专利名称：一种展库酸a的提取方法
技术领域：
本发明属于天然物质的提取技术领域，涉及一种展库酸A的提取方法。
背景技术：
展库酸A (Zhankuic acid A),分子式为C29H4tlO5,分子量为468. 63，是从多孔菌科(Polyporaceae)玉桂薄孔菌JfliratZia cinnamomea Chang & Chou, sp. nov.子实体中分离得到的一种活性成分。研究发现，展库酸A对淋巴白血病细胞P388呈细胞毒活性，IC50为I. 8 μ g/ml ο经文献检索，国内尚未发现展库酸A的工业提取方法相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种高效、环保的展库酸A的提取方法。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
(1)以玉桂薄孔菌子实体为原料，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液；
(2)提取液浓缩后得到粗提物，用双水相溶剂系统进行萃取，收集有机相萃取液，减压回收溶剂得浓缩液；
(3)将浓缩液用高速逆流色谱分离纯化，以氯仿-甲醇-水两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，根据图谱收集成分，低温浓缩干燥即得展库酸A。所述步骤(I)中闪式提取电压为140-160V，提取时间为90s-120S。所述步骤(2)中双水相溶剂系统为乙醇/硫酸铵双水相体系，称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇。所述步骤(3)中氯仿-甲醇-水体积比为(12-14) :(8-10) : (5-8)。本发明的有益效果是(I)本发明采用闪式提取法，快速高效、低耗能、环保；(2)本发明所用乙醇/硫酸铵双水相体系可以回收、重复利用，节约了试剂，降低了成本；(3)本发明利用高速逆流色谱分离展库酸A，分离过程无产品损失，高效，制备周期短。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
取玉桂薄孔菌子实体100g，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为150V，提取时间为100s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液浓缩后得到粗提物；称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇，建立乙醇/硫酸铵双水相体系，将粗提物加入3L乙醇/硫酸铵双水相体系中，振荡摇匀，静置，收集上相，减压回收溶剂得浓缩液；取氯仿、甲醇、水按13:8:7比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为900rpm，同时把下相以2. 5ml/min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，监测波长为266nm，收集流分，减压浓缩后，干燥即得展库酸A,含量96. 4%。实施例2:
取玉桂薄孔菌子实体100g，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为160V，提取时间为120s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液浓缩后得到粗提物；称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇，建立乙醇/硫酸铵双水相体系，将粗提物加入2. 5L乙醇/硫酸铵双水相体系中，振荡摇匀，静置，收集上相，减压回收溶剂得浓缩液；取氯仿、甲醇、水按14:9:8比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，监测波长为266nm，收集流分，减压浓缩后，干燥即得展库酸A，含量94. 6%ο实施例3: 取玉桂薄孔菌子实体100g，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为160V，提取时间为90s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液浓缩后得到粗提物；称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇，建立乙醇/硫酸铵双水相体系，将粗提物加入3L乙醇/硫酸铵双水相体系中，振荡摇匀，静置，收集上相，减压回收溶剂得浓缩液；取氯仿、甲醇、水按12:10:5比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为SOOrpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，监测波长为266nm，收集流分，减压浓缩后，干燥即得展库酸A，含量94. 9%ο实施例4:
取玉桂薄孔菌子实体100g，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为140V，提取时间为120s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液浓缩后得到粗提物；称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇，建立乙醇/硫酸铵双水相体系，将粗提物加入2L乙醇/硫酸铵双水相体系中，振荡摇匀，静置，收集上相，减压回收溶剂得浓缩液；取氯仿、甲醇、水按13:10: 5比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，监测波长为266nm，收集流分，减压浓缩后，干燥即得展库酸A,含量95. 5%ο
权利要求
1.一种展库酸A的提取方法，其特征在于包括以下步骤 (1)以玉桂薄孔菌子实体为原料，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液； (2)提取液浓缩后得到粗提物，用双水相溶剂系统进行萃取，收集有机相萃取液，减压回收溶剂得浓缩液； (3)将浓缩液用高速逆流色谱分离纯化，以氯仿-甲醇-水两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，根据图谱收集成分，低温浓缩干燥即得展库酸A。
2.如权利要求I所述的一种展库酸A的提取方法，其特征在于所述步骤(I)中闪式提取电压为140-160V，提取时间为90s-120s。
3.如权利要求I所述的一种展库酸A的提取方法，其特征在于所述步骤(2)中双水相溶剂系统为乙醇/硫酸铵双水相体系，称取22g硫酸铵加入65ml水中，溶解结束加入32ml无水乙醇。
4.如权利要求I所述的一种展库酸A的提取方法，其特征在于所述步骤(3)中氯仿-甲醇-水体积比为(12-14) :(8-10) : (5-8)。
全文摘要
本发明公开了一种展库酸A的提取方法，属于天然药物化学领域。所述的方法包括以下过程以玉桂薄孔菌子实体为原料，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液，浓缩，浓缩液经过双水相溶剂系统萃取，收集有机相，浓缩后采用高速逆流色谱分离，以氯仿-甲醇-水为溶剂系统，流分减压浓缩，即得展库酸A。本发明采用闪式提取、双水相溶剂系统萃取和高速逆流色谱分离技术，高效环保，适合产业规模化生产。
文档编号C07J9/00GK102863496SQ20121036666
公开日2013年1月9日 申请日期2012年9月28日 优先权日2012年9月28日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司