专利名称：从土鳖虫提取抗肿瘤有效部位脂肪酸的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种抗肿瘤物质，特别涉及一种从中药土鳖虫中分离、提取的抗肿瘤有效部位脂肪酸。
背景技术：
目前，抗肿瘤化疗新药的研制与应用发展迅速，特别是取自于天然药物经修饰、人工合成等方法研制的化疗药物不断问市，如紫杉醇、多希紫杉醇、草酸铂、健择、异长春花碱、开普拓、希罗达、阿里米塔等药物，具有一定的治疗效果。其中，中药是我国独特的天然药物宝库。
在本发明之前，医药界已经认识到单味中药土鳖虫具有抗肿瘤作用和疗效，在体外对白血病细胞有抑制作用，但到底是土鳖虫中的哪个具体成份能够有效抑制肿瘤发展不清楚，对其抗肿瘤机理也认识不清。现阶段的认识多数停留在推测上，有说是土鳖虫中β-谷甾醇成份和以油酸为主的不饱和脂肪酸很有可能有抗癌作用，又一说土鳖虫在治疗体外肝癌、胃癌等方面具有抗突变及抗肿瘤功能。但这些推测和说法均缺乏理论依据和机理分析，更缺乏实验证实。因而，就无法将其真正能够抗肿瘤的有效成份提取、分离出来，研制专门治疗抗肿瘤药物，并实现产业化。
发明内容
本发明的目的就在于克服上述缺陷，分离、提取土鳖虫中抗肿瘤的有效部位脂肪酸。
本发明的技术方案是从土鳖虫提取抗肿瘤有效部位脂肪酸，其主要技术特征在于从土鳖虫中提取有效部位脂肪酸。
本发明的进一步技术方案是有效部位主要为不饱和脂肪酸。
本发明的优点和效果在于采用简单的方法分离、提取到土鳖虫中真正具有抗肿瘤作用和疗效的脂肪酸，并经实验证实具有广谱杀瘤作用，对多种恶性肿瘤细胞具有较强的抑制作用。制备方法简单，药物成本低。
具体实施例方式
首先进行有机溶剂提取以无水乙醇或石油醚等有机溶剂回流提取，经皂化反应后得脂肪酸。具体过程及步骤取1000g，无水乙醇或石油醚等有机溶剂回流提取，得提取液；回收溶剂，得粗脂肪；还可以取1000g，超临界提取得粗脂肪；再加无水乙醇或甲醇、KOH，热回流，蒸干溶剂，得固体物；然后水溶解，用少量乙醚萃取，取水层，加入HCL，调节PH值至酸性，乙醚萃取，取乙醚层；挥去溶剂，得粗脂肪酸；再进行柱层析法以硅胶等为吸附剂，用于分离脂肪酸；以石油醚、氯仿、甲醇、乙醚、乙酸乙酯、丙酮和乙酸等有机溶剂及任何比例组合溶剂为洗脱剂进行层析分离，得到有效部位脂肪酸。
成份分析主要为7-十八碳烯酸、十六烷酸、9-十六碳烯酸、十八酸，该四种物质以单个至多个任意比例组合。
除含上述7-十八碳烯酸、十六烷酸、9-十六碳烯酸、十八酸外，还含有肉豆蔻酸、二十酸、油酸等。
细胞毒实验体外实验通过体外细胞毒实验证明本发明所述的有效部位的有效性。
实验用药物本发明有效部位实验方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法确定药物浓度土鳖虫有效部位脂肪酸在100μg/ml的剂量对人胃低分化腺癌细胞株BGC-823、肠癌细胞株LOVO和原发性肝癌细胞株HepG-II即有明显的抑制作用，抑制率达80％以上。2-4小时即开始起作用，至24小时后达最大作用效果并该效果随时间延长保持稳定。
权利要求
1.从土鳖虫提取抗肿瘤有效部位脂肪酸，其特征在于从土鳖虫中提取有效部位脂肪酸。
2.根据权利要求1所述的从土鳖虫提取抗肿瘤有效部位脂肪酸，其特征在于有效部位主要为不饱和脂肪酸。
3.根据权利要求2所述的从土鳖虫提取抗肿瘤有效部位脂肪酸，其特征在于有效部位为含有7-十八碳烯酸、十六烷酸、9-十六碳烯酸、十八酸。
全文摘要
本发明涉及一种从中药土鳖虫中分离、提取的抗肿瘤有效成分脂肪酸。本发明采用有机溶剂及柱层析法从土鳖虫提取抗肿瘤有效成分脂肪酸且为不饱和脂肪酸，主要成分为7，十八碳烯酸、十六烷酸、9，十六碳烯酸、十八酸，可以单个至多个任意比例组合。解决了现有技术不知土鳖虫中到底哪个成分具有杀肿瘤及机理所存在的盲目性，无法制成专门的抗肿瘤药物的缺陷。经实验证实，无毒性，具有广谱杀瘤作用，对多种恶性肿瘤具有抑制作用和抗肿瘤、抗突变作用。本发明药物成本低，可形成产业化。
文档编号A61K35/64GK1709284SQ20051004066
公开日2005年12月21日 申请日期2005年6月23日 优先权日2005年6月23日
发明者刘宝瑞, 邹玺, 钱晓萍 申请人:南京大学医学院附属鼓楼医院