细胞的变化，可以开展总血细胞计数。
-红细胞计数血红蛋白，血细胞比容，红细胞数量，红细胞指标MCHC、MCH、MCV。
-白细胞计数白细胞总数、不同血细胞(嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、血小板、B-淋巴细胞和T-淋巴细胞)的相对和绝对计数。
细胞的情况可以被用来确定体液免疫系统的改变。因此可以估计出IgA和IgG的浓度。
用于测定抗氧化能力的参数包括Trolox当量抗氧化能力(Troloxequivalent antioxidant capacity，TEAC)，其可以，例如根据Armstrong andBrowne，Adv Exp Med Biol 36643-58(1994)的方法，用分光光度计对1∶1稀释之后的吸收值进行超过3分钟的记录来测量；总抗氧化能力(TotalAntioxidant Capacity，TAC)、红细胞超氧化物歧化酶(ErythrocyteSuperoxid Dismutase，SOD)，其可以，例如在McCord and Fridovich，JBiol Chem 2446056-63(1969)发展的方法的基础上，联合使用O2产生剂(黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase，XOD))和O2检测剂2-(4-苯基碘)-3-(4-硝基酚)-5-氯化苯基四唑([2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenol)-5-phenyltetrazolium chloride])并监测分光光度计的吸收来测定；铁蛋白，可以通过酶联免疫检测来测定；血浆铜蓝蛋白(ceruloplasmin)，可以通过比色法测定血浆铜蓝蛋白氧化酶的活性来测定；维生素E和维生素C；CK；GOT，可以通过在334nm波长处使用荧光探测仪来测定。
以下的实施例进一步地阐述了本发明。
实施例1商业化的干性犬食品(由Hill’s Pet Nutrition GmbH，Liebigstrasse 2-20，D-22113供给的用于犬的Hill’s科学膳食“成犬干粮(Canine Maintenancedry)”)，用(Tatua Nutritionals供给的)乳铁蛋白和(Roche Vitamins供给的)EGCG的水性溶液对其进行喷雾，其数量足以提供在最终的食品组合物中重量占0.002％至3.0％的乳铁蛋白和重量占0.001％至1.0％的EGCG。在挤压完全的掺合物之前，维生素C及维生素E和β-胡萝卜素被进一步加入进去，其数量足以在最终的食品组合物中提供30mg维生素C/kg和300IU维生素E/kg和280mgβ-胡萝卜素/kg。所述的食品组合物被干燥至含有重量比大约90％的干性物质。
实施例2商业化的湿性犬食品(由Hill’s Pet Nutrition GmbH，Liebigstrasse 2-20，22113 Hamburg，Germany供给的用于犬的Hill’s科学膳食“成犬湿性食品(Canine Maintenance wet)”)，与(Tatua Nutritionals供给的)乳铁蛋白和(Roche Vitamins供给的)EGCG的水性溶液混合，其数量足以提供在最终的食品组合物中重量占0.002％至3.0％的乳铁蛋白和重量占0.001％至1.0％的EGCG。在烹制完全的掺合物之前，维生素C及维生素E和β-胡萝卜素被进一步加入进去，其数量足以在最终的食品组合物中提供30mg维生素C/kg和300IU维生素E/kg和280mgβ-胡萝卜素/kg。所述的食品组合物被干燥至含有重量比大约90％的干性物质。
实施例3商业化的犬零食(由Mera Tiernahrung GmbH，Marienstrasse 80-84，47625 Kevelaer-Wetten，Germany供给的用于犬的Mera犬“饼干”)，用(Tatua Nutritionals供给的)乳铁蛋白和(Roche Vitamins供给的)EGCG的水性溶液对其进行喷雾，其数量足以提供在最终的食品组合物中重量占0.002％至3.0％的乳铁蛋白和重量占0.001％至1.0％的EGCG。在挤压完全的掺合物之前，维生素C及维生素E和β-胡萝卜素被进一步加入进去，其数量足以在最终的食品组合物中提供30mg维生素C/kg和300IU维生素E/kg和280mgβ-胡萝卜素/kg。所述的食品组合物被干燥至含有重量比大约90％的干性物质。
实施例4商业化的干性猫食品(由Hill’s Pet Nutrition GmbH，Liebigstrasse 2-20，D-22113供给的用于猫的Hill’s科学膳食“成猫干粮(Feline Maintenancedry)”)，用(Tatua Nutritionals供给的)乳铁蛋白和(Roche Vitamins供给的)EGCG的水性溶液对其进行喷雾，其数量足以提供在最终的食品组合物中重量占0.002％至3.0％的乳铁蛋白和重量占0.001％至1.0％的EGCG。在挤压完全的掺合物之前，更多的维生素C及维生素E和β-胡萝卜素被进一步加入进去，其数量足以在最终的食品组合物中提供30mg维生素C/kg和300IU维生素E/kg和280mgβ-胡萝卜素/kg。所述的食品组合物被干燥至含有重量比大约90％的干性物质。
实施例5商业化的湿性猫食品(由Hill’s Pet Nutrition GmbH，Liebigstrasse 2-20，D-22113供给的用于猫的Hill’s科学膳食“成猫湿性食品(FelineMaintenance wet)”)，用(Tatua Nutritionals供给的)乳铁蛋白和(Roche Vitamins供给的)EGCG的水性溶液对其进行喷雾，其数量足以在最终的食品组合物中提供重量占0.002％至3.0％的乳铁蛋白和重量占0.001％至1.0％的EGCG。在烹制完全的掺合物之前，维生素C及维生素E和β-胡萝卜素被进一步加入进去，其数量足以在最终的食品组合物中提供30mg维生素C/kg和300IU维生素E/kg和280mgβ-胡萝卜素/kg。所述的食品组合物被干燥至含有重量比大约90％的干性物质。
实施例6商业化的猫零食(由Whiskas，Masterfoods GmbH，Eitzer Str.215，27283 Verden/Aller，Germany供给的用于猫的Whiskas Dentabits)，用(Tatua Nutritionals供给的)乳铁蛋白和(Roche Vitamins供给的)EGCG的水性溶液对其进行喷雾，其数量足以在最终的食品组合物中提供重量占0.002％至3.0％的乳铁蛋白和重量占0.001％至1.0％的EGCG。在挤压完全的掺合物之前，维生素C及维生素E和β-胡萝卜素被进一步加入进去，其数量足以在最终的食品组合物中提供30mg维生素C/kg和300IU维生素E/kg和280mgβ-胡萝卜素/kg。所述的食品组合物被干燥至含有重量比大约90％的干性物质。
权利要求
1.一种组合物，包含表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和乳铁蛋白。
2.如权利要求1所述的组合物，还包含维生素C、维生素E和类胡萝卜素。
3.一种组合物，包含表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、维生素E和类胡萝卜素。
4.如权利要求1-3中任一项所述的组合物，包含浓度为大约0.001％至大约3.0％(w/w)的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和浓度为大约0.002％至大约3％(w/w)的乳铁蛋白。
5.如权利要求1-5中任一项所述的组合物，包含浓度为大约30mg/kg至大约6000mg/kg的维生素C、浓度为大约20IU/kg至大约450IU/kg的维生素E和浓度为大约2mg/kg至大约315mg/kg的类胡萝卜素，浓度基于组合物的总重量。
6.如权利要求1-5中任一项所述的组合物，所述组合物是宠物食品，特别是针对犬或猫的。
7.如权利要求1-3中任一项所述的组合物在制造宠物食品特别是针对犬或猫的宠物食品中的用途，所述的宠物食品用于预防或治疗宠物的牙菌斑、牙龈炎、牙周病和口腔恶臭(口臭)以及增强整个生物体的抗氧化能力。
8.如权利要求7所述的EGCG和乳铁蛋白的联合物的用途。
9.如权利要求7所述的EGCG、乳铁蛋白、维生素C、维生素E和类胡萝卜素的联合物的用途。
10.如权利要求7所述的EGCG、维生素C和类胡萝卜素的联合物的用途。
11.如权利要求1-6中任一项所述的组合物或宠物食品在预防或治疗宠物的，特别是犬或猫的，牙菌斑、牙龈炎、牙周病和口腔恶臭(口臭)以及增强整个生物体的抗氧化能力中的用途。
全文摘要
本发明公开了包含表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和乳铁蛋白的组合物，可选地，还包括维生素E、维生素C和类胡萝卜素；或者包含表没食子儿茶素没食子酸酯、维生素E和类胡萝卜素的组合物；以及所述组合物在用于预防或治疗牙菌斑、牙龈炎、牙周病和口腔恶臭(口臭)以及增强整个生物体内的抗氧化能力的宠物饲料中的用途。
文档编号A61P43/00GK1668212SQ03816788
公开日2005年9月14日 申请日期2003年7月18日 优先权日2002年7月26日
发明者斯特凡妮·克雷默 申请人:帝斯曼知识产权资产管理有限公司