专利名称：一种抗癌药物及制备方法
技术领域：
本发明涉及一种抗癌药物及制备方法。
背景技术：
癌症是引起人类死亡的主要疾病之一，虽然对癌症从各个方面有较深入的研究并不断开发新的抗癌药物，但是目前为止还是很难攻克的疾病，还没有开发毒性低，可以治疗癌症并且专一性高的药物，化学合成药物虽然可以延缓癌症的发生和发展，但是没有从根本上解决癌症，同时毒性大，难于接受，中药比化学药物安全，但是药效低，大部分情况下只能起辅助治疗作用。因此开发毒性低，药效可靠的抗癌药物的方法，目前多集中于从天然物中寻找先导化合物或由中药抗癌有效部位来组合开发新的抗癌药物。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术之不足，而提供一种抗癌药物，同时公开了一种上述抗癌药物的制备方法。
本发明是由紫草、茜草、香菇、莪术四味中药组成的新复方制剂，它是依据中药组方原则及抗癌有效成分并考虑到各中药多环节作用机制进行组方的。其技术方案为一种抗癌药物，经过对紫草、茜草、莪术、香菇分别提取其有效成份，取得紫草干浸膏、茜草干浸膏、莪术油和香菇多糖，并对莪术油进行包合形成莪术油环糊精包合物，然后与蒸馏水、淀粉混合制成，其中的有效成份按下述重量比例配比紫草干浸膏1-2茜草干浸膏0.3-1.0莪术油环糊精包合物0.2-0.5香菇多糖0.1-0.3。
上述有效成份优选重量比例配比紫草干浸膏1.98 茜草干浸膏0.53莪术油环糊精包合物0.32 香菇多糖0.13。
上述的制备方法包括下述步骤a、分别提取中药原料的有效成份紫草的有效成份采取温浸法进行提取乙醇浓度为95％，固液比为1∶11，即紫草与乙醇之间的重量比为1∶11，在30℃提取3h，提取2次，减压回收得紫草干浸膏；茜草的有效成份提取方法乙醇浓度为70％，固液比为1∶10，即茜草与乙醇之间的重量比为1∶10，在100℃提取3.5h，提取2次，减压回收得茜草干浸膏；香菇粉碎后，干燥，在中性条件下，96℃提取4h，香菇料与水重量比1∶20进行提取，提取2次，提取液浓缩，加乙醇使醇沉浓度达到70％，放置12h，抽滤，得多糖沉淀，再按上述操作醇沉1次，沉淀溶解，采用Sevage法除蛋白，分离出水层，加乙醇醇沉浓度达到70％，放置12h过滤，沉淀分别用无水乙醇，乙醚，丙酮反复洗涤，置真空干燥箱干燥，得棕色香菇多糖；莪术粉碎、干燥，过10-20目筛，按水蒸气蒸馏的条件进行提取，蒸馏8h，得蒸馏液，蒸馏液用石油醚萃取，减压回收石油醚，得莪术挥发油，然后对莪术油进行包合，取莪术油，加入适量乙醇，滴入β-环糊精饱和水溶液中，莪术油的包合条件为β-环糊精莪术油为1∶5，在30℃包合3h，得莪术油的β-环糊精包合物，冷藏24h，抽滤常温干燥，再用少量石油醚洗涤，干燥得莪术油的β-环糊精包合物；b、按比例取上述的紫草干浸膏、茜草干浸膏、香菇多糖加蒸馏水和淀粉混合，蒸馏水适量，对物料起到湿润作用，淀粉的量在紫草干浸膏、茜草干浸膏、香菇多糖三者总重的40～60％，然后置烘箱内40℃干燥、研碎，加入莪术油的β-环糊精包合物，混匀。
混匀的料可装入0号胶囊内，即得胶囊制剂，平均重量为0.39g。
在上述的制备方法过程中，配方中的莪术油是挥发油属于倍半萜类化合物，极性低不溶于水，因此用β-环糊精包合便于制备固体制剂，掩盖其不良气味，提高其生物利用度。β-环糊精来源于市场购买。香菇子实体中含有一定量的蛋白质，它会随醇沉法的提取工艺和香菇多糖一起沉淀出来，并且在相近的波长下也能和苯酚硫酸反应发生颜色的变化而干扰多糖的含量测定，所以必须除去蛋白质。本发明中香菇多糖是在中性条件下进行提取的。
复方制剂的提取可以混合提取或单独提取，混合提取方法简便，通过各成分间的相互作用，可增加疗效，单独提取可以根据活性成分的特点，提取有效部位，增加制剂中有效成分的含量、减少药物的服用量、而增加疗效、提高其生物利用度，它符合中药现代化的要求。本发明的复方制剂中紫草茜草有效成分虽然都溶解在乙醇中，但紫草色素类成分在超过60℃条件下会发生成分结构的改变；而茜草在60℃以下会提取不完全，所以不能混提；而香菇、莪术虽然都用水提取，但一个是水蒸气蒸馏，一个是水煎法，所以也不能混提。并且四种中药都有其明确的活性成分，所以本发采取单独提取以避免其发生结构的改变，而降低疗效。
单个药材的提取也有不同的方法，应根据用药目的，药物的性状及有效成分的性质、药效学等综合考虑其提取工艺。如本发明的紫草根据紫草素稳定性稍差的特点，选择了温浸法提取工艺，以防止高温对其结构的破坏。
紫草是紫草科植物紫草，新疆紫草，内蒙紫草的干燥根。具有抗肿瘤、抗菌、抗炎等功效。其抗癌有效成分是脂溶性的萘醌类色素，也称紫草色素。紫草衍生物活性基团为5，8位酚羟基，侧链上的双键及酯键，母核上醌结构等。紫草主要的抗癌机制是对DNA拓扑异构酶I有抑制作用，从而抑制DNA的合成。或者可能降低癌细胞RNA含量及对癌细胞超微结构的影响有关。
茜草是茜草科植物茜草的根。性苦味寒，具有凉血止血、活血祛瘀、止咳祛痰之功效。其抗癌有效成分是环己肽类及羟基蒽醌类。茜草的主要抗癌机制是与DNA结合，阻止DNA进行复制，同时参与体内氧化还原系统，产生游离基而切断DNA。
莪术为姜科植物蓬莪术，广西莪术，或温郁金的干燥根茎。主要成分为多种倍半萜类。其中莪术醇，莪术酮，莪术二酮，β-榄香烯等为莪术抗癌的有效成分。其中榄香烯乳剂(以β-榄香烯为主要成分)已作为国家二类新药批准生产。莪术能调节机体免疫反应，促进T淋巴细胞的增殖，成熟，释放和活化而增强细胞免疫功能。同时莪术能直接抑制和破坏癌细胞。
香菇为侧耳科植物香蕈的子实体，1969年由C hihara等首次从香菇中分离出抗癌活性的多糖-线性β→(1-3)-D-葡聚糖和带(1→6)糖苷键接的支链β-D-葡聚糖。香菇多糖为一种β-D-(1-3)葡萄糖残基为主链，侧链为(1-6)葡萄糖残基的葡聚糖重复结构单元，一般含有7个葡萄糖残基，其中2个残基在侧链上。香菇多糖是通过增强机体的免疫系统来达到抗肿瘤作用，并能降低处方中紫草色素类等抗癌成分的毒性，如白细胞减少等，增强其抗癌作用。
本发明人在进行长白山100多种药材的抗癌筛选实验时发现中药紫草显示很强的抗癌活性，其有效成分是萘醌类化合物，如shikonin等，主要抗癌机制是通过抑制拓扑异构酶和癌细胞内ATP等能量的消耗来发挥抗癌作用，中药茜草也显示很强的抗癌作用，其主要有效成分是环己肽类化合物和蒽醌类化合物如emodin等，是通过DNA的嵌入阻止癌细胞的复制而抑制癌细胞的繁殖。中药紫草和茜草的抗癌有效部位来制备新的抗癌药物制剂，在此基础上增加提高免疫的香菇多糖和抗病毒的莪术油，能通过多种综合性机制发挥抗癌效果，能增强总的抗癌活性，增加抗癌谱，减少毒付作用，具有合成抗癌药和中药制剂抗癌药物所共同具有的特点和优点。国内外对中药紫草和茜草已经进行了比较系统的详细的研究，但是还没有人利用其有效部位来制备抗癌药物制剂进行研究。从上可知，本发明的抗癌药物制剂是由紫草、茜草、莪术、香菇中的抗癌有效部位组合而成，整个组方考虑到中药组方原则及各中药抗癌有效成分以及肿瘤生长多环节作用机制的基础上进行组方的现代新复方制剂。由中医理论，紫茜抗癌制剂主治，癥瘕积聚，主要治消化系统肿瘤。组方中紫草败血抗癌、清热解毒、活血化瘀、消炎退肿为君药；茜草助紫草败血抗癌、化瘀通经、消炎退肿为臣药；莪术为君臣药败血抗癌，又行气破血、消积止痛，并缓君臣药之寒性，消癥瘕积聚，缓心脘腹疼痛，为佐药；香菇助以上三药益胃气，补后天之本，缓和上三药峻烈之性，利于败血抗癌，托毒外出，为使药。诸药合用有较强的败血抗癌、清热解毒、化瘀消肿功效，能消腹中癥瘕积聚。各种实验证明本发明抗癌作用大，毒副作用小，是一种很有开发前景的抗癌药物制剂。
下面通过试验来验证本发明的组方最佳含量选择和抗肿癌作用。1、药理试验剂量的选择与配制Table1 The conversions of the clinic dosage and experiment dosage(表1、临床剂量和实验剂量的转换)
AHerbs BThe clinic dosage(g/d)CThe conversions between herbs and extraction powderDThe dosage of humans(mg/kg/d) EThe dosage of mouse per 20gram(mg/d/0.2ml)FThe dosage of experiment(g/d/50ml)Table2 Uniform design for dosage screening of preparation(表2筛选剂量的设计)
Avolatile oil in zedoary(μl/d) Bpowder of Radixa Arnebia seu Lithospermi extraction(g/d)Cpowder of Radix Rubiae extraction(g/d) DThe mushroom polysaccharide(g/d)用移液管分别取0.5，1.5，2.5，3.5，4.5，5.5ml莪术油乳剂加入相应量的紫草、茜草、香菇及适量的吐温-80，加水定容置50ml容量瓶中。
2、对荷S180瘤小鼠的抑瘤效应实验取64只昆明雄性小鼠，无菌条件下取第7天S180小鼠腹水，用0.9％生理盐水按1∶3稀释，每鼠腋下接种0.2ml。次日将小鼠按体重随机分组，空白组、肿瘤模型组、阳性对照组(氟尿嘧啶)按均匀设计条件灌胃给药，给药10天，第11天称重，断髓处死，取瘤组织块称重。并按下列公式计算抑瘤率。
抑瘤率＝对照组瘤重-给药组瘤重/对照组瘤重*100％Table3 The result of anticancer against mouse bearing S180(表3对小鼠S180抗肿瘤实验结果)
从以上表1、2、3中可以证明本发明的抗癌药物具有明显的抗肿瘤作用，而且各成份之间的最佳配比为紫草干浸膏1.98g(相当于药材31.73g)茜草干浸膏0.53g(相当于药材2.95g)莪术油β-环糊精包合物0.32g(相当于药材7.15g)香菇多糖0.13g(相当于药材7.32g)具体实施方式
本发明抗癌药物的制备方法包括下述步骤a、分别提取中药原料的有效成份①紫草的有效成份采取温浸法进行提取乙醇浓度为95％，固液比为1∶11，在30℃提取3h，提取2次，减压回收得干浸膏；依上述提取工艺进行提取、测定，药材紫草中总萘醌的含量为2.51％，与预期值基本相符。
②茜草的有效成份提取方法乙醇浓度为70％，固液比即茜草与乙醇溶液比为1∶10，在100℃提取3.5h，提取2次，减压回收得干浸膏；按上述提取工艺进行提取、测定，茜草药材中总羟基蒽醌的含量为5.34％，与预期值基本相符。
紫草中的化学成分易发生改变，而在紫草提取物中紫草素的含量没有明显的变化，说明提取过程中紫草色素类成分中的酯键没有被破坏(酯键是抗癌活性部位之一)。并且药材紫草、茜草提取物中总萘醌和总羟基蒽醌及相应的紫草素、茜草素的含量与药材中的含量相接近，以上都说明紫草、茜草提取工艺合理。
③香菇粉碎后，干燥，在中性条件下，96℃提取4h，料水比1∶20进行提取。提取2次，提取液浓缩，加乙醇使醇沉浓度达到70％，放置12h，抽滤，得多糖沉淀。再按上述操作醇沉1次。沉淀溶解，采用Sevage法除蛋白，分离出水层，加乙醇(达70％)醇沉，放置12h过滤，沉淀分别用无水乙醇，乙醚，丙酮反复洗涤，置真空干燥箱干燥，得棕色香菇多糖；取香菇多糖适量，计算香菇多糖的含量为78.00％。
④莪术粉碎、干燥，过10-20目筛，按水蒸气蒸馏的条件进行提取，蒸馏8h，得蒸馏液，蒸馏液用石油醚萃取，减压回收石油醚，得莪术挥发油，药材中挥发油的含量为0.92％；然后对莪术油进行包合，取莪术油，加入适量乙醇，滴入β-环糊精饱和水溶液中，莪术油的包合条件为β-环糊精∶油为1∶5，在30℃包合3h，得莪术油的β-环糊精包合物，冷藏24h，抽滤常温干燥，再用少量石油醚洗涤，干燥得莪术油的β-环糊精包合物；b、取紫草干浸膏1.98g、茜草干浸膏0.53g、香菇多糖粗品0.13g，加适量蒸馏水和淀粉1.32g，置烘箱内40℃干燥、研碎，加入莪术油的β-环糊精包合物0.32g，混匀；C、将上述的混合物装入0号胶囊内，即得胶囊制剂，平均重量为0.39g。
权利要求
1.一种抗癌药物，经过对紫草、茜草、莪术、香菇分别提取其有效成份，取得紫草干浸膏、茜草干浸膏、莪术油和香菇多糖，并对莪术油进行包合形成莪术油环糊精包合物，然后与蒸馏水、淀粉混合制成，其中的有效成份按下述重量比例配比紫草干浸膏1-2茜草干浸膏0.3-1.0莪术油环糊精包合物0.2-0.5香菇多糖0.1-0.3。
2.根据权利要求1所述的一种抗癌药物，其特征在于所述的紫草干浸膏、茜草干浸膏、莪术油环糊精包合物和香菇多糖按下述重量比例配比紫草干浸膏1.98 茜草干浸膏0.53莪术油环糊精包合物0.32 香菇多糖0.13。
3.制备权利要求1所述抗癌药物的方法，其特征在于包括下述步骤a、分别提取中药原料的有效成份紫草的有效成份采取温浸法进行提取乙醇浓度为95％，固液比为1∶11，在30℃提取3h，提取2次，减压回收得紫草干浸膏；茜草的有效成份提取方法乙醇浓度为70％，固液比为1∶10，在100℃提取3.5h，提取2次，减压回收得茜草干浸膏；香菇粉碎后，干燥，在中性条件下，96℃提取4h，料水比1∶20进行提取，提取2次，提取液浓缩，加乙醇使醇沉浓度达到70％，放置12h，抽滤，得多糖沉淀，再按上述操作醇沉1次，沉淀溶解，采用Sevage法除蛋白，分离出水层，加乙醇醇沉浓度达到70％，放置12h过滤，沉淀分别用无水乙醇，乙醚，丙酮反复洗涤，置真空干燥箱干燥，得棕色香菇多糖；莪术粉碎、干燥，过10-20目筛，按水蒸气蒸馏的条件进行提取，蒸馏8h，得蒸馏液，蒸馏液用石油醚萃取，减压回收石油醚，得莪术挥发油，然后对莪术油进行包合，取莪术油，加入适量乙醇，滴入β-环糊精饱和水溶液中，莪术油的包合条件为β-环糊精∶莪术油为1∶5，在30℃包合3h，得莪术油的β-环糊精包合物，冷藏24h，抽滤常温干燥，再用少量石油醚洗涤，干燥得莪术油的β-环糊精包合物；b、按比例取上述的紫草干浸膏、茜草干浸膏、香菇多糖加蒸馏水和淀粉混合，置烘箱内干燥、研碎，加入莪术油的β-环糊精包合物，混匀。
全文摘要
本发明公开了一种抗癌药物，经过对紫草、茜草、莪术、香菇分别提取其有效成分，取得紫草干浸膏、茜草干浸膏、莪术油和香菇多糖粗品，并对莪术油进行包合形成莪术油环糊精包合物，最后与蒸馏水、淀粉混合制成，其中的有效成分按下述重量比例配比紫草干浸膏1－2、茜草干浸膏0.3－1.0、莪术油环糊精包合物0.2－0.5、香菇多糖0.1－0.3。本发明是由紫草、茜草、香菇、莪术四味中药组成的新复方制剂，它是依据中药组方原则及抗癌有效成分并考虑到各中药多环节作用机制进行组方的，本发明抗癌作用大，毒副作用小，是一种很有开发前景的抗癌药物制剂。本发明还公开了一种制备抗癌药物的方法。
文档编号A61K36/30GK1726997SQ200510017009
公开日2006年2月1日 申请日期2005年7月26日 优先权日2005年7月26日
发明者金光洙, 朴惠顺 申请人:延边大学