专利名称：用于治疗hpv感染的含有干扰素的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明提供了含有干扰素、用于经口施用的液体药物组合物，可用以治疗人乳头瘤病毒(HPV)导致的感染。
背景技术：
目前已经鉴定了约120种不同类型的乳头瘤病毒，它们可感染人，引起皮肤或者粘膜的上皮或者纤维上皮增殖并随后导致疣和湿疣病变。生殖器感染在某些情况下导致瘤形成，如鳞状细胞癌和子宫颈腺癌，是最广泛传播的HPV相关疾病。在不同国家进行的多中心研究中，发现16和18型HPV是70％子宫鳞状细胞癌的原因，同时不同的HPV类型与子宫上皮癌有关。
乳头瘤病毒感染是持久且难以根除的，因此需要反复治疗性治疗和即时监测患者复发或者发生前癌病变。
因为该病毒在病灶部位积累，治疗性治疗的选择应该针对通过除去疣或可见的前癌病变来控制感染的扩散，这可以通过局部治疗、激光治疗、冷冻疗法或者手术来实现。然而，这些治疗不能确保完全除去病毒，其可以开始新的感染过程。
发明描述已经发现用含有低剂量干扰素的液体药物组合物可以治疗HPV感染的个体，所述药物组合物经口途径施用。根据本发明的治疗被证明尤其有效，允许仅用几次施用而完全除去该病毒。
本发明因此提供了干扰素在制备适于经口施用、用于治疗HPV感染的液体药物组合物。文中所用的经口施用指的是使干扰素组合物与口或咽粘膜接触一段时间，这段时间足够允许活性物质吸附/吸收并通过淋巴系统和血流在局部和外周水平刺激免疫细胞和细胞因子的分泌。适宜的药物形式包括含有药学上可接受赋形剂的溶液剂、混悬剂、分散体、糖浆剂或者其他液体制剂。优选含有缓冲剂、盐和任选地稳定剂、吸附/吸收增强剂、甜味剂、调味剂和助溶剂的水溶液剂。
组合物中干扰素的量可以为100至500国际单位(IU)/ml、优选150IU/ml。根据优选的剂量学方案，每天施用一次或两次0.5至10ml、优选1ml剂量，允许每天摄入150至15000lU干扰素。根据疾病的严重性、患者的一般状况和其他可变参数可以修改日剂量。可以使用合成干扰素(例如重组干扰素)，但是优选含有不同同种型(α、β、γ)和亚型的天然分子。根据公知的方法，如US4732683；Cantell K.和Hirvonen S.，Texas Reportson Biology and Medicine，35卷，138页，1977；Zoon K.C.等人，Science 207，527页，1980所述，可以从外周血白细胞或类淋巴母细胞制备和纯化人天然干扰素、优选α型干扰素。
经口施用允许立即可利用干扰素以及完全吸收其所需的量；此外，可增加患者依从性，而且在工业上尤其重要的是，与当前使用的干扰素制剂相比，降低了产品的制备、保存和分配成本。
在包括诊断为HPV感染阳性的妇女的临床研究中试验了本发明的治疗，对这些妇女施用人α干扰素溶液(每剂量单位150IU)达90天或更长。该治疗导致有效地逐渐减少病毒的最初量直到其完全清除。患者应答的任何差异可能是由于病毒的最初量、其基因型或者患者的特异免疫应答。
研究的细节阐明如下。
实施例-临床研究对经检查为HPV阳性并且随后证实为HPV感染的无免疫疾病的10名女性患者用低剂量人天然α干扰素，经口途径施用。制备在盐水中溶解150IU/ml人天然α干扰素的水溶液。该溶液用白蛋白稳定并分装在1ml小瓶中。治疗时，每天施用1瓶，为期90天，或必要时为180天。
在治疗的第0、30、60、90、180和360天，用HC宫颈采样器从每名患者取子宫颈组织样品，并用Hybrid Capture II试剂盒以及2HPV和CT/GC DNA试验(Diogene Corporation，USA)分析。
简言之，Hybrid Capture II(HCII)试验[Venturoli等人，J.Clin.Virol.2002]是一种液相杂交测定法，其利用辨别5种低危HPV(6、11、42、43和44)的RNA探针。借助针对双链DNA的抗体将DNA/RNA杂化物固定在板上并通过化学发光信号扩增进行检测。
HCII试剂盒用于检测病灶部位的HPV，而采用PCR-ELISA试验(J.Clin.Pathol.1998；143-148，如J.Clin.Pathol.2001；54377-380改进)进行给药和样品(指100000个细胞)中病毒DNA拷贝的半定量测定。
简言之，用能够扩增30种低和高危HPV基因型的共有引物(MY11-MY09)进行PCR-ELISA。在扩增反应期间用异羟洋地黄苷元标记扩增产物，将其分别与对7种低危HPV(HPV 6、11、40、42、53、54、57)和11种高危HPV(16、18、31、33、35、39、45、51、52、58、59)特异的生物素化探针杂交，固定在链霉抗生物素蛋白衍生的微量培养板上并用免疫酶测定法(ELISA)检测。将一部分扩增产物通过电泳分析以检测还没有被可利用的探针分型的扩增的HPV。β球蛋白用作PCR-ELISA扩增对照。
该测定法提供了基于宫颈样品中所含细胞的最初数目并使用每种病毒基因型的校准曲线来半定量测定样品中的病毒DNA拷贝。
结果在下表中报告
该表数据表明在第90天(治疗结束)时10名患者中的7名，即患者1、2、3、6、8、9、10中，检测不到病毒负荷，而10名患者中的3名，即患者4、5、7，显示出病毒负荷的显著减少。第二组患者再治疗90天。在跟随控制的第180和360天，所有患者都为HPV阴性。
权利要求
1.人干扰素在制备经口施用、用于治疗HPV感染的液体药物组合物中的用途。
2.根据权利要求1的100至500IU/ml干扰素的用途。
3.根据权利要求2的150IU/ml干扰素的用途。
4.根据权利要求1-3的天然或重组人干扰素的用途。
5.根据权利要求4的天然干扰素α的用途。
6.根据权利要求1的用途，其中所述液体药物组合物是水溶液。
7.根据权利要求1的干扰素的用途，用于治疗生殖道感染。
8.根据权利要求7的干扰素的用途，用于治疗生殖道粘膜的疣或湿疣性病变。
全文摘要
本发明公开了含有干扰素、用于经口施用的液体药物组合物，和该组合物在治疗由人乳头瘤病毒(HPV)导致的感染中的用途。
文档编号A61P31/00GK1774262SQ200480010283
公开日2006年5月17日 申请日期2004年4月6日 优先权日2003年4月18日
发明者G·塔罗 申请人:尤尼哈特公司